齊曉賓 , 王林光 , 謝春梅 , 程博文 , 郝敬友 , 伍 冶 , 楊宏富 , 王 闖 , 李艷華
(1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院 , 黑龍江 哈爾濱 150000 ; 2.牧原食品股份有限公司 , 河南 南陽 473000 ;3.哈爾濱品赫生物科技有限公司 , 黑龍江 哈爾濱 150000 ; 4.哈爾濱綠達(dá)生動(dòng)物藥業(yè)有限公司 , 黑龍江 哈爾濱 150000 ; 5.江西正邦養(yǎng)殖有限公司 , 江西 南昌 330000)
肺熱腑實(shí)證是一類感受風(fēng)熱而引起的內(nèi)臟熱病,基本病機(jī)為熱壅肺氣,肺失宣降,見于多種肺系疾病。該病主要導(dǎo)致肺的功能失調(diào),常見發(fā)熱咳喘、呼吸急促等呼吸道疾病臨床癥狀,嚴(yán)重時(shí)常累及其他臟腑,出現(xiàn)其他臨床癥狀。該病在各個(gè)階段的豬群都有發(fā)生,但以后備母豬、妊娠母豬、哺乳母豬、育肥豬等大豬最為常見,臨床常用抗菌藥物替米考星、氟苯尼考、鹽酸多西環(huán)素和林可霉素等治療呼吸道疾病,但易產(chǎn)生細(xì)菌耐藥性的問題,例如豬鏈球菌對(duì)強(qiáng)力霉素、氟苯尼考耐藥率分別達(dá)到74.1%和58.5%[1],對(duì)林可霉素的耐藥率甚至在80%以上[2]。為控制細(xì)菌耐藥問題,我國發(fā)布了《全國遏制動(dòng)物源細(xì)菌耐藥行動(dòng)計(jì)劃(2017—2021年)》《獸用抗菌藥使用減量化行動(dòng)試點(diǎn)工作方案(2018—2021年)》和公告第194號(hào)。
宣白承氣湯出自《溫病條辨·卷二》,由清代著名溫病學(xué)家吳鞠通所創(chuàng),該方由生石膏、大黃、杏仁粉和瓜蔞皮4味中藥組成,主要用于治療機(jī)體感受溫?zé)嵝皻鈱?dǎo)致肺失宣降出現(xiàn)的咳喘不止,以及熱邪熾盛又使痰熱凝滯,腑氣不通,出現(xiàn)的腸道秘結(jié)等[3];魚腥草源于三白草科植物蕺菜干燥地上部分,是藥食同源常用藥物之一,最早見于漢代《名醫(yī)別錄》,其味辛、性寒涼,歸肺經(jīng)。主要功能為清熱解毒、消腫排膿、治肺炎、肺膿瘍、利尿通淋,其在豬病防治中應(yīng)用廣泛,尤其對(duì)肺系疾病具有很好的療效[4]。故本試驗(yàn)通過向后備母豬飼料中分別添加宣白承氣散、魚腥草,研究其對(duì)后備母豬肺熱腑實(shí)證的效果,本試驗(yàn)不僅為集約化養(yǎng)殖下豬肺熱腑實(shí)證的防治提供新的思路,也為中醫(yī)經(jīng)典名方的二次開發(fā)提供了科學(xué)依據(jù)。
1.1 受試藥物和動(dòng)物 宣白承氣散、魚腥草,均為自制并經(jīng)檢驗(yàn)合格;受試動(dòng)物為120日齡左右純種大白后備母豬60頭,試驗(yàn)在某大型豬場(chǎng)進(jìn)行。
1.2 主要儀器 電子臺(tái)秤、5 mL EDTA抗凝采血管、10 mL注射器、GPS-6溫濕度記錄儀(江蘇省精創(chuàng)電氣股份有限公司);便攜式復(fù)合氣體檢測(cè)儀(河南省保時(shí)安電子科技有限公司)。
1.3 主要試劑 豬免疫球蛋白G(IgG)酶聯(lián)免疫分析試劑盒、豬皮質(zhì)醇(Cortisol)酶聯(lián)免疫分析試劑盒、豬丙二醛(MDA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒、豬谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-Px)酶聯(lián)免疫分析試劑盒、豬超氧化物歧化酶(SOD)酶聯(lián)免疫分析試劑盒、豬過氧化氫酶(CAT)酶聯(lián)免疫分析試劑盒,均購自北京誠林生物科技有限公司。
1.4 基礎(chǔ)日糧 試驗(yàn)飼喂基礎(chǔ)日糧配比見表1。
表1 基礎(chǔ)日糧及配比Table 1 Basal diet and formula
1.5 方法
1.5.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 將出現(xiàn)肺熱腑實(shí)證初期癥狀的后備母豬60頭隨機(jī)分為3個(gè)組,每組20頭,分別為:A組[試驗(yàn)組,魚腥草5 g/(頭·d)]、B組[試驗(yàn)組,宣白承氣散5 g/(頭·d)]、C組(對(duì)照組),試驗(yàn)時(shí)間為12 d。試驗(yàn)過程中監(jiān)測(cè)豬舍溫度、濕度以及有害氣體濃度變化。
1.5.2 宣白承氣散和魚腥草對(duì)后備母豬肺熱腑實(shí)證的效果評(píng)價(jià) 試驗(yàn)開始后每隔3 d每組隨機(jī)抽取10頭后備母豬,觀察其整體狀態(tài)(體表狀態(tài)、眼部狀態(tài)、精神狀態(tài)、糞便性狀和尿液性狀),按照李召陽[5]和劉蕾等[6]的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分;于試驗(yàn)開始前和結(jié)束后的清晨喂料前,用皮尺測(cè)量空腹豬只的胸圍和體長,胸圍是沿肩胛后角繞一周的長度,體長是從兩耳連線的中點(diǎn)起,沿背脊至尾根的長度,估算后備母豬的體重。體重計(jì)算公式[7]:體重(kg)=[體長(cm)×胸圍(cm)]/93或111或129,其中一等豬(營養(yǎng)好)用93,二等豬(營養(yǎng)中等)用111,三等豬(營養(yǎng)差)用129。試驗(yàn)期間記錄每組母豬每日采食量,計(jì)算料重比,評(píng)價(jià)生長性能;統(tǒng)計(jì)豬群出現(xiàn)咳喘癥狀的數(shù)量,評(píng)價(jià)受試藥物對(duì)后備母豬咳喘的防治效果;每組隨機(jī)選取7頭母豬,在試驗(yàn)結(jié)束后1 d的清晨喂料前,進(jìn)行前腔靜脈采血,利用酶聯(lián)免疫分析試劑盒測(cè)定血液中抗氧化指標(biāo)和免疫指標(biāo)。
1.5.3 數(shù)據(jù)處理與分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析和Duncan多重比較,最終數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
2.1 受試藥物對(duì)后備母豬整體狀態(tài)的影響
2.1.1 受試藥物對(duì)后備母豬體表狀態(tài)的影響 加藥前各組豬只體表狀態(tài)評(píng)分整體較低,此時(shí)豬只體表較健康,加藥前后各組藥物對(duì)豬只體表狀態(tài)的影響與對(duì)照組相比差異不顯著(P>0.05),由表2可知,試驗(yàn)組和對(duì)照組體表狀態(tài)評(píng)分都略有下降。
表2 受試藥物對(duì)后備母豬體表狀態(tài)的影響Table 2 Effect of the tested drugs on integument condition of gilts
2.1.2 受試藥物對(duì)后備母豬眼部狀態(tài)的影響 各組藥物對(duì)豬只眼部狀態(tài)影響與對(duì)照組相比差異均顯著(P<0.05),由表3可知,魚腥草比宣白承氣散對(duì)改善豬只眼分泌物淚斑狀態(tài)效果更佳,試驗(yàn)豬僅有輕微淚斑,眼結(jié)膜正常。
表3 受試藥物對(duì)后備母豬眼部狀態(tài)的影響Table 3 Effect of the tested drugs on eye condition of gilts
2.1.3 受試藥物對(duì)后備母豬精神狀態(tài)的影響 加藥前各組豬只精神狀態(tài)評(píng)分整體較低,此時(shí)豬只精神健康,無明顯的異常,由表4可知,各組藥物對(duì)豬只精神狀態(tài)的影響沒有差異(P>0.05)。
表4 受試藥物對(duì)后備母豬精神狀態(tài)的影響Table 4 Effect of the tested drugs on mental condition of gilts
2.1.4 受試藥物對(duì)后備母豬糞便性狀的影響 各組藥物對(duì)后備母豬糞便性狀的影響與對(duì)照組相比差異均極顯著(P<0.01),由表5可知,宣白承氣散和魚腥草對(duì)肺熱腑實(shí)證引起的大便干燥改善效果同樣顯著,試驗(yàn)豬糞便性狀軟硬適中,成坨狀。
表5 受試藥物對(duì)后備母豬糞便性狀的影響Table 5 Effect of the tested drugs on faces condition of gilts
2.1.5 受試藥物對(duì)后備母豬尿液性狀的影響 A組尿液性狀和對(duì)照組相比沒有顯著變化,尿液性狀都呈黃色、清亮,而B組和對(duì)照組相比有顯著性差異(P<0.05),尿液呈黃色、渾濁狀。由表6可知,宣白承氣散的瀉熱效果比魚腥草更顯著。
表6 受試藥物對(duì)后備母豬尿液性狀的影響Table 6 Effect of the tested drugs on urine condition of gilts
2.2 受試藥物對(duì)后備母豬生長性能的影響 試驗(yàn)過程中記錄了每日各組豬群的喂料量以及剩料量,并在試驗(yàn)前后統(tǒng)計(jì)了豬群體重以計(jì)算料重比。由表7可知,飼料中添加魚腥草、宣白承氣散均可以不同程度地提高豬只的飼料轉(zhuǎn)化率,但沒有顯著性差異(P>0.05)。
表7 受試藥物對(duì)后備母豬料重比的影響Table 7 Effect of the tested drugs on the feed conversion rate of gilts
2.3 受試藥物對(duì)后備母豬咳喘的防治 試驗(yàn)過程中統(tǒng)計(jì)了豬群出現(xiàn)咳喘癥狀的數(shù)量,由表8可知,試驗(yàn)中除了添加宣白承氣散的B組,其余各組豬群均出現(xiàn)了咳喘。
表8 試驗(yàn)中后備母豬咳喘統(tǒng)計(jì)Table 8 Statistics of cough and asthma of gilts in the test
2.4 受試藥物對(duì)后備母豬血液中抗氧化指標(biāo)的影響 各組藥物對(duì)后備母豬抗氧化指標(biāo)產(chǎn)生了不同的影響,由表9可知,A組、B組與對(duì)照組相比,MDA的含量分別降低了5.9%、1.5%,差異顯著(P<0.05),而A組、B組之間沒有顯著性差異(P>0.05);GSH-Px活性分別提高了15.4%、16.7%,差異顯著(P<0.05);與對(duì)照組相比,A組SOD的活性顯著降低了0.6%(P<0.05),而B組顯著提高了10.3%(P<0.05);A組CAT活性顯著提高了4.1%,而B組顯著降低了23.9%。
表9 受試藥物對(duì)后備母豬血液中抗氧化指標(biāo)的影響Table 9 Effect of the tested drugs on antioxidant indexes in blood of gilts
2.5 受試藥物對(duì)后備母豬血液中免疫球蛋白IgG的影響 各試驗(yàn)組血漿中IgG水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05),IgG水平分別提高了5.6%、24%,且B組要顯著高于A組(P<0.05),由表10可知,各組藥物均可以不同程度地提高血漿中IgG的含量,且宣白承氣散比魚腥草的效果更好。
表10 受試藥物對(duì)后備母豬血漿中IgG的影響Table 10 Effect of the tested drugs on plasma IgG of gilts (mg/mL)
出現(xiàn)肺熱腑實(shí)證初期癥狀的后備母豬常見發(fā)熱咳喘,糞便干硬,出現(xiàn)明顯的淚斑,而本試驗(yàn)結(jié)果顯示,添加宣白承氣散的試驗(yàn)組,肺熱腑實(shí)證的臨床癥狀得到顯著改善,用藥結(jié)束后豬只淚斑、眼分泌物明顯減少,糞便稀軟,尿液深黃,甚至呈微紅色,可能是因?yàn)樾壮袣馍⒌臑a熱效果明顯,或者是大黃中的色素導(dǎo)致[8],而添加魚腥草的試驗(yàn)組尿液顏色出現(xiàn)加深后又逐漸變淡,可能是由于魚腥草的瀉熱效果比較緩和。后備母豬發(fā)熱咳喘等癥狀會(huì)降低后備母豬食欲,影響其生長性能,料重比是評(píng)價(jià)生長性能的重要指標(biāo),在本試驗(yàn)中,從料重比可以看出,各個(gè)試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異性均不顯著,可能是因?yàn)榇穗A段后備母豬的消化系統(tǒng)發(fā)育達(dá)到較高水平[9],生長性能已經(jīng)趨于穩(wěn)定,因此對(duì)豬只的飼料轉(zhuǎn)化率影響不大。
動(dòng)物正常的生理活動(dòng)都會(huì)產(chǎn)生少量的自由基,在正常情況下由于機(jī)體的抗氧化防御體系中有多種抗氧化酶,導(dǎo)致氧自由基處于產(chǎn)生和消除的動(dòng)態(tài)平衡之中[10-11]。血液及肝臟中SOD、GSH-Px和CAT等抗氧化酶的活性反映了動(dòng)物機(jī)體抗氧化能力,MDA則代表機(jī)體氧化損傷嚴(yán)重程度,其含量越高代表氧化損傷越嚴(yán)重。出現(xiàn)肺熱腑實(shí)證初期癥狀的后備母豬機(jī)體會(huì)產(chǎn)生大量的氧自由基,并且機(jī)體中抗氧化酶活性降低,MDA含量升高,進(jìn)一步造成機(jī)體損害。本試驗(yàn)中,受試藥物均可以不同程度地降低試驗(yàn)豬只血漿中MDA含量(P<0.05),但對(duì)血液中SOD、GSH-Px和CAT的活性作用不同,可能是由于加藥前試驗(yàn)豬只氧化損傷不嚴(yán)重,所以試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)照組血液中3種酶的活性沒有處于低水平,也可能是由于3種酶在體內(nèi)的主要分布位置不同,導(dǎo)致加藥后血液中3種酶活性的不同變化,造成這種差異的原因還需要進(jìn)一步探究。
后備母豬出現(xiàn)肺熱腑實(shí)證后也會(huì)降低其免疫功能,在血漿中含量最高的免疫球蛋白IgG可以作為評(píng)價(jià)機(jī)體免疫功能強(qiáng)弱的指標(biāo),IgG含量升高代表機(jī)體免疫功能增強(qiáng)。從本試驗(yàn)結(jié)果可以看出,與對(duì)照組相比,各試驗(yàn)組豬只血漿中IgG的含量均有不同程度的提高,且宣白承氣散作用效果較魚腥草更好。
有研究表明,魚腥草和宣白承氣散均可以預(yù)防或治療呼吸道疾病,王勤等[12]觀察發(fā)現(xiàn)魚腥草可以緩解吸煙小鼠模型肺組織的抗氧化損傷,提高抗氧化酶的活性、降低MDA含量;崔小花等[13]研究表明單用魚腥草注射液可以有效退熱并且控制呼吸道感染;鐘相根等[14]發(fā)現(xiàn)宣白承氣湯治療慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)有顯著效果,可能與提高機(jī)體黏膜免疫、增強(qiáng)局部免疫功能有關(guān);李宇航等[15]通過COPD大鼠模型試驗(yàn)證明了宣白承氣湯可以提高血清內(nèi)抗氧化酶的活性,減少氧化損傷,調(diào)整氧化/抗氧化系統(tǒng)失衡狀態(tài)。本試驗(yàn)也證明宣白承氣散可以有效預(yù)防肺熱腑實(shí)證引起后備母豬的咳喘。
在現(xiàn)代化養(yǎng)殖中,生豬肺熱腑實(shí)證已經(jīng)成為豬場(chǎng)常見病癥,本試驗(yàn)證明了宣白承氣散、魚腥草均可以改善肺熱腑實(shí)證后備母豬的整體狀態(tài),降低料重比,且宣白承氣散在提高機(jī)體抗氧化能力和增強(qiáng)免疫力方面較魚腥草更強(qiáng),能有效預(yù)防肺熱咳喘,本試驗(yàn)為宣白承氣散在獸醫(yī)臨床的應(yīng)用及二次開發(fā)提供可靠依據(jù)。