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      鰱魚(yú)骨蛋白水解物對(duì)肌原纖維蛋白凝膠特性的影響

      2022-02-16 05:25:50王鵬穆雅慧何思寧王璐歸艷馬松艷郭麗
      農(nóng)產(chǎn)品加工 2022年2期
      關(guān)鍵詞:鰱魚(yú)肌原纖維魚(yú)骨

      王鵬,穆雅慧,何思寧,王璐,歸艷,馬松艷,郭麗

      (綏化學(xué)院食品與制藥工程學(xué)院,黑龍江 綏化 152061)

      鰱魚(yú)(Hypophthalmichthys molitrix)是我國(guó)淡水養(yǎng)殖的主要魚(yú)類之一,2018年養(yǎng)殖產(chǎn)量為385.864萬(wàn)t,占淡水魚(yú)養(yǎng)殖量的15.17%[1]。鰱魚(yú)價(jià)格低、肉質(zhì)鮮嫩,是生產(chǎn)魚(yú)糜等加工制品的常用蛋白質(zhì)資源。但與傳統(tǒng)的海水魚(yú)類相比,淡水魚(yú)凝膠形成能力弱,同時(shí)在魚(yú)糜制品生產(chǎn)過(guò)程中易發(fā)生蛋白質(zhì)氧化,因此需要添加外源物質(zhì)減少蛋白質(zhì)氧化降解,增強(qiáng)其凝膠品質(zhì)[2-3]。

      有研究發(fā)現(xiàn),骨蛋白水解物能夠抑制鯉魚(yú)魚(yú)糜的蛋白和脂肪氧化變性,濃度越高效果越明顯[4]。酶法制備的具有抗氧化活性的魚(yú)糜加工副產(chǎn)物水解物,可明顯改善魚(yú)糜產(chǎn)品凝膠性質(zhì)和保水能力[5]。試驗(yàn)利用中性蛋白酶制備魚(yú)骨蛋白水解物,研究魚(yú)骨蛋白水解物對(duì)鰱魚(yú)肌原纖維蛋白凝膠性質(zhì)及抗氧化活性的影響,以期為魚(yú)糜制品的工業(yè)應(yīng)用提供理論參考。

      1 材料與方法

      1.1 材料與儀器

      鮮活鰱魚(yú),購(gòu)于大潤(rùn)發(fā)超市;中性蛋白酶(60 000 U/g),北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司提供;8-苯氨基-1-萘磺酸銨鹽(ANS),深圳市美凱特科技有限公司提供;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH),南京奧多福尼生物科技有限公司提供;2,2'-聯(lián)氮-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS),北京酷爾化學(xué)科技有限公司提供;乙二胺四乙酸(EDTA),天津中和盛泰化工有限公司提供;十二烷基硫酸鈉(SDS),天津市大茂化學(xué)試劑廠提供;5,5-二硫代二硝基苯甲酸鹽(DNTB),阿拉丁控股集團(tuán)有限公司提供。

      JJ-2B型組織搗碎機(jī),江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司產(chǎn)品;CR-400型色差儀,日本柯尼卡美能達(dá)公司產(chǎn)品;GL-16G-II型高速冷凍離心機(jī),上海市安亭科學(xué)儀器廠產(chǎn)品;TA-XT.puls型質(zhì)構(gòu)儀,英國(guó)Stable Micro System公司產(chǎn)品;Hitachi S-3400N型掃描電子顯微鏡,日本日立公司產(chǎn)品。

      1.2 試驗(yàn)方法

      1.2.1 魚(yú)骨蛋白水解物的制備

      參考張寶林[6]的方法制備鰱魚(yú)骨蛋白水解物,并略作修改。將鰱魚(yú)骨洗凈,在50℃水中蒸煮1~2 h,以除去魚(yú)骨上的殘肉,將魚(yú)骨剪成1~2 cm的小段,采用正丁醇除去魚(yú)骨中油脂,將脫脂后魚(yú)骨用水清洗3次,再用0.6 mol/L的鹽酸為溶劑,料液比為1∶9,進(jìn)行超聲脫鈣處理,脫鈣時(shí)間為60 min,功率為504 W。脫鈣后吸去魚(yú)骨表面的水分,稱重記錄質(zhì)量,用組織搗碎機(jī)將魚(yú)骨絞碎。以0.02 mol/L磷酸緩沖溶液為溶劑,用中性蛋白酶進(jìn)行水解。提取條件為pH值7.0,酶底比600 U/g,酶解時(shí)間6 h,酶解溫度50~55℃,料液比為1∶20。酶解完成后用沸水滅酶10 min,以轉(zhuǎn)速4 000 r/min離心15 min,上清液即為水解液。然后將所得水解液冷凍、干燥,并在4℃下儲(chǔ)存使用。

      1.2.2 鰱魚(yú)肌原纖維蛋白的制備

      將新鮮鰱魚(yú)除去內(nèi)臟、皮、頭和尾部,取靠近背部的肉150 g,放入組織搗碎機(jī)搗碎,加入5倍體積pH值7.5的0.02 mol/L磷酸鹽緩沖溶液攪拌均勻,肌肉勻漿液在4℃條件下以轉(zhuǎn)速4 300 r/min離心15 min后,棄去上清液,取出沉淀,在相同條件下用上述5倍體積磷酸鹽緩沖溶液洗滌所得沉淀2次,所得沉淀用5倍體積0.1 mol/L的NaCl溶液在相同的條件下洗滌2次,最后一次離心前抽濾,除去勻漿液中的結(jié)締組織,抽濾結(jié)束后在4℃條件下以轉(zhuǎn)速4 300 r/min離心15 min,得到的沉淀即為肌原纖維蛋白[7]。

      1.2.3 魚(yú)骨蛋白水解物-肌原纖維蛋白懸浮液制備

      取肌原纖維蛋白,加入內(nèi)含0.6 mol/L NaCl的pH值6.5的0.02 mol/L磷酸鹽緩沖液溶解,配制蛋白質(zhì)最終質(zhì)量濃度為40 mg/mL的肌原纖維蛋白懸浮液。再向肌原纖維蛋白懸浮液中分別加入1%,2%,4%,6%,8%的魚(yú)骨蛋白水解物(W/肌原纖維蛋白濕重),未添加魚(yú)骨蛋白水解物為對(duì)照,在4℃下靜置穩(wěn)定12 h。

      1.2.4 凝膠制備

      肌原纖維蛋白凝膠制備方法采用二次加熱法[7]。將得到肌原纖維蛋白添加不同濃度魚(yú)骨蛋白水解物,在40℃水浴條件下加熱30 min后,再放入90℃水浴下加熱20 min,加熱完畢后在冰水中冷卻,最后將得到凝膠放入4℃條件下平衡24 h。

      1.3 測(cè)定方法

      1.3.1 肌原纖維蛋白含量的測(cè)定

      向試管中分別加入質(zhì)量濃度為10 mg/mL的牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5 mL,再用水補(bǔ)足至1 mL,加入4 mL雙縮脲試劑,搖勻后室溫放置30 min,于波長(zhǎng)540 nm處測(cè)定吸光度。未加牛血清白蛋白溶液做空白對(duì)照,以蛋白質(zhì)含量為橫坐標(biāo),得到的吸光度為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。準(zhǔn)確量取肌原纖維蛋白稀釋液1 mL加雙縮脲試劑4 mL,室溫反應(yīng)30 min后,于波長(zhǎng)540 nm處測(cè)定吸光度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白含量[8]。得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線為:Y=0.260 3X+0.001 1,R2=0.999 8。

      1.3.2 肌原纖維蛋白總巰基和活性巰基的測(cè)定

      參照吳滿剛[9]方法,取3 mL肌原纖維蛋白稀釋液于比色管中,加入pH值7.0的0.1 mol/L磷酸鹽緩沖溶液3 mL(內(nèi)含1 mmol/L EDTA、8 mol/L尿素、1% SDS),再加入1%的DNTB溶液0.1 mL,以不加DNTB為空白,劇烈振蕩搖勻后,在25℃水浴中放置1 h,然后以轉(zhuǎn)速3 000 r/min離心15 min。然后于波長(zhǎng)412 nm處測(cè)上清液的吸光度,計(jì)算總巰基的含量。測(cè)活性巰基含量時(shí)用的是pH值7.0的磷酸鹽緩沖溶液(內(nèi)含1 mmol/L EDTA、1% SDS),其他步驟同上,計(jì)算活性巰基的含量。

      式中:A——吸光度;

      N——稀釋倍數(shù);

      C——分子吸光系數(shù)13 600 M-1cm-1;

      M——肌原纖維蛋白含量,mg/mL。

      1.3.3 表面疏水性的測(cè)定

      配制成pH值7.0的0.1 mol/L磷酸緩沖液(PBS),再稱取0.120 g ANS,用pH值7.0的0.1 mol/L PBS溶解并定容至50 mL。取4 mL蛋白液加入20 μL預(yù)先配置的ANS溶液,振蕩混勻。使用熒光分光光度計(jì)測(cè)定樣品熒光強(qiáng)度,激發(fā)波長(zhǎng)374 nm,發(fā)射波長(zhǎng)485 nm。以蛋白濃度為橫坐標(biāo),熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)作圖,計(jì)算線性回歸方程曲線斜率,肌原纖維蛋白表面疏水性用SoANS表示[10]。

      1.3.4 白度的測(cè)定

      用手握住色差儀,將色差儀垂直放置于凝膠表面,測(cè)定完畢后,記錄好數(shù)據(jù)并用擦鏡紙擦干色差儀的鏡頭表面,每次放置力度保持均勻,記錄L*(亮度),a*(紅/綠度)和b*(黃色/藍(lán)),平行測(cè)定3次。

      式中:L*——亮度值;

      a*——紅/綠度值;

      b*——黃/藍(lán)度值。

      1.3.5保水性的測(cè)定

      參照Foegeding E A[11]方法,稍作改動(dòng)。取2 g凝膠樣品放入離心管中稱重,在轉(zhuǎn)速10 000 r/min,溫度4℃條件下離心時(shí)間3 min,完成后倒掉離心出來(lái)的水,再稱離心管和凝膠的質(zhì)量,通過(guò)以下公式計(jì)算凝膠保水性,平行測(cè)3次。

      式中:M——離心管質(zhì)量,g;

      M1——離心管與離心后除去水的凝膠總質(zhì)量,g;

      M2——離心前離心管與凝膠總質(zhì)量,g。

      1.3.6 持油性的測(cè)定

      稱取1 g凝膠樣品于離心管中,稱得凝膠與離心管重并記錄,加入5 mL大豆油劇烈振動(dòng)5 min后,在25℃條件下放置30 min,以轉(zhuǎn)速4 000 r/min離心20 min,離心后移去上層大豆油,并稱重,平行測(cè)定3次。

      式中:W0——凝膠樣品質(zhì)量,g;

      W1——凝膠與離心管的質(zhì)量,g;

      W2——凝膠、離心管與色拉油的質(zhì)量,g

      1.3.7 凝膠強(qiáng)度的測(cè)定

      凝膠樣品置于4℃穩(wěn)定12 h后,去除凝膠表面的液體,室溫下放置10 min后進(jìn)行質(zhì)構(gòu)分析。選用直徑10 mm的圓柱狀探頭(P/0.5S),設(shè)定測(cè)試前速度1 mm/s,測(cè)試中速度0.5 mm/s,測(cè)試后速度10 mm/s,穿刺距離10 mm,觸發(fā)力10 g,數(shù)據(jù)速度100(每秒鐘取點(diǎn)數(shù)),通過(guò)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析[12]。

      1.3.8 微觀結(jié)構(gòu)的測(cè)定

      將肌原纖維蛋白凝膠樣品切成小切條(5 mm×5 mm×5 mm),用2.5%的戊二醛在4℃固定24 h。用pH值7.0的0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液洗滌肌原纖維蛋白凝膠條3次,除去戊二醛流體,每次持續(xù)10 min。將除去戊二醛的肌原纖維蛋白凝膠條依次在50%,70%,80%,90%,100%乙醇中脫水10 min,重復(fù)3次。肌原纖維蛋白凝膠條用100%乙醇∶叔丁醇(1∶1)和叔丁醇置換15 min后,將肌原纖維蛋白凝膠條冷凍干燥36 h。使用掃描電子顯微鏡測(cè)定肌原纖維蛋白凝膠的微觀結(jié)構(gòu)[13]。

      1.3.9 抗氧化性的測(cè)定

      (1)ABTS自由基清除能力。配制7 mmol/LABTS溶液,將ABTS與2.45 mmol/L的過(guò)硫酸鉀溶液混合,將混合溶液置于25℃環(huán)境下避光存放12~16 h,從而得到ABTS儲(chǔ)備液。用pH值4.5、濃度20 mmol/L乙酸鈉溶液稀釋至波長(zhǎng)734 nm處的吸光度為0.7±0.02。取3 mL該溶液與20 μL試樣液混合后放置6 min,于波長(zhǎng)734 nm處測(cè)定吸光度。

      式中:I——ABTS自由基清除率,%;

      A0——對(duì)照的吸光度;

      As——樣品的吸光度。

      (2)DPPH自由基清除能力。樣品組Ai用2 mL稀釋后待測(cè)溶液與DPPH溶液2 mL均勻混合;空白組Aj是用2 mL稀釋后待測(cè)溶液與2 mL乙醇均勻混合;對(duì)照組Ac為2 mL純凈水與DPPH溶液2 mL均勻混合。

      (3)羥自由基清除能力。在試管中加入pH值7.4的0.2 mol/L磷酸鹽緩沖液2 mL,去離子水1.0 mL,將上述液體搖勻;繼續(xù)加入0.75 mol/L FeSO4溶液1.0 mL,充分混勻;加入0.01%H2O21.0 mL,振蕩1 min,加入1.5 mmol/L鄰二氮菲無(wú)水乙醇溶液1.0 mL,將混合液在37℃水浴45 min,于波長(zhǎng)536 nm處檢測(cè)反應(yīng)體系吸光度Ap,以去離子水1.0 mL代替H2O21.0 mL,其余條件相同,測(cè)其吸光度A,以樣液1.0 mL代替去離子水,其余條件相同,測(cè)其吸光度值A(chǔ)s。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白疏水性的影響

      鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白疏水性的影響見(jiàn)圖1。

      圖1 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白疏水性的影響

      由圖1可知,與形成凝膠前相比,鰱魚(yú)肉肌原纖維蛋白形成凝膠后,表面疏水性明顯增加,增加至凝膠形成前的15.5倍,因?yàn)榈鞍准訜嵝纬赡z,高溫破壞了蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu),讓更多的疏水性氨基酸暴露出來(lái),導(dǎo)致凝膠的表面疏水性增大。

      隨著鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量增加,肌原纖維蛋白凝膠表面疏水性總體呈下降趨勢(shì),由于外露的疏水性基團(tuán)增加到一定程度時(shí),部分蛋白質(zhì)分子通過(guò)疏水相互作用形成蛋白質(zhì)聚集,使暴露在蛋白分子表面的疏水基團(tuán)又被包埋[14],從而導(dǎo)致表面疏水性下降。

      2.2 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白總巰基和活性巰基的影響

      鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白總巰基和活性巰基的影響見(jiàn)圖2。

      圖2 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白總巰基和活性巰基的影響

      由圖2可知,當(dāng)添加鰱魚(yú)骨蛋白水解物后,總巰基含量、活性巰基的含量呈現(xiàn)逐漸上升趨勢(shì),可能是隨著鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量的增加,使得肌原纖維蛋白結(jié)構(gòu)部分展開(kāi),從而使蛋白結(jié)構(gòu)中的二硫鍵變化形成巰基,使總巰基含量得以升高。而蛋白溶解度提高,會(huì)使包埋于分子內(nèi)部的巰基暴露出來(lái),進(jìn)而使得活性巰基的含量逐漸增加[15]。

      2.3 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋凝膠白度的影響

      鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白凝膠白度的影響見(jiàn)圖3。

      圖3 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白凝膠白度的影響

      由圖3可知,當(dāng)添加量為1%~2%時(shí),添加鰱魚(yú)骨蛋白水解物的肌原纖維蛋白凝膠白度明顯高于空白對(duì)照,當(dāng)添加量為2%時(shí),凝膠的白度達(dá)到最大,為35.80。鰱魚(yú)骨蛋白水解物本身呈白色,使凝膠的白度值有所增加。凝膠的白度變化大小取決于蛋白質(zhì)變性的程度,白度值越小說(shuō)明蛋白質(zhì)變性程度越嚴(yán)重。當(dāng)添加量大于4%時(shí),白度值有所下降,可能是由于水解物添加量較大,攪拌溶解時(shí)間增加,進(jìn)而導(dǎo)致肌原纖維蛋白在空氣中暴露時(shí)間較長(zhǎng),從而導(dǎo)致凝膠白度降低[16]。

      2.4 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白凝膠保水性的影響

      鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白凝膠保水性的影響見(jiàn)圖4。

      圖4 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白凝膠保水性的影響

      隨著鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量的增多,肌原纖維蛋白凝膠的保水性呈上升趨勢(shì),鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量為6%以上時(shí),與未添加鰱魚(yú)骨蛋白水解物凝膠相比保水性提高了5%。鰱魚(yú)骨蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)水解后產(chǎn)生小分子肽,當(dāng)其添加到魚(yú)糜凝膠中時(shí),自身可能會(huì)填充到魚(yú)糜凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中,使凝膠更加致密,從而提高魚(yú)糜制品的保水性[17]。

      2.5 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋凝膠持油性的影響

      鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白凝膠持油性的影響見(jiàn)圖5。

      圖5 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白凝膠持油性的影響

      隨著鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量的增加,肌原纖維蛋白凝膠持油性呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢(shì)。與未添加鰱魚(yú)骨蛋白水解物的凝膠相比,鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量為1%,2%時(shí),凝膠持油性降低了5.70%,2.99%,可能是添加少量鰱魚(yú)骨蛋白水解物在一定程度上破壞了蛋白質(zhì)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),物理截留油粒的能力降低,故持油性降低[18]。當(dāng)添加量為4%,6%,8%時(shí),凝膠持油性提高了0.88%,1.05%,5.26%,可能是大量的鰱魚(yú)骨蛋白水解物與肌原纖維蛋白分子結(jié)構(gòu)間產(chǎn)生相互作用,使親脂基團(tuán)大量暴露,從而提高了凝膠的持油性[19]。

      2.6 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋凝膠強(qiáng)度的影響

      鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白凝膠強(qiáng)度的影響見(jiàn)圖6。

      圖6 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白凝膠強(qiáng)度的影響

      隨著鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量的增大,肌原纖維蛋白凝膠強(qiáng)度呈先增加后下降趨勢(shì)。未添加鰱魚(yú)骨蛋白水解物的凝膠強(qiáng)度為64.59 g,當(dāng)鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量為4%時(shí),凝膠強(qiáng)度達(dá)到最大,為88.33 g,與空白對(duì)照組相比上升了36.74%,部分鰱魚(yú)骨蛋白水解物填充在蛋白質(zhì)的空隙間,使得蛋白質(zhì)凝膠強(qiáng)度一定程度上有所升高。隨著鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量的增加,凝膠強(qiáng)度有所下降,可能是由于過(guò)多的鰱魚(yú)骨蛋白水解物破壞了凝膠的結(jié)構(gòu),導(dǎo)致凝膠強(qiáng)度的下降。

      2.7 微觀結(jié)構(gòu)觀察

      不同魚(yú)骨蛋白水解物的肌原纖維蛋白凝膠電鏡圖見(jiàn)圖7。

      圖7 不同魚(yú)骨蛋白水解物的肌原纖維蛋白凝膠電鏡圖

      隨著鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量的增加,凝膠結(jié)構(gòu)變得光滑平整,由圖7可知,未添加量鰱魚(yú)骨蛋白水解物時(shí),凝膠有明顯的斷層現(xiàn)象,粗糙且有較大蜂窩狀空洞,當(dāng)添加量為1%時(shí),凝膠中有不規(guī)則空洞且有蛋白質(zhì)聚集;當(dāng)繼續(xù)增加添加量時(shí),凝膠的斷層逐漸變小,這與添加鰱魚(yú)骨蛋白水解物后凝膠強(qiáng)度的變化相一致,蛋白凝膠特性的好壞取決于蛋白質(zhì)分子伸展和交聯(lián)的相對(duì)速率,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)伸展速率高于交聯(lián)速率時(shí),蛋白質(zhì)分子得以充分伸展,從而彼此相互作用形成有序的凝膠結(jié)構(gòu);反之則形成粗糙的凝膠網(wǎng)絡(luò)[20]。當(dāng)添加量為4%時(shí),凝膠的結(jié)構(gòu)平整光滑,三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)緊密,有利于凝膠對(duì)水的束縛能力。當(dāng)添加量大于4%,凝膠的結(jié)構(gòu)又開(kāi)始松散,出現(xiàn)斷層,三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)松散,這與李學(xué)鵬等人[21]研究添加微細(xì)鰈魚(yú)魚(yú)骨泥對(duì)金線魚(yú)魚(yú)糜凝膠品質(zhì)的影響結(jié)果相近。

      2.8 鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量對(duì)肌原纖維蛋白凝膠抗氧化性的影響

      添加鰱魚(yú)骨蛋白水解物的肌原纖維蛋白對(duì)自由基清除率的影響見(jiàn)圖8。

      圖8 添加鰱魚(yú)骨蛋白水解物的肌原纖維蛋白對(duì)自由基清除率的影響

      試驗(yàn)研究鰱魚(yú)骨蛋白水解物的肌原纖維蛋白添加量清除ABTS自由基、DPPH自由基和羥自由基的影響。當(dāng)鰱魚(yú)骨蛋白水解物添加量大于4%時(shí),對(duì)ABTS自由基和DPPH自由基清除率達(dá)到最大,清除率分別為27.2%,88.4%。鰱魚(yú)骨蛋白經(jīng)酶解后結(jié)構(gòu)被破壞,形成的水解物含有抗氧化性氨基酸的肽段,增強(qiáng)了其抗氧化能力[22]。也可能是由于蛋白水解后,反應(yīng)位點(diǎn)增多,能提供更多活潑質(zhì)子與自由基結(jié)合成穩(wěn)定的物質(zhì),因而提高了抗氧化活性。

      3 結(jié)論

      研究了魚(yú)骨蛋白水解物對(duì)肌原纖維蛋白巰基、表面疏水性、凝膠性能、微觀結(jié)構(gòu)及抗氧化作用的影響。肌原纖維蛋白表面疏水性、總巰基和活性巰基含量隨魚(yú)骨蛋白水解物添加量增大而增加。添加量為4%魚(yú)骨蛋白水解物可保持使凝膠具有較高的凝膠強(qiáng)度和保水力,掃描電鏡觀察也同樣顯現(xiàn)出致密的微觀結(jié)構(gòu)。4%魚(yú)骨蛋白水解物-肌原纖維蛋白復(fù)合物清除DPPH自由基達(dá)到最高,清除率為88.4%。

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