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    兒童急性早幼粒細胞白血病的免疫表型特點分析

    2021-12-18 07:35:56岳永威孔令軍
    醫(yī)學信息 2021年23期
    關(guān)鍵詞:陽性者危險度表型

    岳永威,孔令軍,2

    (1.蘇州大學附屬兒童醫(yī)院血液科,江蘇 蘇州 215000;2.蘇州市吳江區(qū)兒童醫(yī)院,江蘇 蘇州 215200)

    急性早幼粒細胞白血?。╝cute promyelocytic leukemia,APL)是急性髓系白血病中的特殊類型,在我國APL 約占兒童急性髓系白血病的25%~30%[1],其發(fā)病的驅(qū)動基因為15 號染色體上的PML 基因與17 號染色體上的RARA 基因產(chǎn)生易位[即t(15;17)(q24.1;q21.1)],形成PML-RARA 融合基因,可使用聚合酶鏈定量監(jiān)測反應(yīng)(PCR)以證實疾病負荷并最終確認分子學緩解。隨著全反式維甲酸及亞砷酸治療作用的證實及危險度分層指導下的治療,APL 已成為可治愈的惡性腫瘤。由于其早期出血死亡率較高,盡早診斷、開始誘導分化治療是提高治療效果、改善患者預后的關(guān)鍵。流式細胞術(shù)簡便易行、可重復性強,結(jié)合形態(tài)學檢查可更可靠地早期診斷APL,在APL 的診斷中具有獨特優(yōu)勢。本研究回顧性分析我院87 例APL 患兒的免疫分型數(shù)據(jù),結(jié)合FLT3-ITD突變及初診白細胞相關(guān)數(shù)據(jù),分析兒童APL 的免疫表型特點,現(xiàn)報道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取2013 年1 月-2021 年3 月蘇州大學附屬兒童醫(yī)院確診的87 例兒童APL 患者,其中男性52 例,女性32 例;年齡2~14 歲,中位年齡9歲。所有患兒均經(jīng)FISH 或PCR 方法檢測到PMLRARA 融合基因確診,并采用全反式維甲酸聯(lián)合三氧化二砷及蒽環(huán)類藥物的三藥誘導方案或ATRA+ATO 雙藥誘導方案,鞏固及中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病預防及危險度分組參照《兒童急性早幼粒細胞性白血病-2010 方案》[2]及《兒童急性早幼粒細胞白血病診療規(guī)范(2018 年版)》[3],排除臨床資料不完善者。

    1.2 方法 采用流式細胞術(shù)檢查免疫表型所用抗體,包括CD2、cCD3、CD3、CD7、CD10、CD11b、CD13、CD14、CD15、CD19、CD20、CD22、CD33、CD34、CD36、CD45、CD64、cCD79a、CD123、CD117、MPO、HLA-DR 等,并采用美國BD 公司生產(chǎn)的BD FACSCablibur 流式細胞儀檢測,其中膜抗體表達率≥20%定義為陽性,胞質(zhì)抗體表達率≥10%定義為陽性。臨床危險度分層:低危者:WBC<10×109/L 為;高危者:WBC≥10×109/L 或FLT3-ITD 突變者或低危組維持治療前未達到分子生物學緩解。分子生物學方法FLT3-ITD 突變檢測陽性者定義為突變者,陰性者為無突變者。白細胞WBC≥50×109/L 者為高白細胞者,否則為非高白細胞者。

    1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 26.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析,計數(shù)資料以(n)表示,比較采用χ2檢驗或Fisher 確切概率檢驗,以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    2.1 兒童APL 的免疫表型特點 APL 細胞主要表達CD13、CD33、CD38、CD64、CD117、CD123、MPO,HLA-DR、CD7、CD2 一般為陰性,見表1。

    表1 兒童APL 的免疫表型特點(n)

    2.2 高白細胞、危險度、FLT3-ITD 突變狀態(tài)與免疫標記的關(guān)系 高白細胞者與非高白細胞者CD117 陽性、CD2 陽性比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表2。高危者與低危者CD34 陽性、CD15 陽性比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),而兩者CD117 陽性、CD2 陽性比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表3。FLT3-ITD 突變者與無突變者CD2 陽性、CD117 陽性、CD11b 陽性比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而兩者CD34 陽性、CD15 陽性比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表4。

    表2 高白細胞與免疫標記的關(guān)系(n)

    表3 危險度與免疫標記的關(guān)系(n)

    表4 FLT3-ITD 突變狀態(tài)與免疫標記的關(guān)系(n)

    3 討論

    流式細胞術(shù)在急性白血病的診斷過程中有重要意義,具有簡便、快速、重復性強的優(yōu)點,是傳統(tǒng)細胞形態(tài)學診斷的有力補充和佐證[4-6]。目前分子生物學技術(shù)應(yīng)用逐漸廣泛,但流式細胞術(shù)仍是APL 早期診斷的重要手段[7]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),兒童急性早幼粒細胞白血病細胞為CD13、CD33、CD38、CD64、CD117、CD123、MPO,HLA-DR、CD7、CD2 一般為陰性;CD34 陽性者36 例,占所有患兒的41.38%,同時CD11b 在48 例中發(fā)現(xiàn)21 例陽性,陽性者比例43.75%,與成人APL 陽性情況有所區(qū)別[8,9]。FLT3-ITD 突變者與無突變者CD11b 陽性比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),提示CD11b 陽性者發(fā)生FLT3-ITD 的機會較高,可能提示不良預后[10]。

    此外,本研究中CD2 陽性者共有13 例,占總病例數(shù)的14.94%;高危者與低危者CD2 陽性比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),提示CD2 陽性者更有可能分組為高危;另外FLT3-ITD 明確為突變陽性病例共19 例,占所有病例數(shù)的21.84%,CD2 陽性突變者7 例,無突變0 例,提示CD2 可能提示APL 患兒不良預后。馬榮軍等[11]研究發(fā)現(xiàn),在137 例成人APL病例中CD2 陽性者共35 例,治療完全緩解率為96.9%,與陰性者102 例結(jié)果相同,但是早期死亡率(8.6% vs 5.9%)和復發(fā)率(16.1% vs 4.3%)均高于CD2 陰性者。本研究中CD117 陽性者共52 例,占所有患兒的59.77%,其中高白細胞者3 例,非高白細胞者49 例;高危者18 例,低危者32 例;FLT3-ITD突變者7 例,無突變者13 例,提示CD117 陽性可能提示預后較好。既往研究證明[12-15],APL 化療后CD117 表達下降、CD11b 表達增高,可以作為APL細胞和APL 緩解恢復期良性髓系細胞增生的區(qū)別,但是其預后意義尚待研究。CD34 陽性者未發(fā)現(xiàn)在白細胞水平、FLT3-ITD 突變以及危險度分組方面具有不良預后趨勢,但是CD2 陽性可能提示APL 患兒預后不良,與文獻報道類似[16-19]。CD117 陰性的APL 患兒可能具有更高的白細胞水平,但具體的預后意義仍有待進一步分析[20,21]。

    綜上所述,兒童APL 患兒早幼粒細胞免疫表型與成人類似,但CD34 和CD11b 的表達可能更高。

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