神經(jīng)病理性疼痛的蛋白質(zhì)組學(xué)研究進(jìn)展*

神經(jīng)病理性疼痛 (neuropathic pain, NP) 是指神經(jīng)系統(tǒng)（包括神經(jīng)、脊髓和某些中樞神經(jīng)系統(tǒng)區(qū)域）損傷或疾病引起的疼痛。NP 可以由外周神經(jīng)或中樞神經(jīng)的多種損傷引起，包括代謝、感染、創(chuàng)傷、炎癥和神經(jīng)毒性物質(zhì)等

。NP 的治療指南中

推薦抗驚厥藥和三環(huán)類抗抑郁藥為一線用藥，阿片類藥物及利多卡因貼劑為二線用藥。然而，這些藥物治療效果不理想，且伴有不同程度的不良反應(yīng)，對(duì)一些難治性NP 仍然缺乏有效的治療手段。NP 的治療之所以成為世界難題，主要是由于NP 的病因多樣、機(jī)制復(fù)雜，至今仍未完全闡明其發(fā)病機(jī)制

。

制定MEWS觸發(fā)值和四項(xiàng)參數(shù)值，分別為：意識(shí)、血氧飽和度、出血和臟器衰竭，制作專門(mén)的入院評(píng)估單以便于護(hù)士隨時(shí)參考、評(píng)估、觀察和記錄。見(jiàn)表1。

蛋白是機(jī)體發(fā)揮功能的主要物質(zhì)之一，在幾乎所有病理機(jī)制中都有不可或缺的意義。蛋白質(zhì)組學(xué)是對(duì)某一特定組織包含的全部蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定分析與定量研究的技術(shù)

。蛋白質(zhì)組學(xué)研究不僅可以全景式地揭示生命活動(dòng)的分子本質(zhì)，還能闡明生命在生理或病理?xiàng)l件下的變化機(jī)制。通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可以了解NP 病理過(guò)程中的蛋白質(zhì)表達(dá)差異，有助于理解NP 的發(fā)生發(fā)展機(jī)制，進(jìn)一步選擇干預(yù)的靶點(diǎn)，從而達(dá)到治療疾病的目的，有著極其重要的醫(yī)學(xué)價(jià)值和社會(huì)意義。

既往已有一些針對(duì)NP 動(dòng)物模型的蛋白質(zhì)組學(xué)的研究和綜述

，但缺乏對(duì)NP 蛋白質(zhì)組學(xué)的臨床研究的總結(jié)，同時(shí)近幾年蛋白質(zhì)組學(xué)更新了許多新技術(shù)，尚未見(jiàn)相關(guān)綜述。本文旨在總結(jié)NP 動(dòng)物模型和臨床的蛋白質(zhì)組學(xué)研究的新進(jìn)展，并介紹NP研究中涉及的新蛋白質(zhì)組學(xué)方法，有助于研究者全面了解NP 的蛋白表達(dá)差異，為進(jìn)一步研究NP 的發(fā)病機(jī)制、治療靶點(diǎn)提供重要參考。

一、NP 研究中的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)

蛋白質(zhì)是機(jī)體生理功能的最終執(zhí)行者，最早由澳大利亞學(xué)者Wilkins和Williams提出了“蛋白質(zhì)組”的概念

。隨著生命科學(xué)研究進(jìn)入后基因組時(shí)代，蛋白質(zhì)組學(xué)應(yīng)運(yùn)而生。蛋白質(zhì)組學(xué)又經(jīng)歷進(jìn)一步發(fā)展并細(xì)分出功能蛋白質(zhì)組學(xué)、差異蛋白質(zhì)組學(xué)和相互作用蛋白質(zhì)組學(xué)。差異蛋白質(zhì)組學(xué)是其中最重要的研究策略，也是NP 蛋白質(zhì)組學(xué)研究的主要方向。其利用先進(jìn)的高通量蛋白質(zhì)分離技術(shù)比較不同組織在不同時(shí)刻或不同狀態(tài)下蛋白質(zhì)表達(dá)的變化，從而明確發(fā)病的機(jī)制，并篩選疾病的特異生物標(biāo)志物和治療的靶點(diǎn)。

NP 的蛋白質(zhì)組學(xué)研究基本模式是：①提取與NP 病理過(guò)程相關(guān)的感興趣組織，對(duì)樣本進(jìn)行前處理分離蛋白；②對(duì)提取的蛋白或酶解后的肽段進(jìn)行色譜分離、質(zhì)譜檢測(cè)，確定存在表達(dá)差異的蛋白；③通過(guò)數(shù)據(jù)分析鑒定具體的蛋白種類。隨著技術(shù)的發(fā)展，蛋白質(zhì)組學(xué)的技術(shù)路線迭代更新，NP 的研究中也引入了多種不同的技術(shù)路線。下面對(duì)NP 研究中涉及的幾種技術(shù)路線及各自的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)進(jìn)行介紹。

不同模型和不同組織的蛋白質(zhì)表達(dá)差異很大，與不同動(dòng)物神經(jīng)病變模型表現(xiàn)出的行為和形態(tài)學(xué)差異的結(jié)論一致，人類的NP 也表現(xiàn)為不同的疼痛綜合征。這些NP 模型的蛋白質(zhì)組學(xué)研究提供了大量可能參與神經(jīng)病理性疼痛發(fā)病機(jī)制的蛋白質(zhì)，通過(guò)NP 模型篩選識(shí)別出可能的關(guān)鍵性、特異性的蛋白，然后在臨床病人中進(jìn)一步研究是未來(lái)的發(fā)展方向。

1.雙向凝膠電泳(two-dimensional gel electrophoresis, 2-DE)分離結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)(mass spectrometry, MS)，是早期蛋白質(zhì)組學(xué)研究的常用技術(shù)路線，首先使用雙向凝膠電泳技術(shù)，根據(jù)等電點(diǎn)和分子量?jī)蓚€(gè)方面將蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，然后將感興趣的蛋白質(zhì)點(diǎn)從凝膠中切出，通過(guò)胰蛋白酶消化成肽，再利用質(zhì)譜儀對(duì)肽段的質(zhì)量進(jìn)行測(cè)定，最后通過(guò)匹配分析鑒定出對(duì)應(yīng)的蛋白。

2.液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)(liquid chromatography tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)，已經(jīng)成為蛋白質(zhì)組學(xué)研究的主要手段，通過(guò)液相色譜與串聯(lián)質(zhì)譜的聯(lián)用，大大提高了色譜分離與質(zhì)譜檢測(cè)環(huán)節(jié)的效率，靈敏度更高、檢測(cè)范圍更大，而且檢測(cè)速度快、自動(dòng)化程度高。在此基礎(chǔ)上，還有以更高分辨率著稱的納米級(jí)噴霧圖像的納米液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù) (Nano-LC-MS/MS)

。

鉤藤種植后1～2年內(nèi)植株分枝少，3年后植株枝繁葉茂即可采收，一般于秋冬兩季采收。人工用枝剪剪下或鐮刀割下帶鉤的鉤藤枝條，去除葉片、病枝，扎成把，運(yùn)回。鉤藤主要成分為鉤藤堿，遇高溫會(huì)分解轉(zhuǎn)化，因此在烘干加工過(guò)程中，采取低溫烘干方式能最大程度保留有效成分的含量[12]。一般將帶鉤枝條曬干，或用50～60攝氏度烘干，水分含量<10%即可。

3.基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption ionization [MALDI]-time offlight [TOF]-mass spectrometer, MALDI-TOF-MS)

，是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新型的軟電離生物質(zhì)譜技術(shù)，由煙酰胺基質(zhì)的輔助激光解吸電離離子源(MALDI) 和飛行時(shí)間質(zhì)量分析器(TOF) 組成。適用于混合物及生物大分子的測(cè)定。其準(zhǔn)確度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于色譜分離技術(shù)，具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高及分辨率高等特點(diǎn)。

4.同位素標(biāo)記相對(duì)與絕對(duì)定量技術(shù)

(isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ) 和串聯(lián)質(zhì)譜標(biāo)簽 (tandem mass tags, TMT) 標(biāo)記定量技術(shù)

。iTRAQ 和TMT 分別是美國(guó)AB Sciex 公司和Thermo 公司研發(fā)的多肽體外標(biāo)記定量技術(shù)，在樣本蛋白酶解后，用小分子同位素標(biāo)簽對(duì)酶解后的肽段進(jìn)行標(biāo)記，這兩種技術(shù)可以更好地檢出和定量研究低豐度蛋白。

2017 年P(guān)ark 等

對(duì)SNI 模型蛋白質(zhì)組學(xué)的研究顯示，SNI 模型出現(xiàn)細(xì)胞骨架蛋白的下調(diào)，細(xì)胞骨架蛋白在髓鞘的形成和穩(wěn)定中起重要作用，證實(shí)了周?chē)窠?jīng)損傷后的脫髓鞘在NP 的誘導(dǎo)或維持中的意義。在對(duì)NMDA 受體基因突變小鼠的SNI 模型研究中

，發(fā)現(xiàn)腦富集鳥(niǎo)苷酸激酶相關(guān)蛋白特異性上調(diào)，通過(guò)改變興奮性突觸后電位，激活NMDA 受體參與神經(jīng)病理性疼痛的傳遞。Barry等

的一項(xiàng)運(yùn)用新技術(shù)數(shù)據(jù)非依賴采集質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，分別對(duì)坐骨神經(jīng) (sciatic nerve,SN)、背根神經(jīng)節(jié) (dorsal root ganglia, DRG) 和脊髓 (spinal cord, SC) 3 個(gè)區(qū)域進(jìn)行了全面的蛋白質(zhì)概要分析，并定義了周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)(peripheral nervous system, PNS)富含的蛋白質(zhì)特征。SNI 模型中32 種PNS 的富含蛋白顯示出顯著調(diào)節(jié)，特征是參與免疫信號(hào)和免疫應(yīng)答的蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)。另一組的發(fā)現(xiàn)是細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ECM)蛋白的改變，ECM 對(duì)于細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)之間的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和通信至關(guān)重要。在NP 治療方面，一項(xiàng)關(guān)于對(duì)SNI 模型大鼠行脊髓電刺激 (spinal cord stimulation, SCS) 的研究顯示

，SCS 連續(xù)刺激72 小時(shí)后，發(fā)現(xiàn)脊髓背角組織的155 種蛋白受SCS 顯著影響，主要與應(yīng)激反應(yīng)、氧化/還原反應(yīng)或細(xì)胞外基質(zhì)途徑相關(guān)。研究還顯示SCS 治療可能逆轉(zhuǎn)損傷誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)組的異常狀態(tài)。

1.5 試劑性能驗(yàn)證及結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn) 選擇上述不同IHC級(jí)別的標(biāo)本，共25例，按照優(yōu)化后條件行FISH檢測(cè)。結(jié)果判讀參照乳腺癌HER2檢測(cè)指南(2014版)[2]選擇至少2個(gè)視野，隨機(jī)計(jì)數(shù)至少20個(gè)浸潤(rùn)細(xì)胞。①當(dāng)HER-2/CEP17比值≥2.0時(shí)，HER-2為陽(yáng)性；HER-2/CEP17比值<2.0，但平均HER-2拷貝數(shù)≥6.0時(shí)，HER-2陽(yáng)性；HER-2信號(hào)連接成簇時(shí)，可不計(jì)數(shù)，直接視為基因擴(kuò)增。②當(dāng)HER-2/CEP17比值<2.0，且平均拷貝數(shù)/細(xì)胞<4.0時(shí)，HER-2陰性。③當(dāng)HER-2/CEP17比值<2.0，平均HER-2拷貝數(shù)在4.0～6.0之間，結(jié)果判為不確定。

二、NP 模型中的蛋白質(zhì)組學(xué)研究

NP 的發(fā)生部位可能為中樞神經(jīng)系統(tǒng)或周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)，除了其機(jī)制的復(fù)雜性，其發(fā)生部位的不同也決定其機(jī)制的不同。因此，研究者開(kāi)發(fā)出了針對(duì)不同NP 的動(dòng)物模型，為疼痛的臨床前研究提供了有力的支持。本文對(duì)常用NP 動(dòng)物模型進(jìn)行分類梳理，并對(duì)蛋白質(zhì)組學(xué)研究結(jié)果進(jìn)行匯總和比較。

1.脊神經(jīng)結(jié)扎模型

表1 中不同模型和不同組織的蛋白質(zhì)表達(dá)差異較大，涉及數(shù)百種蛋白。嘗試對(duì)這些研究具有表達(dá)差異的蛋白的共同點(diǎn)進(jìn)行分析，首先進(jìn)行功能分類后發(fā)現(xiàn)，最多改變的為以下幾類：細(xì)胞骨架蛋白；參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的蛋白質(zhì)；參與細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)和代謝的蛋白質(zhì)；參與質(zhì)膜受體運(yùn)輸?shù)牡鞍踪|(zhì)；熱休克蛋白；伴侶蛋白和抗氧化蛋白。其中在多項(xiàng)研究的結(jié)果中具有較強(qiáng)一致性的蛋白按照排序?yàn)椋簾嵝菘说鞍?heat shock protein) (↑)、膜聯(lián)蛋白A1 和A3 (annexin A1 and A3) (↑)、ATP 合成酶β 鏈 (ATP synthase β chain) (↓)、突觸蛋白Ⅰ(SYN1) (↓)。

2.坐骨神經(jīng)分支損傷模型 (spared nerve injury, SNI)

5. 數(shù)據(jù)非依賴采集模式

(data-independent acquisition, DIA)是一種有助于全面檢出低豐度蛋白的技術(shù)。與其相對(duì)的是傳統(tǒng)的數(shù)據(jù)依賴采集模式(data-dependent acquisition, DDA)，在串聯(lián)質(zhì)譜的一級(jí)質(zhì)譜中每個(gè)時(shí)間窗口只采集信號(hào)較高的有限肽段離子（一般為前20）進(jìn)入二級(jí)質(zhì)譜進(jìn)行碎裂分析。而DIA 將質(zhì)譜整個(gè)掃描范圍分為若干個(gè)窗口，對(duì)全部范圍內(nèi)的所有離子進(jìn)行檢測(cè)，具備重復(fù)性好、鑒定敏感度高的優(yōu)勢(shì)。

3.坐骨神經(jīng)慢性壓迫性疼痛 (chronic constriction injury, CCI) 模型

CCI 模型模擬了類似腰椎間盤(pán)突出或神經(jīng)根受壓、缺氧和代謝性疾病時(shí)的慢性神經(jīng)壓迫性疼痛。Zou 等

進(jìn)行的CCI 模型蛋白質(zhì)組學(xué)分析，共鑒定出15 種表達(dá)差異的蛋白，主要關(guān)注的膜聯(lián)蛋白A3 (annexinA3, ANXA3) 明顯升高，且在抑制了ANXA3 的上調(diào)后，減輕了CCI 誘導(dǎo)的機(jī)械性痛覺(jué)超敏和熱痛覺(jué)過(guò)敏，ANXA3 可能在NP 中發(fā)揮重要作用。另一項(xiàng)CCI 模型大鼠的研究是電針刺激雙側(cè)足三里 (ST36) 穴和陽(yáng)陵泉 (GB34) 穴

，分析電針組、CCI 組和正常對(duì)照組的海馬區(qū)存在差異表達(dá)的蛋白。共發(fā)現(xiàn)了19 種蛋白的表達(dá)發(fā)生了顯著變化，排在前三的蛋白途徑是“半胱氨酸代謝”“纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸降解”和“有絲分裂原活化蛋白激酶 (mitogen-activated protein kinases, MAPK) 信號(hào)通路”，表明電針的鎮(zhèn)痛作用可能是通過(guò)調(diào)節(jié)海馬的氨基酸代謝相關(guān)蛋白和激活MAPK 信號(hào)通路介導(dǎo)的。

4.脊髓背根神經(jīng)節(jié)慢性壓迫 (chronic compression of DRG, CCD) 模型

表1 中列出的不同NP 模型的蛋白質(zhì)組學(xué)研究選取了不同的目標(biāo)組織，選擇組織的不同也是造成蛋白表達(dá)差異性巨大的原因。研究者選取的目標(biāo)組織有3 類：①NP 模型損傷的組織結(jié)構(gòu)，例如SNL對(duì)應(yīng)DRG、SNI 對(duì)應(yīng)坐骨神經(jīng)、CCD 對(duì)應(yīng)DRG；②脊髓背角：脊髓背角神經(jīng)元在疼痛的感知與傳遞中起重要作用，是疼痛信息整合的次級(jí)中樞，是研究“中樞敏化”、NP 的發(fā)生和維持中最常見(jiàn)的研究靶點(diǎn)；③大腦中樞區(qū)域：感興趣的區(qū)域?yàn)樾尤屎酥醒牒?(central nucleus of the amygdale, CeA)。CeA被認(rèn)為是負(fù)責(zé)慢性疼痛（包括NP）中樞可塑性的關(guān)鍵區(qū)域之一，CeA 整合了來(lái)自脊髓的傳入性傷害性感受和來(lái)自丘腦、皮質(zhì)的多方面信息。還有一項(xiàng)針刺治療相關(guān)研究的感興趣區(qū)為海馬區(qū)，此前的功能磁共振成像研究顯示，針刺治療導(dǎo)致包括海馬復(fù)合體在內(nèi)的多個(gè)邊緣區(qū)的激活或失活，針刺干預(yù)誘導(dǎo)的疼痛緩解伴隨著海馬神經(jīng)突觸可塑性的改善，因此選取海馬區(qū)為感興趣區(qū)。

5.糖尿病神經(jīng)病理性疼痛 (diabetic painful neuropathy, DPN) 模型

近期一項(xiàng)對(duì)DPN 模型大鼠脊髓背角組織的蛋白質(zhì)組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)

，與對(duì)照組相比，DPN 組下調(diào)的蛋白有169 種，上調(diào)的蛋白有474 種。其中細(xì)胞色素C 氧化酶和NADH 泛醌氧化還原酶等氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白顯著上調(diào)。在對(duì)DPN 大鼠行電針治療刺激足三里(ST36)穴和腎俞(BL23)穴4 周后，DPN 下調(diào)的蛋白中有8 種在電針治療后上調(diào)，DPN 上調(diào)的蛋白中有51 種在電針治療后下調(diào)，其中與氧化磷酸化密切相關(guān)的10 種蛋白水平發(fā)生顯著變化，說(shuō)明氧化磷酸化是電針治療DPN 的主要影響途徑。

我還常把名著當(dāng)作禮物和獎(jiǎng)品贈(zèng)送給學(xué)生，名著成了一種特殊的“教育武器”。這樣的獎(jiǎng)品比起一般的筆記本或鋼筆來(lái)，除了有鼓勵(lì)作用外，更多了一份教育意義，一箭雙雕。學(xué)生學(xué)習(xí)成績(jī)優(yōu)異，我獎(jiǎng)書(shū)，并在書(shū)上附贈(zèng)言；學(xué)生不聽(tīng)話，我也送書(shū)。書(shū)就充當(dāng)了老師的角色，班主任的教育感染力大大增強(qiáng)。

CCD 模型通過(guò)將L 形不銹鋼桿插入椎間孔中以壓迫DRG（常用L

和L

水平），引起DRG 神經(jīng)元的損傷。CCD 模型用于模擬腰椎病變和神經(jīng)根性疼痛。Zhang 等

通過(guò)提取CCD 模型大鼠L

和L

的DRG 組織進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析，共鑒定出15 種表達(dá)水平顯著變化的蛋白質(zhì)，涉及離子通道、跨膜運(yùn)輸、能量代謝和氧化應(yīng)激功能途徑。研究者認(rèn)為離子通道蛋白與跨膜蛋白的上調(diào)在CCD 模型DRG 神經(jīng)元的異常興奮性增高中發(fā)揮作用，此外神經(jīng)元損傷相關(guān)蛋白和神經(jīng)元保護(hù)蛋白的改變同時(shí)存在。

脊神經(jīng)結(jié)扎模型(spinal nerve ligation model, SNL)是一種模擬單神經(jīng)病變的模型。SNL 模型會(huì)出現(xiàn)自發(fā)疼痛的行為體征（保護(hù)、舔和抬起同側(cè)后爪），是模擬臨床神經(jīng)叢或背根神經(jīng)損傷的常用模型。關(guān)于SNL 模型的蛋白質(zhì)組學(xué)研究較多，具體研究?jī)?nèi)容見(jiàn)表1。存在表達(dá)差異的蛋白主要包括：①參與有害信息傳遞和調(diào)節(jié)的蛋白質(zhì)，如5-羥色胺受體2A、突觸蛋白I；②參與細(xì)胞代謝途徑的蛋白質(zhì)，如UDP 葡萄糖脫氫酶，ATP 合成酶β，這些參與能量代謝的蛋白在機(jī)體必不可少，在NP 模型中其上調(diào)和下調(diào)改變不一；③參與質(zhì)膜受體和細(xì)胞外基質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的蛋白質(zhì)，如膜聯(lián)蛋白A1 和A3、白蛋白、載脂蛋白等，對(duì)調(diào)節(jié)細(xì)胞膜的功能和細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性起重要作用；④參與氧化應(yīng)激、凋亡和變性的蛋白質(zhì)，如熱休克蛋白等，其保護(hù)神經(jīng)元和鄰近細(xì)胞避免氧化損傷。綜上所述，NP 的病理過(guò)程涉及的蛋白水平改變復(fù)雜多樣，其中維持細(xì)胞的穩(wěn)定和對(duì)抗氧化和應(yīng)激最為重要。

在不同研究中具有一致性的蛋白只是一小部分，還有數(shù)百種蛋白分別在不同模型和不同組織的研究中具有表達(dá)差異。對(duì)這些蛋白無(wú)法一一進(jìn)行具體分析，只能進(jìn)行概述。第一類為已經(jīng)在研究中證實(shí)與疼痛相關(guān)的蛋白，如鈉門(mén)控離子通道蛋白、腫瘤壞死因子、辣椒素受體相關(guān)蛋白等；第二類為人體重要的功能蛋白，如與細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)和代謝有關(guān)的蛋白質(zhì)、神經(jīng)元功能蛋白，他們?cè)诰S持神經(jīng)元的正常方面發(fā)揮生理功能，因此這類蛋白的異常改變，可能導(dǎo)致了正常生理狀態(tài)向NP 病理過(guò)程的轉(zhuǎn)變；第三類是病理性的蛋白，如熱休克蛋白、炎性蛋白、細(xì)胞凋亡蛋白和神經(jīng)退行性病變相關(guān)的蛋白，除了在NP 中，在各類疾病中均有參與，它們通常在組織損傷和修復(fù)過(guò)程中出現(xiàn)，可能參與了NP 的損傷、修復(fù)和維持。

On solving Eqs. (5) and (10) using the coefficients derived in Eqs. (7), (8), and (9), we get

三、NP 的臨床蛋白質(zhì)組學(xué)研究

相比于動(dòng)物NP 模型中的研究，直接提取病人組織或體液進(jìn)行的蛋白質(zhì)組學(xué)研究顯然更貼近臨床，因而具有更顯著的價(jià)值。但由于病人取材的困難及倫理學(xué)限制等原因，開(kāi)展此類研究較少，直到近5 年內(nèi)才有較多研究，主要涉及帶狀皰疹后神經(jīng)痛、三叉神經(jīng)痛、復(fù)雜性區(qū)域疼痛綜合征等疾病，具體研究及主要結(jié)果見(jiàn)表2。

丁達(dá)仍舊趴在地上一動(dòng)不動(dòng)。在他體內(nèi)，壺天曉和鏡心羽衣癱軟在向?qū)业淖紊希贿呍O(shè)法恢復(fù)精力，一邊等待同伴創(chuàng)造奇跡。他們搭建的感應(yīng)網(wǎng)絡(luò)依然十分穩(wěn)定，因此，同伴的行蹤他倆都一清二楚，這無(wú)疑是個(gè)好勢(shì)頭。壺天曉已把自己最新的經(jīng)驗(yàn)庫(kù)通過(guò)感應(yīng)網(wǎng)絡(luò)分享給了藍(lán)藍(lán)，他相信這個(gè)已有他大部分經(jīng)驗(yàn)庫(kù)的機(jī)器人有能力在地面上保護(hù)幽之谷的居民，并狙擊飛鼠小分隊(duì)。

1.三叉神經(jīng)痛 (trigeminal neuralgia, TN)

對(duì)單純陣發(fā)性經(jīng)典TN 伴血管壓迫的病人應(yīng)用微血管減壓治療的研究發(fā)現(xiàn)

，TN 病人在治療前與對(duì)照組相比，視黃醇結(jié)合蛋白4 (retinol bindingprotein 4, RBP4)、α-1-酸性糖蛋白2 (alpha-1-acid glycoprotein 2, AGP2)、轉(zhuǎn)甲狀腺素 (transthyretin, TTR) 均較對(duì)照組表達(dá)上調(diào)，微血管減壓術(shù)后RBP 和TTR 表達(dá)下調(diào)。提示RBP 和TTR 升高可能與這些病人的氧化應(yīng)激增加有關(guān)。此外，TTR 還參與感覺(jué)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)創(chuàng)傷后的纖維再生。另一項(xiàng)對(duì)TN 病人 (

= 17) 和對(duì)照組 (

= 20) 腦脊液的蛋白質(zhì)組學(xué)分析顯示

，在TN 病人中有46 種蛋白顯著改變（26 種增加，20 種減少）。上調(diào)的蛋白包括高密度脂蛋白組分，如載脂蛋白A4、載脂蛋白M 和載脂蛋白A1，以及細(xì)胞外基質(zhì)中參與補(bǔ)體級(jí)聯(lián)的蛋白表達(dá)的上調(diào)。

2.帶狀皰疹后神經(jīng)痛

對(duì)帶狀皰疹 (herpes zoster, HZ) 病人的血漿進(jìn)行的高通量蛋白質(zhì)組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)

，與健康人血漿相比，在病人血漿中發(fā)現(xiàn)了44 種表達(dá)存在顯著性差異的蛋白（32 種下調(diào)，12 種上調(diào)），這些蛋白參與的主要生理病理過(guò)程是MAPK 信號(hào)通路、神經(jīng)激活配體-受體的相互作用、急性髓系白血病、癌細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄失調(diào)等。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)纖溶酶原(plasminogen, PLG)、凝血酶因子 (thrombin factor II,F2)、玻璃體粘連素 (vitronectin, VTN) 這三種蛋白的表達(dá)水平均顯著低于健康對(duì)照組。提示這三種關(guān)鍵蛋白可能作為檢測(cè)早期HZ 感染的生物標(biāo)志物。

3.復(fù)雜性區(qū)域疼痛綜合征(complex regional pain syndrome, CRPS)

3 例2 型CRPS 病人的神經(jīng)樣本（切除了部分受損周?chē)窠?jīng)），與對(duì)照組（新鮮尸體的腓腸神經(jīng)）的蛋白質(zhì)組學(xué)分析表明

，CRPS 組和對(duì)照組神經(jīng)中表達(dá)的蛋白質(zhì)數(shù)量和功能分布相似。但是金屬硫蛋白(metallothionein) 在2 型CRPS 損傷神經(jīng)中表達(dá)缺失，金屬硫蛋白是一種鋅結(jié)合蛋白，可能參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷和損傷后再生的保護(hù)，提示相關(guān)途徑在CRPS 疼痛中可能有一定作用。

四、展望

未來(lái)可能的研究方向是靶向蛋白質(zhì)組學(xué)。通過(guò)現(xiàn)有的NP 蛋白質(zhì)組學(xué)研究，鎖定進(jìn)一步需要分析的具體蛋白，然后通過(guò)靶向蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行臨床大樣本的檢測(cè)，從而指導(dǎo)臨床治療。

西部作為欠發(fā)達(dá)地區(qū)，經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展水平整體落后于中東部地區(qū)，醫(yī)療技術(shù)水平也不例外。遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“遵醫(yī)附院”）院長(zhǎng)余昌胤認(rèn)為，制約西部地區(qū)醫(yī)療技術(shù)發(fā)展主要有以下四方面原因。

另一個(gè)需要關(guān)注的發(fā)展方向是單細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)。目前基于組織的蛋白質(zhì)組學(xué)是組織中包含的不同細(xì)胞的混合結(jié)果。例如研究結(jié)果可能反映的是感覺(jué)神經(jīng)元免疫細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等不同亞群的蛋白質(zhì)組。因此，未來(lái)的研究應(yīng)集中于在體內(nèi)有效標(biāo)記的神經(jīng)元亞群，進(jìn)行單細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)分析。

在節(jié)能降耗的大目標(biāo)下，能效管理是后勤保障的一個(gè)重要工作內(nèi)容。隨著醫(yī)院組織架構(gòu)的不斷改革，科室獨(dú)立核算是大勢(shì)所趨。建立能耗監(jiān)控平臺(tái)，將各個(gè)科室能耗數(shù)據(jù)進(jìn)行嚴(yán)密監(jiān)測(cè)，并將數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，得到管理者所需的各類對(duì)比分析數(shù)據(jù)。從醫(yī)院層面，為管理者進(jìn)行科室能耗管控提供了可靠依據(jù)，根據(jù)能耗數(shù)據(jù)可指定有針對(duì)性的節(jié)能降耗措施，進(jìn)而規(guī)范醫(yī)院后勤服務(wù)流程、提高工作效率、控制運(yùn)營(yíng)成本、保證服務(wù)質(zhì)量、輔助管理決策、提升醫(yī)院整體管理水平。

通過(guò)已有的NP 蛋白質(zhì)組學(xué)研究，已經(jīng)建立了相應(yīng)的蛋白質(zhì)圖譜和蛋白質(zhì)功能網(wǎng)的數(shù)據(jù)庫(kù)，但目前還停留在基礎(chǔ)研究，未能應(yīng)用于臨床治療。如果能通過(guò)蛋白質(zhì)圖譜和蛋白質(zhì)功能網(wǎng)絡(luò)的全景式分析，結(jié)合多個(gè)關(guān)鍵位點(diǎn)進(jìn)行聯(lián)合干預(yù)，也許能在NP 治療這一世界性的難題取得飛躍性的進(jìn)展。

利益沖突聲明：作者聲明本文無(wú)利益沖突。

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