氣相色譜法測(cè)定有機(jī)磷類農(nóng)殘毛細(xì)管色譜柱的選擇

都麗莉 王云衢

摘 要：基于對(duì)當(dāng)前農(nóng)產(chǎn)品市場(chǎng)中蔬菜水果有機(jī)磷農(nóng)藥殘留相關(guān)狀況的了解，依據(jù)國(guó)家抽檢細(xì)則，建立適用于多種有機(jī)磷農(nóng)藥快速檢測(cè)的氣相色譜方法，其中氣相色譜柱的選擇在檢驗(yàn)過(guò)程中起重要作用。本方法針對(duì)常見(jiàn)的7種有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行分析，通過(guò)對(duì)3種不同極性毛細(xì)管色譜柱進(jìn)行試驗(yàn)，觀察分離結(jié)果，選擇最適合農(nóng)殘檢驗(yàn)的毛細(xì)管色譜柱，進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，并驗(yàn)證色譜柱的適用性。

關(guān)鍵詞：氣相色譜;有機(jī)磷;農(nóng)藥殘留;農(nóng)產(chǎn)品;檢測(cè)

Selection of Capillary Chromatographic Column for Determination of Organophosphorus Residues by Gas Chromatography

DU Lili， WANG Yunqu

（Anshan Inspection， Testing and Certification Center， Anshan 114000， China）

Abstract： Based on the understanding of the relevant situation of organophosphorus pesticide residues in vegetables and fruits in agricultural products market， according to the national sampling rules， a gas chromatography method for the rapid detection of a variety of organophosphorus pesticides was established. The selection of gas chromatographic column plays an important role in the inspection process. In this method， seven kinds of common organophosphorus pesticides were analyzed， and the most suitable capillary chromatographic column for pesticide residue detection was selected by observing the separation results of three different polar capillary chromatographic columns. After that， linear equation and standard recovery tests were carried out to verify the applicability of the column.

Keywords： gas chromatography; organic phosphorus; pesticide residues; agricultural products; detection

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，農(nóng)藥的使用量較大，目前市場(chǎng)上被果農(nóng)菜農(nóng)廣泛應(yīng)用的殺蟲(chóng)劑主要是有機(jī)磷、氨基甲酸酯和擬除蟲(chóng)菊酯類[1]。為了滿足人們對(duì)于果蔬高品質(zhì)的需求，農(nóng)藥、抗生素以及食品添加劑被大量使用，這些物質(zhì)的超標(biāo)使用會(huì)嚴(yán)重?fù)p害人們的身體健康。氣相色譜法是一種常用的檢驗(yàn)有機(jī)磷類農(nóng)殘的檢測(cè)方法，建立科學(xué)準(zhǔn)確的農(nóng)殘檢驗(yàn)方法成為保障居民飲食安全的重要屏障[2]。

1 材料與儀器

1.1 材料與試劑

正己烷（色譜純4 L/瓶），丙酮（分析純，500 mL/瓶），國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)溶液（敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂(lè)果、樂(lè)果、水胺硫磷和毒死蜱）（濃度均為100 μg/mL），農(nóng)業(yè)部農(nóng)殘標(biāo)樣;HP-1毛細(xì)管色譜柱、DB-WAX 毛細(xì)管色譜柱、DB-1701P毛細(xì)管色譜柱，安捷倫公司;比色管，離心管。

1.2 儀器與設(shè)備

7890B氣相色譜儀，美國(guó)安捷倫公司;ME204E電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司;KQ-300DE超聲波清洗儀，昆山市超聲儀器有限公司;Allera64R 離心機(jī)，貝克曼庫(kù)爾特商貿(mào)（中國(guó)）有限公司;NS-10氮吹儀，上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品前處理

分別將蘋果、黃瓜切碎，充分混勻，放入食品加工器粉碎，準(zhǔn)確稱取各樣品25.0 g于100 mL離心管中，加入50.0 mL乙腈，在勻漿機(jī)中高速勻漿2 min后，用濾紙過(guò)濾，濾液收集到裝有6 g氯化鈉的100 mL具塞比色管中，收集濾液40～50 mL，蓋上塞子，劇烈振蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層[3]。

1.3.2 樣品凈化

從比色管中吸取上清液，放入加有凈化包的50 mL離心管中，超聲5 min，8 000 r/min離心5 min，取上清液10.00 mL于比色管中，40 ℃水浴氮吹至近干。用正己烷定容至5.0 mL，再渦旋混勻，過(guò)濾膜移入樣品瓶中，供色譜測(cè)定。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)工作液制備

取出冷藏的敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂(lè)果、樂(lè)果、水胺硫磷及毒死蜱農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，配制7種有機(jī)磷農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。將標(biāo)準(zhǔn)品在室溫環(huán)境中靜置20 min，分別準(zhǔn)確移取1 mL于10 mL容量瓶中，用正己烷和丙酮的混合溶液4∶1定容，搖勻，得到10 μg/mL混標(biāo)中間液。將中間逐級(jí)稀釋，最終配制出濃度為0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.40 μg/mL、0.60 μg/mL、0.80 μg/mL 和1.00 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)曲線系列溶液。

2 結(jié)果與分析

2.1 柱溫箱升溫程序及進(jìn)樣方式

程序升溫在氣相色譜檢驗(yàn)中是至關(guān)重要的一個(gè)環(huán)節(jié)，升溫程序的設(shè)定直接決定了待測(cè)組分是否能夠有效分離，尤其是沸點(diǎn)相近的組分分離的難度高。為了更好地分離沸點(diǎn)相近的組分，不同型號(hào)的毛細(xì)管柱會(huì)添加不同的固定相，或者搭配不同比例。根據(jù)混合標(biāo)準(zhǔn)品的沸點(diǎn)來(lái)設(shè)置程序升溫的初始溫度以及進(jìn)樣口溫度。程序升溫的初始溫度要低于混合標(biāo)準(zhǔn)品的最低沸點(diǎn)，進(jìn)樣口溫度應(yīng)高于或等于混合標(biāo)準(zhǔn)品中最高沸點(diǎn)的溫度。檢測(cè)器的溫度不低于200 ℃，不高于色譜柱的最高使用溫度，兼顧各組分的沸點(diǎn)及熱穩(wěn)定性[4]。

農(nóng)殘檢測(cè)屬于痕量檢測(cè)，待測(cè)組分濃度較小，進(jìn)樣方式采取不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1 μL;選用不分流進(jìn)樣方式的優(yōu)點(diǎn)是進(jìn)樣量大，樣品幾乎全部進(jìn)入色譜柱中，色譜峰絕對(duì)響應(yīng)值高;氣化室溫度：250 ℃;檢測(cè)器溫度：250 ℃;程序升溫條件：初始溫度120 ℃，保持1.0 min，以20 ℃/min升至185 ℃，保持5.0 min，以10 ℃/min升至235 ℃，保持10.0 min;流速：7.0 mL/min;進(jìn)樣量：1 μL;尾吹氣流量為3 mL/min。

2.2 色譜柱的選擇

毛細(xì)管色譜柱具有分離效率高、分析速度快、柱容量小、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)逐步取代填充柱成為主流[5]。本試驗(yàn)選擇不同類型的3種毛細(xì)管色譜柱在相同色譜條件下進(jìn)行分析。3種毛細(xì)管色譜柱為弱極性色譜柱HP-1（30 mm×0.25 mm×0.25 μm）;中等極性色譜柱DB-1701P（30 m×0.32 mm×0.25 μm）;

強(qiáng)極性色譜柱DB-WAX毛細(xì)管色譜柱（30 mm×0.25 mm×0.25 μm）。

選取1.0 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液用上述3種毛細(xì)管色譜柱在上述升溫程序的條件下進(jìn)行分析，得到3組7種農(nóng)殘混標(biāo)的氣相色譜圖。從分離情況來(lái)看，HP-1毛細(xì)管柱與DB-WAX色譜柱分離情況相似，其中組分水胺硫磷與毒死蜱出峰重合，見(jiàn)圖1、圖2;由圖3可知，DB-1701P毛細(xì)管柱分離7種農(nóng)藥種類，分離度、峰型、響應(yīng)值均為3根色譜柱中最好，由此得出結(jié)論，DB-1701P（30 m× 0.250 mm×0.25 μm）毛細(xì)管色譜柱分離效果最好，可作為試驗(yàn)用色譜柱。

2.3 驗(yàn)證試驗(yàn)

2.3.1 加標(biāo)回收試驗(yàn)

選取蘋果為空白基質(zhì)，理論加標(biāo)濃度為0.10 μg/mL進(jìn)行重復(fù)6次的加標(biāo)回收和精密度試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.3.2 7種農(nóng)藥組分的線性范圍、回歸方程、相關(guān)系數(shù)

濃度在0.02～1.00 μg/mL線性范圍內(nèi)，7種組分的回歸方程以及相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表2。

3 結(jié)論與討論

選取DB-1701P（30 m×0.32 mm×0.25 μm）毛細(xì)管柱，分離效果比較理想。在0.02～1.00 μg/mL，線性關(guān)系良好（相關(guān)系數(shù)為0.998 4～0.999 5），能滿足定量檢測(cè)相關(guān)要求，7種有機(jī)磷農(nóng)藥的加標(biāo)回收率為88.2%～109.1%，精密度為0.20～0.41，實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較理想。

參考文獻(xiàn)

[1]梁一博，譚興，胡望資，等.我國(guó)蔬菜中農(nóng)藥殘留現(xiàn)狀及其檢測(cè)技術(shù)的研究進(jìn)展[J]農(nóng)產(chǎn)品加工，2014（3）：74-78.

[2]楊秀蝦.氣相色譜法測(cè)定果蔬中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[J].現(xiàn)代食品，2020（4）：209-222.

[3]中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部.蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定：NY/T 761—2008[S].北京：農(nóng)業(yè)出版社，2008.

[4]趙蕾，張媛媛，李軼，等.同時(shí)測(cè)定蔬菜中15種有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留方法[J].食品研究與開(kāi)發(fā)，2019，40（16）：113-118.

[5]梁漢昌.痕量物質(zhì)分析氣相色譜法[M].北京：中國(guó)石化出版社，2000.