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    不同豆芽基質(zhì)對(duì)4-氯苯氧乙酸鈉和6-芐基腺嘌呤回收率的影響

    2022-06-08 05:55:32豪,高
    現(xiàn)代食品 2022年10期
    關(guān)鍵詞:黃豆芽綠豆芽腺嘌呤

    ◎ 張 豪,高 貞

    (中檢集團(tuán)中原農(nóng)食產(chǎn)品檢測(cè)河南有限公司,河南 鄭州 450008)

    豆芽是一種低脂肪、高營養(yǎng),四季可產(chǎn),深受人們喜愛的蔬菜[1-3]。在豆芽中添加4-氯苯氧乙酸鈉和6-芐基腺嘌呤,能夠使豆芽生長加快且產(chǎn)量提高,但由于其會(huì)危害人體健康,國家禁止添加[4-7]。從2014年至2022年3月底,國家市場(chǎng)監(jiān)督管理局共抽檢豆芽19 917次,主要檢測(cè)其中的4-氯苯氧乙酸鈉和6-芐基腺嘌呤,發(fā)現(xiàn)有2 328次不合格,不合格率高達(dá)11.7%[8]。隨著國家對(duì)食品安全監(jiān)測(cè)力度的加大,對(duì)食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)的要求也在不斷提高,特別是檢測(cè)結(jié)果的精確性[9]。由于豆芽的種類不同,其本身特性也不相同,同一種前處理方法處理不同的豆芽基質(zhì),對(duì)4-氯苯氧乙酸鈉和6-芐基腺嘌呤的回收率是否有影響,這對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性具有重要意義[9]。

    本文使用綠豆芽、黃豆芽和黑豆芽3種空白基質(zhì),采用BJS 201703中的前處理方法,對(duì)基質(zhì)樣品進(jìn)行加標(biāo),通過液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry,LC-MS)考察不同豆芽基質(zhì)對(duì)4-氯苯氧乙酸鈉和6-芐基腺嘌呤回收率的影響,為實(shí)際檢測(cè)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)[10]。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    綠豆芽、黃豆芽、黑豆芽,鄭州丹尼斯超市;甲醇、乙腈、甲酸及乙酸銨,上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司;無水硫酸鎂、無水乙酸鈉,天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司;十八烷基鍵合硅膠吸附劑(C18),天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司;4-氯苯氧乙酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液,100 μg·mL-1,阿爾塔科技有限公司;6-芐基腺嘌呤標(biāo)準(zhǔn)溶液,100 μg·mL-1,阿爾塔科技有限公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    1290-6470液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,Agilent公司;Mvlti Reax全能振蕩器,Heidolph公司;Centrifuge5804R高速離心機(jī),Eppendorf公司;ME203電子天平,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;N-EVAPTM112氮吹儀,美國Organomation Associates;SilentCrusher M高速勻漿機(jī),Heidolph公司。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

    準(zhǔn)確量取4-氯苯氧乙酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg·mL-1)和6-芐基腺嘌呤標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg·mL-1)各1 mL,置于100 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,混合均勻,得到混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 μg·mL-1)。分別移取混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 μg·mL-1)10 μL、20 μL、50 μL、100 μL、150 μL 和 200 μL, 用 甲 醇 定 容 到 1 mL, 得 到10 ng·mL-1、20 ng·mL-1、50 ng·mL-1、100 ng·mL-1、150 ng·mL-1和200 ng·mL-1共6個(gè)濃度混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液[10]。

    1.3.2 樣品前處理

    參照BJS 201703前處理方法[10],以綠豆芽、黃豆芽和黑豆芽為基質(zhì),分別做空白加標(biāo)和基質(zhì)加標(biāo)(3個(gè)平行)實(shí)驗(yàn),其中加標(biāo)濃度分別為20 μg·kg-1、40 μg·kg-1和 80 μg·kg-1,通過 LC-MS 測(cè)定回收率。

    1.3.3 儀器條件

    (1)色譜條件。色譜柱:Agilent Eclipse Plus C18(2.1 mm×100 mm,3.5 μm);流動(dòng)相 A:5 mmol·L-1乙酸銨水溶液;流動(dòng)相B:乙腈;流速:0.3 mL·min-1;柱溫:40 ℃;進(jìn)樣量:2 μL。流動(dòng)相洗脫條件見表1。

    表1 流動(dòng)相梯度洗脫條件表

    (2)質(zhì)譜條件。掃描模式:ESI(-);采集模式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè);霧化氣壓力:35 psi;霧化氣溫度:300 ℃;霧化氣流速:10 L·min-1;鞘氣溫度:320 ℃;鞘氣流速:11 L·min-1;毛細(xì)管電壓:3 000 V。目標(biāo)化合物的SRM條件見表2。

    表2 4-氯苯氧乙酸鈉和6-芐基腺嘌呤的SRM條件表

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同豆芽基質(zhì)中4-氯苯氧乙酸鈉回收率的差異

    以綠豆芽、黃豆芽和黑豆芽為基質(zhì),分別向其中加入混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液,加標(biāo)濃度分別為20 μg·kg-1、40 μg·kg-1和 80 μg·kg-1,樣品按照 BJS 201703 中的前處理方法處理后,測(cè)得4-氯苯氧乙酸鈉的加標(biāo)回收率結(jié)果如圖1所示。

    圖1 不同豆芽基質(zhì)中4-氯苯氧乙酸鈉在不同添加濃度下的回收率圖

    由圖1可知,4-氯苯氧乙酸鈉在空白加標(biāo)中的回收率為97.5%~99.6%,在綠豆芽和黑豆芽基質(zhì)中的回收率為78.5%~82.3%,在黃豆芽基質(zhì)中的回收率為65.6%~67.4%。4-氯苯氧乙酸鈉在相同豆芽基質(zhì)中不同添加濃度下的回收率無顯著性差異;4-氯苯氧乙酸鈉在相同添加濃度下,3種豆芽基質(zhì)的回收率均小于空白加標(biāo),其中綠豆芽與黑豆芽基質(zhì)回收率無顯著性差異,綠豆芽與黃豆芽基質(zhì)回收率具有顯著性差異,黑豆芽與黃豆芽基質(zhì)回收率具有顯著性差異[11]。

    2.2 不同豆芽基質(zhì)中6-芐基腺嘌呤回收率的差異

    以綠豆芽、黃豆芽和黑豆芽為基質(zhì),分別向其中加入混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液,加標(biāo)濃度分別為20 μg·kg-1、40 μg·kg-1和 80 μg·kg-1,樣品按照 BJS 201703 中的前處理方法處理后,測(cè)得6-芐基腺嘌呤的加標(biāo)回收率結(jié)果如圖2所示。

    圖2 不同豆芽基質(zhì)中6-芐基腺嘌呤在不同添加濃度下的回收率圖

    由圖2可知,6-芐基腺嘌呤在空白加標(biāo)中的回收率為97.5%~99.6%,在綠豆芽和黑豆芽基質(zhì)中的回收率為73.7%~77.2%,在黃豆芽基質(zhì)中的回收率為62.6%~64.3%。6-芐基腺嘌呤在相同豆芽基質(zhì)中不同添加濃度下的回收率無顯著性差異;6-芐基腺嘌呤在相同添加濃度下,3種豆芽基質(zhì)的回收率均小于空白加標(biāo),其中綠豆芽與黑豆芽基質(zhì)回收率無顯著性差異,綠豆芽與黃豆芽基質(zhì)回收率具有顯著性差異,黑豆芽與黃豆芽基質(zhì)回收率具有顯著性差異[11]。

    3 結(jié)論

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,采用BJS 201703的前處理方法,在綠豆芽和黑豆芽基質(zhì)中4-氯苯氧乙酸鈉和6-芐基腺嘌呤的回收率較好,在黃豆芽基質(zhì)中的回收率偏低[12]?;|(zhì)效應(yīng)對(duì)4-氯苯氧乙酸鈉和6-芐基腺嘌呤回收率有一定的影響,黃豆芽基質(zhì)影響較大,綠豆芽基質(zhì)和黑豆芽基質(zhì)影響較小[13]。為了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,應(yīng)采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,進(jìn)行定量測(cè)定[10]。

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