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    鹽堿脅迫對(duì)野生大豆種子萌發(fā)的影響

    2022-07-23 03:36:16陶夢慧李鳳嬌趙立興畢盛楠姜昕禹莽春霞候偉峰佟烏蘭
    畜牧與飼料科學(xué) 2022年4期
    關(guān)鍵詞:野生大豆鹽堿發(fā)芽勢

    張 旗,陶夢慧,李 丹,李鳳嬌,趙立興,畢盛楠,姜昕禹,莽春霞,候偉峰,佟烏蘭

    (1.興安盟農(nóng)牧科學(xué)研究所,內(nèi)蒙古 烏蘭浩特 137400;2.科爾沁右翼中旗林業(yè)和草原局,內(nèi)蒙古 科爾沁右翼中旗029400;3.興安盟農(nóng)畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)管中心,內(nèi)蒙古 烏蘭浩特 137400)

    土地的鹽堿化是源于人類活動(dòng)的環(huán)境危害,世界上約有8.31×108hm2的土壤處于鹽漬化威脅狀態(tài),而我國約1/10 耕地存在鹽堿化災(zāi)害威脅[1]。土地鹽堿化難以逆轉(zhuǎn)[2],短時(shí)間內(nèi)很難低成本解決土壤鹽堿化的問題,因此,開發(fā)耐鹽堿的植物對(duì)于農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)都有重要意義。大豆作為我國重要的油料來源及經(jīng)濟(jì)作物,具有極高的食用價(jià)值與飼用價(jià)值。現(xiàn)階段我國大豆進(jìn)口依存度極高[3],大豆價(jià)格容易受到國內(nèi)外形勢影響,關(guān)于大豆的抗逆性研究對(duì)于保障我國糧食安全具有重要意義[4]。 已經(jīng)馴化的大豆具有中度耐鹽性,但種植在鹽堿化土地上依然存在生長發(fā)育受抑制的問題。 部分野生植物資源擁有極高食用價(jià)值的同時(shí)具有良好的抗逆性。我國野生植物資源豐富[5],野生大豆是其中之一。 我國野生大豆的分布范圍極廣,東北地區(qū)、云貴川地區(qū)、長江黃河流域以及新疆、西藏均有分布[6]。野生大豆作為栽培大豆的近緣祖先種[7],有著抗逆性好、基因資源豐富的優(yōu)勢。 利用本地野生大豆的優(yōu)良性狀,可以在一定程度上優(yōu)化大豆的抗逆性、 籽粒蛋白質(zhì)等農(nóng)藝性狀[8],有助于鹽堿化土地的利用以及保證大豆產(chǎn)量。

    內(nèi)蒙古興安盟擁有豐富的野生大豆種質(zhì)資源。 該試驗(yàn)基于植物種子萌發(fā)期對(duì)鹽堿脅迫敏 感 的 特 質(zhì)[9-11], 設(shè) 置 了 不 同 濃 度NaCl、Na2SO4、Na2CO3溶液,進(jìn)行野生大豆模擬鹽堿脅迫,研究不同濃度鹽堿脅迫下野生大豆種子萌發(fā)指標(biāo)、根長、苗長等生長性狀,分析種子萌發(fā)變化規(guī)律, 旨在篩選出耐鹽堿的優(yōu)質(zhì)野生大豆種質(zhì)資源,為改良該地區(qū)栽培大豆品質(zhì)提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    選用興安盟采集的野生大豆種子為試驗(yàn)材料。

    1.2 試驗(yàn)方法

    用鹽脅迫(NaCl 溶液)、弱堿脅迫(Na2SO4溶液)、強(qiáng)堿脅迫(Na2CO3溶液)處理野生大豆種子。挑選大小接近、形態(tài)飽滿的野生大豆種子晾曬,利用1%濃度NaClO 溶液消毒20 min,在此期間,取干凈的培養(yǎng)皿,內(nèi)放2 層濾紙作為發(fā)芽床,將消毒后的野生大豆種子用超純水沖洗, 置于發(fā)芽床上培養(yǎng)。將發(fā)芽床上的野生大豆種子利用5 mL 不同濃度的NaCl 溶液、Na2SO4溶液、Na2CO3溶液充分浸濕。 以不做鹽堿脅迫的處理為對(duì)照組(CK),Na-Cl 溶 液 處 理 濃 度 為0,20、40、80、120 mmol/L。Na2SO4溶液處理濃度為0、10、20、30、40 mmol/L,Na2CO3溶液處理濃度為0、20、40、60、120 mmol/L。每個(gè)處理進(jìn)行3 次重復(fù)試驗(yàn), 每個(gè)培養(yǎng)皿放置50粒消毒完成,沖洗干凈的野生大豆種子,共計(jì)39 個(gè)培養(yǎng)皿,1 950 粒野生大豆種子。 將所有培養(yǎng)皿浸濕完成后置于人工溫室進(jìn)行培養(yǎng), 光照強(qiáng)度為100 Lx,溫度為恒溫30 ℃,日照時(shí)長為12 h,每隔24 h 觀察1 次,記錄當(dāng)日發(fā)芽情況。發(fā)芽試驗(yàn)進(jìn)行期間有霉變的種子及時(shí)剔除,并做好記錄,溶液產(chǎn)生異味時(shí)及時(shí)抽出變質(zhì)溶液并注入新溶液, 發(fā)芽床霉變嚴(yán)重應(yīng)及時(shí)更換發(fā)芽床。 以培養(yǎng)根長達(dá)到種子長度的1/2 為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn), 并更換新溶液。 7 d后連續(xù)2 d 發(fā)芽數(shù)不變時(shí)停止記錄,并整理數(shù)據(jù)。

    1.3 測定指標(biāo)與方法

    發(fā)芽率=正常發(fā)芽的種子數(shù)/總種子數(shù)×100%;發(fā)芽勢=第3 天發(fā)芽種子數(shù)/總種子數(shù)×100%;發(fā)芽指數(shù)(GI)=∑Gt/Dt(式中Gt 為不同時(shí)間的發(fā)芽數(shù),Dt 為相應(yīng)的發(fā)芽天數(shù)); 相對(duì)傷害率=(對(duì)照組發(fā)芽率-處理組發(fā)芽率)/對(duì)照組發(fā)芽率×100%; 第7天發(fā)芽結(jié)束后,每個(gè)重復(fù)選取典型、完整的種子幼苗10 株,濾紙吸干表面水分后用小刀將胚根和胚芽分離,分別用精度為0.000 1 的分析天平稱鮮重與干重,計(jì)算活力指數(shù)?;盍χ笖?shù)=發(fā)芽指數(shù)×種胚芽生長量(平均根重或芽重)。 從不同重復(fù)中隨機(jī)選擇1 株植株,包括對(duì)照組在內(nèi)不同濃度鹽、堿處理組選擇3 株植株測定幼苗根長及苗長 (利用游標(biāo)卡尺測定)。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    采用Excel 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及歸納,SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行單因素方差分析, 采用鄧肯法進(jìn)行多重比較,試驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差” 表示,P<0.05 表示差異顯著,P>0.05 表示差異不顯著。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同濃度NaCl 溶液處理對(duì)野生大豆種子萌發(fā)的影響

    不同濃度NaCl 溶液處理野生大豆種子萌發(fā)指標(biāo)見表1。 隨著NaCl 濃度的增加,野生大豆種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)呈先升高后降低趨勢; 用NaCl 溶液處理野生大豆種子時(shí),80 mmol/L 處理組發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)最高, 發(fā)芽率高于CK (P>0.05);120 mmol/L處理組上述4 項(xiàng)指標(biāo)均最低, 發(fā)芽率顯著 (P<0.05)低于80 mmol/L 處理組。 NaCl 溶液處理對(duì)野生大豆種子的相對(duì)傷害率呈先降低后升高趨勢,80 mmol/L 處理組的相對(duì)傷害率最低,為13.04%,120 mmol/L 處理組的相對(duì)傷害率最高, 為52.17%。

    表1 不同濃度NaCl 溶液處理野生大豆種子萌發(fā)指標(biāo)

    2.2 不同濃度Na2SO4 溶液處理對(duì)興安盟野生大豆種子萌發(fā)情況的影響

    不同濃度Na2SO4溶液處理野生大豆種子萌發(fā)指標(biāo)見表2。隨著Na2SO4濃度的增加,野生大豆種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)呈先升高后降低趨勢;用Na2SO4溶液處理野生大豆種子時(shí),30 mmol/L 處理組的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、 活力指數(shù)最高, 發(fā)芽勢與CK 相同, 并顯著(P<0.05) 高于10 mmol/L 處理組;10、40 mmol/L處理組的發(fā)芽率較低,10 mmol/L 處理組的發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)最低。 Na2SO4溶液處理對(duì)野生大豆種子的相對(duì)傷害率呈先降低后升高趨勢,30 mmol/L 處理組的相對(duì)傷害率最低,為4.35%,10、40 mmol/L 處理組的野生大豆種子相對(duì)傷害率最高,均為30.43%。

    表2 不同濃度Na2SO4 溶液處理野生大豆種子萌發(fā)指標(biāo)

    2.3 不同濃度Na2CO3 溶液處理對(duì)興安盟野生大豆種子萌發(fā)情況的影響

    不同濃度Na2CO3溶液處理野生大豆種子萌發(fā)指標(biāo)見表3。 隨著Na2CO3濃度的增加,發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)均呈逐漸降低趨勢;20 mmol/L 處理組的發(fā)芽率與CK 差異不顯著(P>0.05),高于40 mmol/L 處理組(P>0.05),顯著(P<0.05)高于60 mmol/L、120 mmol/L 處理組;發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)與CK 差異不顯著(P>0.05),顯著 (P<0.05) 高于40、60、120 mmol/L 處理組。Na2CO3溶液濃度為120 mmol/L 時(shí),相對(duì)傷害率達(dá)100%,野生大豆種子不萌發(fā)。 低濃度Na2CO3溶液處理時(shí),相對(duì)傷害率較低。 20 mmol/L 處理組的相對(duì)傷害率最低,為1.95%。

    表3 不同濃度Na2CO3 溶液處理野生大豆種子萌發(fā)指標(biāo)

    2.4 不同濃度NaCl、Na2SO4 溶液處理對(duì)興安盟野生大豆幼苗生長性狀的影響

    不同濃度鹽堿脅迫對(duì)野生大豆幼苗生長性狀影響結(jié)果見表4、表5。 由表4 可知,CK 野生大豆根長、苗長顯著(P<0.05)高于NaCl 溶液處理的野生大豆, 根長、 苗長隨著NaCl 濃度增加而降低,80、120 mmol/L 處理組的根長、苗長顯著(P<0.05)低于20、40 mmol/L 處理組。 由表5 可知, 經(jīng)不同濃度Na2SO4溶液弱堿脅迫處理的野生大豆根長、苗長隨著Na2SO4濃度增加而降低;10 mmol/L 處理組的野生大豆根長及苗長最長, 與其他濃度Na2SO4溶液處理的野生大豆根長及苗長差異顯著(P<0.05),與CK 差異不顯著(P>0.05)。

    表4 不同濃度NaCl 溶液處理野生大豆幼苗生長性狀

    表5 不同濃度Na2SO4 溶液處理野生大豆幼苗生長性狀

    3 討論

    種子發(fā)芽是植物生命的起點(diǎn), 該階段種子生命活動(dòng)強(qiáng)烈,是植株抗逆性最弱的時(shí)期[12-13]。 評(píng)定種子的抗逆性,一般分為萌動(dòng)前期和萌動(dòng)后期。萌動(dòng)前期種子的抗逆性主要以發(fā)芽勢、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)等指標(biāo)進(jìn)行評(píng)定,萌動(dòng)后期主要通過胚芽與胚根等形態(tài)指標(biāo)觀測并判斷種子抗逆能力[14]。從萌發(fā)情況來看,低濃度的鹽堿脅迫對(duì)于興安盟野生大豆影響較小,從幼苗生長性狀來看,鹽堿脅迫對(duì)幼苗根長、苗長影響較大,不同濃度鹽堿脅迫均影響野生大豆植株生長。

    3.1 不同濃度NaCl 溶液處理對(duì)野生大豆種子的影響

    鹽脅迫方面,隨著鹽脅迫濃度增加,野生大豆種子發(fā)芽勢, 發(fā)芽率以及發(fā)芽指數(shù)都有不同程度下降。 NaCl 作為中性鹽,低濃度時(shí)對(duì)野生大豆萌發(fā)指標(biāo)影響較小,這與張曉程[15]研究結(jié)果相似。通常發(fā)芽指數(shù)與種子的活力指數(shù)成正比, 反映種子萌動(dòng)前期生長狀態(tài)。 經(jīng)NaCl 溶液處理后,野生大豆種子的萌發(fā)指標(biāo)及形態(tài)指標(biāo)均呈先升高后降低趨勢。 根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果可知,當(dāng)NaCl 溶液濃度低于120 mmol/L 時(shí)野生大豆種子可以正常萌發(fā),當(dāng)NaCl 溶液濃度為80 mmol/L 時(shí),野生大豆發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)最高,相對(duì)傷害率最小。經(jīng)NaCl 溶液處理的野生大豆中,20 mmol/L 處理組的根長及苗長最長, 這可能是由于鹽離子雖然會(huì)破壞細(xì)胞膜通透性,影響植物生長發(fā)育,但低濃度鹽離子對(duì)植物細(xì)胞破壞程度較小。

    3.2 不同濃度Na2SO4 溶液處理對(duì)野生大豆種子的影響

    弱堿脅迫方面,隨著Na2SO4濃度升高,野生大豆種子發(fā)芽勢、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)及活力指數(shù)均呈先升高后降低趨勢, 說明低濃度的弱堿脅迫對(duì)野生大豆種子影響較小, 在一定范圍內(nèi)具有促進(jìn)生長的作用。當(dāng)Na2SO4濃度為30 mmol/L 時(shí),發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)最高。這與NaCl 溶液處理野生大豆種子得出的結(jié)果相似,同時(shí)與袁典等[16]研究結(jié)果相近。 經(jīng)Na2SO4溶液處理的野生大豆中,30 mmol/L 處理組的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)及活力指數(shù)最高,且相對(duì)傷害率最小。 Na2SO4溶液濃度為10 mmol/L 處理的野生大豆幼苗根長及苗長最長,可能是由于低濃度堿脅迫影響了植株的Na+/K+,降低了堿脅迫對(duì)種子的傷害。

    3.3 不同濃度Na2CO3 溶液處理對(duì)野生大豆種子的影響

    用Na2CO3溶液處理植株種子,不僅可以引起離子脅迫,也伴隨高pH 值脅迫,具有更強(qiáng)的生態(tài)破壞力[17-19]。 Na2CO3溶于水則成為強(qiáng)堿溶液,pH值均在10.5 以上。 由試驗(yàn)結(jié)果可知, 低濃度的Na2CO3溶液處理的野生大豆種子的萌發(fā)指標(biāo)和形態(tài)指標(biāo)顯著高于其他處理組, 這一點(diǎn)與崔京榮等[20]利用Na2CO3溶液脅迫不同花卉種子試驗(yàn)結(jié)果相似。 野生大豆種子萌發(fā)指標(biāo)隨著Na2CO3溶液濃度增加而降低,相對(duì)傷害率與發(fā)芽率成反比,與Na2CO3溶液濃度成正比。 Na2CO3濃度越低,野生大豆受到的傷害越小。由于鹽堿濃度的提高,種子吸水能力受到抑制, 影響種子內(nèi)多種酶活動(dòng)以及代謝,進(jìn)而影響種子的萌發(fā)與生長。 試驗(yàn)過程中,經(jīng)Na2CO3溶液處理的野生大豆種子萌發(fā)后幼苗生長狀態(tài)不良,多數(shù)呈暗棕色,并帶有不良?xì)馕叮@可能是由于Na2CO3固體遇水變?yōu)閺?qiáng)堿溶液,對(duì)幼苗傷害較大,但是低濃度鹽堿脅迫,在一定程度上可能對(duì)種子萌發(fā)產(chǎn)生積極作用。

    4 結(jié)論

    低濃度鹽堿脅迫對(duì)內(nèi)蒙古興安盟野生大豆萌發(fā)指標(biāo)影響較小,弱堿、中性鹽在一定濃度內(nèi)可以促進(jìn)野生大豆種子萌發(fā), 不同濃度鹽堿脅迫均對(duì)野生大豆生長性狀有影響,濃度越高,傷害越大。

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