采用色譜分析法對中藥龍葵化學成分分析研究

摘要：目的 通過對中藥龍葵的化學成分進行相應的分析研究，探討此藥材的化學成分，為此種藥材的治療提供進一步的方便;方法 采用隨機抽樣的調查方法，對于抽取到的中藥龍葵樣品在常溫下采用超聲波進行提取并進一步分析其成分;結果 所抽取中藥龍葵樣品經過濾后合并進一步提取濾液，濾液經減壓蒸餾后得到黃綠色固體，將含生物總堿的甲醇溶液定量取出并減壓蒸干后，殘留物用40mLv[Hcl]：v（乙醇）1：1進行溶解，選定210hm作為茄胺的檢測波長，通過這些探討中藥龍葵的有效化學成分的提取與色譜分析。結論 高效液相色譜近年來以其絕對優(yōu)勢廣泛用于生物堿的分離和鑒定，尤其是由非極性固定想和極性流動相組成的反液相色譜系統(tǒng)（RP-HPLc）的應用約占90%，非極性固定相主要是以硅膠為基質的硅烷化反相鍵和相。

關鍵詞：中藥龍葵;色譜分析;超聲波;茄胺

【中圖分類號】R28 【文獻標識碼】A 【文章編號】2107-2306（2021）14-01

龍葵做為中藥對于臨床治療患者具有消炎、抗菌、降壓、抗癌等多種藥用功能，但其主要成分如何進行更好地分析對于發(fā)揮其藥效具有特別重要的意義。對此，本文通過對色譜分析研究龍葵的有效化學成分，以其能夠更好地發(fā)揮其應有的作用。

1材料與方法

采用臨床分析方法進行分析，對于所選取的中藥龍葵果實樣品進行分析研究，并且進一步地選取相應的實驗儀器和材料。

1.1實驗儀器與材料。實驗儀器采用PHS-3C精密pH計（北京精密儀器有限公司）;DZF-6050型真空干燥箱（北京三博科技有限公司）;SENCO R型旋轉蒸發(fā)器（北京生物創(chuàng)新技術有限公司）;AY120電子天平（日本島津有限公司）;高效液相色譜儀（日本島津有限公司）;實驗材料主要包括甲醇、乙醇、氯仿，所有這些均為分析純。

1.2超聲波輔助提取。臨床上稱取龍葵樣品，用v[Hcl]：v（乙醇）1：4溶液潤濕24h后，龍葵與乙醇按1g：l0mL加入乙醇，在常溫下采用超聲波提取兩次。過濾后合并濾液，濾液經減壓蒸餾后得到黃綠色固體。用0.5mol/L的HCl溶解甾體類生物堿粗提物后，用氯仿萃取三次，去氯仿層，水相用NaOH溶液調節(jié)至pH為10.5，用氯仿萃取三次，合并氯仿萃取液，蒸干后用甲醇溶解并定容至50mL，得到龍葵生物總堿的甲醇溶液。

1.3臨床上茄胺的制備。將含生物總堿的甲醇溶液定量取出并減壓蒸干后，殘留物用40mLv[Hcl]：v（乙醇）1：1溶解，在100度下水解，水解后將溶液中乙醇蒸餾去除，余液用氯仿萃取三次，取酸水層。經NaOH溶液調節(jié)至pH為10.5后，用氯仿萃取三次，合并氯仿萃取液，蒸干并用甲醇溶解，定容至50mL，得到茄胺的甲醇溶液。

1.4色譜分析。經在紫外區(qū)全波段掃描確認標樣茄胺在210hm處有最大吸收峰，因此，選定210hm作為茄胺的檢測波長。色譜條件乙腈：水為55：45（水相pH用磷酸調節(jié)至2.7），流速為1.2mL/min。茄胺進樣量20ug/mL-200 ug /mL時。進樣量2（ug/mL）與峰面積之間呈良好的線性關系。

2結果

通過對于中藥龍葵果實樣品的臨床實驗分析研究，我們可以得出如下的結果，并把結果進行檢驗和驗證。

2.1提取效果。超聲波輔助提取中草藥有效成份具有快速、簡易、提取效率高的特點。依據(jù)這個原則，本文選擇實驗條件溫度為25度，乙醇濃度為95%。在最佳的實驗條件下，莖葉內的茄胺的平均得率為0.42%，果實內的茄胺平均得率3.22%。稱取3份龍葵果實樣品，進行平行提取實驗，計算茄胺產物的質量百分數(shù)以及同批樣品的RSD值，結果表明，3個龍葵樣品提出的茄胺平均質量分數(shù)為2.53%，RSD值為4.18%，證實提取工藝穩(wěn)定、可靠。

2.2色譜效果。本文選擇水解1h的甾體類生物堿樣品作為考查對象，在未添加磷酸的條件下，色譜峰峰形嚴重拖尾，隨著酸度的加強，峰形開始銳化，當pH為2.7時，甾體類生物堿和茄胺已完全離子化，峰形尖銳，兩類色譜峰分離度高。

3討論

結合現(xiàn)代醫(yī)學的觀點和手段，在中草藥資源寶庫中、特別是從確有療效的中草藥中，尋找和開始具有我國自主知識產權的抗癌新藥不僅對促進人類的健康，而且對推進我國民族醫(yī)藥工業(yè)的發(fā)展和中藥現(xiàn)代化具有十分重要的意義。龍葵是一年生草本，全草含澳洲茄堿、澳洲茄明堿、澳洲茄邊堿等多種甾體類生物堿，它們的苷元主要為茄胺，生物堿含量以果實為最多，在未成熟的果實中含量最高，果實成熟后則消失。

龍葵含有豐富的藥用和保健價值成分，具有消炎、抗菌、降壓、抗癌等多種藥用功能，但到目前為止，龍葵的資源利用率仍然比較低，有關其活性成分研究的報導更是一片空白。上個世紀，有人采用國外提取茄屬植物的工藝，用薄層掃描色譜法測定了龍葵中茄堿的甙元茄胺的含量，發(fā)現(xiàn)龍葵果實中茄胺含量明顯高于全草含量，并在未成熟的青果實中發(fā)現(xiàn)茄胺含量甚至高達4.2%，但有關龍葵中總生物堿提取工藝及總含量的快速測定方法尚未見報道。在本文結果顯示中，超聲波輔助醇提法提取龍葵甾體類生物堿具有操作簡單、提取時間短的優(yōu)點。同時其重復性好、穩(wěn)定性與回收率高。

高效液相色譜近年來以其絕對優(yōu)勢廣泛用于生物堿的分離和鑒定，尤其是由非極性固定想和極性流動相組成的反液相色譜系統(tǒng)（RP-HPLc）的應用約占90%，非極性固定相主要是以硅膠為基質的硅烷化反相鍵和相。本文研究并確定了高效液相色譜測定甾體類生物堿及其苷元茄胺的分析條件，紫外檢測波長210hm。流動相選擇乙腈：水為55：45（水相pH用磷酸調節(jié)至2.7），進行紫外、紅外、質譜分析，證實其為龍葵甾體類生物堿的苷元茄胺。

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作者簡介：郭大申（1969年—），男，漢族，吉林通榆人，吉林省白城市通榆縣第一醫(yī)院，研究方向：中醫(yī)中藥理論與實踐研究。