2014年～2020年天津凡納濱對(duì)蝦苗種主要病毒攜帶情況調(diào)查

文/孫悅 劉健 葉桂煊 王禹 潘國(guó)峰 楊凱 賈文濤

作者單位：1.天津市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 2.天津市水產(chǎn)研究所3.天津市農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心

凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖是天津市水產(chǎn)養(yǎng)殖的重要產(chǎn)業(yè)之一。在引進(jìn)凡納濱對(duì)蝦的早期，天津市苗種大多從我國(guó)南方地區(qū)調(diào)運(yùn)，運(yùn)輸?shù)拿绶N包括無(wú)節(jié)幼體與仔蝦。隨著其養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大，天津市開(kāi)始自行繁育苗種，但隨之而來(lái)的病害問(wèn)題影響對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。近年來(lái)，養(yǎng)殖者更加注重病害的預(yù)防，特別是越來(lái)越重視苗種的質(zhì)量安全，因此檢測(cè)對(duì)蝦苗種是否攜帶病原顯得尤為重要。

白斑綜合征（WSD）和傳染性皮下及造血組織壞死?。↖HHN）這兩種疫病被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織劃為必須通報(bào)的甲殼類(lèi)動(dòng)物疫病，同時(shí)也列入我國(guó)一二類(lèi)動(dòng)物疫病名錄中。針對(duì)這一現(xiàn)狀，從2014年～2020年，天津市持續(xù)開(kāi)展凡納濱對(duì)蝦苗種階段感染白斑病毒（WSSV）與傳染性皮下和造血組織壞死病毒（IHHNV）的調(diào)查，分別從外購(gòu)苗種和自繁苗種兩方面開(kāi)展對(duì)蝦苗種病毒抽樣檢測(cè)，為凡納濱對(duì)蝦病害防控提供參考。

一、材料與方法

（一）樣品采樣

2014年～2020年，每年采樣時(shí)間為4月～6月，采樣對(duì)象為凡納濱對(duì)蝦苗種，規(guī)格1cm～1.5cm，每份樣品不少于300尾。樣品來(lái)源為兩部分，一部分以天津機(jī)場(chǎng)為作為流通領(lǐng)域的監(jiān)測(cè)點(diǎn)，針對(duì)從南方地區(qū)通過(guò)空運(yùn)方式抵達(dá)天津的苗種進(jìn)行抽檢；另一部分是在對(duì)蝦育苗階段直接進(jìn)入苗種場(chǎng)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)抽檢。采樣方法依據(jù)《水生動(dòng)物產(chǎn)地檢疫采樣技術(shù)規(guī)范》（SC/T7103-2008）規(guī)定進(jìn)行。

（二）實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法分別采用GB/T 28630.2-2012《白斑綜合征（WSD）診斷規(guī)程第2部分：套式PCR檢測(cè)法》與GB/T25878-2010《對(duì)蝦傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）檢測(cè)PCR法》進(jìn)行檢測(cè)。

二、檢測(cè)結(jié)果

（一）總體檢測(cè)情況

2014年～2020年共采集凡納濱對(duì)蝦苗種樣品1118個(gè)，檢出WSSV陽(yáng)性樣品26個(gè)，檢出率為2.33%；檢出IHHNV陽(yáng)性樣品82個(gè)，檢出率為7.33%。具體結(jié)果詳見(jiàn)表1。

表1 2014年～2020年天津市凡納濱對(duì)蝦苗種抽檢陽(yáng)性檢出率（單位：%）

（二）流通領(lǐng)域苗種檢測(cè)情況

2014年～2019年持續(xù)在天津機(jī)場(chǎng)開(kāi)展采樣檢測(cè)工作。2020年起受新冠肺炎疫情影響，未能持續(xù)開(kāi)展該監(jiān)測(cè)點(diǎn)的苗種抽檢工作。具體結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 2014年～2020年天津機(jī)場(chǎng)凡納濱對(duì)蝦苗種抽檢陽(yáng)性檢出率（單位：%）

（三）育苗場(chǎng)抽檢情況

2014年起每年春季進(jìn)入對(duì)蝦育苗場(chǎng)進(jìn)行采樣檢測(cè)，天津市重點(diǎn)育苗場(chǎng)主要分布在濱海新區(qū)漢沽、大港和塘沽。具體結(jié)果詳見(jiàn)表3。

表3 2014年～2020年天津市育苗場(chǎng)凡納濱對(duì)蝦苗種抽檢陽(yáng)性檢出率（單位：%）

三、結(jié)果分析與討論

（一）整體結(jié)果分析

連續(xù)7年的檢測(cè)結(jié)果顯示，WSSV與IHHNV兩種疫病病原目前均已長(zhǎng)期存在于天津市凡納濱對(duì)蝦苗種階段，整體來(lái)看IHHNV的陽(yáng)性檢出率普遍比WSSV檢出率要高。

（二）苗種來(lái)源分析

從天津機(jī)場(chǎng)監(jiān)測(cè)點(diǎn)6年的檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，凡納濱對(duì)蝦苗種普遍存在攜帶WSSV與IHHNV的情況。2014年與2015年IHHNV的檢出率比WSSV檢出率高，而2018年反之，至2019年兩種病原檢出率相等并達(dá)到最高峰12.5%。雖然其中有的年限未曾檢出，但可以看出在調(diào)運(yùn)苗種中這兩種病原的都存在一定的感染風(fēng)險(xiǎn)，且感染風(fēng)險(xiǎn)呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。

從育苗場(chǎng)抽樣檢測(cè)的結(jié)果來(lái)看，近幾年的WSSV病原陽(yáng)性率呈逐漸上升趨勢(shì)，到2020年為7.32%，而IHHNV陽(yáng)性率雖然有所起伏但每年都有檢出，至2020年檢出率達(dá)到19.51%。同樣，IHHNV的陽(yáng)性檢出率高于WSSV的檢出率。

（三）討論

通過(guò)以天津機(jī)場(chǎng)為監(jiān)測(cè)點(diǎn)對(duì)空運(yùn)到天津市的對(duì)蝦苗種進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示調(diào)運(yùn)的苗種中存在攜帶兩種病原的現(xiàn)象，因此養(yǎng)殖單位在外購(gòu)苗種的時(shí)候特別需要注意苗種質(zhì)量。通過(guò)對(duì)天津市重點(diǎn)育苗場(chǎng)采樣檢測(cè)，確定當(dāng)?shù)刈孕蟹庇姆布{濱對(duì)蝦苗種也存在這兩種病原的感染問(wèn)題，因此在自行繁育生產(chǎn)過(guò)程中需要加強(qiáng)病原防控措施。目前針對(duì)病毒性疾病尚無(wú)有效治療方法，還是需要加強(qiáng)預(yù)防措施，通過(guò)避免接觸感染源的方式，從源頭上切斷病毒感染，減少病毒性疾病的發(fā)生。

四、防控建議

（一）嚴(yán)格把好渠道關(guān)

外購(gòu)對(duì)蝦苗種首先要嚴(yán)把渠道關(guān)。對(duì)蝦包括幼苗的地區(qū)貿(mào)易、長(zhǎng)途運(yùn)輸是造成WSSV迅速蔓延和傳播的主要原因。因此建議養(yǎng)殖者在引進(jìn)苗種時(shí)除了注重苗種活力較好這一標(biāo)準(zhǔn)之外，更應(yīng)該首選具有檢疫合格證的苗種，避免因苗種攜帶病原引發(fā)的后期養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。如果購(gòu)買(mǎi)了沒(méi)有檢疫合格證的苗種，應(yīng)及時(shí)向當(dāng)?shù)貪O業(yè)主管部門(mén)申報(bào)進(jìn)行水產(chǎn)苗種檢疫。

（二）注重親蝦檢疫

對(duì)于自繁苗種的育苗場(chǎng)來(lái)說(shuō)，應(yīng)高度重視親蝦的檢疫。根據(jù)目前資料顯示，WSSV與IHHNV這兩種病毒都可能通過(guò)繁殖傳播給下一代。WSSV可能在卵細(xì)胞表面垂直傳播，健康或輕微感染病毒的對(duì)蝦能夠有效產(chǎn)卵，但攜帶的WSSV具有高毒力。同樣，感染IHHNV后存活下來(lái)的對(duì)蝦可終生攜帶病毒，并垂直傳播給下一代。避免垂直傳播造成苗種感染病原，是整個(gè)苗種繁育過(guò)程疫病防控的關(guān)鍵。注重親蝦的檢驗(yàn)檢疫，確保親本不攜帶疫病病原，才能繁育出健康的苗種。

（三）加強(qiáng)環(huán)境因素的監(jiān)測(cè)

在日常的生產(chǎn)管理中，注重環(huán)境因子的監(jiān)測(cè)也是疫病防控的重要環(huán)節(jié)。經(jīng)口傳播是感染W(wǎng)SSV的主要途徑，對(duì)蝦因?yàn)閿z食攜帶WSSV的浮游動(dòng)物而被感染W(wǎng)SSV的情況已經(jīng)被相關(guān)研究證實(shí)。天然餌料中存在攜帶WSSV病原的生物如鹵蟲(chóng)、輪蟲(chóng)、橈足類(lèi)等，都可以作為WSSV的宿主并保持病毒的感染力。幼蝦更容易感染IHHNV，且該病毒對(duì)幼蝦有更強(qiáng)的致病性，對(duì)蝦苗種之間可能通過(guò)互食病死蝦發(fā)生水平傳播。同時(shí)凡納濱對(duì)蝦攜帶了IHHNV往往不表現(xiàn)出明顯的病理癥狀，但會(huì)引起其發(fā)生慢性矮小殘缺綜合征，從而給養(yǎng)殖生產(chǎn)造成一定的損失，因此應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)生物餌料等環(huán)境因子的監(jiān)測(cè)。