• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      血管緊張素II促進心臟成纖維細胞轉(zhuǎn)分化的實驗條件優(yōu)化*

      2022-02-16 03:00:16徐文麗吳濟民趙明明陳顯達王帥星谷慧君張幼怡北京大學(xué)第三醫(yī)院心內(nèi)科血管醫(yī)學(xué)研究所國家衛(wèi)生健康委心血管分子生物學(xué)與調(diào)節(jié)肽重點實驗室分子心血管學(xué)教育部重點實驗室心血管受體研究北京市重點實驗室北京009石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院新疆地方與民族高發(fā)病教育部重點實驗室新疆石河子83000
      中國病理生理雜志 2022年1期
      關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)分化纖維細胞培養(yǎng)液

      馮 姍, 徐文麗, 吳濟民, 王 蕊, 趙明明, 曹 寧, 陳顯達,王帥星, 張 咪, 谷慧君, 張幼怡, 肖 晗△(北京大學(xué)第三醫(yī)院心內(nèi)科血管醫(yī)學(xué)研究所,國家衛(wèi)生健康委心血管分子生物學(xué)與調(diào)節(jié)肽重點實驗室,分子心血管學(xué)教育部重點實驗室,心血管受體研究北京市重點實驗室,北京 009;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院新疆地方與民族高發(fā)病教育部重點實驗室,新疆 石河子 83000)

      在病理條件下,心肌間質(zhì)出現(xiàn)膠原過度沉積,引起心臟纖維化。心臟纖維化是多種心血管疾病的共同特征,并最終導(dǎo)致心力衰竭。心臟中成纖維細胞(cardiac fibroblast,CFs)向肌成纖維細胞轉(zhuǎn)分化是心臟纖維化的重要病理過程[1],已成為治療心血管疾病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。但是篩選抑制CFs 轉(zhuǎn)分化藥物的實驗條件尚未經(jīng)系統(tǒng)地評估和優(yōu)化,是影響實驗穩(wěn)定性和可重復(fù)性的關(guān)鍵因素。在轉(zhuǎn)分化后,肌成纖維細胞高表達特征性的α-平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),同時合成和分泌細胞外基質(zhì)的能力增強[2-4],從而促進心臟纖維化[5-7]。血管緊張素II(angiotensin II,Ang II)是促進CFs 轉(zhuǎn)分化為肌成纖維細胞的重要因素[8],因此廣泛應(yīng)用于構(gòu)建體外誘導(dǎo)CFs 轉(zhuǎn)分化的細胞模型。目前心臟CFs 轉(zhuǎn)分化的相關(guān)研究選擇的細胞代數(shù)有第1 代(passage 1,P1)、P2、P3 等,選擇的Ang II 刺激時程有24 和48 h等,細胞培養(yǎng)液血清濃度有0%、1%、10% 等[9-13]。本研究擬評估和比較Ang II 引起CFs 轉(zhuǎn)分化的實驗條件,為實驗研究體系的規(guī)范化提供數(shù)據(jù)支持。

      材料和方法

      1 動物

      新生(1~2日齡)和8周齡SPF 級雄性C57BL/6小鼠,體質(zhì)量22~24 g,均購自北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物中心,許可證號SCXK(京)2021-0006,用于分離成年小鼠(4 只/10 cm 皿)和新生小鼠(40 只/10 cm 皿)CFs。動物飼養(yǎng)和使用均完全遵照北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗相關(guān)倫理標(biāo)準(zhǔn)。本研究已獲得北京大學(xué)生物醫(yī)學(xué)倫理委員會實驗動物福利倫理分會批準(zhǔn),批準(zhǔn)號為LA2018112。

      2 主要試劑

      Ang II 購自Sigma-Aldrich;膠原酶Ⅱ和DMEM 培養(yǎng)液購自Gibco;逆轉(zhuǎn)錄試劑盒購自Promega;Trizol、Hoechest 33342 和Alexa Fluor 488 偶聯(lián)的熒光Ⅱ抗購自Invitrogen;抗α-SMA、I 型膠原(collagen type I,Col I)和纖連蛋白(fibronectin,F(xiàn)N)抗體購自Abcam;抗GAPDH 抗體購自Cell Signaling Technology;山羊抗兔IgG(H+L)抗體購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司;Neonatal Heart Dissociation Kit購自Miltenyi Biotec。

      3 主要方法

      3.1 成年小鼠CFs 的分離與培養(yǎng)取8 周齡雄性C57BL/6小鼠,斷頸后用乙醇消毒,剪開胸腔,取出心臟,修剪去除心耳和主動脈,置于預(yù)冷的PBS 中。將心臟剪碎至1 mm×1 mm×1 mm 的糜狀,加入5 mL 的0.1% 膠原酶Ⅱ并置于轉(zhuǎn)速為120 r/min 的恒溫磁力攪拌器中,37 ℃恒溫消化8 min。小心吸走上清,加入膠原酶,重復(fù)8~10 次上述過程,直至心臟消化完全。從第2 次消化開始,取上清加入等體積完全培養(yǎng)液,混合均勻。細胞懸液以室溫轉(zhuǎn)速200×g離心5 min,用完全培養(yǎng)液將細胞重懸,種于細胞培養(yǎng)皿中,置于37 ℃、5% CO2條件下培養(yǎng)。24 h 后更換培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),此時貼壁的CFs 為原代細胞。采用免疫熒光法檢測波形蛋白(vimentin)以鑒定CFs。

      3.2 新生小鼠CFs 的分離與培養(yǎng)采用Neonatal Heart Dissociation Kit 進行分離。步驟如下:取40 只1~2 d 小鼠心臟,剪掉心臟上的血管組織,在預(yù)冷的平衡鹽溶液(Hanks balanced salt solution,HBSS)中沖洗2 遍,用剪刀把心臟組織剪碎并放入含有酶液的組織解離管中,利用Gentle MACS Octo Dissociator儀器消化心臟;消化結(jié)束后立即用完全培養(yǎng)液終止消化,70 μm 濾網(wǎng)過濾,200×g離心5 min,棄上清,使用紅細胞裂解液去除紅細胞,200×g離心5 min。用完全培養(yǎng)液重懸細胞沉淀,種于10 cm 細胞培養(yǎng)皿中,置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2 h,進行差速貼壁,去除未貼壁細胞,已貼壁為原代的CFs。用免疫熒光法檢測vimentin對CFs進行鑒定。

      3.3 細胞傳代成年小鼠和新生小鼠CFs 生長至匯合度達90% 時,用1 mL 2.5 g/L 的胰蛋白酶37 ℃消化1 min 至細胞變圓,棄酶液,加入3 mL 完全培養(yǎng)液終止消化。細胞計數(shù)后,調(diào)整細胞數(shù)至1.6×106接種于10 cm細胞培養(yǎng)皿中繼續(xù)培養(yǎng)。

      3.4 實驗分組CFs 傳代至不同細胞代數(shù)(P1~P4),用完全培養(yǎng)液培養(yǎng)過夜后,更換為含不同濃度(0%、2% 和5%)胎牛血清(fetal bovine serum,F(xiàn)BS)的培養(yǎng)液,正常培養(yǎng)或加入終濃度為10?6mol/L的Ang II繼續(xù)培養(yǎng),分別記為對照(control,Ctrl)組和Ang II組,24或48 h后收集樣品進行檢測。

      3.5 Western blot提取各組細胞樣品,使用二喹啉甲酸法(bicinchoninic acid,BCA)測定樣品中蛋白濃度,取相同質(zhì)量的蛋白樣品進行SDS-PAGE,轉(zhuǎn)至硝酸纖維素膜。用TBST 緩沖液配制的5% 脫脂牛奶室溫封閉1 h 后,分別加入Ⅰ抗[α-SMA(1∶20 000)、Col I(1∶1 000)、FN(1∶1 000)和GAPDH(1∶10 000)]4 ℃孵育過夜。TBST 漂洗3 次,每次10 min,加入山羊抗兔的Ⅱ抗(稀釋比例分別為1∶40 000、1∶2 000、1∶2 000和1∶20 000)室溫孵育1 h。TBST 漂洗3 次,每次10 min。使用GeneSys ECL 化學(xué)發(fā)光法系統(tǒng)成像。用ImageJ 圖像分析軟件測量灰度值,采用目的蛋白/GAPDH灰度值比值來計算蛋白的表達水平。

      3.6 固定細胞免疫熒光技術(shù)棄掉培養(yǎng)液用PBS洗滌后加入4% 多聚甲醛室溫固定30 min,PBS 洗3次,每次5 min。用0.1% 的TritonX-100 室溫破膜10 min,再用PBS洗3次,每次5 min。用1% 牛血清白蛋白室溫封閉30 min 后加PBS 稀釋的Ⅰ抗(1∶100)4 ℃孵育過夜。用PBS洗3次,每次5 min后,加入PBS稀釋的Alexa Fluor 488偶聯(lián)的熒光Ⅱ抗(1∶200)室溫避光孵育1 h。PBS 洗3 次,每次5 min,Hoechst 33342染細胞核6 min。利用Array Scan 高內(nèi)涵系統(tǒng)采集各通道熒光,并分析熒光強度。

      3.7 qPCR用Trizol 試劑提取細胞中的RNA,采用Promega 試劑盒逆轉(zhuǎn)錄后使用Bio-Rad CFX96 Touch進行qPCR(1 μg RNA)檢測。以GAPDH 為內(nèi)參照,通過2?ΔΔCt法比較目的基因的表達差異。引物由北京睿博興科生物技術(shù)有限公司合成,序列見表1。

      表1 qPCR引物序列Table 1.Sequences of the primers for qPCR

      4 統(tǒng)計學(xué)處理

      采用Prism 8 軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SEM)表示。多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)或Kruskal-Wallis檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

      結(jié) 果

      1 成年小鼠CFs不同代數(shù)比較,P1成年小鼠CFs在Ang II刺激后轉(zhuǎn)分化標(biāo)志物表達顯著增加

      成年小鼠CFs傳代的處理流程及鑒定如圖1A、B所示。細胞免疫熒光結(jié)果顯示,僅P1 成年小鼠CFs接受Ang II 刺激48 h 后,其α-SMA、Col I 和FN 的平均熒光強度較對照組顯著增強(P<0.05);處于P2~P4 的CFs 中α-SMA、Col I 和FN 平均熒光強度與對照組相比均無顯著變化(P>0.05),見圖1C。qPCR和Western blot 結(jié)果同樣顯示,僅P1 CFs 接受Ang II刺激48 h 后,其α-SMA、Col I 和FN 表達水平顯著上升(P<0.05),見圖1D、E。且隨著代數(shù)增加,基礎(chǔ)狀態(tài)下,P4 CFs中α-SMA 和Col I平均熒光強度(圖1C)和表達水平(圖1D)較P1 CFs顯著上升。

      2 新生小鼠CFs不同代數(shù)比較,P1新生小鼠CFs在Ang II刺激后,轉(zhuǎn)分化標(biāo)志物表達顯著增加

      新生小鼠CFs傳代的處理流程及鑒定如圖2A、B所示。與成年小鼠類似,細胞免疫熒光結(jié)果顯示,僅P1 新生小鼠CFs 接受Ang II 刺激48 h 后,其α-SMA、Col I 和FN 的平均熒光強度較對照組顯著增強(P<0.05);處于P2~P4 的CFs 中α-SMA、Col I 和FN 平均熒光強度與對照組相比均無顯著變化(P>0.05),見圖2C。qPCR 和Western blot 結(jié)果也顯示,僅P1 CFs接受Ang II 刺激48 h 后,其α-SMA、Col I 和FN 表達水平顯著上升(P<0.05),見圖2D、E。且隨著代數(shù)增加,基礎(chǔ)狀態(tài)下,P4 CFs 中α-SMA、Col I和FN 表達水平較P1 CFs顯著上升,見圖2D。

      3 Ang II 刺激成年小鼠CFs 不同時程比較,Ang II分別刺激24和48 h均可引起成年小鼠CFs轉(zhuǎn)分化

      成年小鼠CFs細胞的處理如圖3A所示。細胞免疫熒光結(jié)果顯示,Ang II 分別處理24 和48 h 后,P1 CFs 中α-SMA、Col I 和FN 的平均熒光強度與對照組相比 均顯 著增 強(P<0.05),見 圖3B。 qPCR 和Western blot 結(jié)果顯示,P1 CFs 給予Ang II 刺激24 和48 h,細胞中α-SMA、Col I 和FN 的mRNA 和蛋白表達水平與對照組相比均顯著升高(P<0.05),見圖3C、D。

      Figure 1.Transdifferentiation of adult mouse cardiac fibroblasts in different passages(P1 to P4)induced by Ang II for 48 h.A:the schematic diagram of cell culture;B:vimentin in adult mouse cardiac fibroblasts observed by immunofluorescence staining(scale bar=20 μm);C:immunofluorescence staining(scale bar=25 μm)and average fluorescence intensity of α-SMA,Col I and FN;D:the mRNA expression of α-SMA, Col I and FN detected by qPCR;E:the protein expression of α-SMA,Col I and FN detected by Western blot.Mean±SEM. n=6.*P<0.05,**P<0.01 vs Ctrl(P1)group.圖1 成年小鼠成纖維細胞不同代數(shù)(P1~P4)給予Ang II刺激48 h后的轉(zhuǎn)分化情況

      Figure 2.Transdifferentiation of neonatal mouse cardiac fibroblasts in different passages(P1 to P4)induced by Ang II for 48 h.A:the schematic diagram of cell culture;B:vimentin in neonatal mouse cardiac fibroblasts observed by immunofluorescence staining(scale bar=20 μm);C:immunofluorescence staining(scale bar =25 μm)and average fluorescence intensity of α-SMA,Col I and FN;D:the mRNA expression of α-SMA,Col I and FN detected by qPCR;E:the protein expression of α-SMA,Col I and FN detected by Western blot.Mean±SEM. n=6.*P<0.05,**P<0.01 vs Ctrl(P1)group.圖2 新生小鼠成纖維細胞不同代數(shù)(P1~P4)給予Ang II刺激48 h后的轉(zhuǎn)分化情況

      4 Ang II 刺激新生小鼠CFs 不同時程比較,Ang II刺激48 h可引起P1新生小鼠CFs轉(zhuǎn)分化

      新生小鼠CFs細胞的處理如圖4A所示。細胞免疫熒光結(jié)果顯示,Ang II處理24和48 h后,P1新生小鼠CFs中α-SMA 和Col I的平均熒光強度與對照組相比均顯著增強(P<0.05),但FN的平均熒光強度僅在刺激48 h 后顯著增強,見圖4B。qPCR 和Western blot 結(jié)果均顯示,Ang II 處理24 和48 h 后,P1 CFs 中α-SMA 的mRNA 和蛋白表達水平與對照組相比均顯著上升(P<0.01),但Col I 和FN 的表達水平僅在刺激48 h后顯著升高,見圖4C、D。

      5 比較不同血清濃度培養(yǎng)液培養(yǎng)成年小鼠CFs,在含0% 和2% FBS 的培養(yǎng)液培養(yǎng)時,CFs 受Ang II 刺激后轉(zhuǎn)分化更顯著

      成年小鼠CFs細胞的處理如圖5A所示。細胞免疫熒光結(jié)果顯示,在含0% 和2% FBS 的培養(yǎng)液中培養(yǎng)時,P1 CFs接受Ang II刺激48 h后,其α-SMA、Col I和FN的平均熒光強度與對照組相比均顯著增強(P<0.05),見圖5B。qPCR 和Western blot 結(jié)果顯示,這些標(biāo)志物的mRNA 和蛋白水平變化與免疫熒光的結(jié)果一致,見圖5C、D。值得注意的是,在無Ang II刺激情況下,5% FBS 培養(yǎng)液與0% FBS 培養(yǎng)液相比,CFs中α-SMA、Col I 和FN 的mRNA 表達水平均顯著升高,見圖5C。

      6 比較不同血清濃度培養(yǎng)液培養(yǎng)新生小鼠CFs,在含0% 和2% FBS 的培養(yǎng)液培養(yǎng)時,CFs 受Ang II 刺激后轉(zhuǎn)分化更顯著

      新生小鼠CFs細胞的處理如圖6A所示。細胞免疫熒光結(jié)果顯示,分別在含0% 和2% FBS 的培養(yǎng)液中培養(yǎng)時,P1 新生小鼠CFs 接受Ang II 刺激48 h 后,其α-SMA、Col I和FN 的平均熒光強度與對照組相比顯著增強(P<0.05);在含5% FBS 的培養(yǎng)液中培養(yǎng)時,CFs中α-SMA、Col I和FN的平均熒光強度與對照組相比無顯著差異,見圖6B。qPCR 和Western blot結(jié)果呈現(xiàn)了一致的變化趨勢,見圖6C、D。同樣在無Ang II刺激情況下,5% FBS 培養(yǎng)液與0% FBS 培養(yǎng)液相比,CFs中α-SMA、Col I和FN的mRNA表達水平均顯著升高,見圖6C。

      討 論

      本研究對成年小鼠和新生小鼠CFs 轉(zhuǎn)分化的實驗條件進行了評估,結(jié)果表明成年小鼠CFs 最適宜的實驗條件為:P1,含0%或2% FBS的培養(yǎng)液,Ang II刺激24 或48 h;新生小鼠CFs 最適宜的實驗條件為:P1,含0%或2% FBS的培養(yǎng)液,Ang II刺激48 h。

      CFs具有強大的分化潛能,增殖能力強且代謝旺盛,可體外培養(yǎng)、多次傳代[14-17]。有研究提出,當(dāng)在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)時,與P0 的大鼠CFs 相比,P1~P3 細胞的大小顯著增加,細胞中的肌成纖維細胞標(biāo)志物α-SMA、vimentin、前列腺素和Col I表達水平顯著升高,大鼠CFs 隨著傳代數(shù)的增加,肌成纖維細胞的含量增多[18-19]。本研究利用Ang II 在不同細胞代數(shù)情況下刺激成年小鼠和新生小鼠的CFs,結(jié)果顯示P1 成年小鼠和新生小鼠CFs 在接受Ang II 刺激48 h 后均可出現(xiàn)顯著轉(zhuǎn)分化,隨著細胞傳代次數(shù)的增加,成年小鼠和新生小鼠CFs 自身也可以出現(xiàn)轉(zhuǎn)分化,導(dǎo)致Ang II無法進一步誘導(dǎo)轉(zhuǎn)分化。

      據(jù)報道,用Ang II 刺激成年小鼠和新生小鼠CFs 24 h 可顯著上調(diào)細胞內(nèi)肌成纖維細胞的標(biāo)志物α-SMA 的表達,刺激至48 h 時,表達水平持續(xù)上升[20]。本研究使用Ang II 刺激P1 成年小鼠CFs 24 或48 h,刺激P1 新生小鼠CFs 48 h,均可出現(xiàn)顯著的轉(zhuǎn)分化。在Ang II 刺激P1 新生小鼠CFs 24 h 時,僅轉(zhuǎn)分化標(biāo)志物α-SMA 的表達顯著升高,細胞外基質(zhì)蛋白Col I和FN 的表達無顯著差異。結(jié)合之前的研究,我們推斷在Ang II 刺激P1 新生小鼠CFs 24 h 時,可能由于刺激時間較短,不足以誘導(dǎo)細胞發(fā)生顯著的轉(zhuǎn)分化導(dǎo)致構(gòu)建模型不穩(wěn)定。所以,使用Ang II 構(gòu)建成年小鼠細胞模型時,刺激時程24 和48 h 均適用;而構(gòu)建新生小鼠細胞模型時,選擇48 h更合適。

      FBS 是一種含有細胞生長和維持所需營養(yǎng)物質(zhì)的復(fù)合物[21]。研究顯示,F(xiàn)BS 以劑量依賴的方式激活小鼠CFs中TGF-β1信號通路,促進CFs轉(zhuǎn)分化[22]。本研究對在含0% FBS、2% FBS 和5% FBS 的培養(yǎng)液中培養(yǎng)的成年小鼠和新生小鼠CFs 給予Ang II 刺激48 h 后,觀察成年小鼠和新生小鼠CFs 僅在含0% 和2% FBS 的培養(yǎng)液中培養(yǎng)時,細胞發(fā)生顯著的轉(zhuǎn)分化。我們的結(jié)果還顯示,在無Ang II 刺激情況下,5% FBS 培養(yǎng)液與0% FBS 培養(yǎng)液相比,CFs 中α-SMA、Col I 和FN 的mRNA 表達水平均顯著升高。因此,我們推斷導(dǎo)致上述差異的原因可能是在高血清狀態(tài)下,血清會促進CFs轉(zhuǎn)分化導(dǎo)致Ang II無法進一步誘導(dǎo)細胞的轉(zhuǎn)分化,過高的血清濃度均會影響成年小鼠和新生小鼠CFs的轉(zhuǎn)分化。

      Figure 3.Transdifferentiation of adult mouse cardiac fibroblasts after Ang II stimulation for 24 and 48 h.A:the schematic diagram of cell culture;B:immunofluorescence staining(scale bar =25 μm)and average fluorescence intensity of α-SMA,Col I and FN;C:the mRNA expression of α-SMA,Col I and FN detected by qPCR;D:the protein expression of α-SMA,Col I and FN detected by Western blot.Mean±SEM. n=6.*P<0.05,**P<0.01 vs Ctrl(24 h)group;#P<0.05,##P<0.01 vs Ctrl(48 h)group.圖3 成年小鼠成纖維細胞在Ang II刺激24和48 h后的轉(zhuǎn)分化情況

      Figure 5.Transdifferentiation of adult mouse cardiac fibroblasts in media containing different concentrations(0%,2% and 5%)of fe?tal bovine serum(FBS)after Ang II stimulation for 48 h.A:the schematic diagram of cell culture;B:immunofluores?cence staining(scale bar=25 μm)and average fluorescence intensity of α-SMA,Col I and FN;C:the mRNA expression of α-SMA,Col I and FN detected by qPCR;D:the protein expression of α-SMA,Col I and FN detected by Western blot.Mean±SEM. n=6.*P<0.05,**P<0.01 vs Ctrl(0% FBS)group;*P<0.05,**P<0.01 vs Ctrl(2% FBS)group.圖5 成年小鼠成纖維細胞在不同血清濃度(0%、2%和5%)培養(yǎng)液培養(yǎng)時,給予Ang II刺激48 h后的轉(zhuǎn)分化情況

      Figure 6.Transdifferentiation of neonatal mouse cardiac fibroblasts in media containing different concentrations(0%,2% and 5%)of fetal bovine serum(FBS)after Ang II stimulation for 48 h.A:the schematic diagram of cell culture;B:immunofluores?cence staining(scale bar=25 μm)and average fluorescence intensity of α-SMA,Col I and FN;C:the mRNA expression of α-SMA,Col I and FN detected by qPCR;D:the protein expression of α-SMA,Col I and FN detected by Western blot.Mean±SEM. n=6.*P<0.05,**P<0.01 vs Ctrl(0% FBS)group;#P<0.05,##P<0.01 vs Ctrl(2% FBS)group.圖6 新生小鼠成纖維細胞在不同血清濃度(0%、2%和5%)培養(yǎng)液培養(yǎng)時,給予Ang II刺激48 h后的轉(zhuǎn)分化情況

      綜上所述,本研究進一步優(yōu)化Ang II 誘導(dǎo)的CFs轉(zhuǎn)分化細胞模型的實驗條件,主要通過對成年小鼠和新生小鼠CFs 的不同代數(shù)、不同處理時程和不同血清濃度培養(yǎng)液培養(yǎng)進行評估,顯示在含0% 或2%FBS 的培養(yǎng)液中用Ang II 刺激P1 成年小鼠24 或48 h均可以出現(xiàn)顯著的轉(zhuǎn)分化,在含0% 或2% FBS 的培養(yǎng)液中用Ang II刺激P1新生小鼠48 h可以出現(xiàn)顯著的轉(zhuǎn)分化。以上分別是CFs轉(zhuǎn)分化成年小鼠/新生小鼠細胞模型的較優(yōu)的實驗條件。本研究將為后續(xù)對于心臟纖維化的相關(guān)研究奠定實驗基礎(chǔ)。

      猜你喜歡
      轉(zhuǎn)分化纖維細胞培養(yǎng)液
      從一道試題再說血細胞計數(shù)板的使用
      Tiger17促進口腔黏膜成纖維細胞的增殖和遷移
      滇南小耳豬膽道成纖維細胞的培養(yǎng)鑒定
      調(diào)整蔗糖、硼酸和pH值可優(yōu)化甜櫻桃花粉萌發(fā)培養(yǎng)液
      不同培養(yǎng)液對大草履蟲生長與形態(tài)的影響研究
      甘草酸聯(lián)合大黃素抑制成纖維細胞增殖及轉(zhuǎn)分化的抗腎臟纖維化作用
      中成藥(2018年5期)2018-06-06 03:12:04
      胃癌組織中成纖維細胞生長因子19和成纖維細胞生長因子受體4的表達及臨床意義
      依那普利對單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎組織胰島素樣生長因子-1表達及腎小管上皮細胞轉(zhuǎn)分化的影響
      超級培養(yǎng)液
      兩種制備大鼠胚胎成纖維細胞的方法比較
      安乡县| 司法| 台中县| 天峨县| 勐海县| 荔浦县| 杭锦旗| 奇台县| 麻阳| 长乐市| 七台河市| 东阳市| 卓资县| 星座| 且末县| 濮阳县| 通许县| 怀仁县| 屯留县| 奉化市| 鹰潭市| 许昌县| 公安县| 那坡县| 姜堰市| 五大连池市| 墨脱县| 满洲里市| 忻州市| 景谷| 马公市| 南城县| 图们市| 利辛县| 舞钢市| 汝城县| 宜丰县| 曲周县| 澎湖县| 邢台市| 齐齐哈尔市|