結(jié)直腸神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中SATB2的表達(dá)及臨床意義

李曉玲，周金釗，王 衡，黃 仲

目前神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(neuroendocrine neoplasms, NEN)的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)呈逐年升高趨勢，其中以胃腸胰神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(gastroenteropancreatic neuroendocrine neoplasms, GEP-NEN)最為常見。該腫瘤的組織學(xué)從高分化的神經(jīng)內(nèi)分泌瘤(neuroendocrine tumor, NET)到低分化的神經(jīng)內(nèi)分泌癌(neuroendocrine carcinomas, NEC)，生物學(xué)行為具有高度異質(zhì)性，為臨床治療帶來極大挑戰(zhàn)。SATB2是一種參與成骨細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞分化的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，是正常下消化道上皮組織及結(jié)直腸癌的高度敏感和特異性的標(biāo)志物。本文旨在探討SATB2在結(jié)直腸NEN中的表達(dá)及臨床意義，以期為臨床診治提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料收集2016年1月～2020年12月廣東醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院診治的136例消化道NEN，其中NET 113例，NEC 23例；男、女性各68例；年齡13～80歲。本實驗獲得我院倫理委員會批準(zhǔn)，患者均知情同意。

1.2 方法標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋切片，HE染色，鏡下觀察，經(jīng)兩名病理醫(yī)師復(fù)診。根據(jù)WHO(2019)消化系統(tǒng)NEN的分類及分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行腫瘤分級分型：高分化NET G1(低級別)、G2(中級別)、G3(高級別)及低分化NEC。采用DAKO Omnis公司最新型全自動免疫組化儀進(jìn)行染色，一抗SATB2及二抗試劑盒均購自福州邁新公司。設(shè)陰、陽性對照，免疫組化染色結(jié)果由兩位病理科醫(yī)師采用雙盲法獨立閱片。

1.3 結(jié)果判讀SATB2表達(dá)定位于細(xì)胞核，根據(jù)陽性細(xì)胞染色強度評分：無著色為0分，淡黃色為1分，淺褐色為2分，深褐色為3分。根據(jù)腫瘤細(xì)胞陽性百分比評分：陽性細(xì)胞數(shù)<25%為1分，25%～49%為2分，50%～75%為3分，>75%為4分。將兩項得分相乘作為最終評分，其中0～3分為陰性，≥4分為陽性。

2 結(jié)果

2.1 臨床特征本組136例消化道NEN中，NET 113例，NEC 23例，其中原發(fā)于食管NEC 5例，胃NET 9例、NEC 5例，胰腺NET 8例，小腸NET 10例，闌尾NET 3例，結(jié)腸NET 1例、NEC 6例，直腸NET 82例、NEC 7例?；颊吣挲g13～80歲，平均(50.65±13.98)歲；其中男性68例，年齡13～80歲，平均(50.07±15.13)歲；女性68例，年齡19～76歲，平均(51.22±12.82)歲。96例結(jié)直腸NEN中NET 83例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移78例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 5例；NEC 13例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移2例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移11例；年齡19～76歲，平均(48.85±13.07)歲。96例結(jié)直腸NEN中男性46例，年齡22～73歲，平均(47.20±12.93)歲；女性50例，年齡19～76歲，平均(50.38±13.14)歲；腫瘤轉(zhuǎn)移與其分化程度密切相關(guān)，NEC組的轉(zhuǎn)移率(11/13，84.61%)高于NET組(5/83，6.02%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2 結(jié)直腸及結(jié)直腸外其他消化道NEN中SATB2的表達(dá)SATB2在結(jié)直腸(78/96、81.25%)及闌尾NEN(3/3，100%)中顯示高陽性率，在結(jié)直腸外其他消化道NEN中SATB2均陰性[食管(0/5)、胃(0/14)、胰腺(0/8)、小腸(0/10)]。本組NEC中SATB2的陽性程度弱于內(nèi)對照的正常隱窩上皮，NET中SATB2在腫瘤周邊條索狀浸潤灶中的陽性程度弱于原腫瘤細(xì)胞巢團(tuán)，HE染色顯示形態(tài)良好的直腸NET G1腰椎骨轉(zhuǎn)移灶中SATB2呈陰性(圖1～6)。

圖1 SATB2在直腸NET中呈陽性，EnVision法 圖2 SATB2在胃NET中呈陰性，EnVision法 圖3 SATB2在結(jié)腸低分化NEC腫瘤細(xì)胞巢中的陽性弱于正常隱窩上皮，EnVision法 圖4 SATB2在直腸NET周邊浸潤灶中的陽性弱于中央原腫瘤細(xì)胞巢，EnVision法 圖5 直腸NET G1骨轉(zhuǎn)移灶，形態(tài)良好的腫瘤細(xì)胞巢團(tuán)穿行在骨小梁之間 圖6 直腸NET G1骨轉(zhuǎn)移灶中腫瘤細(xì)胞巢SATB2呈陰性，內(nèi)對照骨組織SATB2呈陽性，EnVision法

2.3 結(jié)直腸NEN各組中STAB2的表達(dá)在96例結(jié)直腸NEN中，SATB2在NET組的陽性率(74/83，89.16%)高于NEC組(4/13，30.77%)，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽性率(72/80，90.00%)高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(6/16，37.50%)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，表1)。SATB2在結(jié)直腸NEN轉(zhuǎn)移組中的NET組(3/5，60.00%)與NEC組(3/11，27.27%)、結(jié)直腸NET中的轉(zhuǎn)移組(3/5，60.00%)與無轉(zhuǎn)移組(71/78，91.03%)、結(jié)直腸NEC中的轉(zhuǎn)移組(3/11，27.27%)與無轉(zhuǎn)移組(1/2，50.00%)的陽性率，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，表1)。

表1 結(jié)直腸NEN各組中SATB2的表達(dá)

3 討論

NEN是一組起源于肽能神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的高度異質(zhì)性腫瘤，全身多器官組織均可發(fā)生，以胃腸道NEN最為常見[1-2]。該腫瘤生物學(xué)特性復(fù)雜，臨床診治富于挑戰(zhàn)性。部分病例以轉(zhuǎn)移為首發(fā)臨床表現(xiàn)，甚至在原發(fā)病灶隱匿的情況下已發(fā)生肝臟、骨、肺轉(zhuǎn)移，通過組織學(xué)形態(tài)難以確定其來源部位，免疫組化檢查成為重要的鑒別手段。因此，尋找兼具敏感性與器官特異性的免疫組化標(biāo)志物，有效地指導(dǎo)臨床治療和評估預(yù)后具有重要意義。

SATB2基因定位于染色體2q32-q33，其編碼的SATB2蛋白是重要的核基質(zhì)相關(guān)蛋白。SATB2通過與核基質(zhì)附著區(qū)結(jié)合改變?nèi)旧|(zhì)構(gòu)象，參與染色質(zhì)轉(zhuǎn)錄和重塑調(diào)控，從而發(fā)揮調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的功能[3-4]。有研究表明，SATB2在下消化道上皮組織中高表達(dá)，且在惡性腫瘤中的表達(dá)譜相對較窄，主要在結(jié)直腸與闌尾腺癌、成骨細(xì)胞腫瘤和尿路上皮癌中表達(dá)[5]。程凱等[6]報道SATB2在結(jié)直腸腺癌中的陽性率為81.5%，在胃腺癌中的陽性率為8.7%，SATB2在結(jié)直腸癌與胃癌鑒別診斷中的陽性預(yù)測值是81.5%，陰性預(yù)測值是89.9%，提示SATB2或可用于鑒別結(jié)直腸癌與胃癌。何曉蘭等[7]、茍思琪等[8]研究結(jié)果也提示SATB2是鑒別肺轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸腺癌與肺腸型腺癌的高度特異性免疫組化標(biāo)志物。Eberhard等[9]通過組織芯片及免疫組化法檢測結(jié)直腸正常黏膜及結(jié)直腸癌組織中SATB2的表達(dá)，認(rèn)為其在腫瘤組織中的表達(dá)低于正常黏膜，SATB2高表達(dá)提示較好的預(yù)后及對化療、放療有較高的敏感性。Qaseem等[10]研究認(rèn)為SATB2可作為判斷結(jié)直腸癌分化程度相對特異的腫瘤標(biāo)志物，從而明確未知原發(fā)部位腺癌的來源。另有文獻(xiàn)報道SATB2可能在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展與浸潤轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，其低表達(dá)與腫瘤進(jìn)程密切相關(guān)[11]。嵇曉輝等[12]研究發(fā)現(xiàn)SATB2在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)低于正常結(jié)腸組織，并與腫瘤大小、分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期有關(guān)。最新研究顯示，SATB2 /Snail軸缺失可促進(jìn)結(jié)直腸癌的進(jìn)展[13]；SATB2-AS1調(diào)節(jié)TH1型趨化因子表達(dá)和免疫細(xì)胞密度，通過影響腫瘤免疫調(diào)節(jié)SATB2在結(jié)直腸癌細(xì)胞微環(huán)境中的作用[14]。Hoskoppal等[15]報道263例NEN，發(fā)現(xiàn)SATB2對于直腸/直乙交界處高分化NEN、闌尾高分化NEN是高度敏感且特異性的標(biāo)志物；在低分化NEN中SATB2的表達(dá)顯著低于高分化NEN(P<0.001)。本組SATB2在結(jié)直腸外其他消化道NEN中不表達(dá)，而在結(jié)直腸及闌尾NEN中的表達(dá)具有高度特異性與敏感性，并且NET組的陽性率(74/83，89.16%)高于NEC組(4/13，30.77%)，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽性率(72/80，90.00%)高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(6/16，37.50%)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。但在結(jié)直腸NEN轉(zhuǎn)移組中NET組(3/5，60.00%)與NEC組(3/11，27.27%)、結(jié)直腸NET中轉(zhuǎn)移組(3/5，60.00%)與無轉(zhuǎn)移組(71/78，91.03%)、結(jié)直腸NEC中轉(zhuǎn)移組(3/11，27.27%)與無轉(zhuǎn)移組(1/2，50.00%)的陽性率，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，可能與本組病例數(shù)較少有關(guān)。本組低分化NEC中SATB2的陽性程度弱于內(nèi)對照的正常隱窩上皮，高分化NET中SATB2在腫瘤周邊條索狀浸潤灶中的陽性程度弱于原發(fā)灶中央部的腫瘤細(xì)胞巢團(tuán)，提示在腫瘤發(fā)生、發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移中，SATB2可能扮演重要角色發(fā)揮作用。

綜上所述，SATB2是診斷結(jié)直腸NEN的敏感而特異的標(biāo)志物，對鑒別結(jié)直腸來源的NEN具有重要意義。SATB2在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，其表達(dá)降低或丟失與腫瘤分化及進(jìn)程密切相關(guān)。