血AFP/CEA與HCY聯(lián)合檢測(cè)在診斷原發(fā)性肝細(xì)胞癌中的應(yīng)用

余道武 余天霧 茍毅 楊陸蒙

肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是一種常見(jiàn)的原發(fā)性肝癌，早期缺乏典型的臨床癥狀，就診時(shí)大多已發(fā)展為中晚期，臨床預(yù)后較差［1］。目前，臨床常采用血清甲胎蛋白（Alpha fetoprotein，AFP）聯(lián)合超聲檢查方法來(lái)診斷，但研究顯示，AFP對(duì)一些早期較小的肝癌診斷敏感性不理想［2］。尋找新的高敏感性的指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，以提高臨床HCC 的早期診斷率具有重要意義。癌胚抗原（Carcino-embryonic antigen，CEA）是一種廣譜的腫瘤標(biāo)識(shí)物，在多種惡性腫瘤中具有陽(yáng)性表達(dá)［3］。臨床研究顯示，AFP/CEA 可以提高AFP 和CEA 對(duì)HCC 的診斷價(jià)值，更準(zhǔn)確地區(qū)分轉(zhuǎn)移性和原發(fā)性肝癌［4］。血漿同型半胱氨酸（Homocysteine，HCY）是蛋氨酸代謝過(guò)程中的中間產(chǎn)物，其合成與代謝與肝功能密切相關(guān)，可用于臨床HCC 的診斷［5］。本研究將分析血AFP/CEA 與HCY 聯(lián)合檢測(cè)在診斷HCC 中的應(yīng)用價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年6月到2018年9月在重慶醫(yī)科大學(xué)附屬永川醫(yī)院收治的85 例HCC 患者作為HCC組。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)組織學(xué)穿刺活檢確診為HCC 患者［6］。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其它系統(tǒng)惡性腫瘤者；合并嚴(yán)重心腦血管系統(tǒng)疾病者；合并免疫系統(tǒng)疾病者；妊娠期或哺乳期患者；合并血液系統(tǒng)疾病者；臨床資料不完整者。HCC 患者根據(jù)UICC/AJCC 第7 版TNM 分期［7］，Ⅰ期28 例，Ⅱ期57 例。選取同期收治的100 例非HCC 患者為對(duì)照組，疾病類(lèi)型：慢性肝炎48 例、肝硬化38 例、繼發(fā)性肝癌8 例、其它肝臟病變者6 例。本研究經(jīng)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)，受試者或家屬均簽署知情同意書(shū)。

1.2 檢測(cè)指標(biāo)

記錄兩組患者的性別、年齡、吸煙史（連續(xù)或累計(jì)吸煙6 個(gè)月或以上）、飲酒史（存在長(zhǎng)期飲酒超過(guò)5年，且平均每天飲酒量＞40 g/d）、Child-Pugh 分級(jí)［8］等一般資料。于入院第2 d 清晨，采集空腹血液3～5 mL，離心（3 500 rpm，r=10 cm，10 min），取上清。采用ELISA 法檢測(cè)HCY 水平（試劑盒購(gòu)自上海信裕生物科技有限公司），采用貝克曼Access 2全自動(dòng)發(fā)光分析儀及配套檢測(cè)試劑檢測(cè)患者血清AFP、CEA 水平，嚴(yán)格按操作說(shuō)明進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料均以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料均以n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；采用多因素Logistic 回歸分析影響HCC發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素；采用ROC 分析AFP/CEA 聯(lián)合HCY 對(duì)HCC 的診斷價(jià)值，曲線(xiàn)下面積（AUC）表示預(yù)測(cè)價(jià)值；以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般臨床資料

HCC 組飲酒史、吸煙史所占比例明顯高于非HCC 組，血HCY、AFP、CEA 和AFP/CEA 水平明顯高于非HCC組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 HCC 患者的一般資臨床料［n（%），（±s）］Table 1 General clinical data of HCC patients［n（%），（±s）］

表1 HCC 患者的一般資臨床料［n（%），（±s）］Table 1 General clinical data of HCC patients［n（%），（±s）］

一般資料年齡性別n t/χ2值0.685 0.441 P 值0.494 0.507飲酒史7.228 0.007吸煙史Child-Pugh分級(jí)男女有無(wú)有無(wú) A B C 4.736 0.030 185 153 32 70 115 57 128 48 104 33 185 185 185 185 HCC 組（n=85）52.34±10.27 72（84.71）13（15.29）41（48.24）44（51.76）33（38.82）52（61.18）18（21.18）50（58.82）17（20.00）20.85±6.41 223.64±107.45 9.26±4.71 22.47±6.57對(duì)照組（n=100）51.27±10.85 81（81.00）19（19.00）29（29.00）71（71.00）24（24.00）76（76.00）30（30.00）54（54.00）16（16.00）14.76±4.22 41.52±15.76 3.71±1.24 14.16±4.27 1.981 0.376 HCY（μmol/L）AFP（ng/mL）CEA（ng/mL）AFP/CEA 7.733 16.746 11.335 10.340＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.2 多因素Logstic 回歸分析影響HCC 發(fā)生的因素

選擇2.1 中影響HCC 發(fā)生的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量進(jìn)行賦值，非HCC=0，HCC=1；無(wú)飲酒史=0，有飲酒史=1；無(wú)吸煙史=0，有吸煙史=1。采用直接進(jìn)入法將單因素分析有差異的變量帶入方程進(jìn)行Logstic 回歸分析，結(jié)果顯示，合并飲酒史、HCY 升高、AFP 升高、CEA 升高和AFP/CEA 比值升高均為影響HCC 發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 多因素Logstic 回歸分析影響HCC 發(fā)生的因素Table 2 Multivariate Logstic regression analysis of factors affecting the occurrence of HCC

2.3 血AFP/CEA 與HCY 聯(lián)合檢測(cè)對(duì)HCC 的診斷價(jià)值

AFP/CEA 聯(lián) 合HCY 診 斷HCC 的AUC 為0.918 優(yōu)于單一檢測(cè)（P＜0.05）。見(jiàn)表3、圖1。

表3 血AFP/CEA 與HCY 聯(lián)合檢測(cè)診斷HCC 的ROC 特征Table 3 ROC characteristics of combined detection of blood AFP/CEA and HCY in the diagnosis of HCC

圖1 血AFP/CEA 與HCY 聯(lián)合檢測(cè)對(duì)HCC 的診斷價(jià)值Figure 1 The diagnostic value of combined detection of blood AFP/CEA and HCY for HCC

2.4 HCC 患者血AFP/CEA 和HCY 與TNM 分期之間的關(guān)系

Ⅱ期患者血清HCY、AFP 和AFP/CEA 水平明顯高于Ⅰ期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 HCC 患者血AFP/CEA 和HCY 與TNM 分期之間的關(guān)系（±s）Table 4 The relationship between blood AFP/CEA and HCY and TNM staging of HCC patients（±s）

表4 HCC 患者血AFP/CEA 和HCY 與TNM 分期之間的關(guān)系（±s）Table 4 The relationship between blood AFP/CEA and HCY and TNM staging of HCC patients（±s）

nⅠ期Ⅱ期t 值P 值28 57 HCY（μmol/L）18.21±5.47 22.16±6.13 2.890 0.005 AFP（ng/mL）190.59±58.46 239.67±70.34 3.188 0.002 CEA（ng/mL）8.75±2.55 9.51±2.86 1.192 0.237 AFP/CEA 21.57±5.49 24.65±6.31 2.204 0.030

3 討論

HCC 是一種常見(jiàn)的惡性腫瘤，目前臨床醫(yī)師主要根據(jù)患者病情發(fā)展采取個(gè)體化的綜合治療，早期診斷和治療是改善患者預(yù)后的關(guān)鍵。AFP 是目前評(píng)估HCC 最敏感最常用的指標(biāo)，但近年來(lái)研究顯示，AFP 對(duì)于早期肝癌的診斷存在一定的局限性［9］。本研究分析了影響HCC 發(fā)生的因素，發(fā)現(xiàn)合并飲酒史為影響HCC 發(fā)生的危險(xiǎn)因素。廖玉宜等［10］研究顯示，長(zhǎng)期飲酒會(huì)使血液中乙醇濃度升高，導(dǎo)致酒精性肝炎和肝硬化等的發(fā)生，增加HCC 發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，與本研究結(jié)果基本一致。

本研究中，HCC 患者體內(nèi)的AFP 和CEA 水平顯著升高。AFP 為一種白蛋白家族的糖蛋白，參與調(diào)節(jié)機(jī)體多種生物學(xué)過(guò)程，在多種腫瘤中均可表現(xiàn)出較高濃度，臨床常用于HCC 的診斷［11］。CEA 是從結(jié)腸癌和胚胎組織中提取的一種可溶性糖蛋白，在多種惡性腫瘤中均具有高表達(dá)［12］。本研究中，AFP 升高、CEA 升高和AFP/CEA 比值升高等均為影響HCC 發(fā)生的獨(dú)立因素，且AFP/CEA比值對(duì)HCC 的診斷價(jià)值高于AFP 或CEA 單獨(dú)診斷，提示臨床可優(yōu)先選擇AFP/CEA 診斷HCC。臨床研究顯示，CEA 是一種廣譜的腫瘤相關(guān)抗原，不能作為診斷某種惡性腫瘤的特異性指標(biāo)，臨床常采用聯(lián)合診斷來(lái)提高其診斷價(jià)值［13］。王錚等［14］研究顯示，AFP 與CEA 聯(lián)合檢測(cè)可以提高對(duì)HCC 的診斷價(jià)值，與本研究結(jié)果基本一致，提示臨床可優(yōu)先采用AFP/CEA 進(jìn)行HCC 診斷。

本研究中，HCC 患者體內(nèi)的HCY 水平顯著升高，且HCY 水平升高是影響HCC 發(fā)生的獨(dú)立因素。HCY 是一種含硫氨基酸，在體內(nèi)有兩種代謝途徑，少部分HCY 在維生素B6 的參與下生成半胱氨酸，大部分在維生素B12 和葉酸的作用下生成蛋氨酸［15］。肝臟是HCY 的主要代謝場(chǎng)所，肝功能異?？捎绊慔CY 在體內(nèi)的代謝過(guò)程，導(dǎo)致血HCY 累積，水平異常升高。肖健等［16］研究顯示，血清HCY 水平與肝臟的病變程度有關(guān)，有望應(yīng)用于肝臟疾病的診斷和預(yù)后評(píng)估。張庚等［17］研究顯示，血漿HCY 水平可以在一定程度上反映肝臟的損傷程度，對(duì)HCC 具有一定的診斷價(jià)值，與本研究結(jié)果基本一致，提示臨床可根據(jù)患者的HCY 水平預(yù)測(cè)其肝功能損傷程度。本研究中，AFP/CEA 比值聯(lián)合HCY 對(duì)HCC 患者的臨床診斷價(jià)值顯著高于單獨(dú)診斷，提示臨床可聯(lián)合檢測(cè)AFP/CEA 和HCY，以提高HCC 的檢出率。本研究分析了HCC 患者血HCY、AFP 和AFP/CEA 水平與TNM 分期之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)TNM 分期為Ⅱ期組患者血清HCY、AFP 和AFP/CEA 水平明顯高于Ⅰ期組。結(jié)合本研究結(jié)果說(shuō)明，臨床醫(yī)師可根據(jù)HCY、AFP 和AFP/CEA 水平評(píng)估HCC 患者的病情發(fā)展，指導(dǎo)臨床治療。

綜上所述，合并飲酒史、HCY 升高、AFP 升高、CEA 升高和AFP/CEA 比值升高均為影響HCC 發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，AFP/CEA 比值聯(lián)合HCY 對(duì)HCC 患者的臨床診斷價(jià)值顯著高于AFP/CEA 或者HCY 單獨(dú)診斷，臨床可聯(lián)合檢測(cè)患者的血清AFP/CEA 和HCY，以提高HCC 的診斷率。