一款低度養(yǎng)生酒的研制

謝小林，李冰晶，趙景芳，劉國華，王代波，賀紅早

（貴州省生物研究所，貴州貴陽 550025）

隨著人們收入和生活水平的大幅提高，人們更多地開始追求健康高品質(zhì)的生活，健康飲酒、文明飲酒的消費觀念逐步深入人心，酒精度數(shù)較低、有養(yǎng)生功效、口感柔和的產(chǎn)品逐漸受到消費者親睞。目前，保健養(yǎng)生酒已超過黃酒成為我國酒類行業(yè)第四大酒種，同時作為一股新生勢力，支撐酒類行業(yè)更為均衡的發(fā)展。

中藥養(yǎng)生酒是以釀造酒、蒸餾酒或食用酒精為基酒，加入一定比例的中藥材或其有效提取物，采用相應工藝制成的飲料酒。中藥養(yǎng)生酒用藥科學配伍，以養(yǎng)生健體為主，根據(jù)功能不同，可分為補氣、補血、滋陰、補陽和氣血雙補等類型。因此，中藥養(yǎng)生酒具有改善人體素質(zhì)、提高抗病能力、美容潤膚、防病祛病、延緩衰老、益壽延年等作用[1-2]。本實驗以金櫻子、熟地黃、紅花、當歸、松仁、雄蠶蛾、茯苓、龍眼肉、枸杞、天冬、大棗、陳皮等12 味中藥材配伍組方[3-6]，熟地、枸杞、龍眼、松仁、雄蠶蛾等，均屬于傳統(tǒng)的延年益壽藥物，偏重于填補心腎陰精；金櫻子補腎固精；當歸活血化瘀；茯苓滲濕利水，健脾和胃，寧心安神；天冬養(yǎng)陰清熱，潤肺滋腎；大棗補中益氣，養(yǎng)血安神；陳皮疏肝悅脾，理氣解郁；紅花助白酒活血通經(jīng)，利于藥物暢達臟腑，發(fā)揮補益作用；采用超聲提取、超聲陳化、膜過濾等現(xiàn)代生產(chǎn)技術，研制出一款具有滋肝益腎、補血養(yǎng)心、定志安神功效的低度養(yǎng)生酒，為中藥養(yǎng)生酒生產(chǎn)工藝技術提供了數(shù)據(jù)支撐和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

1.1.1 材料

金櫻子，熟地黃，紅花，當歸，松仁，雄蠶蛾，茯苓，龍眼肉，枸杞，天冬，大棗，陳皮，購于貴陽芝林大藥房；52%vol 濃香型白酒，四川綿竹劍南春酒廠有限公司。

1.1.2 試劑

食用酒精：輝縣市酒精有限責任公司；純凈水：康師傅控股有限公司。

1.1.3 儀器設備

XM-800Y 旭曼萬能粉碎機，永康市鉑歐五金制品有限公司；WGL-230B 電熱鼓風干燥箱，天津市泰斯特儀器有限公司；PS-110A 超聲機，東莞市潔康超聲波設備有限公司；RE-2000B旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海越眾儀器設備有限公司；SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水多用真空泵，鞏義市科華儀器設備有限公司；YP2002金諾電子天平，余姚市金諾天平儀器有限公司；HH-4D 數(shù)顯恒溫水浴鍋，常州澳華儀器有限公司；0.45 μm硅藻土精濾機，常德新達利過濾設備公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 工藝流程

本試驗采用工藝流程：中藥材→清洗→干燥→粉碎→超聲提取→過濾→濾液→濃縮→勾調(diào)→陳化→精濾→灌裝→成品

1.2.2 藥材處理工序

藥材清洗后，35 ℃鼓風干燥，干燥后萬能粉碎機粉碎，粉末四號不銹鋼篩過篩，待用。

1.2.3 超聲提取工序[7]

1.2.3.1 單因素試驗

采用超聲提取法提取藥材中的有效成分，以浸出物作為超聲提取效果的衡量指標，以酒精濃度、超聲提取時間、超聲提取溫度、料液比進行單因素實驗[7-8]。通過各因素對提取效果的影響，確定響應面實驗的自變量及取值范圍。

①酒精濃度的確定。本實驗以浸出物為考察指標，稱取2.00 g，料液比1∶8，超聲提取溫度25 ℃，超聲時間20 min，分別采用70 %vol、65 %vol、60 %vol、55 %vol、50 %vol 酒精濃度提取液浸提，平行實驗3 次，根據(jù)浸出物值確定提取液的最佳酒精濃度。

②超聲提取時間的確定。本實驗以浸出物為考察指標，稱取2.00 g，料液比1∶8，采用65%vol 酒精濃度提取液浸提，超聲提取溫度25 ℃，分別提取15 min、20 min、25 min、30 min、35 min，平行實驗3次，根據(jù)浸出物值確定最佳超聲提取時間。

③超聲提取溫度的確定。本實驗以浸出物為考察指標，稱取2.00 g，料液比1:8，采用65%vol 酒精濃度提取液浸提，超聲提取時間20 min，分別采用25 ℃、30 ℃、35 ℃、45 ℃、50 ℃，平行實驗3 次，根據(jù)浸出物值確定最佳超聲提取溫度。

④提取溶液體積的確定。本實驗以浸出物為考察指標，稱取2.00 g，采用65%vol 酒精濃度提取液浸提，超聲提取時間20 min，提取溫度25 ℃，分別采用1∶6、1∶7、1∶8、1∶9、1∶10 的料液比，平行實驗3次，根據(jù)浸出物值確定最佳料液比。

1.2.3.2 響應面試驗

在單因素結(jié)果的基礎上，綜合考慮藥材有效成分的特點及成本因素，以酒精濃度、超聲提取溫度、料液比為自變量，以浸出物為響應值，運用響應面法進行三因素三水平的響應面分析實驗，試驗因子和水平見表1。實驗數(shù)據(jù)運用Design-Expert 8.0.6 Trial 軟件統(tǒng)計分析，優(yōu)選最佳超聲提取工藝，并對優(yōu)選的超聲提取工藝進行驗證實驗，檢驗響應面法優(yōu)選的最佳提取工藝的可靠性。

表1 試驗因子和水平表

1.2.4 過濾濃縮工序

藥材經(jīng)超聲提取后，減壓抽濾，濾液采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，藥材有效成分濃縮至膏狀。

1.2.5 勾調(diào)工序

52 %vol 濃香型白酒降度至38 %vol，浸膏與38%vol 白酒按照配比A（1∶20）、配比B（1∶40）、配比C（1∶60）的質(zhì)量體積比（單位：g/mL）進行勾調(diào)。

1.2.6 陳化工序

勾調(diào)好的養(yǎng)生酒采用人工陳化即超聲陳化，陳化工藝為超聲頻率40 kHz，超聲溫度40 ℃，超聲時間65 min[8-9]。

1.2.7 精濾工序

陳化后的養(yǎng)生酒采用0.45 μm 硅藻土精濾機精濾[10-11]。

1.2.8 感官評定

養(yǎng)生酒精濾后，組織8 名釀酒工程專業(yè)的師生進行感官評定，感官評定依據(jù)見表2[12-14]，評定結(jié)果取平均值。

表2 養(yǎng)生酒感官評定表

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗結(jié)果與分析

2.1.1 酒精濃度對藥材有效成分提取效果的影響

由圖1 可知，隨著酒精濃度的增大，浸出物不斷增多，當酒精濃度達到55%vol 時浸出物達到最大值56.25%；此后，浸出物值隨著酒精濃度的增大而不斷下降。因此，在料液比1∶8，超聲提取溫度25 ℃，提取時間20 min 的工藝條件下，藥材有效成分提取的最佳溶液酒精含量為55%vol。

圖1 酒精濃度對藥材有效成分提取效果的影響

2.1.2 超聲提取時間對藥材提取效果的影響

由圖2 可知，超聲提取時間為15 min 時，浸出物值為53.00%；超聲提取時間為20 min 時，浸出物值為53.50%；超聲提取時間為25 min 時，浸出物值為52.50%；超聲提取時間為30 min 時，浸出物值為53.50 %；超聲提取時間為35 min 時，浸出物值為54.00%；可見，提取溫度為25 ℃時，超聲提取時間對藥材有效成分的提取影響不大。

圖2 超聲提取時間對藥材有效成分提取效果的影響

2.1.3 超聲提取溫度對藥材提取效果的影響

由圖3 可知，隨著提取溫度的上升，浸出物不斷增多，當溫度由25 ℃升高至45 ℃，浸出物值由53.00%升高到56.00%。因此，在料液比1∶8，超聲提取時間20 min的工藝條件下，藥材有效成分隨著溫度的升高而不斷增加。

圖3 超聲提取溫度對藥材有效成分提取效果的影響

2.1.4 料液比對藥材提取效果的影響

由圖4可知，當料液比小于1∶7 時，浸出物值隨著料液比的增加而減小，1∶7 時，浸出物值降低至50.00%；當料液比大于1∶7 時，浸出物值又隨著料液比的增加而增加，當料液比為1∶9時，浸出物值達到最大的53.25%；此后，浸出物值隨著料液比的增加而開始減小。因此，在65%vol酒精濃度浸提液、超聲提取時間20 min、提取溫度25 ℃的工藝條件下，藥材有效成分超聲提取最佳提取料液比為1∶9。

圖4 料液比對藥材有效成分提取效果的影響

2.2 響應面方法優(yōu)化養(yǎng)生酒藥材最佳提取工藝

2.2.1 中心組合工藝條件優(yōu)化結(jié)果

采用Box-Benhnken 中心組合進行響應面優(yōu)化實驗，其實驗方案和結(jié)果見表3，用Design-Expert 8.0.6 Trial 軟件對表中數(shù)據(jù)進行分析，得到Y(jié) 值（浸出物）對自變量（X1、X2、X3）的二次多項回歸方程：

表3 響應面分析方案及試驗結(jié)果

方差分析及顯著性檢驗結(jié)果見表4?？芍?，該回歸方程模型極顯著(P=0.0006＜0.01)，失擬項P=0.1223＞0.05，失擬項檢驗結(jié)果不顯著；說明該模型與數(shù)據(jù)擬合程度高，數(shù)據(jù)模型的選取具有合理性。模型決定系數(shù)R2為0.9554，表明二次回歸方程與實驗結(jié)果的擬合度較好，二次回歸方程可以用于實驗可靠性分析和預測。各因素P 值表明，X32對藥材有效成分提取的影響高度顯著，X12對藥材有效成分提取的影響極顯著，X2、X3對藥材有效成分提取的影響顯著。通過F 值的大小判斷可得各個因素對藥材有效成分提取的影響程度為X3＞X2＞X1，即料液比＞超聲提取溫度＞酒精濃度。

表4 回歸方程各項的方差分析

2.2.2 響應面分析與最優(yōu)條件的確定

通過方差分析結(jié)果及圖5 中等高線和響應面的形狀分析得出，酒精濃度與料液比存在一定的交互作用，超聲提取溫度與料液比、酒精濃度與超聲提取溫度交互作用不明顯。

圖5 兩因素交互作用對藥材有效成分提取效果的影響

利用軟件對實驗數(shù)據(jù)進一步分析，對擬合的回歸方程進行計算，預測藥材有效成分的最佳超聲提取條件。預測的最佳條件為：料液比1∶9.12、提取液酒精濃度55.91%vol、超聲溫度55 ℃、超聲時間20 min，藥材的浸出物預測值達57.70 %。驗證實驗得到的藥材浸出物值為57.35 %，誤差為0.61 %，接近預測值，表明在該實驗模型下得到的最佳提取條件具有較高的可靠性。

2.3 感官評定的結(jié)果與分析

養(yǎng)生酒的感官評定結(jié)果為：配比A 的養(yǎng)生酒綜合評分為63 分，其中色澤11 分，風味26 分，口感26分；配比B 的養(yǎng)生酒綜合評分為85 分，其中色澤15分，風味34 分，口感36 分；配比C 的養(yǎng)生酒綜合評分為78 分，其中色澤18 分，風味29 分，口感31 分?？梢姡浔菳 在三者中得分最高，是本款養(yǎng)生酒的最佳配比。

3 結(jié)論

（1）采用響應面法對中藥養(yǎng)生酒生產(chǎn)工藝中藥材有效成分提取工序的超聲提取條件進行優(yōu)化，確定最佳超聲提取條件為料液比1∶9.12，提取液酒精濃度55.91%vol，超聲溫度55 ℃，超聲時間20 min，此工藝條件下，藥材的浸出物值達到57.35 %。感官評定確定的養(yǎng)生酒藥材有效成分浸膏與白酒的最佳配比為1∶40；制得的養(yǎng)生酒色澤呈棕黃色，光澤度高，透明度好；酒香與藥香協(xié)調(diào)；口感細膩柔順，微甜。

（2）本實驗以金櫻子、熟地黃、紅花、當歸、松仁、雄蠶蛾、茯苓、龍眼肉、枸杞、天冬、大棗、陳皮等12 味中藥材配伍組方，研制的養(yǎng)生酒具有酒度低、感官品質(zhì)高的特點和滋肝益腎、補血養(yǎng)心、定志安神的功效，適合適齡人群的嗜好與養(yǎng)生飲用。本實驗采用的超聲提取、超聲催陳、膜分離等養(yǎng)生酒生產(chǎn)技術具有操作簡便、效率高、節(jié)約成本等特點，值得推廣應用。