高效液相色譜技術(shù)在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究

馮笑　胡睿

摘要：高效液相色譜在藥物檢測(cè)中發(fā)揮著重要作用，可應(yīng)用于藥物含量、中藥成分和抗生素檢測(cè)，以及檢測(cè)所用藥物生產(chǎn)和運(yùn)輸過程中產(chǎn)生的相關(guān)物質(zhì)，高效液相色譜有助于提高藥物檢測(cè)的速度和效率以及藥物檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，從而加強(qiáng)了藥物質(zhì)量控制。本文對(duì)高效液相色譜技術(shù)在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用進(jìn)行分析，以供參考。

關(guān)鍵詞：藥品檢驗(yàn);高效液相色譜技術(shù);應(yīng)用

引言

隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和生活水平的提高，對(duì)藥品質(zhì)量的需求越來(lái)越大，合格藥品需要嚴(yán)格的檢測(cè)程序和先進(jìn)的檢測(cè)方法。其中，高效液相色譜（HPLC）是目前最常用的檢測(cè)方法，在所有藥物質(zhì)量控制技術(shù)中得到更成熟的應(yīng)用。色譜最初沒有用于藥物檢測(cè)，但直到1950年代才開始用于藥物檢測(cè)，才把混合物分成不同的成分。這是目前化學(xué)分析中最常用的方法之一，分離率高，分離效率高，檢測(cè)靈敏度高。近年來(lái)，這已成為藥物質(zhì)量控制的重要手段。

1高效液相色譜的原理和特點(diǎn)

高效液相色譜（HPLC）以常規(guī)液相色譜為基礎(chǔ)，使用高壓輸液泵將指定的流動(dòng)相泵入色譜柱中以進(jìn)行分離和測(cè)定。注入試驗(yàn)樣品進(jìn)入流動(dòng)相色譜列進(jìn)行分析，分離組依次進(jìn)入檢測(cè)儀，色譜信號(hào)由記錄器或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄。高效液相色譜由五個(gè)主要系統(tǒng)組成。高壓灌注系統(tǒng)主要包括容器、排氣處理單元和高壓灌注泵，目的是向分離系統(tǒng)提供穩(wěn)定的高壓液體，使混合物組分離。料道系統(tǒng)由料道、料道和料道（或自動(dòng)取樣）組成。其作用是有效地將分析樣品引入色譜柱，簡(jiǎn)而言之，進(jìn)行采樣和取樣。分隔系統(tǒng)包括預(yù)荷載（保護(hù)柱）、分析柱（色譜柱）和柱殼。色譜是分離系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分，需要高分離、大柱容量和快速分析。一般分析彩色列的長(zhǎng)度通常為10-30厘米，增加列長(zhǎng)度有利于分離零部件，但同時(shí)增加了列壓力。檢測(cè)系統(tǒng)由獨(dú)立的檢測(cè)器及其附件組成，其功能是轉(zhuǎn)換物理或化學(xué)特性高效液相色譜技術(shù)具有易用性、檢測(cè)精度高、節(jié)省時(shí)間等優(yōu)點(diǎn)，在許多檢測(cè)方法中有所不同。

2 HPLC技術(shù)在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

2.1藥品含量檢驗(yàn)

HPLC技術(shù)分辨率高、分析速度快且能夠?qū)崿F(xiàn)重復(fù)分析，在進(jìn)行藥品檢驗(yàn)時(shí)所需樣品少，在藥品含量測(cè)定中有著較高的適用性。藥品質(zhì)量合理性不僅與藥品中各類物質(zhì)治療效用有關(guān)，而且與藥物成分含量有關(guān)，因此需要明確藥品是否具有足夠的效果或是否由于藥品含量不當(dāng)對(duì)人體造成損害。利用HPLC技術(shù)能夠?qū)λ幤分兴幬锍煞钟枰苑蛛x，獲得相應(yīng)成分傳輸?shù)綑z驗(yàn)機(jī)，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本成分的精準(zhǔn)測(cè)量，確保藥品中有關(guān)成分能夠滿足臨床治療需求。目前，藥品含量測(cè)定方法主要包括吸附色譜法、離子交換色譜法，其中反相色譜應(yīng)用最為普遍。如在檢測(cè)馬來(lái)酸曲美布丁原料雜質(zhì)及制劑含量時(shí)，其中含有ATMB、TMBM及A800，采用HPLC技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)不僅操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確率高，而且能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)各制劑中組分含量的檢驗(yàn)。在研究中檢驗(yàn)吡羅昔康藥品含量，該藥物屬于非甾體抗炎藥物，主要功效為解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎，通常按照《中華人民共和國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行含量檢測(cè)。但該藥物在水溶液中化學(xué)性質(zhì)極不穩(wěn)定，氧化水解會(huì)生成2-氨基吡啶，吡羅昔康無(wú)法生成溶液，而采用HPLC檢驗(yàn)，溶劑選擇鹽酸甲醇溶液，劑量為0.01mol/L，不僅能夠促進(jìn)藥物溶解性增加，而且能夠提高吡羅昔康溶液穩(wěn)定性，有利于實(shí)現(xiàn)對(duì)吡羅昔康藥品含量的準(zhǔn)確檢測(cè)。在研究中采用HPLC對(duì)復(fù)方萘甲唑林滴眼液中鹽酸萘甲唑林和馬來(lái)酸氯苯那敏含量予以檢測(cè)，將0.05mol/L磷酸二氫鉀作為流動(dòng)相，設(shè)置流速及進(jìn)樣量分別為0.8ml/min、5μl，柱溫以40℃為宜，結(jié)果顯示，鹽酸萘甲唑啉流出時(shí)間為4.758min，馬來(lái)酸氯苯那敏為7.364min，且回收率均在97%以上，最終得出結(jié)論：HPLC操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確率高，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)藥品含量的準(zhǔn)確檢測(cè)。美國(guó)藥典首次將HPLC作為法定分析方法僅有6個(gè)項(xiàng)目，隨著不斷改進(jìn)及升級(jí)，逐漸增加至418項(xiàng)，截至23版美國(guó)藥典已經(jīng)收載項(xiàng)目達(dá)到2000項(xiàng)以上。我國(guó)藥典中關(guān)于HPLC的收集品種也在不斷增加，HPLC在檢驗(yàn)抗生素及激素類化學(xué)藥品中的應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大。HPLC指標(biāo)已經(jīng)成為反映世界藥典水平的先進(jìn)指標(biāo)。

2.2有關(guān)物質(zhì)檢查

高效液相色譜法還可用于審查藥物生產(chǎn)和運(yùn)輸過程中生產(chǎn)的物質(zhì)，這些物質(zhì)通常生產(chǎn)的物質(zhì)數(shù)量很少，需要加強(qiáng)對(duì)這些物質(zhì)的檢查，以確保這些物質(zhì)不會(huì)對(duì)藥物安全產(chǎn)生影響。高效液相色譜具有極高的敏感性，即使是低含量的相關(guān)物質(zhì)也能獲得準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。例如，在制備和使用鹽酸曲唑酮片時(shí)，它們被高效液相色譜檢測(cè)，檢測(cè)范圍高達(dá)0.05微克/毫升，而常規(guī)檢測(cè)方法的檢測(cè)精度僅為0.025毫克/毫升。

2.3檢測(cè)抗生素中的降解產(chǎn)物和聚合物

高效液相色譜法也可用于測(cè)試抗生素。在臨床上，抗生素得到廣泛使用，但也有許多不良反應(yīng)，包括制造抗生素所用原材料中的雜質(zhì)。為了減少或消除抗生素的不良影響，有必要控制原料中的雜質(zhì)。研究表明，高效液相色譜法可以分離降解產(chǎn)物和原料中產(chǎn)生的聚合物等雜質(zhì)。

2.4藥物中雜質(zhì)含量的檢測(cè)

國(guó)家制定了嚴(yán)格的藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，由國(guó)家藥品質(zhì)量控制局制定。除了嚴(yán)格的藥品活性成分含量規(guī)則外，關(guān)于藥品雜質(zhì)含量的規(guī)則更為嚴(yán)格。因此，有必要監(jiān)測(cè)藥品的雜質(zhì)含量，以確定其是否含有有害或違禁物質(zhì)。溫度和濕度的變化以及藥物過程中的狀態(tài)變化可能導(dǎo)致某些藥物原料中出現(xiàn)功能性補(bǔ)充成分，一旦這些物質(zhì)超過標(biāo)準(zhǔn)，可能會(huì)減少藥物中的活性成分，甚至使其不符合標(biāo)準(zhǔn)。因此，必須嚴(yán)格控制藥品中其他雜質(zhì)的生產(chǎn)。使用高效液相色譜法可以有效地檢測(cè)藥品中雜質(zhì)的含量，而常規(guī)液相色譜法則很難檢測(cè)到。近年來(lái)，一些非法企業(yè)將違禁物質(zhì)引入藥品，以換取金錢，而不是更昂貴的正規(guī)成分，以降低生產(chǎn)成本，但損害公共健康。主管部門還積極利用高效液相色譜技術(shù)打擊藥品的偽造和銷售，這種技術(shù)能夠有效和準(zhǔn)確地確定藥品中違禁成分的含量，從而對(duì)打擊此類犯罪產(chǎn)生良好影響。

3高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用前景

高效液相色譜技術(shù)的優(yōu)勢(shì)主要在于速度和效率。在長(zhǎng)期發(fā)展之后，技術(shù)在操作自動(dòng)化、分析速度、檢測(cè)靈敏度、分離效率等方面得到了顯著提高。同時(shí)，它還具有傳統(tǒng)液相色譜的優(yōu)點(diǎn)，如易于制備色譜、廣泛應(yīng)用樣品、多動(dòng)相等。目前，高效液相色譜與許多先進(jìn)的檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，如柱交換、質(zhì)譜聯(lián)用、梯度洗滌器、分子生物技術(shù)和核磁共振技術(shù)，這些技術(shù)在藥物檢查中發(fā)揮著更大的作用。相信隨著技術(shù)的進(jìn)步，高效液相色譜技術(shù)將朝著情報(bào)便捷的方向發(fā)展，在藥品檢查工作中發(fā)揮更大的價(jià)值。

結(jié)束語(yǔ)

總之，高效液相色譜技術(shù)作為一種高效的分離與分析手段，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、環(huán)保、生命科學(xué)、石油化工等領(lǐng)域。高效液相色譜技術(shù)不僅在技術(shù)操作上高效快捷，而且在儀器自動(dòng)化方面具有巨大優(yōu)勢(shì)，全面提高了和藥品的整體檢測(cè)水平。

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