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    基于SNP分子標(biāo)記的221份荔枝品種(品系)的遺傳多樣性分析及核心種質(zhì)庫構(gòu)建

    2022-08-12 08:05:50黃小鳳韋陽連余金昌袁志永王偉山
    關(guān)鍵詞:晚熟成熟期品系

    黃小鳳,韋陽連,袁 葉,余金昌,袁志永,王偉山

    (東莞植物園,廣東 東莞 523086)

    荔枝(LitchichinensisSonn.)起源于中國,屬于特色農(nóng)產(chǎn)品之一。目前,國內(nèi)荔枝栽培面積約5.3×105hm2,形成了海南特早熟、粵桂西南早熟、粵桂中部中熟、粵東閩南晚熟、瀘州特晚熟等特色優(yōu)勢產(chǎn)區(qū)[1,2]。荔枝品種眾多,表型多樣性豐富。1982年,傅玲娟等[3]在海南島調(diào)查發(fā)現(xiàn),野生荔枝的葉片、果實表型多樣,根據(jù)果皮特征可分為3種類型;1986年,吳仁山以果皮特征為一級分類標(biāo)準(zhǔn),果形為二級分類標(biāo)準(zhǔn),其他性狀為三級和四級分類標(biāo)準(zhǔn),將廣西的荔枝品種分為7大類[4];吳淑嫻[5]在前人研究基礎(chǔ)上,以成熟果實中部果皮上龜裂片和裂片峰的主要特征作為分類標(biāo)準(zhǔn),將全國200余份荔枝品種分為果皮龜裂片尖突型、隆起型、平坦型3大類型,每個類型均包含多種形態(tài)的裂片峰。荔枝豐富的表型多樣性是其遺傳多樣性在形態(tài)上的體現(xiàn)。

    荔枝遺傳多樣性研究對其資源保護和開發(fā)利用具有重要意義。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,DNA分子標(biāo)記技術(shù)已成為遺傳多樣性研究的有效方法。目前,研究者已利用RAPD、AFLP、ISSR、EST-SSR、SNP、SRAP等分子標(biāo)記[6-12]對荔枝品種資源進行了親緣關(guān)系及遺傳多樣性研究,說明將分子標(biāo)記方法用于荔枝種質(zhì)資源研究具有較高的可行性和有效性。

    栽培植物的核心種質(zhì)庫能以最小的品種數(shù)量和遺傳重復(fù),最大程度地代表整個物種資源的遺傳多樣性,核心種質(zhì)庫的構(gòu)建能夠提高種質(zhì)資源的管理和利用效率,已成為國內(nèi)外植物種質(zhì)資源研究的重點[13]。目前,已經(jīng)利用分子標(biāo)記構(gòu)建了水稻(OryzasativaLinn.)、核桃(JuglansregiaLinn.)、杏(ArmeniacavulgarisLinn.)、木荷(SchimasuperbaGardn.et Champ.)、杉木〔Cunninghamialanceolata(Lamb.)Hook.〕和建蘭〔Cymbidiumensifolium(Linn.)Sw.〕等植物的核心種質(zhì)庫[14-19]。荔枝樹體高、占地面積大,其活植物保存需要占用大量土地。為了能夠在有限的土地上盡可能多地保存荔枝品種資源,維持其遺傳多樣性,宜利用分子標(biāo)記構(gòu)建荔枝核心種質(zhì)庫。

    作者所在課題組現(xiàn)收集到荔枝品種(品系)221份,且大多數(shù)品種(品系)的遺傳多樣性和親緣關(guān)系未知。為客觀評價荔枝品種資源的遺傳多樣性,弄清品種間的遺傳關(guān)系,作者利用SNP分子標(biāo)記對收集的荔枝品種(品系)進行遺傳多樣性和遺傳關(guān)系分析,并在此基礎(chǔ)上構(gòu)建荔枝核心種質(zhì)庫,以期高效保存荔枝種質(zhì)資源的遺傳多樣性,有效提高其管理水平,為荔枝種質(zhì)資源的管理與利用提供理論依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    供試樣本為從廣東、廣西、福建、海南和四川收集的221份荔枝品種(品系),包括154份晚熟品種(品系)(編號1~154)、50份中熟品種(品系)(編號155~204)、11份早熟品種(品系)(編號205~215)、6份特早熟品種(品系)(編號216~221),各品種(品系)的名稱和來源地見附錄Ⅰ。

    供試品種(品系)均種植于東莞植物園荔枝種質(zhì)資源圃內(nèi)。該種質(zhì)圃地處南亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū),光照充足、熱量豐富、雨量充沛,圃內(nèi)土壤為赤壤土。

    每份樣本選擇3株單株,株齡為4~14 a,在每株樣株中上部的健康老熟枝條上各采集1枚老熟葉片,于-70 ℃保存、備用。

    1.2 方法

    1.2.1 DNA的提取與檢測 采用CTAB小樣法[20]提取葉片DNA并進行純度檢測,于-20 ℃保存、備用。

    1.2.2 SNP分型 從Liu等[11]開發(fā)的155對SNP引物中篩選出分型穩(wěn)定、多態(tài)性高的19對SNP引物進行PCR擴增反應(yīng),供試引物基本信息見表1。PCR擴增體系總體積10.0 μL,包括10 ng·μL-1基因組DNA 2.0 μL、5 U·μL-1rTaqDNA聚合酶〔寶生物工程(大連)有限公司〕0.6 μL、10×Buffer(含Mg2+)1.0 μL、10 mmol·L-1dNTPs 0.2 μL、10 mmol·L-1正向和反向引物各0.3 μL,滅菌超純水補足剩余體積。PCR擴增程序為:95 ℃預(yù)變性3 min;95 ℃變性45 s、56 ℃退火30 s、72 ℃延伸1 min,共50個循環(huán);最后72 ℃延伸5 min。PCR產(chǎn)物于4 ℃保存。SNP基因分型及數(shù)據(jù)分析參考孫清明等[21]。

    表1 供試19對SNP引物的基本信息

    1.2.3 遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)分析 利用GenAlEx 6.5軟件計算觀測等位基因數(shù)、有效等位基因數(shù)、Shannon’s信息指數(shù)、觀測雜合度、期望雜合度、遺傳分化系數(shù)和遺傳距離,并進行分子方差變異分析(AMOVA)。參照文獻[22]劃分群體遺傳分化程度。

    采用PowerMarker V3.25軟件計算多態(tài)性信息含量;采用STRUCTURE 2.3.4軟件對供試樣本進行分組和群體遺傳結(jié)構(gòu)分析,根據(jù)ΔK值最大原則確定最佳分組數(shù);最后,利用MEGA 5.2軟件,基于遺傳距離采用UPGMA法構(gòu)建系統(tǒng)樹。

    1.2.4 核心種質(zhì)庫的構(gòu)建與評價 按照供試?yán)笾ζ贩N(品系)的果實成熟期進行分組,參照文獻[18]的方法篩選并構(gòu)建核心種質(zhì)庫。運用PowerMarker V3.25 軟件設(shè)置取樣比例為10%、15%、20%、25%和30%,根據(jù)模擬退火算法(simulated annealing algorithm)以等位基因最大化(maximizing allelic richness)為標(biāo)準(zhǔn)構(gòu)建核心種質(zhì)庫;利用GenAlEx 6.5軟件計算核心品種(品系)、原有品種(品系)和保留品種(品系)的遺傳多樣性參數(shù),并通過計算遺傳多樣性參數(shù)的保留率〔核心品種(品系)某一指標(biāo)占原有品種(品系)同一指標(biāo)的百分率〕以及t檢驗評價核心品種(品系)、保留品種(品系)和原有品種(品系)的遺傳多樣性,同時運用主坐標(biāo)分析法(PCoA)對構(gòu)建的核心種質(zhì)庫進行確認(rèn)。

    2 結(jié)果和分析

    2.1 SNP引物和荔枝品種(品系)群體的遺傳多樣性分析

    2.1.1 SNP引物的遺傳多樣性參數(shù)分析 利用19對SNP引物對供試的221份荔枝樣本進行擴增,各引物的遺傳多樣性參數(shù)見表2。

    由表2可見:每對SNP引物的觀測等位基因數(shù)均為2,有效等位基因數(shù)為1.1~2.0,均值為1.5;Shannon’s信息指數(shù)為0.236~0.692,均值為0.482;觀測雜合度為0.081~0.561,均值為0.282;期望雜合度為0.119~0.499,均值為0.314;多態(tài)性信息含量為0.112~0.374,均值為0.256。其中,引物SNP7的有效等位基因數(shù)、Shannon’s信息指數(shù)、期望雜合度和多態(tài)性信息含量均最高。

    表2 用于221份荔枝樣本SNP分子標(biāo)記分析的19對引物的遺傳多樣性參數(shù)

    2.1.2 荔枝品種(品系)群體的遺傳多樣性分析 基于SNP分子標(biāo)記分析結(jié)果,對不同果實成熟期荔枝品種(品系)群體的遺傳多樣性參數(shù)進行分析,結(jié)果見表3。

    由表3可見:供試?yán)笾ζ贩N(品系)群體的觀測等位基因數(shù)、有效等位基因數(shù)、Shannon’s信息指數(shù)、觀測雜合度和期望雜合度的均值分別為1.9、1.6、0.487、0.372和0.327。在4個荔枝品種(品系)群體中,荔枝晚熟品種(品系)群體的有效等位基因數(shù)、Shannon’s信息指數(shù)、觀察雜合度和期望雜合度均最小,早熟品種(品系)群體的上述遺傳多樣性指標(biāo)均最大,表明荔枝早熟品種(品系)群體的遺傳多樣性最高,荔枝晚熟品種(品系)群體的遺傳多樣性最低。

    表3 基于SNP分子標(biāo)記的不同果實成熟期荔枝品種(品系)群體的遺傳多樣性參數(shù)

    2.2 荔枝品種(品系)群體的遺傳分化和遺傳結(jié)構(gòu)

    基于SNP分子標(biāo)記分析結(jié)果,對不同果實成熟期荔枝品種(品系)群體的遺傳分化和遺傳結(jié)構(gòu)進行分析,結(jié)果分別見表4、表5和圖1。

    2.2.1 荔枝品種(品系)群體的遺傳分化 分子方差分析(AMOVA)結(jié)果(表4)顯示:供試?yán)笾ζ贩N(品系)樣本個體間的遺傳變異貢獻率為85%,群體間和群體內(nèi)的遺傳變異貢獻率分別為10%和5%,表明供試?yán)笾ζ贩N(品系)群體的遺傳變異主要發(fā)生在個體間,群體間遺傳變異不明顯。

    表4 荔枝品種(品系)群體的AMOVA分析結(jié)果

    由表5可見:中熟品種(品系)群體與早熟和晚熟品種(品系)群體間的遺傳分化程度很低,遺傳分化系數(shù)分別為0.046和0.021;早熟品種(品系)群體與特早熟和晚熟品種(品系)群體間的遺傳分化程度較低,遺傳分化系數(shù)分別為0.081和0.096;特早熟品種(品系)群體與中熟和晚熟品種(品系)群體間的遺傳分化程度中等,遺傳分化系數(shù)分別為0.166和0.246。晚熟品種(品系)群體與中熟、早熟和特早熟品種(品系)群體間的遺傳距離依次增大,遺傳距離分別為0.014、0.091和0.352;特早熟品種(品系)群體與早熟、中熟和晚熟品種(品系)群體間的遺傳距離也依次增大,遺傳距離分別為0.109、0.240和0.352。表明供試?yán)笾ζ贩N(品系)群體的果實成熟時間相差越大,其遺傳距離越大。

    表5 基于SNP分子標(biāo)記的不同果實成熟期荔枝品種(品系)群體間的遺傳距離和遺傳分化系數(shù)1)

    總體上看,供試?yán)笾ζ贩N(品系)群體間的遺傳分化系數(shù)和遺傳距離均與果實成熟期相關(guān),果實成熟期相距越遠(yuǎn),遺傳分化系數(shù)和遺傳距離越大。

    2.2.2 荔枝品種(品系)群體的遺傳結(jié)構(gòu) 基于SNP分子標(biāo)記的不同果實成熟期荔枝品種(品系)群體的分組結(jié)果(圖1-A)表明:在K=2時,ΔK達(dá)到最大值,說明供試?yán)笾ζ贩N(品系)群體在分成2組時遺傳結(jié)構(gòu)最明顯。

    遺傳結(jié)構(gòu)分析結(jié)果(圖1-B)表明:供試的221份荔枝品種(品系)適合劃分為2組。其中,a組Q值為0.501~0.995,包含181份荔枝品種(品系),主要為中熟和晚熟品種(品系),分別為32和145份品種(品系),另包含4份早熟品種(品系);b組的Q值為0.550~0.997,包含40份荔枝品種(品系),包括所有特早熟品種(品系)(6份)、大部分早熟品種(品系)(7份)、少部分中熟品種(品系)(18份)及極少部分晚熟品種(品系)(9份)。

    K: 分組數(shù)Cluster number.: a組Group a; : b組Group b.P1: 晚熟品種(品系)Late-maturing cultivar(strain); P2: 中熟品種(品系)Mid-maturing cultivar(strain); P3: 早熟品種(品系)Early-maturing cultivar(strain); P4: 特早熟品種(品系)Extremely early-maturing cultivar(strain).

    2.3 荔枝品種(品系)群體的聚類分析

    根據(jù)SNP分子標(biāo)記分析結(jié)果、基于遺傳距離對221份荔枝品種(品系)進行UPGMA聚類分析,結(jié)果見圖2。

    由圖2可見:在遺傳距離0.18處,可將供試?yán)笾ζ贩N(品系)分為3組。特早熟品種(品系)‘荷包荔’(‘Hebaoli’)(編號216)和‘三月紅’(‘Sanyuehong’)(編號219)與絕大多數(shù)品種(品系)的遺傳距離較遠(yuǎn),二者聚為Ⅰ組;另219份品種(品系)可劃分為2組(Ⅱ組和Ⅲ組)。其中,Ⅱ組包含39份品種(品系),包括4份特早熟品種(品系)、10份晚熟品種(品系)、18份中熟品種(品系)和7份早熟品種(品系);Ⅲ組包含180份品種(品系),包括144份晚熟品種(品系)、32份中熟品種(品系)和4份早熟品種(品系)。

    將圖2中Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組包含的品種(品系)分別與圖1中基于遺傳結(jié)構(gòu)的分組結(jié)果進行比對,結(jié)果顯示:Ⅰ組和Ⅱ組包含的41份品種(品系)中,有36份品種(品系)出現(xiàn)在圖1的b組中;Ⅲ組包含的180份品種(品系)中,有177份品種(品系)出現(xiàn)在圖1的a組中。表明聚類分析和遺傳結(jié)構(gòu)分析結(jié)果基本一致。

    : 晚熟品種(品系)Late-maturing cultivars(strains); : 中熟品種(品系)Mid-maturing cultivars(strains); : 早熟品種(品系)Early-maturing cultivars(strains); : 特早熟品種(品系)Extremely early-maturing cultivars(strains).1-221:品種(品系)編號Nos.of cultivars(strains).

    2.4 荔枝核心種質(zhì)庫的構(gòu)建和評價

    2.4.1 荔枝核心種質(zhì)庫構(gòu)建 用PowerMarker V3.25軟件設(shè)置不同的取樣比例并構(gòu)建核心種質(zhì)庫,其遺傳多樣性參數(shù)見表6。

    表6 按照不同取樣比例構(gòu)建的荔枝核心種質(zhì)庫的遺傳多樣性參數(shù)1)

    結(jié)果表明:取樣比例為20%構(gòu)建的核心品種(品系)群體能最大程度地保留原有品種(品系)群體的遺傳多樣性,其觀測等位基因數(shù)、有效等位基因數(shù)、Shannon’s信息指數(shù)、觀測雜合度、期望雜合度的保留率分別為100%、100%、106%、103%和107%,表明該取樣比例篩選出來的荔枝核心品種(品系)群體能充分體現(xiàn)原有品種(品系)群體的遺傳多樣性,可確作為荔枝核心種質(zhì)庫。

    核心種質(zhì)庫包含44份品種(品系)(詳見附錄Ⅰ),其中晚熟品種(品系)有31份,占晚熟品種(品系)總數(shù)的20.1%;主要為來源于海南的品種(品系)(18份),來源于福建和四川的品種(品系)分別有5和2份,來源于廣東和廣西的品種(品系)均有3份。中熟品種(品系)有8份,占中熟品種(品系)總數(shù)的16.0%;來源于廣東、廣西、福建和四川的品種(品系)各有2、3、1和2份。早熟品種(品系)有2份,分別來源于廣東和福建,占早熟品種(品系)總數(shù)的18.2%;特早熟品種(品系)有3份,分別來源于廣東、福建和四川,占特早熟品種(品系)總數(shù)的50.0%??傮w上看,核心種質(zhì)庫包含的品種(品系)全面涵蓋原有品種(品系)群體的果實成熟期和來源地,說明該核心種質(zhì)庫較全面地保留了供試?yán)笾ζ贩N(品系)的相關(guān)信息。

    2.4.2 荔枝核心種質(zhì)庫評價 將荔枝核心種質(zhì)庫中包含的核心品種(品系)群體與原有品種(品系)群體和保留品種(品系)群體的遺傳多樣性參數(shù)進行對比,結(jié)果見表7;對荔枝核心品種(品系)群體與原有品種(品系)群體進行主坐標(biāo)分析(PCoA),結(jié)果見圖3。

    表7 荔枝核心品種(品系)群體與其他品種(品系)群體的遺傳多樣性參數(shù)對比

    : 核心品種(品系)Core cultivar(strain); : 原有品種(品系)Initial cultivar(strain).

    由表7可見:核心品種(品系)群體的Shannon’s信息指數(shù)、觀測雜合度和期望雜合度均高于原有品種(品系)群體和保留品種(品系)群體,表明核心品種(品系)群體的遺傳多樣性相對較高。t檢驗結(jié)果顯示:3個供試群體的遺傳多樣性參數(shù)均無顯著差異,表明核心品種(品系)群體可以代表原有品種(品系)群體,且保留品種(品系)群體可作為核心種質(zhì)庫的備用資源。

    由圖3可見:核心品種(品系)均勻分布在整個供試群體中,且核心品種(品系)還包含特早熟品種(品系)‘荷包荔’和‘三月紅’,表明該荔枝核心種質(zhì)庫的代表性較強。

    3 討論和結(jié)論

    3.1 荔枝品種(品系)的遺傳多樣性及變異來源

    遺傳多樣性研究對植物種質(zhì)資源的利用、保護和進化具有重要意義。本研究利用19對SNP引物對221份荔枝品種(品系)進行了遺傳多樣性研究,Shannon’s信息指數(shù)為0.236~0.692,觀測雜合度為0.081~0.561,表明供試的荔枝品種(品系)樣本具有較高的遺傳多樣性。荔枝群體遺傳多樣性豐富可能與其品種(品系)間的自然雜交有關(guān)。荔枝起源于云南,后沿著西江傳播至海南,并在云南和海南分別馴化為特早熟和晚熟品種(品系),這2類品種(品系)進一步雜交形成早熟和中熟品種(品系)[23];荔枝為異花授粉植物,遺傳基礎(chǔ)十分復(fù)雜,基因型為雜合型,荔枝品種(品系)間的自然雜交使其品種(品系)間的遺傳物質(zhì)交流頻繁,引起遺傳變異和遺傳多樣性的增加[24]。

    在基于SNP分子標(biāo)記數(shù)據(jù)構(gòu)建的UPGMA聚類圖中,供試的221份荔枝樣本可分為3組,Ⅰ組的2份樣本均屬于特早熟品種(品系),Ⅲ組的絕大多數(shù)樣本屬于晚熟品種(品系);Ⅱ組中,靠近Ⅰ組的樣本多屬于特早熟或早熟品種(品系),靠近Ⅲ組的樣本多屬于中熟品種(品系)。在聚類圖上,供試品種(品系)的分布整體呈現(xiàn)兩端分別為特早熟和晚熟品種(品系)、中間為早熟和中熟品種(品系)的特點,基本符合“荔枝先獨立馴化為特早熟和晚熟品種,這2類品種再進一步雜交形成早熟與中熟品種”[23]的研究結(jié)論。但在聚類圖中也出現(xiàn)少數(shù)不同果實成熟期的品種(品系)聚在同組的現(xiàn)象,這可能與不同區(qū)域之間的相互引種以及品種(品系)間的自然雜交有關(guān)。引種和自然雜交過程均可促進品種(品系)間的基因交流,進而產(chǎn)生具有多種遺傳特性的后代,但若品種(品系)之間具有親緣關(guān)系,則無論其果實成熟期是否一致,都有可能聚在一起。

    3.2 荔枝品種(品系)的分類標(biāo)準(zhǔn)

    目前,多根據(jù)果皮特征將荔枝品種(品系)分為尖突型、隆起型和平坦型3大類型,但這一分類體系并不能準(zhǔn)確反映品種(品系)間的親緣關(guān)系。隨著分子生物技術(shù)的廣泛應(yīng)用,有研究者發(fā)現(xiàn)依據(jù)分子標(biāo)記獲得的荔枝樣本的分組結(jié)果同時表現(xiàn)出依果實成熟期分組的特點,因而提出將果實成熟期作為荔枝品種資源分類的首要標(biāo)準(zhǔn)[25]。Liu等[26]基于RAPD分子標(biāo)記技術(shù),將60份荔枝樣本按果實成熟期分為極早熟、早中熟和晚熟至極晚熟3組;基于SSR分子標(biāo)記技術(shù),傅嘉欣[27]發(fā)現(xiàn)供試47份荔枝樣本可分為3大組,分組結(jié)果與果實成熟期具有較好的一致性[25];Liu等[11]基于SNP技術(shù),將96份荔枝樣本按照果實成熟期聚為特早熟、早熟、中熟和晚熟4組。本研究中,供試221份荔枝品種(品系)的果實成熟期相差明顯,且果實成熟期相差越大的荔枝群體,其遺傳分化系數(shù)和遺傳距離也越大,但在UPGMA聚類圖中供試221份荔枝樣本并未完全按照果實成熟期聚類,其中,Ⅲ組主要為晚熟和中熟品種(品系)并包含少量早熟品種(品系),而Ⅱ組中4個果實成熟期的品種(品系)均有。造成這一現(xiàn)象的原因可能與供試樣本的數(shù)量有關(guān),供試樣本越多,攜帶的遺傳信息越多,產(chǎn)生遺傳變異的可能性越大,不確定的影響因子也更多。本研究中供試?yán)笾颖镜钠谕s合度(0.314)高于Liu等[11]的研究結(jié)果(0.305),可見研究對象的有效樣本量越大,產(chǎn)生遺傳變異的可能性越大,其期望雜合度越高。

    2021年,國家荔枝種質(zhì)資源圃在茂名建成,收集了國內(nèi)外700多份荔枝種源,今后應(yīng)以盡可能多的種質(zhì)資源為供試材料,開展多個分子標(biāo)記和多個表型性狀的相關(guān)性研究,從整體上對荔枝種質(zhì)的遺傳背景和表型進行綜合分析,以探討將成熟期或其他性狀作為荔枝種質(zhì)分類新標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)性。

    3.3 荔枝核心種質(zhì)庫的構(gòu)建及其意義

    保存大量的種質(zhì)資源可為荔枝遺傳改良和品種選育提供豐富的遺傳基礎(chǔ),但荔枝為多年生喬木,樹體高、占地面積大,這給荔枝種質(zhì)資源的保存帶來了一定的困難。構(gòu)建荔枝核心種質(zhì)庫,可在有限的土地上保存更多的種質(zhì)資源,實現(xiàn)遺傳多樣性保藏目標(biāo)。

    確定合理的取樣比例是核心種質(zhì)庫構(gòu)建面臨的首要問題。目前,國內(nèi)外不同植物核心種質(zhì)庫的取樣比例為5%~30%,沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。李自超等[28]認(rèn)為,構(gòu)建核心種質(zhì)庫時的取樣比例要根據(jù)原有樣本的數(shù)量而定,原有樣本數(shù)量大時核心種質(zhì)庫的取樣比例可相對較小,反之,取樣比例應(yīng)相應(yīng)增大。李冬波等[29]對廣西原產(chǎn)和引種的88份荔枝品種資源進行分析,構(gòu)建了包含22份品種(品系)的核心種質(zhì)庫,占原有品種(品系)數(shù)的25%;Sun等[30]分析了不同果實成熟期的96份荔枝樣本,并篩選出22份核心樣本,占原有樣本數(shù)的23%;而本研究在供試的221份荔枝品種(品系)中篩選出44份樣本構(gòu)建了核心種質(zhì)庫,占原有品種(品系)數(shù)的20%。由此可見,隨原有種質(zhì)庫中荔枝品種(品系)數(shù)的逐漸增多,核心種質(zhì)庫的取樣比例逐漸減小,這在一定程度上佐證了李自超等[28]的研究結(jié)論。

    經(jīng)PCoA主坐標(biāo)分析和t檢驗,采用本研究方法構(gòu)建的荔枝核心種質(zhì)庫包含的品種(品系)的遺傳多樣性參數(shù)與原有種質(zhì)庫無顯著差異,且該核心種質(zhì)庫涵蓋了原有種質(zhì)庫的所有品種(品系)的果實成熟期和來源地,說明構(gòu)建的核心種質(zhì)庫具有很好的代表性,在實際育種工作中可優(yōu)先考慮使用核心種質(zhì)庫的品種(品系)作為育種材料。當(dāng)土地資源減少,無法保存所有供試品種(品系)的活植物時,應(yīng)優(yōu)先保存核心種質(zhì)庫的品種(品系),以維持其遺傳多樣性。

    目前,早熟品種不優(yōu)質(zhì)是荔枝產(chǎn)業(yè)發(fā)展面臨的主要問題之一,選育早熟優(yōu)質(zhì)荔枝品種(品系)是荔枝重要的育種目標(biāo)。本研究結(jié)果顯示:特早熟品種(品系)‘荷包荔’和‘三月紅’與絕大多數(shù)品種(品系)的遺傳距離較遠(yuǎn),且為核心品種(品系),在早熟品種(品系)育種工作中可考慮選擇‘荷包荔’和‘三月紅’與優(yōu)質(zhì)荔枝品種(品系)進行雜交,以選育早熟優(yōu)質(zhì)荔枝品種(品系)。

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