小劑量葉酸降低H型高血壓患者高同型半胱氨酸及其MTHFR C677T基因多態(tài)性的研究

陳 萍 陳肖霞 謝利坤 詹夏菲 鄧晶晶 林孝裕

（福建醫(yī)科大學(xué)附屬福州市第一醫(yī)院全科醫(yī)學(xué)科，福建 福州 350004）

高血壓是最常見(jiàn)的心血管疾病，可引起心、腦、腎等靶器官損害。李建平教授等[1]研究指出，目前中國(guó)高血壓人群中有約75%為H型高血壓，可見(jiàn)同型半胱氨酸作為心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素越來(lái)越受到人們的重視。H型高血壓是指合并高同型半胱氨酸(Hcy≥10 μmol/L)血癥的高血壓[2]，其心腦血管疾病事件的風(fēng)險(xiǎn)明顯升高[3]。亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)是Hcy代謝過(guò)程中的關(guān)鍵酶之一，該酶缺陷引起Hcy的轉(zhuǎn)化發(fā)生障礙，血液中的Hcy水平升高。本研究旨在檢測(cè)福州地區(qū)漢族人群H型高血壓病患者的MTHFR C677T基因多態(tài)性，分析小劑量葉酸治療該類(lèi)患者對(duì)同型半胱氨酸（Hcy）的影響，以期為當(dāng)?shù)胤乐蜨型高血壓病提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2019年12月至2020年12月福州市第一醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）全科醫(yī)學(xué)科接診的H型高血壓患者178例，對(duì)MTHFR C677T位點(diǎn)基因進(jìn)行檢測(cè)后將其分為3組：CC組（50例）、CT組（74例）、TT組（54例）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡＞18周歲。②漢族。③籍貫為福州常住人口。④高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國(guó)高血壓防治指南》（2018版）中關(guān)于H型高血壓的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；收縮壓≥140 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）和（或）舒張壓≥90 mm Hg。高血壓合并高同型半胱氨酸血癥是指原發(fā)性高血壓患血漿Hcy升高≥10 μmol/L。剔除標(biāo)準(zhǔn)：①近期有手術(shù)、外傷、感染疾病，呼吸衰竭、嚴(yán)重心腦血管疾病、肝腎疾病、惡性腫瘤、血液系統(tǒng)及自身免疫疾病者。②半年內(nèi)已服用葉酸、維生素B6、維生素B12者。③精神異常疾病者。④無(wú)法隨訪者。所有研究均在患者本人簽署知情同意書(shū)后完成，通過(guò)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的審查（編號(hào)201903051）。

1.2 治療方法 給予入組患者個(gè)體化降壓治療方案，在降血壓治療基礎(chǔ)上，3組患者口服葉酸片5 mg，每周一、三、五晨起口服1片（福州海王制藥有限公司，批號(hào)：H35020215）。研究期間患者規(guī)律服用降壓藥物，監(jiān)測(cè)血壓，飲食、生活起居習(xí)慣不變，但研究期間不能服用含有葉酸等維生素B族的藥物和影響維生素代謝的藥物如苯妥英鈉、甲氨蝶呤等。

1.3 觀察指標(biāo) 記錄所有患者性別、年齡、吸煙史、飲酒史、糖尿病史、血壓、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）=體質(zhì)量/身高2（kg/m2）、葉酸、Hcy指標(biāo)。血壓測(cè)定：患者在未服用降壓藥物情況下，安靜休息30 min后，坐位測(cè)量右側(cè)肱動(dòng)脈收縮壓、舒張壓3次，取平均值。記錄治療前及治療1個(gè)月、3個(gè)月后檢測(cè)葉酸、Hcy水平。

1.4 檢測(cè)方法 血清葉酸檢測(cè)、血漿Hcy檢測(cè)：受試者空腹10 h，抽取清晨肘靜脈血2 mL，應(yīng)用貝克曼AU680全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，葉酸正常參考范圍9.53～44.9 nmol/L，血漿Hcy正常參考范圍為0～10 μmol/L。

MTHFR C677T基因檢測(cè)：采用EDTA抗凝采血管抽取2 mL靜脈血，存至-80 ℃冰箱用于提取DNA，使用MX3005p熒光定量PCR儀，應(yīng)用PCR熒光探針?lè)ńY(jié)果判讀，MTHFR 677C/T檢測(cè)試劑盒（深圳泰樂(lè)德醫(yī)療有限公司生產(chǎn)）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 將本研究受試者涉及的臨床資料使用SPSS 24.0軟件進(jìn)行處理。計(jì)數(shù)資料采用頻數(shù)、百分比表示，組間采用χ2檢驗(yàn)。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用（x-±s）表示，不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用中位數(shù)（四分位數(shù)）[M（P25，P75）]表示，采用秩和檢驗(yàn)，兩兩比較采用Bonferroni方法校正。以上所有數(shù)據(jù)均采用雙側(cè)檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 3組一般資料比較 3組患者性別比例、年齡、吸煙史、飲酒史、有糖尿病史、血壓、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。見(jiàn)表1。2.2 3組治療前后血清葉酸水平比較 治療前3組間葉酸水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療1個(gè)月后3組基因型患者葉酸水平升高，與治療前水平比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。治療后3個(gè)月3組組間葉酸水平比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。（P＜0.05）。與本組相比較，治療后3個(gè)月Hcy水平與治療后1個(gè)月比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表1 3組一般資料比較

表2 3組治療前后血清葉酸水平比較（±s）

表2 3組治療前后血清葉酸水平比較（±s）

注：3組治療后1個(gè)月與治療前相比，aP＜0.05；3組治療后3個(gè)月相比，bP＞0.05。

組別n治療前治療后1個(gè)月 治療后3個(gè)月CC組5012.63±3.4221.24±5.43a35.22±3.24b CT組7411.42±4.2818.82±4.61a34.74±3.96b TT組5411.84±3.6517.43±5.22a32.43±4.34b

表3 3組治療前后血漿Hcy水平比較（±s）

表3 3組治療前后血漿Hcy水平比較（±s）

注：TT組與CC、CT組相比，aP＜0.01；與本組治療前相比，bP＜0.05；TT組與CC組相比，cP＜0.05；治療后3個(gè)月與本組治療后1個(gè)月相比，dP＜0.05。

組別n治療前治療后1個(gè)月 治療后3個(gè)月CC組50 23.21±5.4617.56±4.22b11.54±3.82d CT組7428.54±6.2221.84±5.35b12.32±4.16d TT組54 36.42±6.64a 23.25±3.86bc 14.26±5.39d

2.3 3組治療前后血漿Hcy水平比較 經(jīng)重復(fù)測(cè)量方差分析顯示，治療前CC與CT基因型與TT基因型Hcy水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。治療1個(gè)月后3組基因型患者Hcy水平均下降，與治療前Hcy水平比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中TT組葉酸降低Hcy治療有顯著影響（P＜0.01）；治療后1個(gè)月，比較CC組與TT組差值，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

2.4 治療有效率比較 治療3個(gè)月后，3組血漿Hcy＜10 μmol/L的例數(shù)、有效率為CC組39例，有效率78%、CT組45例，有效率60.81%、TT組31例，有效率57.41%。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，3組治療有效率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.028）；經(jīng)χ2分割法兩兩比較，CT組和TT組有效率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.683）。CC組治療有效率明顯高于其他兩組，與CT組比較P=0.015，與TT組比較P=0.009，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討 論

HHcy是心腦血管疾病的危險(xiǎn)因素，H型高血壓病的發(fā)生、發(fā)展與MTHFR C677T基因多態(tài)性密切相關(guān)[4-5]。MTHFR C677T突變后5-甲基四氫葉酸（5-MTHF）合成不足，影響Hcy向蛋氨酸的轉(zhuǎn)換，進(jìn)而引起 Hcy升高，Hcy水平升高與原發(fā)性高血壓患者在心血管時(shí)間上存在協(xié)同作用，使得高血壓心血管風(fēng)險(xiǎn)升高[6-8]。因此，控制血壓和降低血漿Hcy水平對(duì)減少高血壓患者心腦血管疾病的發(fā)生具有重要意義。本研究結(jié)果顯示，檢測(cè)福州地區(qū)178例高血壓患者M(jìn)THFR C677T基因類(lèi)型，TT型的H型高血壓患者血漿Hcy偏高而葉酸水平偏低，TT型血漿Hcy高于CT型、CC型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），CT和TT基因型相比于CC基因型發(fā)生H型高血壓的風(fēng)險(xiǎn)增高，與國(guó)內(nèi)張俊等[9]、章衍達(dá)[10]報(bào)道一致。

本研究過(guò)程中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)服用葉酸出現(xiàn)藥物不良反應(yīng)，小劑量葉酸降低Hcy治療有很好的安全性[11]。但也有研究發(fā)現(xiàn)，服用大劑量葉酸片可能有其他潛在風(fēng)險(xiǎn)[12-13]，如增加腫瘤的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[14-15]。盧曉燕等[16]研究不同劑量葉酸對(duì)HHcy的影響發(fā)現(xiàn)，對(duì)CT、TT型的人群，4周內(nèi)給予5 mg/d葉酸治療的效果更好，而CC型患者選擇0.8 mg/d葉酸即可，且指出不同劑量葉酸治療3個(gè)月后，TT型患者Hcy水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但服用葉酸片的研究存在一定局限性，因?yàn)閭€(gè)人飲食生活習(xí)慣不同，每個(gè)人從食物中攝入葉酸存在差異，而且有研究[17]指出吸煙、飲酒、熬夜等不良生活習(xí)慣均會(huì)影響血清Hcy水平，因此，臨床可根據(jù)高血壓病患者Hcy水平、MTHFR C677T基因型進(jìn)行精準(zhǔn)、個(gè)體化干預(yù)，降低高Hcy血癥引起心腦血管并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，高血壓病患者的血漿Hcy水平升高與MTHFR C677T基因突變相關(guān)，可短期適當(dāng)補(bǔ)充葉酸，彌補(bǔ)葉酸代謝途徑的缺陷，為降低H型高血壓伴有的Hcy水平的升高提供了一種可行性方案，以期降低H型高血壓患者心腦血管事件風(fēng)險(xiǎn)，為防治H型高血壓提供新思路。