熒光定量PCR檢測HBV-DNA與ELISA檢測HBsAg對乙型肝炎診斷價值比較

李娟娟 馬瑞霞 沙吾庫·瑪拉提別克

【摘要】目的：對比分析熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測乙型肝炎病毒-脫氧核糖核酸（HBV-DNA）、 酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）檢測乙肝表面抗原（HBsAg）應(yīng)用于臨床診斷乙肝的具體價值。方法：以我院2019年10月—2021年12月期間收治的100例疑似乙肝患者作為本次研究對象，指定同一名實驗室醫(yī)師（具備高年資、高職稱）對其實施熒光定量PCR檢測HBVDNA與ELISA檢測HBsAg。記錄并對比100例疑似乙肝患者HBV-DNA、HBsAg檢測陽性情況，計算HBV-DNA、HBsAg對乙肝診斷敏感性及特異性。結(jié)果：100例疑似乙肝患者經(jīng)HBV-DNA檢測陽性率為49.00%，經(jīng)HBsAg檢測陽性率為57.00%，數(shù)據(jù)對比差異不大（P>0.05）；進一步分析可知100例疑似乙肝患者最終確診乙肝病情52例（52.00%），HBV-DNA檢測對乙肝診斷敏感性為92.31%、特異性為97.92%，HBsAg檢測對乙肝診斷敏感性為90.38%、特異性為79.17%。結(jié)論：應(yīng)用HBV-DNA檢測結(jié)果輔助診斷乙肝病情敏感性及特異性均較優(yōu)。

【關(guān)鍵詞】乙型肝炎；HBV-DNA；HBsAg；診斷價值

Comparison of HBV-DNA detection by fluorescence quantitative PCR and HBsAg detection by ELISA in the diagnosis of hepatitis B

LI Juanjuan， MA Ruixia， Shawuku·Malatibieke

Yili State Friendship Hospital， Yili， Xinjiang 835000， China

【Abstract】Objective： To compare and analyze the specific value of the detection of hepatitis B virus-deoxyribonucleic acid （HBV-DNA） by fluorescence quantitative polymerase chain reaction （PCR） and the detection of hepatitis B surface antigen （HBsAg） by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） in clinical diagnosis of hepatitis B. Methods： 100 suspected hepatitis B patients admitted to our hospital from October 2019 to December 2021 were selected as the research subjects， and the same laboratory physician （with high seniority and professional title） was assigned to detect HBV-DNA by fluorescence quantitative PCR and HBsAg by ELISA.The positive rate of HBV-DNA and HBsAg in 100 suspected hepatitis B patients was recorded and compared， and the sensitivity and specificity of HBV-DNA and HBsAg for the diagnosis of hepatitis B were calculated. Results： The positive rate of HBV-DNA detection in 100 suspected hepatitis B patients was 49.00%， and the positive rate of HBsAg detection was 57.00%，there was little difference in data comparison（P>0.05）；Further analysis showed that 52 cases of 100 suspected hepatitis B patients were finally diagnosed with hepatitis B disease （52.00%），the sensitivity of HBV-DNA detection to hepatitis B was 92.31%，the specificity was 97.92% ， and the sensitivity of HBsAg detection to hepatitis B was 90.38%，the specificity was 79.17%. Conclusion：The sensitivity and specificity of HBV-DNA detection in auxiliary diagnosis of hepatitis B are excellent.

【Key Words】Hepatitis B； HBV-DNA； HBsAg； Diagnostic value

乙型肝炎（下文簡稱乙肝）是臨床發(fā)病率較高的傳染性疾病之一，發(fā)病原因為乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染，發(fā)病后勢必對患者生活質(zhì)量及身心健康造成嚴重影響。早診斷、早治療是現(xiàn)階段臨床處理乙肝患者的主要原則，但醫(yī)學工作者對此病輔助診斷方法并未達成共識[1]?；诖?，本文將以我院2019年10月—2021年12月期間收治的100例疑似乙肝患者作為本次研究對象，對比分析熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）檢測HBV-脫氧核糖核酸（DeoxyriboNucleic Acid，DNA）、 酶聯(lián)免疫吸附測定（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）檢測乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）應(yīng)用于臨床診斷乙肝的具體價值，以利于為今后臨床醫(yī)生接診疑似乙肝病例后合理取舍輔助診斷方法提供可靠參考依據(jù)，現(xiàn)詳述如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

100例疑似乙肝患者中男58例，女42例，年齡19～76歲，平均年齡（48.92±0.27）歲。納入標準：①因乏力、黃疸、惡心、肝區(qū)疼痛等乙肝相關(guān)癥狀前來就診，需接受進一步檢查輔助確診病情；②對本次研究中涉及的熒光定量PCR檢測HBV-DNA、ELISA檢測HBsAg等方法具有良好耐受性；③意識清醒，臨床病歷資料完整；④遵循自愿、獨立、記名等原則簽署知情同意協(xié)議（簽署時間為入組前，該協(xié)議由本院醫(yī)學與倫理研究會擬定）。排除標準：①合并其他肝臟疾??；②合并其他感染性疾?。虎酆喜盒阅[瘤疾?。虎芎喜⒕裣到y(tǒng)疾?。虎萏幱谌焉锲?、產(chǎn)褥期等特殊生理時期女性；⑥意識不清；⑦病歷資料不全；⑧拒絕簽署知情同意協(xié)議。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 100例疑似乙肝患者均接受熒光定量PCR檢測HBV-DNA與ELISA檢測HBsAg，指定同一名實驗室醫(yī)師（具備高年資、高職稱）完成相關(guān)操作。具體如下：（1）儀器設(shè)備：安徽中科中佳HC-3018R高速冷凍離心機、杭州博日LineGene-9600Plus熒光定量PCR分析儀、上?？迫A乙型肝炎病毒核酸定量檢測試劑、帝肯洗板機、帝肯酶標儀、帝肯全自動酶免儀、英科新創(chuàng)酶聯(lián)免疫試劑等；（2）HBV-DNA：于清晨抽取待檢者空腹狀態(tài)下靜脈血液作為檢測樣本，血樣在-20℃條件下保存待用，檢測方法為熒光定量PCR，嚴格按照儀器及試劑相關(guān)說明書要求操作；（3）HBsAg：血樣獲取條件同HBVDNA，將4mL靜脈血樣分離血清后保存在4℃條件下待用，檢測方法為ELISA，嚴格按照儀器及試劑相關(guān)說明書要求操作。

1.2.2 觀察指標 （1）陽性率：記錄并對比100例疑似乙肝患者HBV-DNA、HBsAg檢測陽性情況；（2）敏感性及特異性：以100例疑似乙肝患者隨訪確診結(jié)果為依據(jù)，計算HBV-DNA、HBsAg對乙肝診斷敏感性及特異性。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 26.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料采用（%）表示，進行χ2檢驗，計量資料采用（χ±s）表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 陽性率

100例疑似乙肝患者均順利完成HBV-DNA、HBsAg檢測，經(jīng)分析可知HBV-DNA檢測陽性率為49.00%、HBsAg檢測陽性率為57.00%，數(shù)據(jù)對比無統(tǒng)計學意義（P>0.05），如表1。

2.2 敏感性及特異性

進一步分析100例疑似乙肝患者臨床資料可知，其最終確診乙肝52例（52.00%），計算認為HBVDNA檢測對乙肝診斷敏感性為92.31%、特異性為97.92%，HBsAg檢測對乙肝診斷敏感性為90.38%、特異性為79.17%，具體如表2、表3。

3 討論

乙肝是現(xiàn)階段嚴重威脅患者生活質(zhì)量及身心健康的傳染性疾病之一，如何有效提高此病正確檢出率已成為廣大臨床醫(yī)務(wù)工作者、患者本人及家屬等多方人群共同關(guān)注的熱點問題。既往臨床工作中認為HBeAg檢測結(jié)果對診斷乙肝病情具有重要的指導意義，是一種能夠準確評價機體免疫耐受因子、病毒復制的指標[2]。但近年來研究認為[3]，部分肝癌患者或其他不明原因肝臟疾病患者機體內(nèi)可能存在隱匿性HBV感染，若僅依據(jù)HBeAg檢測結(jié)果則不能夠真實判斷HBV感染及復制情況，此外該指標無法及時、動態(tài)評估HBV傳染危險性。另有研究認為[1]，部分乙肝患者機體內(nèi)HBsAg檢測結(jié)果可能呈陰性，分析原因與HBV基因突變、HBV-DNA與肝細胞染色體整合從而使血清中缺失HBV顆粒等因素有關(guān)[4]。HBV-DNA是HBV遺傳物質(zhì)基因，能夠準確反映機體內(nèi)HBV復制情況[5]。近年來越來越多的研究資料指出，HBV-DNA屬于乙肝病毒的核心組成部分，因此檢測該指標對明確機體HBV感染情況具有直接性、高靈敏性及特異性等優(yōu)勢，相較于乙肝病毒核心顆粒中可溶性蛋白質(zhì)HBeAg而言，在乙肝病情活動期、非活動期等不同時期均對臨床疾病診治工作具有指導意義[6]。本文也已通過回顧性分析100例疑似乙肝患者臨床資料后證實，HBV-DNA檢測陽性率為49.00%，經(jīng)HBsAg檢測陽性率為57.00%，但HBVDNA檢測對乙肝診斷敏感性、特異性均高于HBsAg檢測，此結(jié)論與趙棉[7]等人研究結(jié)果相符。

綜上所述，應(yīng)用HBV-DNA檢測結(jié)果輔助診斷乙肝病情敏感性及特異性均較優(yōu)，值得在今后實際工作中參考使用。

參考文獻

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