• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    三種傳統(tǒng)發(fā)酵食品中酵母菌的分離鑒定與特性分析

    2022-04-13 06:46:42謝引榮范文廣曹瑩瑩任海偉
    中國(guó)釀造 2022年3期
    關(guān)鍵詞:紅茶菌馬克斯假絲

    田 輝,謝引榮,王 琰,馬 卓,范文廣,趙 萍,曹瑩瑩,任海偉

    (蘭州理工大學(xué) 生命科學(xué)與工程學(xué)院,甘肅 蘭州 730050)

    發(fā)酵食品可提高食品的營(yíng)養(yǎng)和安全性,改善食品感官特性[1]。而酵母菌是許多發(fā)酵食品中必不可少的功能性微生物之一,在工業(yè)食品生產(chǎn)和傳統(tǒng)發(fā)酵食品中都發(fā)揮著重要作用[2]。酵母菌作為單細(xì)胞真核微生物,長(zhǎng)期以來(lái)不僅被用于面包和酒精類食品生產(chǎn)中,在其他發(fā)酵食品生產(chǎn)中也具有主導(dǎo)作用,如傳統(tǒng)發(fā)酵類的植物、乳制品、魚(yú)類和肉類[3]。酵母菌主要在食品發(fā)酵中起到產(chǎn)生酒精、改善質(zhì)地、酸化保藏、產(chǎn)生抑菌性物質(zhì)、提高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、去除抗?fàn)I養(yǎng)因子以及產(chǎn)生生物活性肽和維生素等作用[4]。

    自然界中發(fā)現(xiàn)的酵母菌已有1 500多種[5]。傳統(tǒng)發(fā)酵食品中酵母種類也很多,且不同食品中的酵母菌種類也有差異,如傳統(tǒng)發(fā)酵乳中的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、馬克斯克魯維酵母(Kluyveromyces marxianus)、庫(kù)德畢赤酵母菌(Pichia kudriavzevii)及其他畢赤酵母屬(Pichiaspp.)菌株;發(fā)酵肉制品中的漢遜德巴利酵母(Debaryomyce shansenii)、誕沫假絲酵母(Candida zeylanoides)及解脂耶羅威亞酵母(Yarrowia lipolytica);發(fā)酵橄欖、可可和咖啡中的釀酒酵母、仙人掌有孢漢遜酵母(Hanseniaspora opuntiae)、畢赤酵母屬、威克漢姆酵母屬(Wickerhamomycessp.)及假絲酵母屬(Candidaspp.)[3]。除酵母菌的發(fā)酵特性及有益作用外,部分酵母菌通過(guò)產(chǎn)生水解酶類、形成氣體、分解有機(jī)酸、產(chǎn)生色素或異味等,導(dǎo)致食品(以高酸性或高糖度食品為主)腐敗[6]。

    我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵食品種類豐富、原料多樣、所含菌種資源豐富。微生物的多樣性研究,有助于闡明傳統(tǒng)食品的發(fā)酵機(jī)制及開(kāi)發(fā)自主產(chǎn)權(quán)發(fā)酵劑,或有效控制腐敗微生物生長(zhǎng),保障食品安全。紅茶菌、藏靈菇及酸菜作為我國(guó)傳統(tǒng)自制發(fā)酵食品,其營(yíng)養(yǎng)特性及所含有的微生物種類逐漸受到人們重視,不同地區(qū)和培養(yǎng)環(huán)境下,其中的酵母菌種類和特性具有一定差異性,有待深入研究及利用[7-9]。本研究從紅茶菌、藏靈菇及甘肅地區(qū)酸菜中分離和鑒定酵母菌,并對(duì)菌株發(fā)酵性能進(jìn)行分析,以期為酵母菌資源利用提供數(shù)據(jù)支持。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    1.1.1 樣品

    紅茶菌:采集自甘肅省蘭州市和陜西省寶雞市,各1份;藏靈菇:采集自山東省德州市和安徽省蕪湖市,各1份;酸菜:采集自甘肅省永登市2個(gè)不同農(nóng)戶,各1份。

    1.1.2 培養(yǎng)基

    紅茶菌活化培養(yǎng)基:綠茶2 g,蔗糖15~20 g,蒸餾水500 mL,煮沸15~20 min,于超凈臺(tái)中用4層無(wú)菌紗布過(guò)濾,密封后備用。

    馬鈴薯葡萄糖瓊脂(potato dextrose agar,PDA)改良培養(yǎng)基:200 g去皮土豆(切塊)煮沸20 min后,過(guò)濾冷卻,添加瓊脂粉16 g,蛋白胨10 g,葡萄糖20 g,氯霉素0.1 g,蒸餾水定容至1 000 mL,121 ℃滅菌20 min。

    PDA培養(yǎng)基:200 g去皮馬鈴薯(切塊)煮沸20 min,冷卻后用四層紗布過(guò)濾,加葡萄糖20 g,固體培養(yǎng)基加瓊脂粉16 g,蒸餾水定容至1 000 mL,121 ℃滅菌20 min。

    1.1.3 試劑

    亞甲基藍(lán)、重鉻酸鉀、無(wú)水乙醇、蛋白胨、氯霉素、葡萄糖、蔗糖、乳糖及瓊脂粉(均為分析純):國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;酵母基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)提取試劑盒:天根生化科技有限公司;ExTaqDNA聚合酶(5 U/mL):寶生物工程有限公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    LDZX-50KBS立式高壓蒸汽滅菌鍋:上海申安醫(yī)療器械廠;UV2600A型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì):尤尼科(上海)儀器有限公司;TGL-16G離心機(jī):上海安亭科學(xué)儀器廠;SK200生物顯微鏡:麥克奧迪實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司;SHZ-82恒溫振蕩器:常州國(guó)華電器有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 酵母菌的分離純化[10]

    無(wú)菌條件下,吸取不同樣品(或發(fā)酵液)25 mL至225 mL生理鹽水(8.5 g/L NaCl)中,充分混勻,并以10倍梯度稀釋法稀釋至10-8,再取100 μL不同梯度的稀釋液涂布于PDA改良培養(yǎng)基(含氯霉素)上,倒置于30 ℃培養(yǎng)箱,培養(yǎng)48 h后觀察菌落形態(tài)特征。使用接種環(huán)挑取不同形態(tài)的菌落,分別劃線于PDA固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)48 h后,根據(jù)菌落形態(tài)進(jìn)行第二次劃線和培養(yǎng),得到酵母菌單一純化菌落。

    1.3.2 菌種的保藏與活化[11]

    挑取單一菌落至PDA 液體培養(yǎng)基中,30 ℃振蕩(200 r/min)培養(yǎng)24 h,連續(xù)培養(yǎng)兩代,按酵母菌液∶甘油溶液=3∶2的比例添加滅菌的體積分?jǐn)?shù)50%的甘油溶液,使甘油最終體積分?jǐn)?shù)為20%,混勻后-20 ℃冷凍保藏。

    保藏菌種使用前需進(jìn)行活化,即將菌種接種于PDA液體培養(yǎng)基中,30 ℃振蕩(200 r/min)培養(yǎng)24 h,連續(xù)活化兩代。

    1.3.3 酵母菌的鑒定

    (1)菌株形態(tài)學(xué)鑒定

    觀察純化單一菌落的顏色、形狀、邊緣、表面光滑度及濕潤(rùn)度等特征。

    挑取單一菌落,進(jìn)行美藍(lán)染色,并在光學(xué)顯微鏡(40×)物鏡下觀察菌體形態(tài)。

    (2)糖發(fā)酵試驗(yàn)

    分別將PDA液體培養(yǎng)基中的碳源設(shè)定為D-葡萄糖、蔗糖及乳糖。采用杜氏管法,將活化三代后菌株以2%的接種量接種至裝有倒置杜氏管的10 mL PDA培養(yǎng)基中,30 ℃培養(yǎng)2~3 d,觀察和記錄菌株對(duì)不同碳源的發(fā)酵情況。對(duì)于不發(fā)酵或發(fā)酵力較弱的菌株,延長(zhǎng)觀察至10 d[12]。

    (3)rDNA基因間隔序列(ITS)測(cè)定

    離心收集菌體,提取基因組,對(duì)rDNA-ITS序列進(jìn)行擴(kuò)增和測(cè)序。正反向引物分別為ITS1(5'-TCCGTAGGTGAACCTGCCG-3')和ITS4(5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3')。采用50 μL反應(yīng)體系為:2.5 U ExTaq酶,5 μL 10×ExTaqBuffer(Mg2+),50 μmol 脫氧核糖核苷三磷酸(deoxynucleotide triphosphate,dNTP)Mixture,2 μg模板,5 μmol正反向引物,無(wú)菌去離子水補(bǔ)齊至50 μL。反應(yīng)程序?yàn)椋?4 ℃預(yù)變性5 min,35個(gè)循環(huán)包括:94 ℃變性1 min,60 ℃退火1 min,72 ℃延伸1 000 bp/min。最后72 ℃延伸10 min。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后,送測(cè)序公司進(jìn)行序列測(cè)定。所得DNA序列在美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information,NCBI)網(wǎng)站上通過(guò)基于局部比對(duì)算法的搜索工具(basic local alignment search tool,BLAST)程序(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST)進(jìn)行比對(duì),初步確定菌株的種屬[13]。并將rDNA-ITS序列提交至GenBank獲取序列注冊(cè)號(hào)。

    使用MEGA 6軟件構(gòu)建基因發(fā)育樹(shù),將目標(biāo)序列與多個(gè)模式菌株的rDNA-ITS,通過(guò)鄰接法(neighborhood-joining method,NJ)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),自展值(bootstrap value)分析設(shè)置重復(fù)1 000次。

    1.3.4 酵母菌的發(fā)酵與生長(zhǎng)特性

    (1)產(chǎn)乙醇試驗(yàn)

    將活化菌株以2%(V/V)的接種量接種于PDA液體培養(yǎng)基中,置于30 ℃發(fā)酵3 d,采用重鉻酸鉀比色法測(cè)定產(chǎn)乙醇能力[13]。以乙醇含量(x)為橫坐標(biāo),吸光度值(y)為縱坐標(biāo)繪制乙醇含量-吸光度值的標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到線性方程為y=23.886x+0.001 6,相關(guān)性系數(shù)R2=0.996 3。

    (2)生長(zhǎng)曲線測(cè)定

    將酵母菌按5%(V/V)的接種量接入PDA液體培養(yǎng)基中,在30 ℃條件下培養(yǎng),以未接種PDA培養(yǎng)基為對(duì)照,每組設(shè)置兩個(gè)平行,每隔3 h測(cè)定培養(yǎng)液在波長(zhǎng)600 nm處的OD600nm值,連續(xù)測(cè)48 h,繪制酵母菌的生長(zhǎng)曲線。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 菌株的分離純化

    經(jīng)過(guò)3次平板劃線培養(yǎng),分別從藏靈菇、紅茶菌及酸菜中分離到14株酵母菌疑似菌株(見(jiàn)表1)。

    表1 不同食品來(lái)源中的酵母菌疑似菌株Table 1 Suspected yeasts from different food sources

    2.2 菌株種屬鑒定

    2.2.1 菌株形態(tài)學(xué)特征

    觀察14株疑似酵母菌的菌落特征與細(xì)胞形態(tài),結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知,菌落形態(tài)基本上都是圓形,顏色分別呈白色、乳白色或淡黃色,大多菌落表面光滑。細(xì)胞形態(tài)有圓形、橢圓形、卵圓形或臘腸狀等。根據(jù)不同食品來(lái)源,其中紅茶菌中的酵母菌菌落較大,而藏靈菇和酸菜中菌落較小。以上特征說(shuō)明不同來(lái)源之間酵母菌具有形態(tài)學(xué)多樣性。

    表2 不同食品來(lái)源疑似酵母菌的菌落特征與菌體細(xì)胞形態(tài)Table 2 Colony characteristics and cell morphology of suspected yeasts from different food sources

    2.2.2 糖發(fā)酵試驗(yàn)

    由表3可知,大部分疑似菌株(X1-1、X1-2、X3-3、Y4-2、R5-1、R5-2、R5-3、R5-4、M2-1、M2-2)可代謝葡萄糖,而對(duì)蔗糖和乳糖發(fā)酵性能較弱或不能發(fā)酵,如發(fā)酵蔗糖時(shí),菌株X1-1和X3-3可較快產(chǎn)氣,而X1-2則需7 d后才產(chǎn)生氣泡;發(fā)酵乳糖時(shí),僅X1-1和X3-3表現(xiàn)出可代謝性能。經(jīng)過(guò)形態(tài)學(xué)特征觀察及糖發(fā)酵試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)菌株間存在一定差異,但需配合rDNA-ITS序列測(cè)定對(duì)其種屬進(jìn)行更為精確的鑒定。

    表3 不同食品來(lái)源疑似酵母菌的糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果Table 3 Sugar fermentation test of suspected yeasts from different food sources

    2.2.3 rDNA-ITS序列分析

    rDNA-ITS序列經(jīng)PCR擴(kuò)增及測(cè)序后,通過(guò)美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information,NCBI)中BLAST程序進(jìn)行同源性比對(duì)(見(jiàn)表4)。經(jīng)序列測(cè)定和分析,確定了14株疑似酵母菌中有9株為酵母菌,而其他5株的rDNA-ITS序列未能通過(guò)PCR擴(kuò)增得到相應(yīng)DNA產(chǎn)物,推測(cè)其為單細(xì)胞原核微生物。將9株菌的rDNAITS提交至GenBank后,獲得序列注冊(cè)號(hào)分別為:MZ506852(M2-1)、MZ506853(M2-2)、MZ506854(R5-1)、MZ506855(R5-2)、MZ506856(R5-3)、MZ506857(R5-4)、MZ506858(X1-1)、MZ506859(X1-2)及MZ506860(X3-3)。

    使用MEGA6軟件構(gòu)建了目標(biāo)菌株與參考菌株rDNAITS序列的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)見(jiàn)圖1。

    由表4、圖1可知,9株酵母菌歸為4個(gè)不同的屬。其中,藏靈菇發(fā)酵乳中分離到的3株菌(X1-1、X1-2、X3-3)鑒定為馬克斯克魯維酵母(Kluyveromy cesmarxianus);紅茶菌發(fā)酵液中獲得的3株菌(R5-2、R5-3、R5-4)鑒定為異常假絲酵母(Candida incommunis)及1株菌鑒定為Starmerella davenportii;酸菜中分離到的2株菌(M2-1、M2-2)鑒定為瑟氏哈薩克斯坦酵母(Kazachstania servazzii)。不同種類食品中菌株屬于不同種類酵母菌。

    圖1 基于rDNA-ITS序列不同食品來(lái)源篩選酵母菌的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig.1 Phylogenetic tree of screened yeasts from different food sources based on rDNA-ITS sequences

    表4 基于rDNA-ITS序列菌株對(duì)比結(jié)果Table 4 Comparison of strains based on rDNA-ITS sequences

    2.3 酵母菌發(fā)酵特性分析

    2.3.1 產(chǎn)乙醇能力

    酵母菌屬于兼性厭氧菌,無(wú)氧環(huán)境下會(huì)將葡萄糖分解產(chǎn)生CO2和乙醇。乙醇發(fā)酵是評(píng)價(jià)酵母菌發(fā)酵性能的重要指標(biāo)之一。

    由圖2可知,產(chǎn)乙醇量最低的菌株為馬克斯克魯維酵母X3-3(29.6%),產(chǎn)乙醇量較高的為異常假絲酵母R5-2(75.8%)和瑟氏哈薩克斯坦酵母M2-2(71.0%)。相對(duì)而言,紅茶菌和酸菜中的酵母菌株產(chǎn)乙醇能力強(qiáng)于藏靈菇中酵母菌,即馬克斯克魯維酵母的產(chǎn)乙醇力較弱,而Starmerella davenportii、異常假絲酵母及瑟氏哈薩克斯坦酵母的產(chǎn)乙醇力較強(qiáng)。

    圖2 不同酵母菌產(chǎn)乙醇能力比較Fig.2 Comparison of ethanol production capacity of different strains

    2.3.2 生長(zhǎng)特性

    選取每個(gè)種屬中乙醇產(chǎn)量最高的菌株,進(jìn)行0~51 h生長(zhǎng)曲線的測(cè)定(見(jiàn)圖3)。由圖3可知,4種酵母菌中馬克斯克魯維酵母生長(zhǎng)能力最佳,菌株X1-2在約6 h時(shí)即進(jìn)入對(duì)數(shù)期,且在約30 h時(shí)達(dá)到最大菌數(shù)(OD600nm值=6.152)。

    圖3 四株酵母菌的生長(zhǎng)曲線Fig.3 Growth curves of 4 yeast strains

    而其他3種酵母在PDA培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較緩慢,其中瑟氏哈薩克斯坦酵母M2-2在約9 h時(shí)進(jìn)入對(duì)數(shù)期,約15 h進(jìn)入穩(wěn)定期,而此階段OD600nm值<0.6。異常假絲酵母R5-2在0~39 h期間的菌體增殖較為平緩,但在39~51 h期間增殖較為迅速,并在51 h達(dá)到最大吸光度值(OD600nm值=1.313)。Starmerella davenportiiR5-1在0~51 h內(nèi)增殖最為緩慢,整個(gè)階段,OD600nm值<0.2,可能是PDA培養(yǎng)基中缺少該菌株所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)導(dǎo)致的。

    3 討論

    3.1 酵母菌的分類學(xué)研究

    馬克斯克魯維酵母最初曾被歸屬為酵母屬,后來(lái)劃歸至克魯維酵母屬[15]。馬克斯克魯維酵母分別被美國(guó)和歐洲認(rèn)定為滿足“公認(rèn)安全”(generally regarded as safe,GRAS)和“安全資格認(rèn)定”(qualified presumption of safety,QPS)的安全菌株標(biāo)準(zhǔn)[16]。由圖1可知,馬克斯克魯維酵母與瑟氏哈薩克斯坦酵母在一個(gè)進(jìn)化分支上。瑟氏哈薩克斯坦酵母以前被稱為賽瓦酵母,屬于酵母屬[17]。因此,馬克斯克魯維酵母與瑟氏哈薩克斯坦酵母進(jìn)化關(guān)系較為接近,與本實(shí)驗(yàn)中結(jié)果是一致的。Starmerella davenportii與異常假絲酵母在另一個(gè)進(jìn)化分支上。Starmerella davenportii曾被稱為Candida davenportii,后來(lái)被重新命名為Starmerella davenportii,可見(jiàn)二者具有較為接近的進(jìn)化關(guān)系[18]。

    根據(jù)《酵母菌的特征與鑒定手冊(cè)》,馬克斯克魯維酵母對(duì)葡萄糖、蔗糖和乳糖的發(fā)酵性能為可變性;異常假絲酵母不可發(fā)酵乳糖,對(duì)葡萄糖的發(fā)酵至7 d后才出現(xiàn)氣泡,對(duì)蔗糖發(fā)酵力具有可變性[19]。而本實(shí)驗(yàn)中馬克斯克魯維酵母X1-1和X3-3對(duì)3種糖都具有發(fā)酵能力;異常假絲酵母R5-2、R5-3及R5-4對(duì)葡萄糖的發(fā)酵至7 d后觀察到氣泡,對(duì)蔗糖和乳糖都不能發(fā)酵。在《酵母菌的特征與鑒定手冊(cè)》中,賽瓦酵母(瑟氏哈薩克斯坦酵母)可發(fā)酵葡萄糖,不可發(fā)酵蔗糖和乳糖[19]。哈薩克斯坦酵母屬由于缺乏β-半乳糖苷酶,因此不能利用乳糖[20]。本研究中,瑟氏哈薩克斯坦酵母M2-1與M2-2可發(fā)酵葡萄糖,對(duì)另兩種糖都未觀察到發(fā)酵能力。因此,馬克斯克魯維酵母、異常假絲酵母及瑟氏哈薩克斯坦酵母的糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果與《酵母菌的特征與鑒定手冊(cè)》基本一致。

    Starmerella davenportii在《酵母菌的特征與鑒定手冊(cè)》中未被收錄。但文獻(xiàn)報(bào)道中的益生型酵母Starmerella davenportiiDo18可發(fā)酵D-葡萄糖、棉子糖及果糖,不發(fā)酵乳糖[18]。本研究中Starmerella davenportiiR5-1對(duì)D-葡萄糖的發(fā)酵至7 d后產(chǎn)氣,而對(duì)蔗糖和乳糖則不能發(fā)酵,因此試驗(yàn)結(jié)果與菌株Do18基本一致。

    3.2 傳統(tǒng)發(fā)酵食品中的酵母菌

    藏靈菇即西藏開(kāi)菲爾粒,是由乳酸菌、醋酸菌和酵母菌等微生物組成的共生體[21]。盧曼等[22]從藏靈菇中分離出釀酒酵母屬、克魯維酵母屬及亞羅酵母屬中的16株菌,其中8株確定為馬克斯克魯維酵母菌。馬克斯克魯維酵母菌作為一種食品級(jí)酵母,具有多種益生特性,如可代謝乳糖和菊粉、較高耐熱性、可產(chǎn)生溶解酶類、較高生長(zhǎng)速率及產(chǎn)生乙醇等,因而非常適合工業(yè)應(yīng)用[15]。

    紅茶菌即康普茶,是茶糖水經(jīng)酵母菌、醋酸菌及乳酸菌等微生物發(fā)酵而成的一種功能性飲料[23]。紅茶菌中主要有假絲酵母屬、酒香酵母屬、酵母屬、裂殖酵母屬、類酵母屬、接合酵母屬、畢赤酵母屬、德克酵母屬及德巴利酵母屬等[23-24]。近期報(bào)道的益生型酵母Starmerella davenportiiDo18也分離自紅茶菌[18]。

    酸菜和泡菜是我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵蔬菜類食品,含有多種酵母菌和乳酸菌等微生物。烏日娜等[25]從延邊泡菜中分離出4株耐鹽較強(qiáng)的賽瓦酵母。瑟氏哈薩克斯坦酵母(賽瓦酵母)在一些發(fā)酵食品中可以起到改善風(fēng)味的作用[26]。但有研究認(rèn)為,瑟氏哈薩克斯坦酵母是韓國(guó)泡菜中形成不良白色菌膜的主要酵母之一,會(huì)導(dǎo)致泡菜產(chǎn)品脹包、形成不良?xì)馕都耙鹋莶速|(zhì)地軟化[27]。

    馬克斯克魯維酵母相較于其他酵母菌,具有更快的生長(zhǎng)速率,這與文獻(xiàn)報(bào)道是一致的[15]。在營(yíng)養(yǎng)豐富培養(yǎng)基中,馬克斯克魯維酵母的生長(zhǎng)速率是釀酒酵母的兩倍[28]。馬克斯克魯維酵母同釀酒酵母一樣,屬于兼性厭氧菌,可通過(guò)將糖發(fā)酵成乙醇產(chǎn)生能量,也可通過(guò)氧化磷酸化及三羧酸(tricarboxylic acid,TCA)循環(huán)產(chǎn)生更多能量[15]。而后者有利于菌體生物量的增加。本研究中馬克斯克魯維酵母產(chǎn)乙醇力較弱,而生長(zhǎng)性能優(yōu)異,因此菌株X1-1、X1-2及X3-3更偏向于將更多碳源通過(guò)有氧呼吸產(chǎn)生能量,從而提高了菌體繁殖速率。

    4 結(jié)論

    從3種傳統(tǒng)發(fā)酵食品中分離到4個(gè)不同種屬中的9株酵母菌,包括藏靈菇中的3株馬克斯克魯維酵母(Kluyveromy cesmarxianus)、紅茶菌中的1株Staemerella dovenpoetii酵母和3株異常假絲酵母(Candida incommunis)及酸菜中的2株瑟氏哈薩克斯坦酵母(Kazachstania servazzii)。不同食品來(lái)源的酵母菌種屬及發(fā)酵性能各不相同,且菌株之間發(fā)酵性能具有顯著差異性。3株馬克斯克魯維酵母產(chǎn)乙醇力較弱,但菌株X1-2生長(zhǎng)速率快且活菌數(shù)高;異常假絲酵母R5-2和瑟氏哈薩克斯坦酵母M2-2產(chǎn)乙醇能力較強(qiáng)。

    猜你喜歡
    紅茶菌馬克斯假絲
    米卡芬凈對(duì)光滑假絲酵母菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)活性的影響
    萆薢滲濕湯治療濕熱下注型外陰陰道假絲酵母菌病的臨床觀察
    紅茶菌的國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀
    紅茶菌
    小老鼠馬克斯在城里
    益生菌的另一個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域:紅茶菌飲料
    紅茶菌和中草藥紅茶菌體外抑制沙門氏菌的比較研究
    中西醫(yī)結(jié)合治療復(fù)發(fā)性外陰陰道假絲酵母菌病的臨床觀察
    白假絲酵母菌耐吡咯類藥物的ERG11基因分析
    馬克斯的家
    亚洲欧美日韩东京热| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产成人系列免费观看| 欧美精品啪啪一区二区三区| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 中亚洲国语对白在线视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 日韩欧美国产在线观看| 久久久久九九精品影院| 久久天堂一区二区三区四区| 日本黄色视频三级网站网址| 亚洲av成人精品一区久久| 一级作爱视频免费观看| 制服诱惑二区| 免费无遮挡裸体视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 色精品久久人妻99蜜桃| 精品乱码久久久久久99久播| 色哟哟哟哟哟哟| 精品高清国产在线一区| 夜夜夜夜夜久久久久| 久久香蕉国产精品| 免费看a级黄色片| 免费无遮挡裸体视频| 欧美久久黑人一区二区| 亚洲人与动物交配视频| 18禁美女被吸乳视频| 精品国产美女av久久久久小说| 全区人妻精品视频| 成人一区二区视频在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 成人午夜高清在线视频| 亚洲成人国产一区在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 亚洲国产欧美网| 成人三级做爰电影| 久久久久九九精品影院| 麻豆国产97在线/欧美 | 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲人与动物交配视频| 我要搜黄色片| 国产欧美日韩一区二区三| 亚洲成人久久性| 国产伦在线观看视频一区| 欧美国产日韩亚洲一区| 日韩有码中文字幕| 国产伦人伦偷精品视频| 18禁国产床啪视频网站| 又粗又爽又猛毛片免费看| 日韩国内少妇激情av| 久久热在线av| av片东京热男人的天堂| 一级片免费观看大全| 久久久水蜜桃国产精品网| 丁香欧美五月| 亚洲精品中文字幕在线视频| 搡老熟女国产l中国老女人| 校园春色视频在线观看| 好男人在线观看高清免费视频| 制服丝袜大香蕉在线| 99精品欧美一区二区三区四区| 婷婷精品国产亚洲av在线| 精品福利观看| 黄色毛片三级朝国网站| 欧美另类亚洲清纯唯美| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产精品一区二区三区四区久久| 午夜福利18| 国产一级毛片七仙女欲春2| 亚洲一区二区三区不卡视频| 九色国产91popny在线| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 久久精品91无色码中文字幕| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| avwww免费| 久久久久久久久中文| 啪啪无遮挡十八禁网站| 黄色 视频免费看| 久久草成人影院| 十八禁网站免费在线| 国产免费男女视频| 给我免费播放毛片高清在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 日本在线视频免费播放| 久久久国产精品麻豆| 日韩精品中文字幕看吧| 桃红色精品国产亚洲av| 日本五十路高清| 日本三级黄在线观看| 国产黄a三级三级三级人| 欧美精品啪啪一区二区三区| 后天国语完整版免费观看| 久久久国产欧美日韩av| 国产精品一区二区免费欧美| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| bbb黄色大片| 国产精品久久视频播放| 亚洲性夜色夜夜综合| 亚洲精品色激情综合| 亚洲国产精品999在线| 老汉色∧v一级毛片| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 看免费av毛片| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产成人aa在线观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 在线观看一区二区三区| 久久久久久人人人人人| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 看黄色毛片网站| 久久人妻av系列| 成年女人毛片免费观看观看9| 真人一进一出gif抽搐免费| 亚洲av熟女| 99国产综合亚洲精品| 亚洲精品色激情综合| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲精品一区av在线观看| 不卡一级毛片| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产一级毛片七仙女欲春2| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 国产成人精品久久二区二区免费| 国产精品一区二区免费欧美| 亚洲av电影不卡..在线观看| 美女 人体艺术 gogo| 毛片女人毛片| 色精品久久人妻99蜜桃| 18禁美女被吸乳视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲精品色激情综合| 国产av一区二区精品久久| 少妇人妻一区二区三区视频| 此物有八面人人有两片| 日本黄大片高清| 中文亚洲av片在线观看爽| 午夜激情av网站| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 亚洲第一电影网av| 人妻久久中文字幕网| 欧美3d第一页| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲成av人片免费观看| 久久天堂一区二区三区四区| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 最新在线观看一区二区三区| 国产黄a三级三级三级人| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| svipshipincom国产片| 欧美日韩乱码在线| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国产成人精品无人区| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产成+人综合+亚洲专区| 成年免费大片在线观看| 午夜免费激情av| 久久久久九九精品影院| 久久久久国内视频| 久久精品成人免费网站| 一级片免费观看大全| 男女视频在线观看网站免费 | 日韩欧美在线乱码| 亚洲国产欧美网| 91在线观看av| 91九色精品人成在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 国产精品免费一区二区三区在线| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 叶爱在线成人免费视频播放| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 久久中文字幕人妻熟女| 听说在线观看完整版免费高清| 久久中文字幕人妻熟女| 精品免费久久久久久久清纯| а√天堂www在线а√下载| 性色av乱码一区二区三区2| 男人的好看免费观看在线视频 | 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 欧美色欧美亚洲另类二区| 亚洲人成伊人成综合网2020| x7x7x7水蜜桃| 国产区一区二久久| 老司机午夜福利在线观看视频| 精品日产1卡2卡| 久久伊人香网站| 最近最新中文字幕大全电影3| 黄色a级毛片大全视频| 日日爽夜夜爽网站| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产成+人综合+亚洲专区| 757午夜福利合集在线观看| 国产精品一区二区精品视频观看| 欧美成人午夜精品| 老司机靠b影院| 国产三级中文精品| 亚洲国产精品999在线| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 1024香蕉在线观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 床上黄色一级片| 最近视频中文字幕2019在线8| 国产精品av久久久久免费| 亚洲无线在线观看| 久久精品影院6| 亚洲欧美日韩东京热| 脱女人内裤的视频| 久久久久久久久中文| 国内精品久久久久精免费| 制服人妻中文乱码| 国产日本99.免费观看| 99在线视频只有这里精品首页| 久久久久九九精品影院| 亚洲黑人精品在线| 欧美在线一区亚洲| 久久精品国产亚洲av高清一级| 午夜亚洲福利在线播放| 男女视频在线观看网站免费 | 毛片女人毛片| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 1024手机看黄色片| 久久午夜亚洲精品久久| 一边摸一边抽搐一进一小说| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 久久精品成人免费网站| 亚洲av熟女| 欧美在线一区亚洲| 欧美成狂野欧美在线观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 十八禁人妻一区二区| 老鸭窝网址在线观看| 久久九九热精品免费| 91国产中文字幕| 精品久久久久久久末码| 69av精品久久久久久| 亚洲五月婷婷丁香| 国产精品久久视频播放| 久久久久九九精品影院| 午夜老司机福利片| 午夜老司机福利片| 99久久国产精品久久久| 午夜福利视频1000在线观看| 久久久久国内视频| 十八禁人妻一区二区| 禁无遮挡网站| av片东京热男人的天堂| 亚洲人成伊人成综合网2020| 免费在线观看成人毛片| 国产日本99.免费观看| √禁漫天堂资源中文www| 老司机午夜福利在线观看视频| 老司机午夜福利在线观看视频| 特大巨黑吊av在线直播| 国产在线精品亚洲第一网站| 精品一区二区三区av网在线观看| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产成人av激情在线播放| 看片在线看免费视频| 在线国产一区二区在线| 国产午夜精品论理片| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 日本黄色视频三级网站网址| 最好的美女福利视频网| 丁香欧美五月| 一区福利在线观看| 床上黄色一级片| 一个人免费在线观看的高清视频| 视频区欧美日本亚洲| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 1024视频免费在线观看| 丝袜人妻中文字幕| 后天国语完整版免费观看| 国产成年人精品一区二区| 91av网站免费观看| 男人的好看免费观看在线视频 | 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 久9热在线精品视频| 精品无人区乱码1区二区| 在线看三级毛片| 精品一区二区三区av网在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 国产精品久久久久久久电影 | 国产精品免费一区二区三区在线| 99精品欧美一区二区三区四区| 丰满人妻一区二区三区视频av | 国产真人三级小视频在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| videosex国产| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 麻豆av在线久日| 亚洲成av人片免费观看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 中文在线观看免费www的网站 | 无遮挡黄片免费观看| 国产成人系列免费观看| 国产高清激情床上av| 国产av不卡久久| 久久精品成人免费网站| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 老司机午夜十八禁免费视频| 午夜久久久久精精品| 日本黄大片高清| 精品人妻1区二区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 69av精品久久久久久| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产熟女午夜一区二区三区| 午夜成年电影在线免费观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产黄片美女视频| 12—13女人毛片做爰片一| 国产成人系列免费观看| 在线永久观看黄色视频| 免费看美女性在线毛片视频| 一级片免费观看大全| 欧美日韩一级在线毛片| 午夜久久久久精精品| 国产1区2区3区精品| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲 国产 在线| 亚洲美女视频黄频| 91av网站免费观看| 高清毛片免费观看视频网站| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 制服人妻中文乱码| 国产亚洲精品av在线| 老司机在亚洲福利影院| 日韩成人在线观看一区二区三区| 国产精品,欧美在线| 免费在线观看完整版高清| 久久久久久久午夜电影| 亚洲国产精品成人综合色| 桃色一区二区三区在线观看| 国产精品永久免费网站| 怎么达到女性高潮| 日韩中文字幕欧美一区二区| 男女午夜视频在线观看| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产高清有码在线观看视频 | 又大又爽又粗| av福利片在线| 欧美一级a爱片免费观看看 | 久久人人精品亚洲av| 免费高清视频大片| 一夜夜www| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 日韩欧美国产在线观看| 国产精品一区二区精品视频观看| 999精品在线视频| 亚洲国产看品久久| 日韩三级视频一区二区三区| 欧美黑人欧美精品刺激| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 欧美中文日本在线观看视频| 国产片内射在线| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲 国产 在线| 日本 av在线| 九九热线精品视视频播放| 国产熟女午夜一区二区三区| 欧美极品一区二区三区四区| 国产1区2区3区精品| 国产精品98久久久久久宅男小说| avwww免费| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 成人一区二区视频在线观看| 欧美日韩精品网址| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 日韩欧美一区二区三区在线观看| cao死你这个sao货| 很黄的视频免费| 国产成人av教育| 日日爽夜夜爽网站| 国产视频一区二区在线看| 午夜免费观看网址| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 麻豆国产av国片精品| 一级毛片女人18水好多| 色老头精品视频在线观看| 国产三级中文精品| 在线免费观看的www视频| 99riav亚洲国产免费| 首页视频小说图片口味搜索| 国产1区2区3区精品| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 黄色女人牲交| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 国产真实乱freesex| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲色图av天堂| 村上凉子中文字幕在线| 久久久水蜜桃国产精品网| 日韩有码中文字幕| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 天天一区二区日本电影三级| 美女大奶头视频| videosex国产| 久久性视频一级片| 91麻豆av在线| 国产精品99久久99久久久不卡| 精品久久久久久,| 亚洲精品色激情综合| 久99久视频精品免费| 看黄色毛片网站| 一进一出抽搐gif免费好疼| 18禁国产床啪视频网站| 欧美日韩乱码在线| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产亚洲av高清不卡| 男女下面进入的视频免费午夜| 久久久国产精品麻豆| 欧美黄色淫秽网站| 黑人操中国人逼视频| 精华霜和精华液先用哪个| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲av第一区精品v没综合| 久久久国产成人精品二区| 国产亚洲精品av在线| 国产三级中文精品| 男女之事视频高清在线观看| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 中文字幕久久专区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲国产欧美人成| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 99久久精品热视频| 制服诱惑二区| xxx96com| 国产视频一区二区在线看| 久久久水蜜桃国产精品网| 午夜精品在线福利| 久久人妻av系列| 91字幕亚洲| 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲成人久久爱视频| 男女那种视频在线观看| 亚洲av五月六月丁香网| 欧美黑人欧美精品刺激| 青草久久国产| 最新美女视频免费是黄的| ponron亚洲| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 制服诱惑二区| 国产熟女xx| 亚洲成人久久性| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产亚洲精品一区二区www| 国产99白浆流出| 欧美黑人欧美精品刺激| 99精品久久久久人妻精品| 两个人的视频大全免费| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 一进一出抽搐动态| 亚洲欧美日韩东京热| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 成在线人永久免费视频| av福利片在线| 一级毛片精品| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 午夜福利成人在线免费观看| 国产精品一区二区精品视频观看| 国产高清激情床上av| 99riav亚洲国产免费| 日本在线视频免费播放| 久久国产精品影院| 精品国产美女av久久久久小说| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 波多野结衣巨乳人妻| 久久这里只有精品中国| 日韩大码丰满熟妇| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 国产主播在线观看一区二区| 男人的好看免费观看在线视频 | 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 亚洲一码二码三码区别大吗| 午夜精品一区二区三区免费看| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲第一电影网av| 国产精品久久久久久久电影 | 久久香蕉激情| 一级毛片女人18水好多| 久久欧美精品欧美久久欧美| 精品久久久久久久末码| 观看免费一级毛片| 久久国产精品影院| 久久久精品欧美日韩精品| 老司机午夜十八禁免费视频| 波多野结衣巨乳人妻| 午夜免费成人在线视频| 国产成人精品无人区| 麻豆一二三区av精品| 在线视频色国产色| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 亚洲精品av麻豆狂野| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 男人的好看免费观看在线视频 | 亚洲天堂国产精品一区在线| 不卡一级毛片| 亚洲国产精品成人综合色| 精品无人区乱码1区二区| 国产亚洲精品一区二区www| 日本五十路高清| 岛国在线免费视频观看| 欧美大码av| 国产精品久久久久久久电影 | 女警被强在线播放| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 99久久国产精品久久久| 欧美激情久久久久久爽电影| 久久久久久大精品| 欧美极品一区二区三区四区| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 大型av网站在线播放| 91老司机精品| 99久久精品热视频| 一级作爱视频免费观看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 国产免费av片在线观看野外av| a在线观看视频网站| 一区二区三区国产精品乱码| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲人成77777在线视频| 色av中文字幕| 日韩中文字幕欧美一区二区| 日韩av在线大香蕉| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久天堂一区二区三区四区| 久99久视频精品免费| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 精品欧美一区二区三区在线| 久久久久久九九精品二区国产 | 老司机福利观看| 国产亚洲精品第一综合不卡| 亚洲av熟女| 亚洲人成网站高清观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 午夜老司机福利片| 免费在线观看影片大全网站| 精品国产乱码久久久久久男人| 色尼玛亚洲综合影院| 美女免费视频网站| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 亚洲九九香蕉| 欧美高清成人免费视频www| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲中文字幕日韩| 免费观看人在逋| 色综合婷婷激情| 一进一出好大好爽视频| x7x7x7水蜜桃| 国产爱豆传媒在线观看 | netflix在线观看网站| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 国产区一区二久久| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲九九香蕉| 久久久久免费精品人妻一区二区| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 一本精品99久久精品77| 久久久国产欧美日韩av| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲中文字幕日韩| 91av网站免费观看| 亚洲一区二区三区不卡视频| 一二三四社区在线视频社区8| 亚洲人成网站高清观看| 啦啦啦免费观看视频1| 毛片女人毛片| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| cao死你这个sao货| 亚洲av五月六月丁香网| 90打野战视频偷拍视频| 中文字幕av在线有码专区| 免费电影在线观看免费观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲国产精品999在线| 少妇的丰满在线观看| 悠悠久久av| 久99久视频精品免费| av福利片在线观看| 久久久久国内视频| 欧美三级亚洲精品| 国产精品 国内视频| av福利片在线观看| 波多野结衣高清作品| 在线看三级毛片| 99国产极品粉嫩在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 成人特级黄色片久久久久久久|