2型糖尿病患者血清S100A12、sRAGE與頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度的相關(guān)性研究*

趙郁松，梅笑雪

揚(yáng)州大學(xué)附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科，江蘇揚(yáng)州 225000

2型糖尿病是一種慢性疾病，以糖代謝紊亂為主要特征。大血管病變易導(dǎo)致2型糖尿病患者病死率增高，而動(dòng)脈粥樣硬化是其主要病理基礎(chǔ)[1]。頸動(dòng)脈是全身動(dòng)脈粥樣硬化的窗口，頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度(CIMT)是臨床上判斷動(dòng)脈粥樣硬化的標(biāo)志。動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生機(jī)制尚不明確，有研究認(rèn)為，動(dòng)脈粥樣硬化與炎性反應(yīng)、血管內(nèi)皮損傷密切相關(guān)[2]。S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)是S100鈣結(jié)合蛋白家族的一員。S100A12主要表達(dá)于單核巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞中，可影響鈣離子的結(jié)合狀態(tài)，參與體內(nèi)多種炎性反應(yīng)[3]。呂曉佟等[4]研究發(fā)現(xiàn)，急性心肌梗死患者血清中S100A12水平明顯升高，且S100A12與冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)呈正相關(guān)。晚期糖基化終產(chǎn)物受體(RAGE)是免疫球蛋白超家族受體成員之一，可與不同配體結(jié)合發(fā)揮不同的病理作用?？扇苄訰AGE(sRAGE)抑制細(xì)胞表面RAGE和其他RAGE-配體受體的結(jié)合，可減輕RAGE誘導(dǎo)的炎性反應(yīng)[5]。LIM等[6]研究發(fā)現(xiàn)，sRAGE可通過(guò)結(jié)合S100鈣結(jié)合蛋白配體來(lái)調(diào)控核因子κB(NF-κB)信號(hào)傳導(dǎo)通路。目前S100A12和sRAGE在2型糖尿病大血管病中的作用鮮有報(bào)道?；诖?，本研究將分析血清S100A12和sRAGE與2型糖尿病患者CIMT的相關(guān)性，以期為2型糖尿病大血管病變防治提供理論依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年6月至2020年12月本院收治的2型糖尿病患者116例為觀察組，其中男54例，女62例；年齡35～75歲，平均(56.17±11.42)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《中國(guó)2型糖尿病防治指南(2013年版)》[7]；(2)在本院接受CIMT測(cè)量；(3)愿意配合此研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并糖尿病酮癥酸中毒；(2)合并惡性腫瘤或嚴(yán)重肝、腎疾??；(3)合并內(nèi)分泌疾病(生長(zhǎng)激素分泌異常、甲狀腺異常疾病、腎上腺疾病)；(4)有嚴(yán)重感染。另外選取同期70例在本院體檢健康者為對(duì)照組，其中男34例，女36例；年齡35～75歲，平均(56.88±11.04)歲。本研究受試者均知情同意并簽署知情同意書(shū)，且本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2檢測(cè)指標(biāo) 收集所有研究對(duì)象體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、空腹血糖、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)，并收集患者糖尿病病程。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集 在所有研究對(duì)象清晨空腹時(shí)取靜脈血3～4 mL，在室溫狀態(tài)下靜置20 min，離心，留上清液裝于無(wú)RNA酶的EP管中，存放于-80 ℃冰箱中，待測(cè)。

1.3.2檢測(cè)血清中S100A12、sRAGE水平 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定血清S100A12、sRAGE水平，分別按照S100A12 ELISA試劑盒(南京森貝伽生物科技有限公司)、sRAGE ELISA試劑盒(南京森貝伽生物科技有限公司)說(shuō)明書(shū)指示進(jìn)行操作。

1.4CIMT測(cè)量 受試者去枕仰臥，頸后仰，頭偏向外側(cè)，由同一醫(yī)師操作，用8～10 Hz探頭分別檢測(cè)雙側(cè)頸總動(dòng)脈、頸總動(dòng)脈分叉部、頸內(nèi)動(dòng)脈顱外段的CIMT，計(jì)算以上部位的CIMT平均值。荷蘭飛利浦HD-15型彩色多普勒超聲診斷儀測(cè)定CIMT。根據(jù)《中國(guó)高血壓防治指南2010》[8]，定義CIMT≥0.9 mm為內(nèi)膜增厚，將觀察組分為CIMT正常組(CIMT<0.9 mm)51例，CIMT增厚組(CIMT≥0.9 mm)65例。依據(jù)CIMT將CIMT增厚組進(jìn)一步分為CIMT初級(jí)增厚組(0.9 mm≤CIMT<1.3 mm)37例和頸動(dòng)脈斑塊組(CIMT≥1.3 mm)28例。

2 結(jié) 果

2.1各組臨床資料比較 對(duì)照組、CIMT正常組、CIMT增厚組性別、年齡、HDL-C、TC、TG水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與對(duì)照組比較，CIMT增厚組、CIMT正常組BMI、空腹血糖、血清LDL-C水平較高(P<0.05)；與CIMT正常組比較，CIMT增厚組空腹血糖、血清LDL-C水平較高(P<0.05)，病程較長(zhǎng)(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 各組患者臨床資料比較(n/n或

組別nLDL-C(mmol/L)HDL-C(mmol/L)TC(mmol/L)TG(mmol/L)CIMT增厚組653.67±0.79ab1.12±0.335.12±1.452.98±0.99CIMT正常組513.06±0.69a1.19±0.324.98±1.322.78±0.88對(duì)照組702.48±0.661.24±0.294.72±1.022.63±0.75F/t/χ246.5572.4931.7342.702P<0.0010.0850.1800.070

2.2各組血清S100A12、sRAGE水平比較 與對(duì)照組比較，CIMT增厚組、CIMT正常組血清S100A12水平較高(P<0.05)，血清sRAGE水平較低(P<0.05)；與CIMT正常組比較，CIMT增厚組血清S100A12水平較高(P<0.05)，血清sRAGE水平較低(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 各組血清S100A12、sRAGE水平比較

2.3CIMT增厚患者血清S100A12、sRAGE水平比較 與CIMT初級(jí)增厚組比較，頸動(dòng)脈斑塊組血清S100A12水平較高(P<0.05)，血清sRAGE水平較低(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 兩組血清S100A12、sRAGE水平比較

2.42型糖尿病患者血清S100A12、sRAGE與CIMT的相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，2型糖尿病患者血清S100A12水平與CIMT呈正相關(guān)(r=0.506，P<0.05)；血清sRAGE水平與CIMT呈負(fù)相關(guān)(r=-0.518，P<0.05)。

2.5影響2型糖尿病CIMT增厚的多因素Logistic回歸分析 以2型糖尿病CIMT厚度為因變量，將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量納入多因素結(jié)果中進(jìn)行分析，分析結(jié)果顯示，S100A12水平升高、sRAGE水平降低是影響2型糖尿病CIMT增厚的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 影響2型糖尿病CIMT增厚的多因素Logistic回歸分析

3 討 論

2型糖尿病患者機(jī)體長(zhǎng)期處于高糖環(huán)境，導(dǎo)致患者大血管及微血管損傷，增加了患者發(fā)生大血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)[9]。臨床上有研究提示，2型糖尿病患者多數(shù)合并動(dòng)脈粥樣硬化，最終可能導(dǎo)致冠心病和腦卒中發(fā)生，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，且炎性反應(yīng)、血管內(nèi)皮損傷均可導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生[10]。

S100A12又稱(chēng)為RAGE結(jié)合蛋白。S100A12表達(dá)上調(diào)可參與激活炎性細(xì)胞，促使炎性細(xì)胞遷移、趨化，逐漸加劇動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中的血管炎癥[11]。有研究報(bào)道，S100A12A促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化[12]。TONDERA等[13]用熒光放射實(shí)驗(yàn)證明，S100A12可與CD36結(jié)合，并將CD36募集到細(xì)胞膜上，從而調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化形成。本研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組、CIMT正常組、CIMT增厚組血清S100A12水平依次升高，頸動(dòng)脈斑塊組血清S100A12水平明顯高于CIMT初級(jí)增厚組，提示S100A12可能參與了頸動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程，進(jìn)一步探討發(fā)現(xiàn)2型糖尿病患者血清S100A12水平與CIMT呈正相關(guān)，經(jīng)多因素Logistic回歸分析證實(shí)S100A12水平升高是2型糖尿病CIMT增厚的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示S100A12可能與頸動(dòng)脈粥樣硬化具有密切關(guān)系，具有作為臨床上早期判斷頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的生物指標(biāo)的潛力。另外，SCICALI等[14]研究發(fā)現(xiàn)，高膽固醇血癥患者血漿中S100A12水平明顯高于非高膽固醇血癥患者。本研究發(fā)現(xiàn)，CIMT增厚組血清LDL-C水平高于CIMT正常組，猜測(cè)S100A12促進(jìn)2型糖尿病患者頸動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程可能與LDL-C水平升高有關(guān)。

RAGE表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞和單核細(xì)胞中。RAGE可與S100家族蛋白、高級(jí)糖基化終產(chǎn)物(AGE)結(jié)合，調(diào)控炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)從而參與血管內(nèi)皮損傷引起的動(dòng)脈粥樣硬化，sRAGE可阻止RAGE激活A(yù)GE，減輕炎癥損傷，延緩動(dòng)脈粥樣硬化[15]。有文獻(xiàn)報(bào)道，血漿中高水平sRAGE可降低CIMT增厚速度，該過(guò)程中sRAGE阻止RAGE與配體結(jié)合，抑制促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生、白細(xì)胞活化、遷移和組織浸潤(rùn)[16]。本研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組、CIMT正常組、CIMT增厚組血清sRAGE水平依次降低，頸動(dòng)脈斑塊組血清sRAGE水平明顯低于CIMT初級(jí)增厚組，提示血清sRAGE水平可能對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程有影響，綜合上述研究猜測(cè)高水平sRAGE在機(jī)體中可能通過(guò)結(jié)合S100A12等配體，減輕炎癥損傷，延緩頸動(dòng)脈粥樣硬化，患者血清中sRAGE水平降低，無(wú)法阻止頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生，致使2型糖尿病患者表現(xiàn)出CIMT增厚。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病患者血清sRAGE水平與CIMT呈負(fù)相關(guān)，經(jīng)多因素Logistic回歸分析證實(shí)，sRAGE水平降低是2型糖尿病CIMT增厚的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示血清sRAGE可能是頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的相關(guān)因素，血清sRAGE水平降低可能促使頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生。

綜上所述，血清S100A12與2型糖尿病患者CIMT呈正相關(guān)，sRAGE與2型糖尿病患者CIMT呈負(fù)相關(guān)，血清S100A12水平升高、sRAGE水平降低是2型糖尿病患者CIMT增厚的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究為臨床上闡明2型糖尿病患者頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生機(jī)制奠定基礎(chǔ)，但血清S100A12、sRAGE與2型糖尿病患者頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的作用機(jī)制尚未明確，仍需進(jìn)一步深入研究。