紫杉醇聯(lián)合順鉑對晚期食管癌患者癌細(xì)胞增殖及侵襲活性的影響

賀軍領(lǐng)

洛陽市第六人民醫(yī)院腫瘤科，河南 洛陽 471003

食管癌（EC）為臨床發(fā)病率較高的一種消化道腫瘤，嚴(yán)重影響患者生命健康。由于EC早期診斷率較低，故大部分患者病情在確診時(shí)已發(fā)展至晚期階段，已錯(cuò)過手術(shù)治療的最佳時(shí)機(jī)，具有較高的病死率［1］?；煘橥砥谑彻馨ˋEC）的主要治療手段之一，其主要目的在于延長患者生存期，5氟尿嘧啶聯(lián)合順鉑為AEC患者常用化療方案，可有效控制局部腫瘤進(jìn)展，但毒副反應(yīng)相對較多。紫杉醇是一種新型抗微管藥物，在乳腺癌、肺癌等多種惡性腫瘤中應(yīng)用廣泛，具有良好抗腫瘤效果，同時(shí)毒副反應(yīng)相對較少，有助于改善患者生存質(zhì)量［2-3］。本研究旨在分析紫杉醇聯(lián)合順鉑治療AEC患者對癌細(xì)胞增殖及侵襲活性的影響，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

按照依據(jù)住院病歷號(hào)將洛陽市第六人民醫(yī)院腫瘤科2018年7月—2020年5月接收的80例AEC患者分為對照組與觀察組，每組各40例。對照組男性23例，女性17例；年齡42～70歲，平均年齡（58.62±3.25）歲；病程11個(gè)月～35個(gè)月，平均病程（21.23±3.02）個(gè)月；腫瘤直徑1～8 cm，平均腫瘤直徑（4.06±1.16）cm；體重指數(shù)18～25 kg/m2，平均體重指數(shù)（21.63±1.27）kg/m2；癌胚抗原（CEA）水平4～51 mg/mL，平均CEA水平（26.73±5.82）ng/mL；病理類型：鱗癌17例，腺癌21例，其他2例。觀察組男性24例，女性16例；年齡43～71歲，平均年齡（58.69±3.32）歲；病程12個(gè)月～35個(gè)月，平均病程（21.36±3.08）個(gè)月；腫瘤直徑1～9 cm，平均腫瘤直徑（4.13±1.22）cm；體重指數(shù)18～26 kg/m2，平均體重指數(shù)（21.58±1.32）kg/m2；CEA水平3～53 mg/mL，平均CEA水平（27.18±5.96）ng/mL；病理類型：鱗癌16例，腺癌22例，其他2例。兩組患者一般資料具有可比性（P＞0.05）。本研究經(jīng)樣本醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)

（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理檢查確診為AEC。②首次接受治療。③預(yù)計(jì)生存時(shí)間＞6個(gè)月。④配合度理想。⑤自愿簽署知情同意書。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①對本研究藥物過敏。②伴有其他系統(tǒng)惡性腫瘤。③嚴(yán)重肝腎功能不全。④合并高血壓、糖尿病。⑤合并全身急慢性感染疾病。⑥精神異常、認(rèn)知功能障礙。

1.3 方法

對照組患者給予5氟尿嘧啶聯(lián)合順鉑治療，第1～3 d，將30 mg/m2順鉑（齊魯制藥有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：20180211、20190105，規(guī)格為10 mg）加入100 mL生理鹽水稀釋后靜脈滴注，滴注時(shí)間為2 h；第1～5 d，將500 mg/m25氟尿嘧啶（上海旭東海普藥業(yè)有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：20180215、20190412，規(guī)格為10mL：0.25 g×5支）與500 mL葡萄糖溶液混合靜脈滴注治療，滴注時(shí)間為6～8 h，21 d為1個(gè)周期，連續(xù)治療2個(gè)周期。觀察組患者給予紫杉醇聯(lián)合順鉑治療，第1 d：將140 mg/m2的紫杉醇（哈藥集團(tuán)生物工程有限公司，生產(chǎn)批號(hào)： 20180210、20190303，規(guī)格為5 mL：30 mg）加入500 mL生理鹽水稀釋后靜脈滴注，滴注時(shí)間為3 h，第1～3 d，將30 mg/m2順鉑加入100 mL生理鹽水稀釋后靜脈滴注，滴注時(shí)間為2 h，21 d為1個(gè)周期，連續(xù)治療2個(gè)周期。

1.4 評(píng)價(jià)指標(biāo)

治療前與治療2個(gè)周期后，分別使用胃鏡取食管腫瘤組織標(biāo)本，使用熒光定量PCR法檢測兩組患者增殖基因與侵襲基因表達(dá)量。增殖基因包括MACC1、Nucleostemin、DEC1、PTPN14、TRAF4；侵襲基因包括EphA2、Snail、PTEN、RACK1、PFN2。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前、治療2個(gè)周期后增殖基因表達(dá)量情況

治療2個(gè)周期后，兩組MACC1、Nucleostemin、TRAF4較治療前低，DEC1、PTPN14較治療前高，且觀察組MACC1、 Nucleostemin、 TRAF4低 于 對 照 組， DEC1、PTPN14高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者治療2個(gè)周期后增殖基因表達(dá)量情況（±s）

表1 兩組患者治療2個(gè)周期后增殖基因表達(dá)量情況（±s）

a表示與同組治療前相比，P＜0.05。

組別治療前觀察組（n=40）對照組（n=40）MACC1 Nucleostemin 1-Dec PTPN14 TRAF4 t值P值123.69±14.26 123.45±14.31 0.075 0.94 119.68±10.35 120.01±10.44 0.142 0.888 81.46±9.54 81.96±9.06 0.24 0.811 79.56±7.68 80.12±7.34 0.333 0.74 102.35±9.82 101.47±10.28 0.392 0.697治療2個(gè)周期后觀察組（n=40）對照組（n=40）t值P值70.23±6.24a 92.66±8.94a 13.012＜0.001 68.12±5.13a 90.45±9.86a 12.706＜0.001 124.36±11.24a 102.24±10.45a 9.116＜0.001 127.85±14.21a 93.21±9.43a 12.846＜0.001 73.86±8.54a 82.14±8.49a 4.349＜0.001

2.2 兩組患者治療前、治療2個(gè)周期后侵襲基因表達(dá)量情況

治療2個(gè)周期后，兩組EphA2、Snail、PFN2較治療前低，PTEN、RACK1較治療前高，且觀察組EphA2、Snail、PFN2低于對照組，PTEN、RACK1高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組患者治療2個(gè)周期后侵襲基因表達(dá)量情況（±s）

表2 兩組患者治療2個(gè)周期后侵襲基因表達(dá)量情況（±s）

b表示與同組治療前相比，P＜0.05。

組別治療前觀察組（n=40）對照組（n=40）EphA2 Snail PTEN RACK1 PFN2 t值P值112.36±9.46 112.71±9.34 0.167 0.868 115.69±8.68 116.23±8.47 0.282 0.779 52.36±5.24 52.78±5.16 0.361 0.719 78.58±4.25 78.33±4.20 0.265 0.792 99.86±11.48 100.56±12.39 0.262 0.794治療2個(gè)周期后觀察組（n=40）對照組（n=40）t值P值51.03±6.75b 80.26±7.49b 18.335＜0.001 53.96±5.84b 90.64±8.79b 21.982＜0.001 103.25±12.15b 75.49±8.62b 11.785＜0.001 114.56±11.74b 90.36±8.64b 10.500＜0.001 73.64±8.49b 81.24±9.02b 3.880＜0.001

3 討論

EC的主要發(fā)病機(jī)制為食管鱗狀上皮、腺上皮發(fā)生病理性增生，導(dǎo)致惡性病變，且具有較高的惡性程度。AEC患者很難治愈，故如何延長生存時(shí)間，提高生存率為臨床研究的熱點(diǎn)。以往臨床多采用5氟尿嘧啶聯(lián)合順鉑治療該疾病，能夠有效阻止腫瘤繼續(xù)擴(kuò)散或抑制腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移，該方案在治療后會(huì)引起嚴(yán)重的毒副反應(yīng)，影響治療效果［4］。近年來，紫杉醇聯(lián)合順鉑已逐漸成為AEC患者首選化療方案。紫杉醇具有顯著的抗腫瘤作用，主要作用機(jī)制為通過與微管蛋白結(jié)合，促進(jìn)其聚合，形成不具有活性，且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的微管聚合物，并且能夠阻止微管網(wǎng)重組，干擾癌細(xì)胞的有絲分裂M期，使癌細(xì)胞快速凋亡［5-6］。順鉑為常見的一種化療藥物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)能夠有效破壞癌細(xì)胞增殖過程，進(jìn)而起到抑制腫瘤作用，促進(jìn)癌細(xì)胞衰亡［7-8］。紫杉醇與順鉑聯(lián)合使用，可有效增強(qiáng)化療療效。

癌細(xì)胞的增殖與侵襲活性均能夠反映腫瘤的惡性程度。MACC1、Nucleostemin、DEC1、PTPN14、TRAF4均為增殖基因，且MACC1、Nucleostemin、TRAF4屬于促增殖基因，其中MACC1是原癌基因，其在結(jié)腸癌、宮頸癌等多種惡性腫瘤組織中呈異常升高表達(dá)，可對PI3K/AKT信號(hào)通路產(chǎn)生激活作用，刺激腫瘤細(xì)胞增長；Nucleostemin在正常分化成熟的組織中不表達(dá)，主要存在于多種惡性腫瘤組織及干細(xì)胞中，其表達(dá)量與腫瘤細(xì)胞增殖活性呈正相關(guān)；TRAF4是重要胞質(zhì)銜接蛋白，在腫瘤壞死因子受體家族的信號(hào)傳導(dǎo)中發(fā)揮重要作用，此外TRAF4可直接或間接與TRAF胞質(zhì)相結(jié)合，調(diào)節(jié)多種信號(hào)通路，參與腫瘤細(xì)胞的存活、分化、增殖及凋亡。有研究指出，抑制TRAF4表達(dá)可控制腫瘤細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移。DEC1、PTPN14屬于抗增殖基因，前者為生長發(fā)育基因，高表達(dá)DEC1對抑制癌細(xì)胞增殖具有積極作用，后者表達(dá)量與癌細(xì)胞增殖成反比。本研究結(jié)果顯示紫杉醇聯(lián)合順鉑可改善AEC患者增殖基因表達(dá)，抑制腫瘤進(jìn)展。究其原因在于，紫杉醇可破壞微管蛋白及微管蛋白二聚體動(dòng)態(tài)平衡，誘導(dǎo)微管蛋白聚合，穩(wěn)定微管并抑制癌細(xì)胞又是分裂，觸發(fā)細(xì)胞凋亡；此外，紫杉醇與順鉑均可對酪氨酸激酶活性產(chǎn)生抑制作用，使細(xì)胞周期停滯于DNA合成前期，阻斷細(xì)胞分裂，抑制腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。

除腫瘤細(xì)胞增殖外，腫瘤細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移也是增加EC惡性程度的重要因素之一，不利于患者預(yù)后?？骨忠u基因與促侵襲基因表達(dá)失衡是改變腫瘤細(xì)胞侵襲活性的直接原因，可有效反應(yīng)AEC患者臨床治療效果。EphA2、Snail、PTEN、RACK1均屬于侵襲基因，且EphA2、Snail屬于促侵襲基因，前者高表達(dá)量可促進(jìn)癌細(xì)胞脫落，增強(qiáng)癌細(xì)胞侵襲性，后者在上皮－間質(zhì)轉(zhuǎn)型中具有重要作用，能夠加強(qiáng)癌細(xì)胞侵襲活性，PTEN、RACK1屬于抗侵襲基因，前者是一種典型的抑癌基因，后者屬于胞質(zhì)內(nèi)錨定蛋白，均可有效降低癌細(xì)胞侵襲活性［9-10］。本研究結(jié)果顯示，紫杉醇聯(lián)合順鉑可以有效抑制AEC患者癌細(xì)胞侵襲的活性。分析其原因，紫杉醇與順鉑還可干擾轉(zhuǎn)化生長因子、血管內(nèi)皮生長因子、基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)，抑制腫瘤新生血管生成，阻礙腫瘤細(xì)胞向周圍組織侵襲及轉(zhuǎn)移。

綜上所述，AEC患者采用紫杉醇聯(lián)合順鉑治療具有顯著的臨床效果，對降低癌細(xì)胞增殖與侵襲活性均具有重要作用，在臨床中值得廣泛推廣應(yīng)用。