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    幾種寒旱區(qū)適生植物的鎳耐性評價

    2022-07-04 10:46:34張君霞何靜蘇世平黃海霞
    關(guān)鍵詞:錦雞兒耐性梭梭

    張君霞,何靜,蘇世平,黃海霞

    (甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院,甘肅 蘭州 730070)

    對礦山復(fù)墾、重金屬污染地進行植物修復(fù),具有成本低、二次污染易掌控,且集綠化、防風(fēng)固土和修復(fù)于一體,能夠達到多效能治理的目的[1-2]。中國科學(xué)院地理科學(xué)與資源研究所陳同斌團隊在國際上首次報道第1種砷超富集植物—蜈蚣草(PterisvittataL.)[3-4],并成功應(yīng)用于 As污染土壤的原位修復(fù)[5];美國Viridian環(huán)境公司應(yīng)用十字花科庭薺屬Ni超富集植物Alyssummurale和Alyssumcorsicum,有效地富集了加拿大Ontario污染土壤中的Ni,通過回收植物體內(nèi)的Ni,獲得2 500美元/(hm2/a)的經(jīng)濟收益[6-7]。仇榮亮等[8]對由美國Viridian環(huán)境公司提供A.murale和A.corsicum2種植物及普通作物蘿卜和芥菜的鎳富集能力進行了測定,結(jié)果顯示,土壤類型不同,植物鎳富集能力不同。同時,資料表明:世界上已經(jīng)發(fā)現(xiàn)Cd、Co、Cu、Ni、Pb、Mn、Zn超富集植物400多種,其中73%為Ni的超富集植物,但它們分布在世界少數(shù)幾個地區(qū)[9],且我國超富集植物篩選與耐性植物考察研究主要集中在氣候環(huán)境適宜、物種資源豐富的南部礦區(qū)[10-13],對于西北部干旱荒漠地區(qū)的富集及耐性植物研究較少[14-15]。

    因此,本研究針對甘肅金昌鎳礦跡地及周邊污染區(qū)土壤的植物修復(fù),對比測定當(dāng)?shù)刂饕耘嘧魑锛耙吧参镌阪嚸{迫下的種子萌發(fā)和幼苗生長,篩選鎳耐性植物,以期為寒旱區(qū)鎳污染地的生態(tài)修復(fù)提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    化學(xué)分析純NiSO4·6H2O,分子量為262.85。

    供試植物種子材料共6科16種,均購自甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院種子市場。其中十字花科4種,分別為二月蘭(Orychophragmusviolaceus(L.)O.E.Schulz)、香雪球(Lobulariamaritima(Linn.)Desv)、蘿卜(RaphanussativusL)、芥菜(Brassicajuncea(Linnaeus)Czernajew var.gracilis Tsen et Lee);禾本科4種,分別為小麥(TriticumaestivumL)、玉米(ZeamaysL)、芨芨草(Achnatherumsplendens(Trin.)Nevski)、稗草(Echinochloacrusgalli(L.)Beauv);豆科3種,分別為花棒(HedysarumscopariumFisch.et Mey)、中間錦雞兒(CaraganaintermediaKuang et H.C.Fu)、大豆(Glycinemax(Linn.)Merr);藜科2種,分別為梭梭(Haloxylonammodendron(C.A.Mey.)Bunge)、甜菜(BetavulgarisL);車前科2種,分別為大車前(PlantagomajorL)、小車前(PlantagominutaPall);錦葵科1種,棉花(Gossypiumspp)。

    1.2 試驗方法

    通過預(yù)試驗測定,十字花科、禾本科幾種植物及豆科大豆的最高耐受鎳處理濃度較低,其余植物耐受濃度較高。因此,對不同植物設(shè)置了不同鎳處理濃度,十字花科,木本科,豆科植物的處理濃度為0、5、10、20、40、80、160 mg/L,其余植物的處理濃度為0、10、20、50、100、200、400 mg/L。

    選取顆粒飽滿、大小均勻、無病蟲害的種子,1%的NaClO溶液消毒15 min,去離子水沖洗3~5次,并用濾紙吸干種子表面水分。90 mm培養(yǎng)皿滅菌烘干,放入兩層濾紙,分別加入5 mL不同濃度NiSO4·6H2O處理液,以加等量去離子水為對照,每處理設(shè)置3~5個重復(fù),依據(jù)種子大小,每培養(yǎng)皿均勻擺放20~100粒種子,保證每處理至少100粒種子,放入25 ℃、全黑暗人工氣候箱培養(yǎng)。每天按時補充等量不同濃度的原液于培養(yǎng)皿中,以胚芽突破種皮為萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn),每天觀察記錄種子發(fā)芽數(shù),計算發(fā)芽率,連續(xù)3 d不再有新發(fā)芽種子時停止試驗,測定胚芽長、胚根長及干鮮質(zhì)量。

    1.3 數(shù)據(jù)分析

    考查植物在逆境脅迫下的耐受能力,通常用到的參數(shù)是耐性指數(shù)。耐性指數(shù)(tolerance index)計算方法[16-17]:

    耐性指數(shù)=處理組指標(biāo)值/對照組指標(biāo)值

    耐性指數(shù)越高表明植物耐受能力就越強,反之越弱。

    數(shù)據(jù)采用Excel進行整理并制作圖表;利用SPSS 17.0統(tǒng)計分析軟件進行單因素方差分析,采用Duncan法進行多重比較;用Probit進行Logistic線性回歸。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 16種植物種子發(fā)芽對不同濃度Ni2+處理的耐性評價

    2.1.1 不同濃度Ni2+處理對16種植物種子發(fā)芽率的影響 不同濃度Ni2+處理對16種植物種子發(fā)芽率普遍呈現(xiàn)低促高抑影響(表1),且在低濃度處理下(5 mg/L)與對照差異未達到極顯著水平;在濃度為10 mg/L時,蘿卜、玉米與對照差異極顯著,均被抑制,而其余14種種子發(fā)芽率與對照無極顯著差異,且大多被促進;濃度為20 mg/L時,稗草、花棒、中間錦雞兒、梭梭、甜菜、大車前和小車前種子與對照差異未達到極顯著,而香雪球在此濃度下,發(fā)芽率達到最高,與對照差異極顯著;當(dāng)濃度達到100 mg/L及以上時,香雪球、中間錦雞兒、梭梭種子發(fā)芽率與對照差異仍未達到極顯著,其余植物種子發(fā)芽均被顯著抑制;在最高濃度處理下,蘿卜、芥菜、棉花、大車前、小車前與對照的差異顯著度高達5個層級以上,其種子發(fā)芽率不超過15%,但梭梭發(fā)芽率仍高達65.33%。

    表1 不同濃度Ni2+處理對供試種子發(fā)芽率的影響

    2.1.2 16種植物種子發(fā)芽對不同濃度Ni2+處理的耐性評價 對16種植物在不同濃度Ni2+處理下的種子發(fā)芽率進行回歸分析,并通過擬合Logit方程,得到當(dāng)種子萌發(fā)率為10%、50%、90%和與對照發(fā)芽率平齊時的理論Ni2+濃度,該Ni2+濃度我們可以認為分別表示為10%耐受濃度(GC10)、半耐受濃度(GC50)、耐受濃度(GC90)和對照耐受濃度(GCck)。由此,從表2可知,中間錦雞兒、梭梭、小麥和香雪球在Ni2+濃度高達17 092.85 mg/L時,仍有10%的種子能夠萌發(fā);甜菜、玉米、花棒的10%耐受濃度高于(GC10)1 000 mg/L,且以上6種植物種子的半耐受濃度(GC50)均高于307.55 mg/L。當(dāng)發(fā)芽率與對照平齊時(GCck),仍然能夠耐受高濃度鎳脅迫,認為該種植物就具備了鎳耐受植物的基本特性之一,即GCck可作為植物種子萌發(fā)鎳耐受性評價的關(guān)鍵指標(biāo)。數(shù)據(jù)顯示,中間錦雞兒、香雪球、梭梭的GCck均高于212.43 mg/L,且中間錦雞兒的GCck為1 752.53 mg/L;耐受濃度(GC90)中梭梭表現(xiàn)最突出,即當(dāng)用212.43 mg/L Ni2+處理梭梭,其種子發(fā)芽率仍可高達90%。由此可以得出,中間錦雞兒、香雪球、梭梭及甜菜整體耐性較好,有進一步研究價值。

    表2 16種植物種子發(fā)芽對Ni2+處理耐性評價

    2.2 4種植物幼苗生長對不同濃度Ni2+處理的耐性評價

    2.2.1 不同濃度Ni2+處理對4種植物干鮮質(zhì)量的影響 從圖1-A~D可知,不同濃度Ni2+處理對4種植物的干鮮質(zhì)量影響整體表現(xiàn)為濃度與干鮮質(zhì)量呈負相關(guān)性。根據(jù)擬合的線性方程斜率可知,4種植物干質(zhì)量線性方程的斜率均較鮮質(zhì)量低,從低濃度到高濃度干質(zhì)量下降緩慢,擬合直線相對平緩,說明干質(zhì)量對濃度變化響應(yīng)不敏感;甜菜和香雪球的鮮質(zhì)量隨濃度升高,生物量快速下降,尤其是甜菜各處理間差異極顯著,說明甜菜干鮮質(zhì)量整體對Ni2+濃度變化敏感;而在低濃度(5~10 mg/L)處理下對梭梭鮮質(zhì)量有促進作用,高濃度抑制,但從50~200 mg/L差異不顯著,尤其中間錦雞兒干質(zhì)量在0~50 mg/L和鮮質(zhì)量在100~400 mg/L濃度處理下均表現(xiàn)無極顯著差異,且在400 mg/L濃度處理下,中間錦雞兒干鮮質(zhì)量較對照分別下降了18.02%和25.01%,說明中間錦雞兒鮮質(zhì)量對Ni2+濃度變化不敏感,4種植物中耐性最強。

    A:不同濃度Ni2+對中間錦雞兒生物量的影響;B:不同濃度Ni2+對梭梭生物量的影響;C:不同濃度Ni2+對甜菜生物量的影響;D:不同濃度Ni2+對香雪球生物量的影響。圖中字母表示同一指標(biāo)不同濃度的多重比較結(jié)果,小寫字母為P<0.05水平的差異顯著性,大寫字母為P<0.01水平的差異顯著性。

    2.2.2 4種植物干鮮質(zhì)量對不同濃度Ni2+處理的耐性評價 以Ni2+處理濃度為橫坐標(biāo),干鮮質(zhì)量耐性指數(shù)為縱坐標(biāo),對4種植物在不同濃度Ni2+處理下的耐性指數(shù)進行回歸分析,擬合LOGIT方程得到,當(dāng)耐性指數(shù)為0.1、0.5、0.9時的理論耐受Ni2+濃度,值越大,表明植物干鮮質(zhì)量能夠耐受的Ni2+濃度越高。由表3可知,4種植物中,中間錦雞兒對鎳的耐性更強,其TC50值遠高于其他植物,即當(dāng)耐性指數(shù)為0.5時,中間錦雞兒鮮質(zhì)量和干質(zhì)量能夠耐受的鎳濃度分別高達1 878.47和8 293.63 mg/L;其次為梭梭,其TC50值為515.89 mg/L,鮮質(zhì)量的TC90值為71.90 mg/L;香雪球和甜菜的TC50值不超過100 mg/L,尤其是香雪球值最低,其鮮質(zhì)量和干質(zhì)量的TC50值為12.63 mg/L和67.30 mg/L,TC90值僅為0.76 mg/L和0.36 mg/L。

    表3 4種植物干鮮質(zhì)量對不同濃度Ni2+處理的耐性指數(shù)

    2.2.3 不同濃度Ni2+處理對4種植物苗長的影響 由圖2-A~D中可知,4種植物幼苗苗長生長與Ni2+處理濃度呈負相關(guān)性,除了在低濃度對梭梭胚芽長有促進作用外,其余均顯示抑制作用,且對比不同濃度Ni2+處理下每種植物的胚芽長和胚根長的線性斜率,發(fā)現(xiàn)胚芽長的斜率均較低,說明胚芽生長對鎳處理濃度變化響應(yīng)不敏感,即在種子發(fā)芽初試狀態(tài)下,胚根生長更易感受到鎳脅迫,其耐性較胚芽低;中間錦雞兒(圖2-A)胚根長與胚芽長在不同濃度處理間的差異性顯示一致,均為低濃度與對照差異不顯著,中高濃度與對照差異極顯著;梭梭(圖2-B)在10~200 mg/L濃度處理下,胚根長生長無極顯著差異,10~100 mg/L無顯著差異,胚芽生長在50~200 mg/L間無顯著差異,說明梭梭苗長生長對鎳耐性較強;甜菜(圖2-C)胚根生長各處理濃度間差異極顯著,而胚芽生長在0~100 mg/L濃度處理下無極顯著差異,依然說明甜菜幼苗胚芽生長較胚根生長對鎳耐性更強;在不同濃度Ni2+處理下香雪球(圖2-D)胚根與胚芽生長均顯示極顯著差異,濃度為160 mg/L時,幾乎不生長,說明香雪球幼苗對鎳敏感,耐性較差。

    A:不同濃度Ni2+對中間錦雞兒苗長的影響;B:不同濃度Ni2+對梭梭苗長的影響;C:不同濃度Ni2+對甜菜苗長的影響;D:不同濃度Ni2+對香雪球苗長的影響。圖中字母表示同一指標(biāo)不同濃度的多重比較結(jié)果,小寫字母為P<0.05水平的差異顯著性,大寫字母為P<0.01水平的差異顯著性。

    2.2.4 4種植物苗長對不同濃度Ni2+處理的耐性評價 通過對4種植物苗長耐性指數(shù)的回歸分析,可知,在耐性指數(shù)為0.1時,2種木本植物的胚根較胚芽生長耐受鎳濃度高,而2種草本植物則相反;在耐性指數(shù)高于0.5后,4種植物胚芽生長均較胚根生長耐受鎳濃度高,說明木本植物胚根對鎳更敏感;梭梭在耐性指數(shù)為0.1時,胚芽長和胚根長生長的理論耐受鎳濃度(TC10)高達1 570.93 mg/L以上,在耐性指數(shù)為0.5(TC50)時,胚芽生長理論耐受鎳濃度仍超101.78 mg/L,其次為中間錦雞兒,其幼苗苗長生長TC10超過504.85 mg/L;香雪球的理論耐受鎳濃度最高值為41.06 mg/L。

    表4 4種植物苗長對不同濃度Ni2+處理的耐性指數(shù)

    3 討論

    在植物修復(fù)研究中,目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的重金屬超累積植物或耐性植物多數(shù)為草本,但木本植物較草本植物根系發(fā)達,修復(fù)期不用反復(fù)種收,不易進入食物鏈,且若種子萌發(fā)的耐鎳性強,一旦定植其自然擴繁較容易。施翔等[18]通過盆栽試驗證明紫穗槐可作為修復(fù)鉛鋅礦區(qū)污染土壤的潛力樹種;張富運等[19]將8種木本植物種植于鉛鋅礦渣中證明光皮樹、黧蒴栲、楠木、杜鵑可用于鉛鋅污染土壤的修復(fù)。同時,在西北干旱荒漠地帶的重金屬污染土壤的植物修復(fù)中,木本植物具有集修復(fù)、綠化、防風(fēng)固沙和保持水土等多方面實際意義。因此,在選擇供試材料時有意選擇了幾種多年生耐寒耐旱木本植物。結(jié)果顯示,3種木本植物(花棒、中間錦雞兒、梭梭)中有2種(中間錦雞兒、梭梭)整體發(fā)芽耐性要比其他草本植物高,且依據(jù)GCck排序,中間錦雞兒耐性最強,高居16種植物榜首、梭梭居于第三,花棒為第五。

    由于木本植物凋落物二次污染、栽植密度低及在西北寒旱區(qū)的種植成本高等問題,其植物修復(fù)應(yīng)用還有一定局限性,但如果能將耐性草本與木本植物混合配植,進行聯(lián)合修復(fù),既能通過收獲草本植物減少木本植物凋落物二次污染,又能在空間維度上達到深層次、廣范圍的立體修復(fù)。本研究中中間錦雞兒、梭梭整體耐性強,其次為甜菜,因此,甜菜與中間錦雞兒和梭梭混合種植可能將是研究區(qū)鎳污染土壤修復(fù)的方式之一。

    綜合比較各測定指標(biāo)TC50值,可以發(fā)現(xiàn)植物種子發(fā)芽對鎳的耐性更強,其次為幼苗干質(zhì)量,再次是幼苗鮮質(zhì)量,然后是胚芽長,最后是胚根長。分析其原因可能為:在植物萌發(fā)初期,胚乳本身儲存營養(yǎng)可以消解部分重金屬離子對發(fā)芽的抑制,而胚根是植物的吸收器官,直接接觸重金屬離子,并在相對短時間內(nèi)將重金屬積累在根系,因此表現(xiàn)為發(fā)芽率耐受重金屬脅迫,而胚根長最敏感,易受毒害。許多研究也得出相似研究結(jié)論,戴敏[15]在重金屬鎳脅迫對3種耐旱植物種子萌發(fā)及幼苗生理特性影響的研究中發(fā)現(xiàn),木藤蓼、苦豆子在響應(yīng)鎳脅迫時,胚根比胚芽更敏感;王寶媛等[17]在研究20個高羊茅品種鎘耐性評價及富集特征時,得出植物根長對Cd2+脅迫的敏感度明顯高于株高;魯艷等[20]研究發(fā)現(xiàn)鎳脅迫對供試植物對發(fā)芽率影響最小,對根長抑制作用最強。

    在西北干旱荒漠地帶的重金屬污染區(qū),由于本身氣候特點再加重金屬累積毒性,植被恢復(fù)困難,沙漠化進程加劇,且重金屬隨風(fēng)沙遷移飄散,造成二次污染[21-22],因此,對現(xiàn)狀下的重金屬污染修復(fù)或原位固定就顯得極為迫切。本研究通過對比16種植物的發(fā)芽率耐性,篩選出了4種植物,并對該4種植物幼苗生長的鎳耐性評價結(jié)果發(fā)現(xiàn),中間錦雞兒、梭梭整體耐性更強,其次為甜菜,而香雪球相對敏感,耐性最弱。魯艷等[20]也發(fā)現(xiàn)了梭梭的耐鎳脅迫能力較強,與本研究結(jié)果一致。因此,中間錦雞兒和梭梭在作為寒旱區(qū)鎳污染地生態(tài)修復(fù)的植物中有極大優(yōu)勢,但其耐性機制及是否具有鎳超累積性還有待進一步研究。

    4 結(jié)論

    依據(jù)GCck對16種供試植物發(fā)芽率耐鎳脅迫能力進行排序:中間錦雞兒>香雪球>梭梭>甜菜,其GCck值接近100 mg/L,可作為具有進一步研究價值的第一梯隊耐鎳植物;第二梯隊中按GCck大于50 mg/L排序,分別為花棒>小車前>玉米>大車前,而其他植物發(fā)芽對鎳濃度變化敏感,耐鎳能力較弱。

    對第一梯隊4種植物幼苗生長的鎳耐性評價結(jié)果顯示,中間錦雞兒、梭梭整體耐性強,其次為甜菜,而香雪球相對敏感,耐性較弱。因此,結(jié)合研究區(qū)整體狀況,認為中間錦雞兒、梭梭、甜菜可以作為寒旱區(qū)鎳污染地生態(tài)修復(fù)的優(yōu)選植物。

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