CTRP1、HMGB1、CAM水平變化與腦卒中患者神經(jīng)功能損傷程度的關(guān)系研究

錢晶，谷麗麗

（河南省直第三人民醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，河南 鄭州 450000）

腦卒中的發(fā)生，能夠?qū)е禄颊叨唐趦?nèi)致殘率和不良臨床結(jié)局發(fā)生率的上升，從而增加患者的多器官功能障礙風(fēng)險(xiǎn)［1］。部分研究者認(rèn)為，腦卒中的發(fā)病率可超過(guò)475/1 萬(wàn)人左右，部分高危地區(qū)腦卒中的發(fā)病率可進(jìn)一步的上升［2］。臨床上對(duì)于腦卒中患者的病情評(píng)估具有重要的意義，對(duì)于神經(jīng)功能的評(píng)估，能夠在疾病的治療及臨床預(yù)后隨訪方面發(fā)揮重要的作用。血清學(xué)炎癥性相關(guān)因子，能夠在病情的進(jìn)展及臨床預(yù)后隨訪方面發(fā)揮作用。腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白（CTRP1）能夠通過(guò)誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，加劇瀑布式炎癥反應(yīng)的激活，進(jìn)而促進(jìn)腦組織的炎癥性損傷，加劇腦功能的障礙［3］；高遷移率族蛋白1（HMGB1）能夠通過(guò)誘導(dǎo)趨化因子的富集，募集炎癥因子的沉積，進(jìn)而促進(jìn)腦組織的損傷和功能的障礙［4］；鈣調(diào)蛋白（CAM）的表達(dá)改變，能夠通過(guò)影響到神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)鈣離子的超載，進(jìn)而誘導(dǎo)神經(jīng)元細(xì)胞的線粒體損傷，促進(jìn)神經(jīng)元的凋亡［5］。為了揭示CTRP1、HMGB1、CAM 的表達(dá)及其與腦卒中患者的神經(jīng)功能障礙的關(guān)系，本次研究選取選取2019 年6 月至2020 年6 月在河南省直第三人民醫(yī)院接受治療的腦卒中患者為研究對(duì)象，探討了CTRP1、HMGB1、CAM 的表達(dá)情況，并分析了相關(guān)指標(biāo)與腦卒中患者的病情關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年6 月至2020 年6 月河南省直第三人民醫(yī)院收治的92 例腦卒中患者，設(shè)為觀察組，其中男50 例，女42 例；年齡54～75 歲，平均（63.74±4.33）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥50 周歲；②經(jīng)CT 或相關(guān)檢查確診為腦卒中；③無(wú)其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者；④均為首次發(fā)病。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不全者；②合并其他嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病者；③死亡病例。另選取來(lái)院體檢的健康人士92 例作為對(duì)照組，其中男51 例，女41 例；年齡52～78歲，平均（63.86±4.45）歲。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本項(xiàng)研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)評(píng)審?fù)ㄟ^(guò)，且所有參與者均知情同意。

1.2 方法

取受試者靜脈血4 mL，1 500 r/min 離心15 min，取上清液，在每個(gè)聚苯乙烯板中加入上述液體0.1 mL，4℃過(guò)夜孵育，加入磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌3 次，每次3 min，在每個(gè)聚苯乙烯板孔中加入CTRP1、HMGB1、CAM 抗體（1∶800，購(gòu)自南京伯斯金生物公司），37℃孵育30 min，加入PBS 洗滌3 次，3 min/次，每孔中加入四甲基聯(lián)苯胺（TMB）溶液底物0.1 mL，37℃，20 min，加入2 M 硫酸0.05 mL 終止反應(yīng)，采用Varioskan LUX 多功能酶標(biāo)儀（上海賽默飛世爾科技有限公司）進(jìn)行OD 值檢測(cè)。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

觀察兩組研究對(duì)象CTRP1、HMGB1、CAM 水平，分析腦卒中患者CTRP1、HMGB1、CAM 與神經(jīng)功能損傷程度的相關(guān)性。神經(jīng)功能損傷程度采用美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）評(píng)估（均在入院時(shí)完成）：小于7 分：輕型神經(jīng)功能缺損；7～15 分：中型神經(jīng)功能缺損；大于15 分：重型神經(jīng)功能缺損?；颊叱鲈汉蟮谌齻€(gè)月月底進(jìn)行電話隨訪，并采用改良的Rankin 量表（MRS）評(píng)估患者預(yù)后，滿分5 分，≤2 分預(yù)后良好，＞2 分預(yù)后不良。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料以例表示；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)和F檢驗(yàn)（兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)）。相關(guān)性采用Pearson 相關(guān)分析法分析。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較

觀察組患者的CTRP1、HMGB1、CAM 水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組研究對(duì)象CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較（n=92,±s）

表1 兩組研究對(duì)象CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較（n=92,±s）

2.2 不同神經(jīng)功能損傷程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較

根據(jù)NIHSS 評(píng)分將患者分為輕型神經(jīng)功能缺損39 例，中型神經(jīng)功能缺損31 例，重型神經(jīng)功能缺損22 例。不同神經(jīng)功能損傷程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平存在明顯不同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同神經(jīng)功能損傷程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較（±s）

表2 不同神經(jīng)功能損傷程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平比較（±s）

2.3 腦卒中患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平與神經(jīng)功能損傷程度的相關(guān)性

腦卒中患者的CTRP1、HMGB1、CAM 水平與神經(jīng)功能損傷程度均呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=0.764、0.737、0.801,P＜0.05）。

2.4 不同預(yù)后患者CTRP1、HMGB1、CAM水平

預(yù)后不良組患者29 例，預(yù)后良好患者63 例。預(yù)后不良組患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平顯著高于預(yù)后良好組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 不同預(yù)后患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平（±s）

表3 不同預(yù)后患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平（±s）

3 討論

臨床上不同的病理性改變，能夠通過(guò)誘導(dǎo)腦血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，加劇粥樣斑塊的沉積，進(jìn)而提高腦卒中的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。在具有基礎(chǔ)性高血脂癥或者動(dòng)脈管壁硬化的患者中，腦卒中的發(fā)病率和病死率可進(jìn)一步的惡化［6-7］。長(zhǎng)期的觀察發(fā)現(xiàn)，腦卒中患者的總體生存時(shí)間較短，其短期內(nèi)病情變化較快，治療后的神經(jīng)功能缺損表現(xiàn)較為明顯［8］。而臨床上缺乏對(duì)于腦卒中患者神經(jīng)功能缺損的相關(guān)評(píng)估性指標(biāo)，雖然影像學(xué)指標(biāo)能夠在腦卒中患者的病情評(píng)估過(guò)程中發(fā)揮作用。但部分單中心的臨床分析研究可見(jiàn)，磁共振或者頭顱CT 檢查，對(duì)于腦卒中患者神經(jīng)功能評(píng)估的一致性率不足45%，其對(duì)于患者病情演變?cè)u(píng)估的靈敏度較低［9］。本次研究對(duì)于腦卒中患者血清中CTRP1、HMGB1、CAM 的表達(dá)分析研究，能夠揭示腦卒中患者病情進(jìn)展機(jī)理的同時(shí)，為臨床上腦卒中患者的神經(jīng)功能缺損評(píng)估提供參考。

CTRP1 是炎癥性相關(guān)因子，其作為腫瘤壞死因子家族成員，能夠通過(guò)直接誘導(dǎo)神經(jīng)元細(xì)胞的損傷，促進(jìn)神經(jīng)元膜完整性的破壞，進(jìn)而加劇腦組織的功能損傷和神經(jīng)功能障礙的發(fā)生。相關(guān)研究還認(rèn)為，CTRP1 能夠在機(jī)理上誘導(dǎo)腫瘤壞死因子α 或者白細(xì)胞介素-6（IL-6）的富集，進(jìn)而加劇炎癥信號(hào)通路的激活，提高腦卒中患者的病情進(jìn)展速度［10］；HMGB1 是趨化因子相關(guān)家族成員，其能夠誘導(dǎo)補(bǔ)體成分C3、C4 的激活，進(jìn)而提高其對(duì)于腦組織的浸潤(rùn)和損傷作用［11］；CAM 是鈣離子調(diào)控相關(guān)蛋白，其能夠提高鈣離子的內(nèi)流速度，加劇神經(jīng)元細(xì)胞的鈣超載負(fù)荷，進(jìn)一步加劇神經(jīng)元細(xì)胞的破壞［12］。部分研究者探討了HMGB1 的表達(dá)與腦卒中的關(guān)系，認(rèn)為在腦卒中患者中，HMGB1 的表達(dá)明顯上升，但缺乏對(duì)于CTRP1、CAM 的分析研究。

對(duì)于腦卒中患者血清中CTRP1、HMGB1、CAM 的分析研究可見(jiàn)，在腦卒中病例組患者中，CTRP1、HMGB1、CAM 的表達(dá)濃度均明顯上升，高于正常對(duì)照組人群，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異較為明顯，提示了CTRP1、HMGB1、CAM 的高表達(dá)均可能影響到了腦卒中的病情進(jìn)展。其具體基礎(chǔ)方面的機(jī)理，可能考慮與CTRP1、HMGB1、CAM 的下列幾個(gè)方面的病理生理性改變有關(guān)［13-14］：①CTRP1 能夠誘導(dǎo)腫瘤壞死因子家族成員的激活，提高了下游炎癥性信號(hào)通路NF-KB 的激活程度，進(jìn)而促進(jìn)了腦組織的破壞；②HMGB1 能夠提高趨化蛋白的富集，促進(jìn)其對(duì)于腦血管內(nèi)皮細(xì)胞的浸潤(rùn)和損傷，加劇了腦組織的缺血性氧化應(yīng)激性損傷；③CAM能夠提高線粒體鈣離子的超載，導(dǎo)致線粒體的功能障礙，加劇了線粒體的功能損傷。沈顯群等［15］研究者發(fā)現(xiàn)了與本次研究相似的結(jié)論，其發(fā)現(xiàn)在腦卒中患者中，HMGB1 的表達(dá)濃度可明顯上升，平均上升幅度可超過(guò)35%以上，同時(shí)在具有明顯的腦功能缺損的患者中，HMGB1 的表達(dá)波動(dòng)更為顯著。NIHSS 評(píng)分是評(píng)估患者腦功能缺損的評(píng)分指標(biāo)，腦卒中患者的相關(guān)評(píng)分明顯的上升，腦功能的缺損較為明顯，提示了腦卒中患者的腦功能的障礙，這主要由于腦組織的缺血性損傷，促進(jìn)了神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡，導(dǎo)致神經(jīng)電沖動(dòng)傳遞的異常，進(jìn)而影響到了腦功能。相關(guān)關(guān)系分析研究可見(jiàn)，CTRP1、HMGB1、CAM 的表達(dá)與腦卒中患者的腦功能評(píng)分正相關(guān)，預(yù)后不良組患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平顯著高于預(yù)后良好組。進(jìn)一步提示了CTRP1、HMGB1、CAM 的表達(dá)與腦卒中患者的病情關(guān)系，這主要由于相關(guān)指標(biāo)的波動(dòng)，能夠反應(yīng)患者神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞或者神經(jīng)元的損傷程度，進(jìn)而評(píng)估病情進(jìn)展。臨床上可以通過(guò)檢測(cè)CTRP1、HMGB1、CAM，分析腦卒中患者腦神經(jīng)損傷情況，同時(shí)預(yù)測(cè)患者臨床結(jié)局。

綜上所述，在腦卒中患者中，CTRP1、HMGB1、CAM 的表達(dá)明顯上升，同時(shí)CTRP1、HMGB1、CAM 的表達(dá)與腦卒中患者的腦功能評(píng)分密切相關(guān)。后續(xù)臨床研究可以深入探討相關(guān)指標(biāo)的診斷學(xué)價(jià)值。