豬圓環(huán)病毒病的診斷及防治措施

賈彥龍

（渭源縣北寨鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，甘肅 渭源 748200）

0 引言

1 發(fā)病機制

豬圓環(huán)病毒病是由豬圓環(huán)病毒（PCV）引起的一種傳染病。豬圓環(huán)病毒是迄今發(fā)現(xiàn)的最小的動物病毒，主要分為Ⅰ、Ⅱ兩種血清型，其中Ⅱ型PCV（PCV-2）具有致病性。PCV主要存在于豬只部分器官（肺臟、脾臟、扁桃體）的淋巴組織中，進而侵害豬只的免疫系統(tǒng)。此外，豬圓環(huán)病毒可與巨噬細胞、單核細胞等免疫細胞共生，導(dǎo)致患病豬只體內(nèi)單核細胞數(shù)量增多，B、T淋巴細胞中CD4+數(shù)量減少，干擾細胞的正常增殖，形成免疫抑制后導(dǎo)致豬只自免疫缺陷［1］。

2 臨床癥狀

感染豬圓環(huán)病毒的豬只由于生長發(fā)育階段不同，故其在臨床上的表現(xiàn)也不同，主要分為以下4種。

2.1 斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征

1周左右的仔豬感染豬圓環(huán)病毒后最易出現(xiàn)斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征，主要表現(xiàn)為食欲不振、精神低沉、皮膚蒼白、被毛蓬亂無光澤、行動遲緩，還伴有呼吸困難等呼吸障礙。部分患病仔豬會出現(xiàn)腹瀉、神經(jīng)紊亂等癥狀，出現(xiàn)概率較小但病死率極高。極少患病豬嗜睡或突然死亡，同時患病豬只的部分器官會發(fā)生病變，如出現(xiàn)心包積液，呈絨毛心狀，肺伴有間質(zhì)水腫、粘連。

2.2 新生仔豬先天震顫

只有新出生的仔豬感染豬圓環(huán)病毒后會出現(xiàn)先天震顫癥狀，病豬在躺臥或睡覺時會不停地顫抖。若外部環(huán)境發(fā)生變化，如氣溫突然下降或突如其來的異響等，都會引起顫抖加強。新生仔豬先天震顫可分為輕微、嚴重兩種。嚴重震顫的仔豬在出生5～7 d內(nèi)會因無法正常吮乳而餓死，存活下來的仔豬在14～21 d內(nèi)機體會逐漸恢復(fù)。

2.3 妊娠母豬繁殖障礙

妊娠母豬感染豬圓環(huán)病毒后會出現(xiàn)繁殖障礙。病豬妊娠早期感染會出現(xiàn)胎兒死亡，妊娠后期感染則會出現(xiàn)流產(chǎn)，即使未流產(chǎn)，也會導(dǎo)致出現(xiàn)死胎、弱胎、木乃伊胎等。

2.4 豬增生性壞死性間質(zhì)性肺炎

育肥期的豬只感染豬圓環(huán)病毒后會出現(xiàn)增生性壞死性間質(zhì)性肺炎，主要表現(xiàn)為病豬生長發(fā)育速度受阻，育肥速度減緩，采食量下降，全身被毛粗糙無光澤。解剖病死豬，可以看到肺部明顯腫大、炎癥反應(yīng)明顯，間質(zhì)變寬且在表面有紅色的斑點，有大量壞死的細胞存在于肺泡內(nèi)，且含有蛋白樣的物質(zhì)［2］。

3 病理變化

患豬圓環(huán)病毒病的豬只最顯著特征為全身淋巴結(jié)腫大，其中腸系膜、腹股溝淋巴結(jié)腫大后是正常狀態(tài)下的2～5倍，切面白色；可在肺部發(fā)現(xiàn)炎癥和腫脹，有橡皮樣的彌漫性病灶；腎臟水腫，質(zhì)地蒼白，并伴有壞死灶出現(xiàn)；脾臟發(fā)生腫大；心臟脂肪和心內(nèi)膜上有出血點，心包積液；小腸和結(jié)腸多腫脹并伴有壞死灶，腸系膜及腹部有黃染的脂肪；膀胱中有黃褐色的尿液；還有心肌炎等多種炎癥出現(xiàn)［3］。

4 診斷方法

經(jīng)驗豐富的獸醫(yī)可根據(jù)病豬的臨床表現(xiàn)進行初步診斷，進一步確診則需要結(jié)合患病豬的病理剖檢及專業(yè)的實驗室檢測結(jié)果。目前，該病較精確的診斷方法主要有免疫學(xué)診斷和分子生物學(xué)診斷。

④環(huán)境管理:根據(jù)血站業(yè)務(wù)工作的具體流程,合理進行布局、分區(qū)。分為采血區(qū)和非采血區(qū)、清潔區(qū)和污染區(qū),均需要隔離開來。確保采供血工作有條不紊的進行。加強環(huán)境管理,為患者提供安全、舒適的獻血環(huán)境。由專人負責引導(dǎo)工作,指導(dǎo)獻血者有序的進行檢驗和采血。采血環(huán)境應(yīng)保持整潔衛(wèi)生,并嚴格進行消毒,預(yù)防血液污染,并對報廢血和受到污染的血液進行妥善處理,確保血液質(zhì)量,采供血過程信息完整的記錄在檔案當中。

4.1 免疫學(xué)診斷

免疫學(xué)診斷方法主要是采集患病豬血液后分離血清進行檢測，包括酶聯(lián)免疫吸附法、競爭性酶聯(lián)免疫吸附法、免疫膠體金檢測法等，每種方法都有各自的優(yōu)勢。養(yǎng)殖戶可根據(jù)實際情況選擇適合的方法進行診斷。

4.1.1 酶聯(lián)免疫吸附法。酶聯(lián)免疫吸附法即ELISA。診斷人員用一次性采血器采集患病豬的靜脈血，離心后分離血清備用，然后嚴格按照豬圓環(huán)病毒酶聯(lián)免疫吸附診斷試劑盒的使用說明對采集的病豬樣本進行診斷。該方法具有較高的靈敏性、較強的特異性、較快的診斷速度等，適合養(yǎng)殖規(guī)模較大的豬場進行大規(guī)模檢測，且操作簡單，可在基層進行推廣普及。

4.1.2 競爭性酶聯(lián)免疫吸附法。診斷人員先要采集患病豬的血液并分離出血清備用，然后對照競爭性酶聯(lián)免疫試劑盒的操作說明逐步進行操作。簡要操作步驟如下：診斷人員先進行洗板，接著按照說明書在免疫板中加入抗原（即分離出的患病豬只的血清）、競爭試劑（即PCV-2的特異性單克隆抗體）競爭30 min，最后加入顯色底物后在酶標儀450 nm處進行測定，顏色越淺則說明檢測結(jié)果為陽性，即可確診該豬感染了豬圓環(huán)病毒。

4.1.3 免疫膠體金檢測法。免疫膠體金檢測法的原理是利用銀顯影液增強的標記效果，將還原的銀覆蓋在金顆粒的表面，提高膠體金的檢測限度。診斷人員通過被標記到膠體金上的特異性抗體與細胞懸液涂片或組織切片中的抗原進行特異性結(jié)合，然后在光學(xué)顯微鏡下觀察抗原與抗體表面的結(jié)合位點，從而進行準確判斷。該方法除了對Ⅱ型豬圓環(huán)病毒血清表現(xiàn)出極高的特異性外，不會對其他病毒免疫血清出現(xiàn)交叉反應(yīng)［4］。

4.2 分子生物學(xué)診斷

分子生物學(xué)檢測技術(shù)均是以PCR技術(shù)為基礎(chǔ)，主要包括常規(guī)PCR、熒光定量PCR及PCR限制性片段長度多態(tài)性分析。

4.2.1 常規(guī)PCR。常規(guī)PCR檢測方法歷史悠久，且敏感性、特異性均較高。診斷人員首先要采集患病豬的肝臟、肺臟等組織進行病毒核酸的提取，將其剪碎后置于2 mL的EP管中，加入PBS并進行研磨，反復(fù)凍融3次后離心取上清液，按照病毒DNA提取試劑盒的說明書提取樣品中的DNA，然后用其作為模板進行PCR檢測（具體PCR操作流程參考使用說明書），接著用高保真酶對PCV-2的16SrRNA進行擴增，最后對患病豬樣品的PCV-2核酸進行檢測。若在特點片段處出現(xiàn)了特異性條帶，則說明該豬感染了PCV-2病毒。

4.2.2 熒光定量PCR。診斷人員首先采集患病豬的血液，將血液離心后獲得血清，并采用核酸提取試劑盒進行病毒核酸的提取工作，然后制備豬圓環(huán)病毒的重組質(zhì)粒標準品，接著采用熒光定量PCR檢測豬圓環(huán)病毒的核酸，并通過設(shè)置陰性對照來評估特異性，分別以重組質(zhì)粒濃度的對數(shù)和Ct值作X、Y軸繪制標準曲線。當PCV在533～580 nm波長處出現(xiàn)了擴增曲線時，說明該豬感染了豬圓環(huán)病毒病。

4.2.3 PCR限制性片段長度多態(tài)性分析。診斷人員首先要采集患病豬的血液，將血液分離得到血清，然后使用限制性內(nèi)切酶從血清中分離出豬圓環(huán)病毒的DNA，接著進行凝膠電泳，并使雙鏈的DNA變性成單鏈，再進行Southern印跡，將帶有DNA的尼龍膜暴露于帶有放射性互補核苷酸探針的溶液中，使探針與尼龍膜上特定選擇的DNA序列雜交，最后將尼龍膜放置在X射線膠片上，產(chǎn)生放射自顯影圖，再根據(jù)RFLP分析以檢測模式差異來確認多態(tài)性，從而對該豬是否感染豬圓環(huán)病毒病進行診斷。

5 治療措施

5.1 常規(guī)治療措施

第一，治療人員可根據(jù)患病豬的體質(zhì)量，按照0.1 mL/kg的劑量用炎康注射液對患病豬進行肌內(nèi)注射，同時聯(lián)合應(yīng)用鹽酸嗎啉胍（具體用量可參照使用說明書），連用2 d即可。第二，治療人員可將山藥、麥芽各35 g，黃芪、洋參、山楂、甘草、白砂糖各20 g，黃芩15 g，桑葉10 g，紅花5 g，以及復(fù)合維生素B（用量0.002 g/kg）混合后研制成粉末，混入飼料中對患病豬進行飼喂，一日3次。第三，對于抗病力較弱且已經(jīng)感染豬圓環(huán)病毒病的豬只，治療人員需要根據(jù)不同階段豬的體質(zhì)量，用白細胞干擾素和黃芪多糖注射液（各10 mL，充分混合）混合液，對3～10日齡的仔豬、斷奶仔豬、育肥豬分別注射1、2、4 mL/頭，一日1次，連用3 d，以提高豬只免疫力和抵抗力；再分別稱取黃芪150 g，黨參、金銀花、連翹各50 g，甘草25 g，板藍根、茵陳各20 g，然后加1 000 mL水進行煎煮，共煎煮3次，待藥水冷卻至室溫后再根據(jù)患病豬的體質(zhì)量，按照1 mL/kg的劑量對豬只進行灌服，一日2次，連用5 d，即可起到良好的防治效果。

5.2 患病仔豬的治療措施

治療人員可根據(jù)患病豬的體質(zhì)量，按照0.2 mL/kg的劑量，對患病仔豬注射黃芪多糖，一日2次，還可對每頭豬肌內(nèi)注射聚肌胞4 mg，連用5 d即可［3］。該治療方案適合治療出現(xiàn)消化不良、腹瀉、消瘦癥狀的仔豬。

5.3 患病母豬的治療措施

治療人員可在患病母豬日糧中分別添加利高霉素1.2 kg/t、15%金霉素2.5 kg/t、阿莫西林150 g/t，添加時間為母豬分娩前7 d和母豬分娩后7 d，共用藥14 d即可［5］。

5.4 患病公豬的治療措施

治療人員應(yīng)該根據(jù)患病公豬的體質(zhì)量，按照1.5 mL/kg的劑量對豬肌內(nèi)注射黃芪多糖注射液，一日1次，連用3 d。同時，為了防止發(fā)生繼發(fā)感染，治療人員需要在豬飼料中拌入頭孢噻呋鈉水溶性粉4 g/kg，一日2次，連用5 d。

6 預(yù)防措施

6.1 加強飼養(yǎng)管理

科學(xué)的飼養(yǎng)管理可有效減少養(yǎng)殖場豬圓環(huán)病毒病的發(fā)生及流行。第一，養(yǎng)殖人員要做好圈舍的消毒工作，制定嚴格的消毒制度，每15 d進行一次全面、嚴格的消毒，確保圈舍的清潔衛(wèi)生。第二，養(yǎng)殖人員要在天氣晴朗的時候?qū)︷B(yǎng)殖場進行通風換氣，并在炎熱的夏季做好降溫工作，在寒冷的冬季做好保暖工作，以確保為豬只提供適宜的生長環(huán)境，有效避免生豬因應(yīng)激導(dǎo)致免疫力低下帶來的疫病。第三，養(yǎng)殖人員要做到科學(xué)飼喂，根據(jù)豬只的營養(yǎng)需求制訂適合不同階段豬只的飼料配方，嚴格把控飼料質(zhì)量關(guān)，禁止飼喂發(fā)霉變質(zhì)、冷凍腐爛的飼料，可在飼料中添加一些中草藥制劑（板藍根、蒲公英、黃芪多糖等）、微生態(tài)制劑（益生菌、益生元等），以提高豬只的免疫力和抵抗力，預(yù)防豬只發(fā)生豬圓環(huán)病毒病。

6.2 疫苗免疫接種

疫苗免疫接種是各畜禽養(yǎng)殖場有效減少疫病發(fā)生的重要預(yù)防手段之一，因此制定科學(xué)高效的免疫程序至關(guān)重要。養(yǎng)殖人員要根據(jù)養(yǎng)殖場的實際情況，制定切實可行的免疫制度，并做好疫苗免疫接種相關(guān)工作，減少疫病的發(fā)生及流行。為預(yù)防豬圓環(huán)病毒病，養(yǎng)殖場要加強豬圓環(huán)病毒疫苗接種工作，在妊娠母豬產(chǎn)前四五周內(nèi)對其接種Ⅱ型豬圓環(huán)病毒滅活疫苗，在仔豬出生后兩三周內(nèi)對其接種疫苗，疫苗接種量按照說明執(zhí)行。養(yǎng)殖人員對豬只接種疫苗時要事先了解疫苗免疫方法及用量，保證免疫效果和免疫質(zhì)量，以進一步降低豬群的帶菌率，提升豬群的免疫力。

6.3 科學(xué)引種繁殖

科學(xué)引種繁殖可減少養(yǎng)殖場疫病的發(fā)生。第一，養(yǎng)殖人員在引種之前要確保所引進豬只的健康，提前對豬只所在豬場的疫苗接種情況、豬只的免疫抗體等進行詳細檢查，并進行抽血檢測，必須由引種地的檢疫部門出具健康檢疫證明。第二，在運輸過程中，養(yǎng)殖人員要做好運輸車輛和運輸人員的消毒工作，避免運輸過程中豬只感染某些疫病，并盡量縮短運輸?shù)臅r間和距離，避免過度顛簸造成豬只應(yīng)激，或在運輸之前適當在飲水中加入恩諾沙星、阿莫西林等藥物進行預(yù)防。第三，新引入的豬只到達場區(qū)后，一定要在隔離后進行混養(yǎng)，一般需要對新引入的豬只進行一個月的隔離，隔離圈舍與其他圈舍的距離要大于50 m。在隔離期間，養(yǎng)殖人員要對引入豬只完成高發(fā)傳染病的檢測，確定引入豬只未攜帶其他病原后再和原豬群進行混養(yǎng)。

7 結(jié)語

近年來，豬圓環(huán)病毒病在各地養(yǎng)殖場普遍發(fā)生，給養(yǎng)殖場造成了極大的損失。因此，生豬養(yǎng)殖人員要充分了解該病的發(fā)病機制、臨床癥狀、病理變化等基礎(chǔ)知識，掌握先進科學(xué)的診斷技術(shù)，對該病進行科學(xué)治療及防控，以保障養(yǎng)殖場的效益，推動生豬養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展。