滇產(chǎn)楓香樹葉化學(xué)成分研究

周文武，潘 捷，楊 彤，張寅燕，楊靖華，文政琦, 李碧桃 ，汪云松

(1.云南大學(xué) 化學(xué)科學(xué)與工程學(xué)院 教育部自然資源藥物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南省天然產(chǎn)物轉(zhuǎn)化與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650091;2.昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，云南 昆明 650500)

楓香樹(LiquidambarformosanaHance)，民間又稱楓樹、三角楓，是金縷梅科(Hamamelidaceae) 楓香樹屬(LiquidambarLinn.)植物，落葉喬木，萌生力極強(qiáng)，分布在我國(guó)秦嶺及淮河以南各省，東南亞北部及朝鮮南部均有分布，是我國(guó)南方的常見樹種，在亞熱帶次生林演替過(guò)程中起著重要作用[1]. 楓香樹是一種藥用植物，其樹脂供藥用，能解毒止痛，止血生??；根、葉及果實(shí)亦入藥，有祛風(fēng)除濕，通絡(luò)活血功效.其果實(shí)又名路路通，《中國(guó)藥典》記載其“祛風(fēng)活絡(luò)，利水通經(jīng)”；其樹葉可解毒、止血，主治急性胃腸炎，痢疾，產(chǎn)后風(fēng). 楓香除了具有觀賞和藥用價(jià)值，由于木材稍堅(jiān)硬，可制家具及貴重商品的裝箱，還具有工業(yè)價(jià)值[1-2].

楓香樹葉是楓香樹(LiquidambarformosanaHance)的重要藥用部分，從本世紀(jì)初開始，就有不少關(guān)于其藥理活性的報(bào)道.2001年，徐紅權(quán)等[3]報(bào)道了楓香樹葉的止血作用. 同年，黃瀾等[4]對(duì)楓香樹葉的無(wú)機(jī)成分進(jìn)行了測(cè)定及分析，其中富含的人體必需無(wú)機(jī)元素揭示了其可能的降血壓和保健效果.2004—2005年間，鄭毅等人[5-6]研究、分析了楓香葉提取物的色素及鞣質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其葉中的鞣質(zhì)具有抗辣椒黑斑病菌活性.2007年，鐘有添等[7-8]發(fā)現(xiàn)楓香樹葉對(duì)包括綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌在內(nèi)的多種致病菌具有抑制活性.2010年，Kai等[9]研究發(fā)現(xiàn)楓香樹葉提取物具有抗氧化活性.2015年，謝瓊珺等[10]發(fā)現(xiàn)楓香樹葉乙醇提取物乙酸乙酯部分對(duì)人白血病K562細(xì)胞具有較強(qiáng)的抑制效果.為了探究楓香樹葉活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，對(duì)楓香樹葉的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離得到11個(gè)化合物，根據(jù)其理化常數(shù)及波譜數(shù)據(jù)鑒定為香草醛(1)、 丁香酸(2)、沒(méi)食子酸乙酯(3)、連苯三酚(4)、沒(méi)食子酸(5)、原兒茶酸(6)、順式對(duì)羥基肉桂酸(7)、正十六烷酸(8)、正十六烷酸甲酯(9)、正二十一烷醇(10)、12-羥基茉莉酸(11)，其中化合物11為首次從該屬植物中分離得到，其結(jié)構(gòu)如圖1 所示.

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與材料

EYELA N-1001旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(日本 EYELA 公司)、SHZ-D循環(huán)水式真空泵(鞏義市予華儀器公司)、400 MHz核磁共振儀(APEX DUO Bruker公司)、YB-1000A 高速多功能粉碎機(jī)(上海力箭機(jī)械公司)、ZF-7三用紫外分析儀(鞏義市予華儀器公司)、SephadexLH-20凝膠柱色譜(丙酮、甲醇)、玻璃色譜層析柱(四川蜀玻公司)、柱層析硅膠(青島海洋化工廠)、薄層層析硅膠板(青島海洋化工廠).

楓香樹樹葉樣品于2019年4月采自云南省昆明市五華區(qū)云南大學(xué)東陸校區(qū)，由云南大學(xué)王躍華教授鑒定為L(zhǎng)iquidambarformosanaHance.

圖1 滇產(chǎn)楓香樹葉中分離得到化合物1～11的化學(xué)結(jié)構(gòu)

1.2 提取與分離

干燥的楓香樹葉(3.5 kg)粉碎后，以95%乙醇加熱回流提取4次，合并提取液，減壓濃縮，得楓香樹葉浸膏 620 g.加入適量水，依次使用石油醚、乙酸乙酯及水飽和正丁醇萃取.分別將萃取液減壓濃縮，得正丁醇部分 109 g，乙酸乙酯部分 72 g，石油醚部分 130 g.

乙酸乙酯部分(72 g)采用正相硅膠(200～300目)層析，以二氯甲烷∶甲醇(1∶0、15∶1、9∶1、7∶3、0∶1，V/V)進(jìn)行洗脫，經(jīng)TLC(薄層色譜)檢視合并相同餾分，得到餾分F-1～F-6共6部分.其中，餾分F-1經(jīng)正相硅膠色譜(石油醚-二氯甲烷體系)、SephadexLH-20凝膠柱色譜(丙酮)等色譜方法，分離純化得到化合物1(3.2 mg)、10(4.7 mg)、8(8.7 mg)，9(12 mg)和11(10 mg)；餾分F-2經(jīng)正相硅膠色譜法(石油醚-丙酮體系、加酸的石油醚-二氯甲烷體系、加酸的二氯甲烷-甲醇體系)反復(fù)層析、純化得到化合物2(4 mg)和3(7 mg)；餾分F-3經(jīng)正相硅膠色譜法(二氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯三相體系、加酸的石油醚-乙酸乙酯體系)、SephadexLH-20凝膠柱色譜(甲醇)經(jīng)多次層析、分離得到化合物7(4.6 mg)及4(6.7 mg)；餾分F-4以SephadexLH-20凝膠柱色譜(甲醇)及重結(jié)晶等方法，分離得到化合物5(12 mg)和6(3 mg).

2 化合物結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1白色固體，易溶于二氯甲烷.1H NMR(CDCl3,400 MHz)δH9.84(1H,m,H-1),7.42(1H,m,H-6),7.44(1H,m,H-2),7.06(1H,m,H-5),6.23(1H,s,OH-4),3.98(3H,s,OCH3-3).13C NMR(CDCl3,100 MHz)δC190.9(C-7),151.6(C-4),147.1(C-3),129.9(C-1),127.6(C-6),114.4(C-5),108.7(C-2),56.2(-OCH3).化合物的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)[11]一致，故化合物鑒定為香草醛.

化合物2白色固體，易溶于甲醇.1H NMR(CD3OD,400 MHz)δH7.30(2H,s,H-2,H-6),3.86(6H,s,2×-OCH3).13C NMR(CD3OD,100 MHz)δC55.4(2×-OCH3),106.9(C-2,C-6),147.4(C-3,C-5),171.6(-COOH).化合物的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)[12]一致，故化合物鑒定為丁香酸.

化合物3白色固體，易溶于甲醇.1H NMR(CD3OD,400 MHz)δH7.05(2H,s,H-2,H-6),4.27(2H,9,J=7.0 Hz,H-8),1.34(3H,t,J=7.1 Hz).13C NMR(CD3OD,100 MHz)δC14.8(C-9),61.9(C-8),110.2(C-2,C-6),122.0(C-1),139.9(C-4),146.7(C-3,C-5),168.8(C-3).化合物的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)[13]一致，故化合物鑒定為沒(méi)食子酸乙酯.

化合物4白色固體，易溶于甲醇.1H NMR(CD3OD,400 MHz)δH6.47(1H,t,J=8.0 Hz,H-5),6.30(2H,d,J=8.0 Hz,H-4,H-6).13C NMR(CD3OD,100 MHz)δC106.9(C-4,C-6),118.7(C-5),132.8(C-2),145.7(C-1,C-3).化合物的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)[14]一致，故化合物鑒定為連苯三酚.

化合物5黃色針狀晶體，易溶于甲醇.1H NMR(CD3OD,400 MHz)δH7.06(2H,s,H-2,H-6).13C NMR(CD3OD,100 MHz)δC108.9(C-2,C-6),120.7(C-1),138.2(C-4),145.0(C-3,C-5),169.2(C-7).化合物的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)[13]一致，故化合物鑒定為沒(méi)食子酸.

化合物6黃色固體，易溶于甲醇.1H NMR(CD3OD,400 MHz)δH7.43(1H,s,H-3),7.40(1H,d,J=2.0 Hz,H-5),6.78(1H,d,J=8.0 Hz,H-6).13C NMR(CD3OD,100 MHz)δC114.3(C-3),116.3(C-6),121.8(C-5),122.4(C-4),144.6(C-2),150.0(C-1).化合物的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)[15]一致，故化合物鑒定為原兒茶酸.

化合物7白色固體，易溶于甲醇.1H NMR(CD3OD,400 MHz)δH7.62(2H,d,J=8.7 Hz,H-2,H-6),6.83(1H,d,J=12.8 Hz,H-7),6.76(2H,d,J=8.7 Hz,H-3,H-5),5.78(1H,d,J=12.8 Hz,H-8).13C NMR(CD3OD,100 MHz)δC114.4(C-3,C-5),116.1(C-8),126.4(C-1),132.0(C-2,C-6),142.5(C-7),158.4(C-4),169.0(C-9).化合物的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)[16]一致，故化合物鑒定為順式對(duì)羥基肉桂酸.

化合物8白色蠟狀，易溶于二氯甲烷.1H NMR(CDCl3,400 MHz)δH2.35(2H,t,J=7.5 Hz),1.63(2H,t,J=7.3 Hz),1.20～1.38(24H,brs,12×2H),0.88(3H,t,J=6.1 Hz).13C NMR(CDCl3,100 MHz)δC14.1(-CH3),22.7(C-15),24.7(C-3),29.1～29.7(C-4～C-13),31.9(C-14),34.0(C-2),179.9(-COOH).化合物的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)[17] 一致，故化合物鑒定為正十六烷酸.

化合物9白色蠟狀，易溶于二氯甲烷.1H NMR(CDCl3,400 MHz)δH3.50(3H,brs,H-17),2.35(2H,brs,H-3),1.63(2H,m,H-4),1.24～1.27(m,H-5～H-16),0.88(3H,t,J=6.5 Hz).13C NMR(CDCl3,100 MHz)δC179.8(C-18),50.8(-OCH3),31.9(C-3),29.1～29.7(C-4 to C-14),24.7(C-15),22.7(C-16),14.2(C-17).化合物的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)[18]一致，故化合物鑒定為正十六烷酸甲酯.

化合物10白色蠟狀，易溶于二氯甲烷.1H NMR(CDCl3,400 MHz)δH3.64(3H,t,J=6.9 Hz,H-1),1.57(2H,brs,H-2),1.24(36H,brs,H-3～19),0.88(3H,t,J=6.4 Hz,H-21).13C NMR(CDCl3,100 MHz)δC14.2(C-20),22.7(C-19),25.8(C-18),29.4(C-17),29.5(C-16),29.6～29.7(C-4～C-15),31.9(C-3),32.8(C-2),63.1(C-1).化合物的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)[19]一致，故化合物鑒定為正二十一烷醇.

化合物11無(wú)色油狀液體.1H NMR(CDCl3,400 MHz)δH5.46(2H,dt,J=15.3,5.5 Hz,H-9,H-10),3.69(2H,t,J=6.2 Hz,H-12).13C NMR(CDCl3,100 MHz)δC25.5(C-8),27.4(C-4),30.7(C-11),37.8(C-5),39.0(C-2),54.3(C-7),62.2(C-12),128.3(C-10),128.8(C-9),176.7(C-1),219.2(C-6).化合物的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)[20]一致，故化合物鑒定為12-羥基茉莉酸.

3 結(jié)果與討論

從滇產(chǎn)楓香樹屬植物楓香樹的葉的醇提物中分離得到11個(gè)化合物，根據(jù)其理化常數(shù)及波譜數(shù)據(jù)鑒定為香草醛(1)、丁香酸(2)、沒(méi)食子酸乙酯(3)、連苯三酚(4)、沒(méi)食子酸(5)、原兒茶酸(6)、順式對(duì)羥基肉桂酸(7)、正十六烷酸(8)、正十六烷酸甲酯(9)、正二十一烷醇(10)、12-羥基茉莉酸(11)，其中化合物11為首次從該屬植物中分離得到. 研究結(jié)果豐富了對(duì)楓香樹葉化學(xué)成分的研究，為進(jìn)一步開發(fā)該部分的藥用價(jià)值提供了一定的科學(xué)依據(jù).