光葉巴豆中的西松烷型二萜

張 靜，羅興禮，張金鳳，高 瀾，陳業(yè)高

（云南師范大學 化學化工學院，云南 昆明 650500）

光葉巴豆（Croton laevigatusVahl）是大戟科（Euphorbiaceae）巴豆屬（Croton）植物，主要分布于印度、斯里蘭卡以及我國海南省和云南省南部。生長于海拔50～600 m的密林、疏林、溪邊或灌木叢中[1]。其根和葉均可入藥，有活血通絡、解熱鎮(zhèn)痛的功效，可用于治療瘧疾、胃痛等。中外學者對光葉巴豆的研究表明，光葉巴豆中的化學成分豐富，主要包括二萜、三萜、倍半萜、黃酮和甾體等。其中西松烷型（cembrane-type）、半日花烷型（labdane-type）、克羅烷型（clerodane-type）等多種類型的二萜類化合物是光葉巴豆的主要活性成分[2-5]。這些成分的生物活性主要表現(xiàn)為細胞毒、抗腫瘤、抗HIV和抗炎鎮(zhèn)痛等[6-9]。為了進一步地從光葉巴豆中分離出更多活性良好的二萜成分，本文對采自云南西雙版納的光葉巴豆枝葉部分進行了研究，采用多種色譜技術對其化學成分進行分離純化，從中分離并鑒定出5個西松烷型二萜（圖1）。分別為：sublylactones A（1），B（2），laevigatlactones C（3），E（4），F(xiàn)（5）。

圖1 光葉巴豆中的西松烷型二萜Figure 1 Cembrane-type diterpenes from Croton laevigatus Vahl

1 實驗儀器、試劑與材料

1.1 儀器

核磁共振波譜儀DRX 500，BRUKER；N-1100型旋轉蒸發(fā)儀，東京理化器械獨資工廠；ZF-1型三用紫外分析儀，杭州齊威儀器有限公司。

1.2 試劑

層析硅膠：80～100 目，200～300 目；H 硅膠，青島海洋化工廠；Sephadex LH-20 凝膠；薄層層析硅膠板HSGF254，煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司；顯色劑為10%硫酸乙醇溶液，所用溶劑均為工業(yè)純（重蒸）；其它試劑為分析純或化學純。

1.3 植物材料

光葉巴豆枝葉采自云南省西雙版納，由中國醫(yī)學科學院藥用植物開發(fā)研究所云南分所彭朝中老師鑒定為Croton laevigatusVahl。

2 化合物的提取與分離

光葉巴豆枝葉部分（11.5 kg）晾干粉碎，工業(yè)甲醇（50 L）浸泡提取5次，將浸出液減壓濃縮得到甲醇提取物（1.8 kg）。用乙酸乙酯-水對甲醇浸提物萃取10次，減壓濃縮后得到乙酸乙酯萃取物（760 g）。乙酸乙酯萃取物用硅膠（80～100目）拌樣，進行硅膠柱層析，以石油醚/乙酸乙（0∶1→1∶0）進行梯度洗脫，經(jīng)TCL檢驗，得到8個組分（F1-F8）。利用硅膠柱層析和Sephadex LH-20凝膠柱層析對F5（石油醚/乙酸乙酯5∶1）部分進行反復分離純化得到sublylactone A（1，15.1 mg），sublylactone B（2，10.0 mg），laevigatlactones C（3，8.1 mg），E（4，6.3 mg）和F（5，6.7 mg）。

3 結構鑒定

化合物1：sublylactone A，無色油狀物，10%硫酸乙醇溶液加熱呈深紫色，MF：C20H30O4，MW：334;1H NMR（500 MHz，CDCl3）δH：6.93（1H，m，H-11），5.47（1H，d，J= 15.6 Hz，H-7），5.42（1H，m，H-3），5.42（1H，d，J= 15.6 Hz，H-6），5.38（1H，m，H-2），2.34（2H，d，J= 7.3 Hz，H-5），2.17（2H，d，J=14.1，6.3 Hz，H-13），2.13（2H，m，H-10），1.94（1H，dd，J= 14.1，14.1，6.3 Hz，H-14b），1.88（1H，m，H-9b），1.86（1H，m，H-15），1.84（1H，m，H-9a），1.78（1H，dd，J=14.1，6.3 Hz，H-14a），1.39（3H，s，H-18），1.27（3H，s，H-19），0.96（3H，d，J= 7.1 Hz，H-17），0.94（3H，d，J= 7.1 Hz，H-16）。13C NMR（125 MHz，CDCl3）δC：168.1（s，C-20），146.3（d，C-11），138.6（d，C-3），137.9（d，C-7），127.1（d，C-2），124.3（s，C-12），124.0（d，C-6），85.7（s，C-1），72.6（s，C-4），72.5（s，C-8），46.7（t，C-5），41.2（t，C-9），37.2（d，C-15），26.9（t，C-14），26.5（q，C-19），25.6（t，C-10），25.2（q，C-18），21.0（t，C-13），17.3（q，C-16），16.8（q，C-17）。與文獻報道的sublylactone A的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)基本一致，因此化合物1確定為sublylactone A[10]。

化合物2：sublylactone B，無色油狀物，10%硫酸乙醇溶液加熱呈深紫色，MF：C20H30O4，MW：334;1H NMR（500 MHz，CDCl3）δH：6.04（1H，m，H-11），5.60（1H，d，J= 15.8 Hz，H-2），5.58（1H，d，J= 15.8 Hz，H-3），5.46（1H，m，H-6），5.33（1H，dd，J= 15.8，2.5 Hz，H-7），2.98（1H，m，H-10b），2.50（2H，m，H-13），2.44（1H，ddd，J= 14.5，2.8，2.3 Hz，H-5b），2.19（1H，m，H-10a），2.15（1H，dd，J= 14.5，2.8 Hz，H-5a），1.91（1H，m，H-9b），1.86（1H，m，H-14b），1.82（1H，m，H-15），1.80（1H，m，H-14a），1.76（1H，dd，J=5.9，2.9 Hz，H-9a），1.30（3H，s，H-18），1.25（3H，s，H-19），0.94（3H，d，J=7.3 Hz，H-17），0.92（3H，d，J= 7.3Hz，H-16）。13C NMR（125 MHz，CDCl3）δC：167.3（s，C-20），149.3（d，C-11），138.5（d，C-7），137.4（d，C-3），125.5（d，C-2），124.0（s，C-12），123.0（d，C-6），86.0（s，C-1），73.5（s，C-4），73.4（s，C-8），47.3（t，C-5），42.4（t，C-9），37.5（d，C-15），31.0（q，C-19），28.6（q，C-18），28.5（t，C-14），26.8（t，C-10），24.4（t，C-13），17.5（q，C-16），17.5（q，C-17）。與文獻報道的sub?lylactone B的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)基本一致，因此化合物2確定為sublylactone B[10]。

化合物3：laevigatlactone C，無色油狀物，10%硫酸乙醇溶液加熱呈粉紫色，MF：C20H30O3，MW：318，1H NMR（500 MHz，CDCl3）δH：6.98（1H，dd，J= 11.1，2.5 Hz，H-11），5.71（1H，d，J= 16.0 Hz，H-2），5.64（1H，d，J=16.0 Hz，H-3），4.66（1H，t，J=8.5 Hz，H-7），2.71（1H，m，H-13a），2.31（1H，dd，J=13.5，11.1 Hz，H-10a），2.24（1H，dd，J=13.5，6.4 Hz，H-9a），2.20（1H，d，J=13.5 Hz，H-10b），2.13（1H，m，H-13b），2.10（1H，m，H-6a），2.04（1H，m，H-6b），1.99（1H，t，J= 6.4 Hz，H-9b），1.94（1H，m，H-14a），1.83（1H，d，J=8.0 Hz，H-5a），1.80（1H，t，J=7.3 Hz，H-15），1.65（1H，m，H-14b），1.54（1H，m，H-5b），1.54（3H，s，H-19），1.22（3H，s，H-18），0.97（3H，d，J= 7.3 Hz，H-16），0.97（3H，d，J=7.3 Hz，H-17）。13C NMR（125 MHz，CDCl3）δC：169.1（s，C-20），148.3（d，C-11），138.3（d，C-3），132.6（s，C-8），130.6（d，C-7），126.7（s，C-12），126.0（d，C-2），88.3（s，C-1），74.1（s，C-4），43.6（t，C-5），39.3（d，C-15），38.6（t，C-9），32.1（q，C-18），28.8（t，C-14），27.1（t，C-10），24.0（d，C-6），22.0（t，C-13），17.7（q，C-17），17.6（q，C-19），16.9（q，C-16）。與文獻報道的laevigatlactone C 的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)基本一致，因此化合物3確定為laevigatlactone C[11]。

化合物4：laevigatlactone E，無色油狀物，10%硫酸乙醇溶液加熱呈深紫色，MF：C20H30O4，MW：334;1H NMR（500 MHz，CDCl3）δH：6.84（1H，m，H-11），5.60（1H，m，H-6），5.48（1H，d，J= 15.9 Hz，H-2），5.35（1H，dd，J=15.3，1.7 Hz，H-7），5.31（1H，d，J=15.9 Hz，H-3），2.43（1H，m，H-13a），2.33（1H，m，H-5a），2.23（1H，m，H-13b），2.20（1H，m，H-10a），2.18（1H，m，H-5b），2.14（1H，m，H-10b），2.05（1H，dd，J=12.2，6.0 Hz，H-14a），1.88（1H，m，H-9），1.85（1H，m，H-15），1.77（1H，dd，J=12.2，6.0 Hz，H-14b），1.33（3H，s，H-19），1.26（3H，s，H-18），0.94（3H，d，J=7.0 Hz，H-16），0.94（3H，d，J= 7.0 Hz，H-17），13C NMR（125 MHz，CDCl3）δC：168.9（s，C-20），146.3（d，C-11），138.6（d，C-3），137.9（d，C-7），127.1（d，C-2），124.3（s，C-12），124.0（d，C-6），85.7（s，C-1），72.7（s，C-4），72.5（s，C-8），46.7（t，C-5），41.2（t，C-9），37.2（d，C-15），29.8（q，C-18），29.4（t，C-14），26.9（t，C-10），26.6（q，C-19），21.0（t，C-13），17.3（q，C-16），16.9（q，C-17）。與文獻報道的laevigatlactone E 的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)基本一致，因此化合物4確定為laevigatlactone E[11]。

化合物5：laevigatlactone F，無色油狀物，10%硫酸乙醇溶液顯色為紫色，MF：C20H30O5，MW：350;1H NMR（500 MHz，CDCl3）δH：6.80（1H，dd，J=11.4，2.3 Hz，H-11），5.62（1H，ddd，J=15.8，10.7，3.4 Hz，H-6），5.51（1H，d，J= 15.8 Hz，H-2），5.31（1H，dd，J= 15.7，2.1 Hz，H-7），5.20（1H，d，J= 15.8 Hz，H-3），2.41（1H，m，H-13a），2.29（1H，dd，J=14.9，3.1 Hz，H-5a），2.23（1H，m，H-13b），2.19（1H，m，H-10a），2.15（1H，m，H-10b），2.13（1H，m，H-5b），1.99（1H，dd，J=13.7，6.2 Hz，H-14a），1.84（1H，d，J= 14.1，3.0 Hz，H-9a），1.82（1H，s，H-15），1.78（1H，dd，J= 14.1，3.0 Hz，H-9b），1.72（1H，dd，J=13.7，6.2 Hz，H-14b），1.29（3H，s，H-19），1.22（3H，s，H-18），0.95（3H，d，J=7.3 Hz，H-17），0.94（3H，d，J=7.3 Hz，H-16）。13C NMR（125 MHz，CDCl3）δC：170.7（s，C-20），148.5（d，C-11），140.2（d，C-3），133.3（d，C-7），128.2（d，C-6），125.7（d，C-2），125.5（s，C-12），87.7（s，C-1），84.2（s，C-8），73.0（s，C-4），47.5（t，C-5），38.5（t，C-9），38.1（d，C-15），30.8（t，C-14），29.9（q，C-18），25.9（t，C-10），24.6（t，C-13），22.0（q，C-19），17.7（q，C-16），16.8（q，C-17）。與文獻報道的laevigatlactone F的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)基本一致，因此化合物5確定為laevigatlactone F[12]。

4 結論

對光葉巴豆枝葉部分的甲醇浸提物進行萃取后反復分離純化，從中分離得到5個西松烷型二萜類化合物，結構分別為sublylactones A（1）、B（2），laevigatlactones C（3）、E（4）和F（5），其中sublylactones A（1）和B（2）為首次從該植物中分離得到。