口蹄疫病毒持續(xù)感染的研究進展

沈 超， 曾一歌

(武漢大學生命科學學院， 武漢 430072)

口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus，F(xiàn)MDV)屬于小RNA病毒科口瘡病毒屬，有7種血清型，其基因編碼4種結(jié)構(gòu)蛋白和10種非結(jié)構(gòu)蛋白.口蹄疫(foot-and-mouth disease，F(xiàn)MD)由FMDV引起，是一種高度接觸性、熱性、急性的傳染病.雖然它的致死率低，但會導致動物的體重下降進而生產(chǎn)力降低.并且由于FMDV毒株多樣，蔓延極快，傳播途徑極廣，對畜牧業(yè)乃至國家整體經(jīng)濟的危害極大，所以口蹄疫被世界動物衛(wèi)生組織列為動物必報疫病之首.

在1959年，Bekkum等[1]發(fā)現(xiàn)在臨床表現(xiàn)正常的牛咽部軟腭可以不定期檢測出FMDV的存在，首次提出了持續(xù)感染的概念.FMDV病毒通過呼吸道進入宿主體內(nèi)，會形成急性感染.它首先感染咽喉處上皮，而后通過血液擴散到全身.動物開始發(fā)熱，口鼻、乳頭、腳趾間及無毛覆蓋的皮膚出現(xiàn)水皰[2].急性感染一般持續(xù)一周左右，期間動物飽受發(fā)燒和水皰糜爛的折磨.無論是自然感染還是接種過疫苗的動物，有一定比例的個體在急性感染痊愈后會發(fā)展為口蹄疫病毒攜帶者，在康復后的很長時間內(nèi)雖然不會發(fā)病，但取其咽部和軟腭處液體都能檢測到活病毒.無論動物接種疫苗與否，它們都可能在經(jīng)歷急性感染后保持持續(xù)感染的狀態(tài)[3].

流行病學研究表明，易感染動物與攜帶病原體的動物接觸是傳染性疾病爆發(fā)之根源.FMDV在動物體內(nèi)形成持續(xù)感染后，動物會成為臨床表現(xiàn)不明顯的病毒攜帶者，難以發(fā)現(xiàn)從而容易將病毒傳播給其他個體.所以FMDV的持續(xù)感染是FMDV研究和防控的關鍵性問題，解決這一問題定能讓我國對口蹄疫有更好的防控，為畜牧業(yè)貿(mào)易排憂解難.

1 FMDV持續(xù)感染類型概述

在病毒感染機體后，機體受感染細胞長期或終身帶毒，而且機體經(jīng)?；蚍磸烷g斷向外界排出病毒的狀態(tài)叫做持續(xù)感染.病毒的持續(xù)感染大致可以分為3種類型：潛伏性感染、慢性感染、慢發(fā)性感染.潛伏性感染是指在臨床急性感染痊愈后，宿主體內(nèi)的病毒與免疫力處于相對平衡狀態(tài)，病毒可以在體內(nèi)實現(xiàn)長時間潛伏，一般不引起癥狀.但當宿主免疫力下降時，這種平衡被打破，病毒大規(guī)模增殖引發(fā)感染.比如水痘-帶狀皰疹病毒、單純皰疹病毒和EB病毒引發(fā)的潛伏性感染.慢性感染是指機體在顯性或隱性感染后，病毒在血液或組織中一直存在，并不斷被排出體外或者經(jīng)輸血，注射而傳播給其他個體.病程常達數(shù)月至數(shù)十年，患病個體的臨床癥狀表現(xiàn)輕微.例如HBV、EB病毒、巨細胞病毒引發(fā)的感染.慢發(fā)性感染，也稱慢病毒感染，潛伏期長達數(shù)月，數(shù)年甚至數(shù)十年.此類感染造成慢性持續(xù)性病變，最終常為致死性感染.如艾滋病和由缺損性麻疹病毒所致的亞急性硬化性全腦炎(SSPE).

FMDV屬于三種類型中的慢性感染.FMDV的持續(xù)感染與其他病毒的不同主要體現(xiàn)在兩個方面.一方面，F(xiàn)MDV病毒在體內(nèi)的存在位置比較穩(wěn)定，病毒在動物體內(nèi)雖然被擴散到了全身，但咽部和軟腭的病毒濃度一直處于全身的最高水平；另一方面，雖然病毒在被感染的動物體內(nèi)持續(xù)存在，并可以隨體液持續(xù)排出.但在一般情況下，動物很少因為體內(nèi)FMDV的持續(xù)存在而在急性感染痊愈后復發(fā)口蹄疫或在長時間無臨床癥狀之后病癥加重.

在構(gòu)成持續(xù)感染的機制方面，不同持續(xù)感染類型的病毒采取的“策略”有一定共性，也有各自的特性.構(gòu)成持續(xù)感染的機制大致可以歸納為以下幾種：病毒基因表達水平的改變；病毒基因的整合作用；病原體隱匿在免于免疫攻擊的部位；機體的免疫系統(tǒng)異常；宿主細胞與病原微生物基因的變異；出現(xiàn)缺損干擾病毒顆粒.FMDV病毒持續(xù)感染形成的機制是讓病毒與宿主細胞共選擇、共進化.這種方式是上述幾種機制的融合，包括雙方基因的變異與病原體導致的宿主免疫系統(tǒng)功能異常等.至今，對于口蹄疫病毒持續(xù)感染的形成機制學術界仍無定論.

無論是在動物疾病還是人類疾病中，防治持續(xù)感染都是傳染病研究中的重點和難點.一是對于受感染的機體本身來說，持續(xù)感染反復發(fā)作，難以治愈，甚至可能導致嚴重疾病(如自身免疫病和腫瘤)，再是對于所有易感群體來說，持續(xù)感染的機體可以經(jīng)常向外界排出病毒，對所有易感者造成了很大的威脅，對公共衛(wèi)生有很大的危害.另外，持續(xù)感染患者需要長期使用藥物治療，日積月累下病原體對抗生素及藥物的耐藥性會不斷增加.所以，研究FMDV的持續(xù)感染不僅對于防控口蹄疫本身有巨大的實用意義，更能讓人們對所有持續(xù)感染病毒都有更深刻的認識.

2 持續(xù)感染期間FMDV在機體內(nèi)存在的位置

在1966年，Burrows等[4]想要確定病毒在被感染的動物身上存在的具體位置，分別從初次感染的牛和接種疫苗后才被感染的牛身上的不同位置取樣：咽、食道部分泌物(oesophageal-pharyngeal fluid, OPF)和從舌、咽、鼻甲、軟腭、氣管、扁桃體、食道的腺部和膀胱刮取的組織樣本.定期從動物體內(nèi)取樣處理觀察后發(fā)現(xiàn)，在100 d內(nèi)：1) 不能在從膀胱和鼻甲取得的樣本中分離出病毒;2) 在從氣管、扁桃體和舌頭取得的樣本中可以成功分離出一次或兩次病毒;3) 在其他的部位取得的樣本中能夠持續(xù)且穩(wěn)定地分離出病毒，尤其是從咽部和軟腭獲得的樣品，從中提取出的病毒最多.因此，F(xiàn)MDV持續(xù)感染時病毒存在的最佳的部位是咽部和軟腭.

一般來說，咽部是病毒入侵動物體內(nèi)的第一個“站點”，病毒在此復制后再進入血液擴散到全身.而后一直到動物康復后的初期階段，在動物的許多器官和組織內(nèi)都能分離出具有感染性的病毒.其中，在咽、軟腭和扁桃體這些部位常?？梢蕴崛〕龃罅坎《荆也《镜臐舛容^高；反而在鼻子、肺、支氣管淋巴結(jié)這些部位很少得到病毒.在逆轉(zhuǎn)錄PCR技術問世之后，Murphy等[5]通過在器官與組織的樣本中檢測FMDV基因組的量驗證了Burrows的發(fā)現(xiàn).最近，Stenfeldt等[6]通過免疫顯微鏡對早期和持續(xù)性階段的組織樣本進行分析，證實了原發(fā)性和持續(xù)性FMDV感染均位于覆蓋粘膜相關淋巴樣組織(MALT)的鼻咽粘膜上皮的特殊區(qū)域.隨著診斷與檢測手段的不斷創(chuàng)新，人們對病毒持續(xù)感染的在機體內(nèi)存在的位置進行了進一步探索，在偶蹄動物的尾部也發(fā)現(xiàn)了病毒的存在[7-8].

3 FMDV持續(xù)感染的特性

與最初感染動物的大部分原始病毒相比，持續(xù)感染的FMDV病毒具有復制能力下降、形成空斑的能力改變、抗逆性下降的特性.Straver等[9-10]證明在持續(xù)感染過程中病毒形成的噬斑具有逐漸減小的表型，與初入宿主體內(nèi)相比，這些病毒的滴度明顯下降，且抗逆性降低(如對強烈理化性質(zhì)、UV或熱較不耐受).有證據(jù)表明，感染宿主的親本病毒群體中存在具有后期持續(xù)感染病毒特性的個體，這說明宿主體內(nèi)的細胞環(huán)境對病毒的選擇可能是持續(xù)感染形成的機制之一.

FMDV持續(xù)感染病毒和親代病毒在基因組與抗原方面的差異不大.Biswal等[11]在印度的一個奶牛場暴發(fā)FMD后的13個月內(nèi)，連續(xù)從持續(xù)感染的水牛中采樣并分離出O/ME-SA/Ind2001d血清型的FMDV，發(fā)現(xiàn)不同時期的FMDV P1衣殼編碼區(qū)的核苷酸差異在0.1%～1.3%之間，且其中大部分為同義突變.一定程度上說明持續(xù)感染水牛體內(nèi)的病毒與初感染的水牛的病毒基因非常接近，不足以形成基因突變帶來的表型差異.同時，持續(xù)感染病毒在病毒抗原方面也呈現(xiàn)出變化程度很小的趨勢.Salt等[12]在單克隆抗體的酶聯(lián)免疫吸附劑測定實驗中發(fā)現(xiàn)，在感染的不同時期測試病毒血清的中和活性可以發(fā)現(xiàn)其活性并沒有發(fā)生很大的變化.然而，在后續(xù)的研究中有實驗對VP1的核苷酸序列進行分析，結(jié)果顯示病毒基因組的每個核苷酸每年有小至0.9×10-2，大到7.4×10-2的替代突變概率，這可能導致抗原變異[13-14]，說明選擇作用會使持續(xù)感染病毒的遺傳物質(zhì)和抗原發(fā)生一定變化.

Domingo等[15-17]提出了準物種的概念，即FMDV急性感染和持續(xù)感染的病毒種群在許多方面有所不同.但無論是初始的病毒種群還是持續(xù)感染后在體內(nèi)所形成的病毒種群，它們都是由不同種類的病毒突變體混合而成，突變體之間存在一定的競爭關系[18-19].但最后存活下來的優(yōu)勢種群也可能并不存在于初始的群體中.在持續(xù)感染的過程中，由于宿主體內(nèi)環(huán)境對病毒的影響，如病毒需要在特定細胞中進行增殖，躲避免疫系統(tǒng)的攻擊等，病毒也可能產(chǎn)生新的突變體，但其具體機制有待進一步闡明.

4 FMDV持續(xù)感染的形成機制

FMDV持續(xù)感染的形成主要與病毒自身機制、宿主細胞機制與宿主免疫機制3個方面有著密切關聯(lián)，后文中將詳述此3種機制.除此之外，F(xiàn)MDV持續(xù)感染的形成也與FMDV滅活疫苗的使用和FMDV的多宿主性有一定的關系.早期FMDV疫苗比如福爾馬林滅活疫苗中存在滅活不完全的病毒.這種疫苗雖然有一定的防疫貢獻[20]，但也與FMD的再次發(fā)生有一定的直接關系.現(xiàn)在更主流的控制口蹄疫的方式是清場和撲殺患病動物.在FMDV的多宿主性方面，Hughes等[21]曾經(jīng)指出感染FMDV的綿羊和山羊的臨床表現(xiàn)不明顯，在國際貿(mào)易中很容易導致FMDV傳到非疫區(qū)；甚至不同血清型的FMDV可以同時感染一個宿主.多宿主性導致的混合感染對于FMDV在全球范圍內(nèi)建立起持續(xù)感染有很大的幫助.

4.1 FMDV持續(xù)感染的研究模型

在體外細胞培養(yǎng)過程中，F(xiàn)MDV可導致培養(yǎng)的細胞發(fā)生細胞病變效應(cytopathic effect，CPE)，但很多情況下，它也可以在細胞內(nèi)建立長期的持續(xù)感染[22].de la Torre等在1985年建立了FMDV持續(xù)感染細胞系C1-BHK-Rc1和C1-IBRS-Rc1.他們用純化后的FMDV C-S8c1病毒分別感染BHK-21和IBRS-2細胞，對存活下來的帶毒細胞進行克隆與分析，得到了6種以上生長狀態(tài)、細胞形態(tài)及病毒抗性方面有不同表型的細胞.

多年來本實驗室相關課題組也構(gòu)建了許多有效的FMDV持續(xù)感染模型.早年間用FMDV OBGF15感染敘利亞倉鼠腎細胞系(BHK-21)，傳代并篩選后得到了O-BHK-RN細胞株.Huang等[23]又開創(chuàng)性地用NH4Cl弱堿法處理感染FMDV的BHK-21，結(jié)合單克隆選擇，獲得了一株O型FMDV持續(xù)感染陽性克隆細胞系.用基因芯片分別分析與對比FMDV急性和持續(xù)感染細胞的基因表達圖譜后發(fā)現(xiàn)兩者存在較大的差異.分析其原因可能是宿主細胞為了適應病毒的存在而進化出了針對特定基因的調(diào)節(jié)機制[24].最終通過單細胞分析的方式(如圖1所示)發(fā)現(xiàn)，細胞中EBP基因轉(zhuǎn)錄組的數(shù)量決定了細胞異質(zhì)性的程度，與持續(xù)感染狀態(tài)的保持有很大的關系[25].

圖1 口蹄疫研究中單細胞分離和測定的原理圖[51]

近十年也有許多理想的持續(xù)感染細胞系模型誕生，這些模型不僅能在保持較低異質(zhì)性的同時盡量貼近宿主體內(nèi)的生活狀態(tài)，也能在帶毒量高的同時保持較長時間的存活力和代謝功能.如O’Donnell等[26]在2014年從牛咽部的部分細胞組織分離出的O型FMDV感染細胞系，此細胞系能較大程度還原宿主體內(nèi)細胞與病毒的生存狀態(tài)；Kopliku等[27]在2015年建立的O型FMDV感染牛腎細胞(MDBK)的持續(xù)感染細胞系，此細胞系帶毒傳代的穩(wěn)定性較好.支持FMDV體外感染和復制的細胞模型，是研究病毒與宿主之間的相互作用、解釋體內(nèi)病毒的持續(xù)感染分子機制的重要工具，并在治療新靶點的發(fā)現(xiàn)和候選藥物功效評估等研究工作中發(fā)揮關鍵作用.

4.2 FMDV持續(xù)感染中病毒的變化

de la Torre等[21]在持續(xù)感染細胞系C1-BHK-Rc1傳代過程中發(fā)現(xiàn)感染性FMDV顆粒減少，細胞能保持對口蹄疫病毒的特異性免疫，且體內(nèi)的病毒抗原和病毒基因組明顯減少.且有研究表明這些病毒的性狀都發(fā)生了很大程度的變化，如噬斑形成能力下降，病毒的抗逆性和穩(wěn)定性差.前文提到過， FMDV在傳代過程中基因組幾乎不發(fā)生變化[28-29].但對進入宿主體內(nèi)的FMDV進行序列分析，結(jié)果表明病毒一級和二級復制位點之間的FMDV準物種組成存在顯著差異[5].這樣的改變與差異會導致病毒蛋白合成的異常，例如，在口蹄疫病毒VP3蛋白中，纈氨酸取代了半胱氨酸使得二硫鍵的形成受阻；病毒蛋白VP1中發(fā)生的氨基酸取代致使病毒抗原性也發(fā)生變化[28].

但有實驗證明從傳代培養(yǎng)細胞中分離出的口蹄疫病毒在感染新的細胞時擴增一代所需的時間甚至比初代更短；當用相同劑量的這些病毒和親本病毒同時感染C1-BHK-Rc1細胞系時，后一組細胞的存活情況遠遠好于前一組.這說明病毒蛋白發(fā)生單個氨基酸替換這一程度的變化并不會使病毒本身毒力減弱，甚至能使病毒毒力增強.病毒毒力不減反增的原因可能與部分RNA的翻譯活性增強有關.用FMDV感染BHK-21細胞系，細胞傳到第100代時回收細胞培養(yǎng)物中的病毒，發(fā)現(xiàn)在回收的病毒基因組的內(nèi)部核糖體進入位點處有兩個錯義突變，第376位的核苷酸替換導致了病毒 IRES的活性增強[30].

上文提到過Kopliku等[27]建立的O型FMDV感染MDBK細胞的持續(xù)感染細胞系，他們在這株細胞系中分離出第23代FMDV(FMDV Op23)，并對其結(jié)構(gòu)蛋白VP1進行測序，此蛋白對病毒附著和進入、免疫逃逸以及血清型特異性有重要意義.發(fā)現(xiàn)此蛋白與早期病毒相比，其基因組第3 415位的核苷酸發(fā)生了從T到C的替換，這導致了VP1蛋白中第 50 位的氨基酸纈氨酸被丙氨酸殘基取代，這破壞了類泛素蛋白修飾分子SUMO1(small ubiquitin-like modifier，SUMO)的結(jié)合位點，一定程度上有利于病毒在細胞內(nèi)生存以及免疫逃逸[27].

4.3 FMDV持續(xù)感染中宿主細胞的變化

被口蹄疫感染后的宿主細胞的性狀與形態(tài)會發(fā)生一定的變化.以BHK-21細胞為例：顯微觀察到細胞由梭形變成圓形，且細胞貼壁與生長的速度均有所提升，甚至對病毒的抗性也會增加[31-34].進一步實驗發(fā)現(xiàn)，當不用病毒感染細胞，僅用核苷類似物處理攜帶者的細胞時也可以得到具有相同特征的細胞[34-36].

de la Torre等對第一個FMDV持續(xù)感染細胞系的研究展現(xiàn)了進化的異質(zhì)病毒群體和高度異質(zhì)性的細胞之間的動態(tài)相互作用，驗證了病毒和細胞之間長期的相互應答和相互選擇.細胞的多樣性也是病毒在細胞內(nèi)實現(xiàn)持續(xù)感染的重要原因之一.和病毒遺傳異質(zhì)性一樣，病毒和細胞長期存活也依賴于細胞的多樣性.O’ Donnell等所分離出的O型FMDV感染細胞系得到的結(jié)果也能佐證病毒-宿主共適應的理論[26].

Hernandez等[33]用能裂解細胞的烈性FMDV感染已經(jīng)感染過FMDV并治愈的BHK-21單層細胞，發(fā)現(xiàn)細胞存活力增加但FMDV對原始BHK-21細胞未表現(xiàn)出減毒，證明了細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生變化才是FMDV能夠建立持續(xù)感染的真正原因.遺傳物質(zhì)的變化讓細胞對于FMDV的抗性增加了，而并不是病毒本身獨立致使的變化[33].

用功能性基因組學的方法對比持續(xù)感染細胞系與急性感染的細胞，發(fā)現(xiàn)持續(xù)感染細胞系一共有十二種不同的細胞基因表達模式，這說明宿主細胞在對抗FMDV感染的過程種發(fā)生了轉(zhuǎn)錄組水平的變化[24].比較親本細胞與持續(xù)感染多代的細胞之間的轉(zhuǎn)錄圖譜發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)許多參與細胞各方面生命活動的基因在兩種細胞中顯著差異表達.通過這種方法，本課題組在FMDV感染的分子機制方面有了重要的發(fā)現(xiàn)：對包含模式識別受體(pattern recognition receptor，PRR)、主要組織相容性復合物 (major histocompatibility complex，MHC)、白細胞介素-1(interleukin 1，IL-1)家族成員和受體等在內(nèi)的69個天然免疫相關基因和4個適應性免疫相關基因的差異分析顯示，這些基因的平均表達水平在持續(xù)感染多代的細胞中比親本細胞中高，這可以表明持續(xù)感染多代的細胞比親本細胞的免疫應答反應更強烈，而MAPK信號響應更微弱.如果使MAPK/ERK信號通路中斷，則可以使FMDV的復制水平明顯下降，呈現(xiàn)出持續(xù)感染的趨勢[37].在此基礎上進行的后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)，在FMDV感染的后期，MAPK/ERK和MAPK/p38信號通路會被病毒的復制行為所激活，并對病毒的持續(xù)感染做出貢獻，通過抑制這兩條信號通路可以顯著降低病毒的核酸復制水平和蛋白合成水平.根據(jù)已有的研究成果可以得出結(jié)論，MAPK信號通路的激活很大可能對FMDV持續(xù)感染起到了促進作用.

4.4 病毒與免疫系統(tǒng)的相互作用

病毒在生物體中持續(xù)感染要具有在宿主免疫系統(tǒng)的壓力下生存的能力.對于口蹄疫病毒，大約有兩種策略可供它們選擇其一或兩個全部執(zhí)行.一是選擇躲避在宿主體內(nèi)如神經(jīng)系統(tǒng)等一些免疫攻擊較弱的部位以求長久生存；二是通過感染免疫細胞如巨噬細胞和淋巴細胞來改變宿主的免疫反應來謀求持續(xù)感染.

在逃逸免疫系統(tǒng)的清除方面，Sanz-Parra等[40]通過研究發(fā)現(xiàn)FMDV通過阻止宿主細胞合成MHC-I類分子來達到逃脫宿主的免疫應答的目的.細胞表面的MHC-I類分子表達受影響，導致病毒的抗原性物質(zhì)病毒肽不能被呈遞給T淋巴細胞，這對病毒起到了重要的保護作用，使病毒有機會不斷繁衍、不斷產(chǎn)生新的突變株，有利于病毒在宿主體內(nèi)形成持續(xù)感染.

Nfon與Ostrowski等[41-42]發(fā)現(xiàn)免疫細胞的吞噬作用在小鼠和牛感染FMDV后得到了抑制，這導致了機體延遲清除病毒，有利于持續(xù)感染的發(fā)展.最近，James等[43]用IPA(Ingenuity Pathway Analysis)軟件分析了所有差異表達基因，發(fā)現(xiàn)FMDV攜帶者和非攜帶者的鼻咽上皮之間差異表達的基因會顯著影響免疫細胞的運輸：減少中性粒細胞、T細胞和樹突狀細胞的募集，增加巨噬細胞和NK細胞向上皮細胞的遷移.Zhang等[44]通過檢測牛的血清樣品，發(fā)現(xiàn)早期感染的攜帶者雖然口蹄疫病毒的抗體水平與非攜帶者別無二致，但白介素IL-10的量總體上明顯高于非攜帶動物，這可能是免疫細胞的運輸受到影響的直接原因之一.以上都說明免疫調(diào)節(jié)作用起效對于宿主抵抗病毒入侵非常重要.

在抑制細胞的免疫應答方面，有研究發(fā)現(xiàn)是否接種口蹄疫疫苗會影響受FMDV感染的牛產(chǎn)生免疫應答[45].在感染細胞中誘導凋亡的兩種主要機制是T細胞介導的細胞毒性和死亡受體信號轉(zhuǎn)導，這些機制可以幫助細胞清除病毒.Eschbaumer等[45]通過比較攜帶FMDV與非攜帶FMDV的牛的成熟mRNA序列，發(fā)現(xiàn)在攜帶者中表達的促凋亡基因與補體調(diào)節(jié)因子都明顯低于非攜帶者，說明在攜帶者FMDV持續(xù)感染的組織中，細胞凋亡的兩種機制均受到損害[46].此外，病毒還可以通過抑制調(diào)節(jié)型T細胞介導的抗病毒免疫來維持其持續(xù)感染[47].

5 總結(jié)與展望

本文對FMDV持續(xù)感染在體內(nèi)存在的位置、感染特性及持續(xù)感染各方面的機制進行了綜合介紹.目前，通過單細胞分析、轉(zhuǎn)錄組測序等方式[50]已經(jīng)篩選出了病毒與細胞中許多與持續(xù)感染相關的基因和分子，并聯(lián)系信號通路闡明了二者相互作用和共同進化的部分作用機制.

研究者們發(fā)現(xiàn)一些細胞在病毒存在的壓力下獲得了更強的抵御能力，未來用基因組學、表觀基因組學和蛋白質(zhì)組學分析的方法在持續(xù)感染的細胞群中尋找這些細胞并鑒定其特征，或許可以對抗病毒的研究有所啟發(fā).同時，病毒與宿主相互適應，共同進化的模式也能為進化生物學的研究提供思路與證據(jù).

當今，我國仍然經(jīng)常受到口蹄疫的危害.O型、亞洲I型、A型3種血清型[8]的口蹄疫病毒在我國流行.此外還有時發(fā)的境外疫情[48-49]，常傳入我國，嚴重危害我國的畜牧業(yè).口蹄疫的防疫與消滅工作仍將面臨不少難題和挑戰(zhàn)，任重而道遠.

口蹄疫的疫情防控需要三個方面的努力：1) 開發(fā)出有效的診斷檢測技術，篩查并消滅作為傳染源的FMDV攜帶動物；2) 切斷FMDV攜帶者與易感動物之間可能的傳播途徑；3) 開發(fā)出針對不同血清型口蹄疫病毒的有效疫苗并實施計劃免疫保護易感動物.目前，國內(nèi)外大量使用的疫苗均為口蹄疫病毒的滅活疫苗.最近的研究者們保留病毒衣殼研制了FMDV VLPs疫苗，VLPs有安全性高、細胞攝取效率高的優(yōu)點，靶向給藥的能力很強.除此之外，疫情防控也需要養(yǎng)殖戶們保持飼養(yǎng)環(huán)境的衛(wèi)生，做好日常的預防工作，嚴格按照免疫程序進行疫苗免疫，按照說明書規(guī)定的操作和劑量正確使用疫苗.綜合多方努力解決口蹄疫病毒持續(xù)感染帶來的防疫困難，進一步優(yōu)化疫情防控體系.