骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)聯(lián)合免疫固定電泳檢測(cè)診斷多發(fā)性骨髓瘤的價(jià)值和不同ISS分期表達(dá)情況

徐彩鴻（天津市環(huán)湖醫(yī)院,天津 300350）

多發(fā)性骨髓瘤（Multiple myeloma，MM）是惡性漿細(xì)胞病，常伴隨血清中單克隆免疫球蛋白（M蛋白）異常增生，對(duì)骨髓造血功能造成嚴(yán)重?fù)p害[1-2]。MM早期無(wú)明顯癥狀，臨床表現(xiàn)可遍及全身，易造成漏診和誤診現(xiàn)象。對(duì)骨髓細(xì)胞學(xué)進(jìn)行檢測(cè)和分析可為診斷MM、了解病情程度提供參考；臨床常采用免疫固定電泳（Immunofixation electrophoresis，IFE）檢測(cè)M蛋白分型，該方法具有較高技術(shù)敏感性，可判斷M蛋白分型[3]。基于此，本研究選取我院102例MM患者，探討骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)聯(lián)合IFE診斷MM患者的臨床意義。具體分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究選取2018年3月-2020年2月我院收治的MM患者102例，男59例，女43例；年齡37-79歲，平均年齡（48.56±3.78）歲，其中貧血79例、骨破壞84例、骨痛69例、腎功能障礙53例。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn) （1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中華內(nèi)科雜志》中有關(guān)MM診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；②骨髓漿細(xì)胞增多＞30%；③伴隨血清M蛋白增多；④伴隨溶骨病變；⑤免疫球蛋白減少＞50%。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴隨其他惡性腫瘤者；②無(wú)法配合研究者；③意識(shí)不清晰者。

1.3 方法

1.3.1 骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查 對(duì)患者進(jìn)行骨髓穿刺，并提取0.3ml骨髓液，進(jìn)行涂片后自然晾干，采用上海博湖生物科技有限公司生產(chǎn)的快速瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液進(jìn)行染色。并用蒸餾水進(jìn)行清洗，確保涂片和染色正常，實(shí)施鏡檢分類，并對(duì)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)進(jìn)行分析。

1.3.2 IFE檢查 使用法國(guó)Sebia全自動(dòng)電泳儀，抽取患者肘靜脈血液4ml，于抗凝管中以轉(zhuǎn)速3000r/min的速度離心8min，取上層血清稀釋，各取14μl加入6個(gè)加樣梳孔位內(nèi)，將樣品盤置于全自動(dòng)電泳儀中，保濕后加抗血清板，采用濾紙將多余固定液吸出，并移動(dòng)加樣模板，吸取凝膠板表層水分及固定液，進(jìn)行烘干處理。烘干后放凝膠片于染色缸中進(jìn)行染色，再使用檸檬酸脫色液對(duì)其脫色，分析IFE對(duì)不同免疫分型MM檢出情況和M蛋白部位。

1.4 觀察指標(biāo) ①M(fèi)M患者骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征。②MM患者IFE結(jié)果，分析MM患者IFE檢測(cè)IgG型、IgA型、IgM型、輕鏈型、未分泌型結(jié)果。③不同ISS分期患者骨髓瘤細(xì)胞比例。④不同ISS分期患者M(jìn)蛋白和骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)陽(yáng)性率。⑤相關(guān)性分析，分析骨髓細(xì)胞比例、M蛋白陽(yáng)性率、骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)陽(yáng)性率和ISS分期的相關(guān)性。⑥靈敏性分析，比較骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)、IFE和二者聯(lián)合診斷的靈敏性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（±s）表示，t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，χ2檢驗(yàn)，采用Pearson進(jìn)行相關(guān)性分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 MM患者骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征 102例MM患者中，骨髓增生較為迅速99例，占比97.06%（99/102），骨髓增生降低3例，占比2.94%（3/102）；骨髓瘤細(xì)胞比例＞10%97例，占比95.10%（97/102），骨髓細(xì)胞形態(tài)變化顯著，骨髓瘤細(xì)胞比例在5%-10%之間4例，占比3.92%（4/102），骨髓瘤細(xì)胞比例＜5%1例，占比0.98%（1/102），為顱骨孤立性骨髓瘤；骨髓瘤細(xì)胞形態(tài)為成熟型53例，占比51.96%（53/102），骨髓瘤細(xì)胞形態(tài)為幼稚型39例，占比38.24%（39/102），骨髓瘤細(xì)胞形態(tài)為原始型6例，占比5.88%（6/102），骨髓瘤細(xì)胞形態(tài)為網(wǎng)狀細(xì)胞型4例，占比3.92%（4/102）。

2.2 MM患者IFE結(jié)果 102例MM患者中采用IFE檢測(cè)出IgG型64例，占比62.74%（64/102），IgA型26例，占比25.49%（26/102），IgM型7例，占比6.86%（7/102），輕鏈型3例，占比2.94%（3/102），未分泌型2例，占比1.96%（2/102）。見(jiàn)表1。

表1 MM患者IFE結(jié)果[n(%)]

2.3 不同ISS分期患者骨髓瘤細(xì)胞比例 與I期MM患者相比，II期、III期MM患者骨髓瘤細(xì)胞比例較高，與I期、II期患者相比，III期MM患者骨髓瘤細(xì)胞比例較高（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同ISS分期患者骨髓瘤細(xì)胞比例(±s,%)

表2 不同ISS分期患者骨髓瘤細(xì)胞比例(±s,%)

ISS分期 例數(shù) 骨髓瘤細(xì)胞比例I期 21 11.53±1.28 II期 26 23.65±2.47 III期 55 28.94±2.95 F 348.337 P＜0.001

2.4 不同ISS分期患者M(jìn) 蛋白和骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)陽(yáng)性率 I期、II期患者M(jìn)蛋白和骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)陽(yáng)性率比較無(wú)顯著差異（P＞0.05）；III期患者M(jìn)蛋白陽(yáng)性率98.18%較骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)陽(yáng)性率83.64%高（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 不同ISS分期患者M(jìn)蛋白和骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)陽(yáng)性率[n(%)]

2.5 相關(guān)性分析 Pearson分析結(jié)果顯示，骨髓瘤細(xì)胞比例、M蛋白陽(yáng)性率、骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)陽(yáng)性率和ISS分期呈正相關(guān)（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 相關(guān)性分析

2.6 靈敏性分析 102例MM患者中，經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)診斷出真陽(yáng)性78例，IFE診斷出真陽(yáng)性93例，二者聯(lián)合診斷出真陽(yáng)性100例，二者聯(lián)合診斷靈敏性98.04%較骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)診斷76.47%和IFE診斷91.18%高（P＜0.05）。見(jiàn)表5。

表5 靈敏性分析[n(%)]

3 討論

MM為惡性腫瘤，主要以惡性漿細(xì)胞增生為特點(diǎn)，由于增生程度和浸潤(rùn)程度不同，可造成各部位臟器受損程度存在顯著差異，并伴隨貧血、骨痛、感染、腎功能障礙等臨床表現(xiàn)，但該病早期癥狀不明顯，特異性不高，易出現(xiàn)誤診、漏診現(xiàn)象[4-6]。因此，臨床需找尋安全、高效的診斷方法來(lái)檢測(cè)MM，為臨床治療和判斷預(yù)后提供參考[7-9]。

本研究針對(duì)我院102例MM患者采用骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)聯(lián)合IFE檢測(cè)診斷，結(jié)果顯示，102例MM患者中，骨髓增生較為迅速占比97.06%，骨髓增生降低占比2.94%；骨髓瘤細(xì)胞比例＞10%占比95.10%，骨髓細(xì)胞形態(tài)變化顯著，3.92%患者骨髓瘤細(xì)胞比例在5%-10%之間，0.98%患者骨髓瘤細(xì)胞比例＜5%，為顱骨孤立性骨髓瘤；骨髓瘤細(xì)胞形態(tài)為成熟型占比51.96%，骨髓瘤細(xì)胞形態(tài)為幼稚型占比38.24%，骨髓瘤細(xì)胞形態(tài)為原始型占比5.88%，骨髓瘤細(xì)胞形態(tài)為網(wǎng)狀細(xì)胞型占比3.92%，可見(jiàn)檢測(cè)并分析骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)能為診斷骨髓漿細(xì)胞異常增殖提供參考依據(jù)，這一結(jié)果與盧姿[10]等研究結(jié)果一致，臨床診斷MM的主要參考標(biāo)準(zhǔn)便是骨髓漿細(xì)胞異常增生和浸潤(rùn)，充分重視骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征在MM診斷中具有重要意義。骨髓細(xì)胞學(xué)可清晰呈現(xiàn)MM細(xì)胞形態(tài)特征，而骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)分型在診斷MM中具有重要價(jià)值，檢出單克隆漿細(xì)胞可作為MM的診斷指標(biāo)之一[11]。經(jīng)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，102例MM患者中采用IFE檢測(cè)出62.74%IgG型、25.49%IgA型、6.86%IgM型、2.94%輕鏈型、1.96%未分泌型，提示IFE檢測(cè)出MM免疫分型主要以IgG型、IgA型為主。IFE技術(shù)操作簡(jiǎn)單，分辨率高，對(duì)分離和鑒定M蛋白方面具有較高敏感度，可直接對(duì)M蛋白類型進(jìn)行判斷[12-13]。不同M蛋白類型可導(dǎo)致不同臨床結(jié)果，IgG型MM易導(dǎo)致感染，IgA型MM易導(dǎo)致高鈣血和高膽固醇，而輕鏈型MM常損害患者腎功能。研究結(jié)果還顯示，與I期MM患者相比，II期、III期MM患者骨髓瘤細(xì)胞比例較高，與I期、II期患者相比，III期MM患者骨髓瘤細(xì)胞比例較高（P＜0.05），充分說(shuō)明MM患者病情越嚴(yán)重，骨髓瘤細(xì)胞比例越高。研究數(shù)據(jù)顯示，III期患者M(jìn)蛋白陽(yáng)性率98.18%較骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)陽(yáng)性率83.64%高（P＜0.05），提示M蛋白陽(yáng)性率明顯較高。Pearson分析結(jié)果顯示，骨髓細(xì)胞比例、M蛋白陽(yáng)性率、骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)陽(yáng)性率和ISS分期呈正相關(guān)（P＜0.05）；充分說(shuō)明骨髓細(xì)胞比例、M蛋白陽(yáng)性率、骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)陽(yáng)性率和ISS分期與MM患者預(yù)后存在明顯相關(guān)性。研究數(shù)據(jù)表明，102例MM患者中，經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)診斷出真陽(yáng)性78例，IFE診斷出真陽(yáng)性93例，二者聯(lián)合診斷出真陽(yáng)性100例，二者聯(lián)合診斷靈敏性98.04%，較骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)診斷76.47%和IFE診斷91.18%高（P＜0.05），提示二者聯(lián)合檢測(cè)能夠提高診斷靈敏性。IFE在診斷MM中具有較高的靈敏度，與骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)相聯(lián)合能提高診斷效果[14-15]。MM患者在不同病理分期呈現(xiàn)不同骨髓細(xì)胞形態(tài)，通過(guò)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)聯(lián)合IFE檢測(cè)可提升MM的診斷靈敏度和準(zhǔn)確度，有效判斷預(yù)后[16]。

綜上所述，骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)聯(lián)合IFE檢測(cè)診斷MM可確定免疫分型，評(píng)估病情分期與嚴(yán)重程度，有利于臨床治療MM和改善預(yù)后，臨床應(yīng)用價(jià)值高。