• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    鐵皮石斛多糖對糖尿病大鼠脂代謝異常的改善作用及機制

    2021-12-03 07:27:46寇戰(zhàn)利陳社論劉冰林張效科李聰郭杰
    關(guān)鍵詞:鐵皮石斛多糖

    寇戰(zhàn)利, 陳社論, 劉冰林, 張效科, 李聰, 郭杰

    (1.咸陽市第一人民醫(yī)院中醫(yī)科,陜西咸陽 712000;2.陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科,陜西咸陽 712083)

    隨著人們生活方式和飲食方式的改變,2型糖尿病的患病率不斷上升。臨床已成功研制出許多口服降糖藥,如磺酰脲類、噻唑烷二酮類等。雖然這些藥物降糖療效顯著,但存在低血糖、過敏反應(yīng)、胃腸道反應(yīng)、肝損傷、血液系統(tǒng)不良反應(yīng)等副作用[1]。目前,尋找療效好、毒性低的天然抗糖尿病活性成分成為研究的熱點。糖尿病屬于中醫(yī)學(xué)“消渴”的范疇,基本病機以陰虛為本,燥熱為標(biāo)[2]。鐵皮石斛是治療“消渴”的常用中藥,具有生津益胃、滋陰清熱的功效[3]。鐵皮石斛多糖是鐵皮石斛中發(fā)揮藥理作用的主要活性成分[4],具有抗疲勞、抗氧化、抗癌、降血糖血脂、免疫調(diào)節(jié)及肝保護等作用[5-7]。有研究[8-9]表明,鐵皮石斛多糖可改善糖尿病小鼠血脂代謝紊亂,修復(fù)胰島細(xì)胞,促進胰島素分泌和肝糖原合成,減輕腎損傷。然而,鐵皮石斛多糖降糖降脂作用的潛在機制尚不清楚?;诖?,本研究建立糖尿病大鼠模型,觀察鐵皮石斛多糖對脂代謝異常的改善作用,并探討其可能的作用機制,以期為臨床應(yīng)用鐵皮石斛多糖治療糖尿病提供新的依據(jù),現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

    1 材料與方法

    1.1 實驗動物 90 只雄性SPF 級6 周齡SD 大鼠,體質(zhì)量180~200 g,由上海南方模式生物科技股份有限公司提供,動物生產(chǎn)許可證號:SCXK(滬)2019-0002。飼養(yǎng)于陜西中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心,保持溫度23~25 ℃,濕度60%~65%,晝夜12 h交替環(huán)境中,適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d。

    1.2 藥物、試劑與儀器 鐵皮石斛多糖(北京索萊寶科技有限公司,純度≥85%,批號:180316);鹽酸二甲雙胍腸溶片(河北醫(yī)科大學(xué)制藥廠,國藥準(zhǔn)字H20083575)。鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(美國Sigma 公司);檸檬酸(天津永大化學(xué)試劑有限公司);兔抗大鼠胰島素受體底物2(IRS2)、磷酸化IRS2(p-IRS2)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)單克隆抗體和蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)多克隆抗體、辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔免疫球蛋白(IgG)抗體(北京全式金生物技術(shù)有限公司);甘油三酯(TG)、空腹胰島素(FINS)酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)試劑盒,總膽固醇(TC)檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所);超氧化物歧化酶(SOD)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)檢測試劑盒(上海晶抗生物公司);高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)檢測試劑盒(武漢博士康生物工程有限公司)。Multiskan FC全自動酶標(biāo)儀(美國Thermo公司)。

    1.3 建模與分組 隨機選取75只大鼠建立糖尿病大鼠模型,剩余15 只為正常組。造模方法參照文獻[10]:建模大鼠用高糖高脂飼料(質(zhì)量分?jǐn)?shù)配比:10.0%豬油、20.0%蔗糖、2.5%膽固醇、1.0%膽酸鹽、66.5%常規(guī)飼料)喂養(yǎng),正常組大鼠用常規(guī)飼料喂養(yǎng)。喂養(yǎng)1個月后,禁食不禁水12 h,建模大鼠給予腹腔注射10 g/L STZ溶液(由0.1 mmol/L檸檬酸緩沖液冰浴配制,現(xiàn)配現(xiàn)用)30 mg/kg,正常組腹腔注射等體積的0.1 mmol/L 檸檬酸緩沖液。注射后3 h 禁食,給予大鼠30 g/L 葡萄糖溶液預(yù)防低血糖。3 d 后,所有大鼠禁食12 h,尾靜脈采血測空腹血糖(FBG),若FBG ≥16.7 mmol/L,且維持1 周以上,則判斷造模成功[11]。將造模成功的68 只大鼠隨機分為模型組,鐵皮石斛多糖低、高劑量組和二甲雙胍組,每組17只。

    1.4 干預(yù)方法 造模成功24 h后,依照藥理實驗中動物與人體間的等效劑量換算,參照蘆春斌等[12]的大鼠給藥劑量,鐵皮石斛多糖低、高劑量組分別灌胃鐵皮石斛多糖100、200 mg/kg,二甲雙胍組灌胃鹽酸二甲雙胍150 mg/kg,正常組和模型組灌胃等體積的生理鹽水。每日1次,共干預(yù)30 d。

    1.5 觀察指標(biāo)與方法

    1.5.1 血FBG、FINS檢測 尾靜脈取血,應(yīng)用血糖儀測定各組大鼠藥物干預(yù)0、15、30 d FBG 水平。于藥物干預(yù)30 d,按照FINS ELISA 試劑盒說明書加樣,應(yīng)用酶標(biāo)儀檢測450 nm 波長處的吸光度(OD)值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算FINS的濃度。

    1.5.2 血清TG、TC、LDL-C、HDL-C水平檢測 末次藥物干預(yù)結(jié)束后,各組隨機選取7只大鼠,斷頭取血,以3 500 r/min,離心半徑8 cm,離心10 min,得到上清液,-20 ℃保存?zhèn)溆谩H〕?20 ℃保存?zhèn)溆玫纳锨逡?,分別按照TG、TC、LDL-C、HDL-C試劑盒說明書,應(yīng)用酶標(biāo)儀檢測大鼠血清TG、TC、LDL-C、HDL-C 在500 nm、510 nm、546 nm、546 nm 波長處的OD 值。各生化指標(biāo)水平=(樣本OD 值-空白孔OD 值)/(校準(zhǔn)品OD 值-空白孔OD值)×校準(zhǔn)品濃度。

    1.5.3 血清SOD、MDA水平檢測 取保存在-20 ℃的上清液,按照SOD 試劑盒說明書加樣,采用黃嘌呤氧化酶法測定SOD 水平,應(yīng)用酶標(biāo)儀測出550 nm 波長處的OD 值。SOD 樣品比活力(U/mL)=(對照管OD值-測定管OD值)/對照管OD值÷50%×反應(yīng)體系稀釋倍數(shù)×樣本測試前稀釋倍數(shù)。

    取保存在-20 ℃的上清液,按照MDA 試劑盒說明書加樣,采用硫代巴比妥酸法測定MDA 水平(μmol/L),應(yīng)用酶標(biāo)儀測出532 nm 處的OD 值。MDA含量(nmol·mL-1)=(測定OD值-對照OD值)/(標(biāo)準(zhǔn)OD值-空白OD值)×標(biāo)準(zhǔn)品濃度(10 nmol·mL-1)×樣本測試前稀釋倍數(shù)。

    1. 5. 4 蘇木素-伊紅(HE)染色法觀察肝臟組織病理學(xué)變化 將剩余大鼠全部處死,快速從腹腔分離出肝臟組織,用生理鹽水清洗后,左側(cè)肝臟組織用40 g/L 多聚甲醛溶液固定24 h,于4 ℃冰箱保存。右側(cè)肝臟組織置于-80 ℃冰箱中保存。將肝臟組織從固定液中取出,梯度乙醇脫水,二甲苯處理,石蠟包埋,切片(4 μm),HE染色,脫水透明,中性樹脂膠封片,光學(xué)顯微鏡下觀察并拍照。

    1. 5. 5 蛋白免疫印跡(Western Blot)法檢測肝臟組織IRS2、p-IRS2、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR 蛋白相對表達(dá)水平 取-80 ℃保存的肝臟組織100 mg,研磨,加入蛋白提取液冰上裂解,離心,取上清,二喹啉甲酸(BCA)法進行蛋白定量;加入十二烷基硫酸鈉(SDS)上樣緩沖液,100 ℃水浴使蛋白變性,進行SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳(PAGE),轉(zhuǎn)膜;50 g/L脫脂牛奶室溫封閉2 h;洗膜后分別加入1∶1 000 稀釋的IRS2、p-IRS2、PI3K、p-PI3K、mTOR單克隆一抗和AKT、p-AKT多克隆一抗,4 ℃孵育過夜;洗膜后加入1∶4 000稀釋辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗,室溫孵育1 h;洗膜后加入電化學(xué)發(fā)光液(ECL)顯影。采用ImageJ軟件分析圖像,以β-actin為內(nèi)參,IRS2、p-IRS2、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR蛋白相對表達(dá)量用目的蛋白條帶灰度值與β-actin 蛋白條帶灰度值的比值表示。

    1.6 統(tǒng)計方法 采用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析,計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,多組間比較采用單因素方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2. 1 各組大鼠血FBG、FINS 水平比較 FBG、FINS 水平組間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與正常組比較,模型組,鐵皮石斛多糖低、高劑量組和二甲雙胍組干預(yù)0、15、30 d FBG水平和FINS 水平均升高(P<0.05);與模型組比較,鐵皮石斛多糖低、高劑量組和二甲雙胍組干預(yù)0 d FBG 水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),干預(yù)15、30 d FBG 水平和FINS 水平均降低(P<0.05);鐵皮石斛多糖高劑量組干預(yù)15、30 d FBG水平和FINS 水平與二甲雙胍組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。隨著干預(yù)時間0、15、30 d 增加,模型組FBG 水平持續(xù)上升,鐵皮石斛多糖低、高劑量組和二甲雙胍組FBG 水平持續(xù)下降(P<0.05)。具體結(jié)果見表1。

    表1 各組大鼠FBG、FINS水平比較Table 1 Comparison of FBG and FINS levels of rats in various groups(±s)

    表1 各組大鼠FBG、FINS水平比較Table 1 Comparison of FBG and FINS levels of rats in various groups(±s)

    ①P <0.05,與正常組比較;②P <0.05,與模型組比較;③P <0.05,與二甲雙胍組比較;④P <0.01,與同組干預(yù)0 d比較;⑤P <0.05,與同組干預(yù)15 d比較

    FBG(mmol?L-1)FINS(μU·mL-1)5.13±0.73 12.31±1.14①7.26±0.86①②③6.02±0.78①②5.88±0.75①②288.911<0.001組別正常組模型組鐵皮石斛多糖低劑量組鐵皮石斛多糖高劑量組二甲雙胍組F值P值鼠數(shù)(只)15 17 17 17 17干預(yù)0 d 5.30±1.67 18.80±1.91①18.90±1.90①18.80±1.89①18.60±1.91①191.394<0.001干預(yù)15 d 5.20±1.60 21.40±2.01①④16.70±1.71①②③④15.50±1.61①②④15.10±1.62①②④275.488<0.001干預(yù)30 d 5.50±1.31 23.50±1.91①④⑤14.30±1.56①②③④⑤12.40±1.41①②④⑤12.10±1.61①②④⑤467.760<0.001

    2. 2 各組大鼠血清TG、TC、LDL-C 和HDL-C水平比較 血清TG、TC、LDL-C 和HDL-C 水平組間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與正常組比較,模型組,鐵皮石斛多糖低、高劑量組和二甲雙胍組血清TG、TC、LDL-C 水平升高,HDL-C水平降低(P<0.05);與模型組比較,鐵皮石斛多糖低、高劑量組和二甲雙胍組血清TG、TC、LDL-C水平降低,HDL-C水平升高(P<0.05);鐵皮石斛多糖高劑量組血清TG、TC、LDL-C 和HDL-C 水平與二甲雙胍組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。具體結(jié)果見表2。

    表2 各組大鼠血清TG、TC、LDL-C和HDL-C水平比較Table 2 Comparison of serum TG,TC,LDL-C and HDL-C levels of rats in various groups (±s,mmol·L-1)

    表2 各組大鼠血清TG、TC、LDL-C和HDL-C水平比較Table 2 Comparison of serum TG,TC,LDL-C and HDL-C levels of rats in various groups (±s,mmol·L-1)

    ①P <0.05,與正常組比較;②P <0.05,與模型組比較;③P <0.05,與二甲雙胍組比較

    組別正常組模型組鐵皮石斛多糖低劑量組鐵皮石斛多糖高劑量組二甲雙胍組F值P值HDL-C 1.79±0.18 0.72±0.08①0.96±0.10①②③1.29±0.13①②1.31±0.13①②69.419<0.001鼠數(shù)(只)77777 TG 0.67±0.08 1.52±0.16①1.32±0.14①②③1.02±0.11①②0.98±0.10①②50.311<0.001 TC 2.14±0.31 3.42±0.35①3.13±0.32①②③2.78±0.31①②2.73±0.31①②15.792<0.001 LDL-C 0.59±0.07 1.35±0.14①1.12±0.15①②③0.83±0.09①②0.84±0.09①②47.754<0.001

    2.3 各組大鼠血清SOD活性、MDA水平比較 大鼠血清SOD 活性、MDA 水平組間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與正常組比較,模型組,鐵皮石斛多糖低、高劑量組和二甲雙胍組血清SOD活性降低,MDA水平升高(P<0.05);與模型組比較,鐵皮石斛多糖低、高劑量組和二甲雙胍組血清SOD活性升高,MDA水平降低(P<0.05);鐵皮石斛多糖高劑量組SOD 活性、MDA 水平與二甲雙胍組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。具體結(jié)果見表3。

    表3 各組大鼠血清SOD活性、MDA水平比較Table 3 Comparison of serum SOD activity and MDA level of rats in various groups(±s)

    表3 各組大鼠血清SOD活性、MDA水平比較Table 3 Comparison of serum SOD activity and MDA level of rats in various groups(±s)

    ①P <0.05,與正常組比較;②P <0.05,與模型組比較;③P <0.05,與二甲雙胍組比較

    MDA(nmol·mL-1)1.58±0.23 3.76±0.38①3.22±0.33①②③2.75±0.28①②2.70±0.28①②49.115<0.001組別正常組模型組鐵皮石斛多糖低劑量組鐵皮石斛多糖高劑量組二甲雙胍組F值P值鼠數(shù)(只)77777 SOD(U·mL-1)389.68±40.23 246.51±28.56①287.57±32.36①②③337.64±34.51①②340.42±35.29①②17.796<0.001

    2.4 各組大鼠肝臟組織病理學(xué)表現(xiàn)比較 正常組肝細(xì)胞形態(tài)正常清晰,排列規(guī)則有序,組織結(jié)構(gòu)完整。模型組出現(xiàn)大量肝細(xì)胞水腫壞死現(xiàn)象,組織結(jié)構(gòu)紊亂,排列不均。鐵皮石斛多糖低劑量組有少量肝細(xì)胞水腫壞死,細(xì)胞排列紊亂,病理表現(xiàn)較模型組改善。鐵皮石斛多糖高劑量組和二甲雙胍組肝細(xì)胞形態(tài)、排列及組織結(jié)構(gòu)正常,個別肝細(xì)胞水腫壞死,病理表現(xiàn)較模型組明顯改善。見圖1。

    圖1 各組大鼠肝臟組織病理表現(xiàn)比較(HE染色法,×100)Figure 1 Comparison of liver histopathologic manifestations of rats in various groups(by HE staining,×100)

    2. 5 各組大鼠肝臟組織IRS2、p-IRS2、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR蛋白相對表達(dá)水平比較 p-IRS2、p-PI3K、p-AKT、mTOR蛋白相對表達(dá)水平組間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與正常組比較,模型組,鐵皮石斛多糖低、高劑量組和二甲雙胍組肝臟組織p-IRS2、p-PI3K、p-AKT、mTOR 蛋白相對表達(dá)水平降低(P<0.05);與模型組比較,鐵皮石斛多糖低、高劑量組和二甲雙胍組肝臟組織p-IRS2、p-PI3K、p-AKT、mTOR 蛋白相對表達(dá)水平升高(P<0.05);鐵皮石斛多糖高劑量組肝臟組織p-IRS2、p-PI3K、p-AKT、mTOR蛋白相對表達(dá)水平與二甲雙胍組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。而IRS2、PI3K、AKT 蛋白相對表達(dá)水平組間比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。具體結(jié)果見表4、圖2。

    圖2 各組大鼠肝臟組織IRS2、p-IRS2、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR蛋白相對表達(dá)水平比較Figure 2 Comparison of relative protein expression levels of IRS2,p-IRS2,PI3K,p-PI3K,AKT,p-Akt and mTOR in liver tissues of rats in various groups

    表4 各組大鼠肝臟組織IRS2、p-IRS2、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR蛋白相對表達(dá)水平比較Table 4 Comparison of relative protein expression levels of IRS2,p-IRS2,PI3K,p-PI3K,AKT,p-AKT,mTOR in liver tissues of rats in various groups(±s)

    表4 各組大鼠肝臟組織IRS2、p-IRS2、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR蛋白相對表達(dá)水平比較Table 4 Comparison of relative protein expression levels of IRS2,p-IRS2,PI3K,p-PI3K,AKT,p-AKT,mTOR in liver tissues of rats in various groups(±s)

    ①P <0.05,與正常組比較;②P <0.05,與模型組比較;③P <0.05,與二甲雙胍組比較

    組別正常組模型組鐵皮石斛多糖低劑量組鐵皮石斛多糖高劑量組二甲雙胍組F值P值mTOR 1.01±0.11 0.38±0.05①0.60±0.06①②③0.84±0.09①②③0.85±0.09①②86.060<0.001鼠數(shù)(只)8 10 10 10 10 IRS2 1.01±0.11 1.01±0.11 1.02±0.12 1.01±0.11 1.02±0.12 0.022 0.999 p-IRS2 0.99±0.11 0.39±0.05①0.61±0.07①②③0.82±0.09①②0.83±0.09①②72.865<0.001 PI3K 1.22±0.16 1.24±0.15 1.21±0.17 1.22±0.16 1.23±0.17 0.049 0.995 p-PI3K 0.98±0.10 0.38±0.05①0.62±0.07①②③0.83±0.09①②0.84±0.09①②78.485<0.001 AKT 1.41±0.17 1.42±0.16 1.40±0.17 1.41±0.16 1.42±0.18 0.025 0.999 p-AKT 1.21±0.17 0.61±0.11①0.82±0.12①②③0.99±0.12①②1.01±0.14①②26.819<0.001

    3 討論

    糖尿病發(fā)病機制復(fù)雜,多數(shù)患者伴有血脂代謝異常,胰島素在調(diào)節(jié)血糖過程中發(fā)揮了重要的作用,可通過調(diào)節(jié)PI3K/AKT 信號通路,參與葡萄糖轉(zhuǎn)運和脂肪合成過程,調(diào)節(jié)糖脂代謝[13]。PI3K/AKT 信號通路是胰島素的下游分子通路,與細(xì)胞生長、增殖、分化、凋亡、葡萄糖轉(zhuǎn)運有關(guān)[14]。IRS2 是維持胰島β 細(xì)胞功能的重要信號蛋白,胰島素與胰島素受體結(jié)合后,使得IRS2 酪氨酸位點磷酸化,磷酸化的IRS2 酪氨酸殘基與PI3K的調(diào)節(jié)亞基p85 結(jié)合,進而激活下游的PI3K,活化的PI3K 將磷脂酰肌醇磷酸轉(zhuǎn)化為磷脂酰肌醇二磷酸和磷脂酰肌醇三磷酸,并作為其第二信使激活A(yù)KT,活化的AKT 激活mTOR 的表達(dá),抑制糖異生限速酶的表達(dá),減少糖異生,降低血糖[15]。蔡羽[16]研究表明,上調(diào)PI3K/AKT 信號通路中IRS2、PI3K、AKT、p-AKT 的表達(dá),可有效改善糖脂代謝,減輕肝臟、胰腺和腎臟組織損傷,減少氧化應(yīng)激。陸梓華等[17]研究表明,上調(diào)IRS2、PI3K、AKT2 的表達(dá)與調(diào)節(jié)2 型糖尿病大鼠糖脂代謝異常狀態(tài)有關(guān)。另外,有研究證實,通過激活PI3K/AKT通路,可減少肝臟細(xì)胞脂質(zhì)新生,緩解高脂血癥模型大鼠肝臟脂質(zhì)沉積[18]。

    本研究結(jié)果顯示,經(jīng)鐵皮石斛多糖治療后的糖尿病大鼠FBG、FINS、TG、TC、LDL-C、MDA水平降低,HDL-C、SOD 水平升高,肝臟組織病理學(xué)變化得到改善,且高劑量鐵皮石斛多糖與鹽酸二甲雙胍療效無明顯差異,提示鐵皮石斛多糖可降低血糖,改善脂代謝,促進胰島素正常分泌,抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)。另外,本研究結(jié)果亦顯示,經(jīng)鐵皮石斛多糖治療后的糖尿病大鼠肝臟組織p-IRS2、p-PI3K、p-AKT、mTOR 蛋白表達(dá)上調(diào),表明脂代謝相關(guān)指標(biāo)得到明顯改善,提示鐵皮石斛多糖可能是通過激活PI3K/AKT 信號通路,改善脂代謝。

    綜上所述,鐵皮石斛多糖可改善糖尿病大鼠脂代謝異常,其可能是通過激活PI3K/AKT 信號通路發(fā)揮作用的。

    猜你喜歡
    鐵皮石斛多糖
    飛鼠與石斛
    鐵皮俠的裝備
    鐵皮園
    趣味(語文)(2020年4期)2020-07-27 01:43:14
    35 種石斛蘭觀賞價值評價
    米胚多糖的組成及抗氧化性研究
    金釵石斛化學(xué)成分的研究
    中成藥(2018年5期)2018-06-06 03:11:56
    熟三七多糖提取工藝的優(yōu)化
    中成藥(2018年3期)2018-05-07 13:34:45
    鐵皮石斛家庭種植技術(shù)探索
    正交設(shè)計在觀賞石斛種胚離體培養(yǎng)中的應(yīng)用
    酶法降解白及粗多糖
    中成藥(2014年11期)2014-02-28 22:29:50
    久久99蜜桃精品久久| 国产真实伦视频高清在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲人与动物交配视频| 视频中文字幕在线观看| 久久精品国产自在天天线| 精品酒店卫生间| 十八禁高潮呻吟视频 | 国产伦精品一区二区三区四那| 久久久久久人妻| 狂野欧美激情性bbbbbb| 美女中出高潮动态图| 日本免费在线观看一区| 国产黄片视频在线免费观看| 久久精品国产a三级三级三级| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 女人精品久久久久毛片| 国产黄色免费在线视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 国产高清三级在线| 韩国av在线不卡| 成人无遮挡网站| av黄色大香蕉| av又黄又爽大尺度在线免费看| 久久99蜜桃精品久久| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 国产色爽女视频免费观看| 极品教师在线视频| 狂野欧美激情性bbbbbb| 99久久综合免费| 男男h啪啪无遮挡| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 国产极品天堂在线| 免费观看在线日韩| 亚洲欧美精品自产自拍| 大陆偷拍与自拍| 午夜免费男女啪啪视频观看| 中文在线观看免费www的网站| 中文字幕制服av| 亚洲精品成人av观看孕妇| videossex国产| 国精品久久久久久国模美| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 久久ye,这里只有精品| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | av女优亚洲男人天堂| 精品少妇久久久久久888优播| 哪个播放器可以免费观看大片| 亚洲怡红院男人天堂| 五月伊人婷婷丁香| 少妇被粗大猛烈的视频| 色吧在线观看| 精品久久久久久久久亚洲| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产黄色免费在线视频| 国产成人精品无人区| 国产免费福利视频在线观看| 插逼视频在线观看| 国产高清不卡午夜福利| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲av二区三区四区| 亚洲av二区三区四区| 看十八女毛片水多多多| 免费大片黄手机在线观看| 黄色一级大片看看| 99国产精品免费福利视频| 岛国毛片在线播放| 少妇高潮的动态图| 亚洲欧美日韩东京热| 色网站视频免费| 色94色欧美一区二区| 精品酒店卫生间| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 十八禁网站网址无遮挡 | 国产精品国产三级国产av玫瑰| 久久久久久伊人网av| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 青春草视频在线免费观看| 伊人久久国产一区二区| 中文字幕免费在线视频6| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 最近2019中文字幕mv第一页| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 一区二区三区乱码不卡18| 精品久久久精品久久久| 日韩欧美精品免费久久| 日韩欧美精品免费久久| 卡戴珊不雅视频在线播放| 综合色丁香网| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 丰满乱子伦码专区| 亚州av有码| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 777米奇影视久久| 97超视频在线观看视频| 少妇人妻久久综合中文| 少妇人妻 视频| 一级,二级,三级黄色视频| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 久久免费观看电影| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲真实伦在线观看| av播播在线观看一区| 国产永久视频网站| 在线观看av片永久免费下载| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 精品一区二区免费观看| 亚洲国产av新网站| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲精品一二三| 国产免费又黄又爽又色| 免费看光身美女| 日韩欧美 国产精品| 精华霜和精华液先用哪个| 亚洲av男天堂| 亚洲精品国产成人久久av| 亚洲高清免费不卡视频| 婷婷色av中文字幕| 蜜桃在线观看..| 天天操日日干夜夜撸| 十分钟在线观看高清视频www | av在线播放精品| 日本欧美国产在线视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 欧美一级a爱片免费观看看| 欧美激情国产日韩精品一区| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产成人91sexporn| 国产精品三级大全| 国产高清有码在线观看视频| 水蜜桃什么品种好| 老女人水多毛片| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 免费观看a级毛片全部| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 精品少妇内射三级| 成人美女网站在线观看视频| 这个男人来自地球电影免费观看 | 国产精品久久久久久精品古装| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 国产精品一二三区在线看| 女性生殖器流出的白浆| 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 色网站视频免费| 一级a做视频免费观看| 妹子高潮喷水视频| 精品熟女少妇av免费看| 精品少妇久久久久久888优播| 又爽又黄a免费视频| 国产成人精品无人区| 亚洲情色 制服丝袜| 丝瓜视频免费看黄片| 高清黄色对白视频在线免费看 | 少妇高潮的动态图| 黑人猛操日本美女一级片| 香蕉精品网在线| 成人亚洲欧美一区二区av| 九色成人免费人妻av| 在线观看www视频免费| 久久女婷五月综合色啪小说| 伦理电影免费视频| 丝袜喷水一区| 亚洲精品,欧美精品| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲精品第二区| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 日韩三级伦理在线观看| 极品教师在线视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 久久久久人妻精品一区果冻| 日本91视频免费播放| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产精品久久久久成人av| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲欧洲国产日韩| 99热全是精品| 免费观看av网站的网址| 啦啦啦视频在线资源免费观看| tube8黄色片| 最新的欧美精品一区二区| 大片免费播放器 马上看| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲怡红院男人天堂| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲成色77777| 黑人猛操日本美女一级片| 熟妇人妻不卡中文字幕| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 久久午夜福利片| 久久久欧美国产精品| 搡女人真爽免费视频火全软件| 精品人妻熟女av久视频| 黑丝袜美女国产一区| av一本久久久久| 高清毛片免费看| 日韩一本色道免费dvd| 久久 成人 亚洲| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲av男天堂| 18禁动态无遮挡网站| 在线看a的网站| 免费观看性生交大片5| 欧美97在线视频| 免费人妻精品一区二区三区视频| 最近手机中文字幕大全| 成年人免费黄色播放视频 | 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 在线看a的网站| 免费观看性生交大片5| 亚洲三级黄色毛片| 七月丁香在线播放| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 男的添女的下面高潮视频| 91久久精品国产一区二区成人| 一级毛片aaaaaa免费看小| 久久久久精品久久久久真实原创| 国产精品国产三级国产专区5o| 精品国产露脸久久av麻豆| 丰满迷人的少妇在线观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 久久久午夜欧美精品| 亚洲精品国产av成人精品| 欧美人与善性xxx| 欧美精品国产亚洲| 熟妇人妻不卡中文字幕| 日本av免费视频播放| 美女cb高潮喷水在线观看| 久久av网站| 五月玫瑰六月丁香| 老熟女久久久| av免费观看日本| 水蜜桃什么品种好| 在线看a的网站| 在线观看免费高清a一片| 日韩欧美一区视频在线观看 | 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 美女大奶头黄色视频| 一级二级三级毛片免费看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 久久久国产一区二区| 日本欧美国产在线视频| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产极品天堂在线| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 免费大片18禁| 国产美女午夜福利| 国产成人精品福利久久| 成人国产av品久久久| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 少妇人妻精品综合一区二区| 人妻 亚洲 视频| 亚洲精品视频女| 免费av中文字幕在线| 久久精品国产亚洲网站| 伦理电影大哥的女人| 一边亲一边摸免费视频| 国产精品一二三区在线看| 国产在线视频一区二区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 97精品久久久久久久久久精品| 尾随美女入室| 男人舔奶头视频| 精品久久久久久久久av| 亚洲怡红院男人天堂| 五月天丁香电影| kizo精华| 国产一区二区在线观看日韩| 偷拍熟女少妇极品色| tube8黄色片| 免费人妻精品一区二区三区视频| 少妇丰满av| 老司机影院成人| 一级毛片aaaaaa免费看小| 日本午夜av视频| 久久午夜福利片| 国产在线男女| 国产 一区精品| 精品少妇内射三级| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产极品天堂在线| 91精品国产国语对白视频| 午夜影院在线不卡| 一级,二级,三级黄色视频| 久久青草综合色| 免费黄频网站在线观看国产| 91久久精品电影网| 免费观看性生交大片5| 日本91视频免费播放| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 久久久久久久精品精品| 乱人伦中国视频| 欧美xxⅹ黑人| 我要看日韩黄色一级片| 欧美 日韩 精品 国产| 欧美日韩综合久久久久久| 伦理电影免费视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 黄色配什么色好看| 亚洲av成人精品一二三区| av不卡在线播放| av视频免费观看在线观看| 只有这里有精品99| 最近中文字幕高清免费大全6| 中文在线观看免费www的网站| 在线观看av片永久免费下载| 成人漫画全彩无遮挡| 久久久久久久久久久丰满| 中文字幕人妻丝袜制服| 亚洲精品国产成人久久av| 嘟嘟电影网在线观看| 精品酒店卫生间| 国产成人精品婷婷| 久久99热6这里只有精品| 久久久久久久久久久免费av| 一边亲一边摸免费视频| 久久精品久久久久久久性| 国产有黄有色有爽视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 午夜精品国产一区二区电影| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲精品国产成人久久av| 亚洲图色成人| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产综合精华液| 老女人水多毛片| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 美女福利国产在线| 国产色婷婷99| 亚洲天堂av无毛| 热99国产精品久久久久久7| 久久av网站| 桃花免费在线播放| 熟女人妻精品中文字幕| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 亚州av有码| 国产亚洲一区二区精品| 99视频精品全部免费 在线| 91久久精品国产一区二区三区| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 交换朋友夫妻互换小说| 国产黄片视频在线免费观看| 国产日韩欧美在线精品| 国产 一区精品| 在线 av 中文字幕| 久久精品国产亚洲av涩爱| 精品一区二区免费观看| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲欧洲日产国产| 国产乱人偷精品视频| 亚洲精品亚洲一区二区| 精品卡一卡二卡四卡免费| 赤兔流量卡办理| www.色视频.com| a级毛色黄片| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲情色 制服丝袜| 成人美女网站在线观看视频| 日本色播在线视频| 日本欧美国产在线视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 最黄视频免费看| 国产精品99久久99久久久不卡 | av线在线观看网站| 亚洲一区二区三区欧美精品| 午夜老司机福利剧场| 国产成人一区二区在线| 日韩中文字幕视频在线看片| 国产精品久久久久久精品古装| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 大香蕉97超碰在线| 伦精品一区二区三区| 亚洲精品乱久久久久久| 欧美 日韩 精品 国产| 中文天堂在线官网| 美女福利国产在线| 国产午夜精品一二区理论片| 亚洲美女黄色视频免费看| av国产久精品久网站免费入址| 国产一级毛片在线| 三级经典国产精品| 黑人猛操日本美女一级片| 在线观看人妻少妇| 男女边摸边吃奶| 性色avwww在线观看| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲精品国产成人久久av| av黄色大香蕉| 黄片无遮挡物在线观看| 久久久久网色| 久久女婷五月综合色啪小说| 青青草视频在线视频观看| 新久久久久国产一级毛片| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲精品国产色婷婷电影| 99久久人妻综合| 国产精品成人在线| 大香蕉97超碰在线| 国产在线视频一区二区| 欧美少妇被猛烈插入视频| 老女人水多毛片| 国产 一区精品| 我要看黄色一级片免费的| www.av在线官网国产| 国产男人的电影天堂91| 韩国av在线不卡| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲性久久影院| 97在线视频观看| 精品亚洲成国产av| 国内揄拍国产精品人妻在线| 久久精品国产亚洲网站| 日本-黄色视频高清免费观看| 美女福利国产在线| 亚洲国产精品999| 黑人猛操日本美女一级片| 国产高清三级在线| 亚洲国产精品专区欧美| 美女视频免费永久观看网站| 久久热精品热| 夜夜骑夜夜射夜夜干| h日本视频在线播放| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 免费黄频网站在线观看国产| 精华霜和精华液先用哪个| 99热这里只有是精品在线观看| 美女大奶头黄色视频| 国产av精品麻豆| 久久99热这里只频精品6学生| 久久婷婷青草| 亚洲av福利一区| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 日韩中字成人| 成人二区视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 免费黄色在线免费观看| 国产成人精品无人区| 高清欧美精品videossex| h日本视频在线播放| 嫩草影院新地址| 精品国产乱码久久久久久小说| 乱系列少妇在线播放| 国产免费福利视频在线观看| 精品久久久精品久久久| 性高湖久久久久久久久免费观看| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲国产欧美在线一区| 高清在线视频一区二区三区| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 久久国产乱子免费精品| 人妻系列 视频| 久久久亚洲精品成人影院| a 毛片基地| 欧美精品一区二区大全| 在线 av 中文字幕| 制服丝袜香蕉在线| 大香蕉97超碰在线| 人体艺术视频欧美日本| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产精品欧美亚洲77777| 青春草视频在线免费观看| 国产男人的电影天堂91| 少妇精品久久久久久久| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲av不卡在线观看| 免费观看a级毛片全部| 欧美3d第一页| 亚洲精品,欧美精品| 最近的中文字幕免费完整| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲人与动物交配视频| 91久久精品电影网| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 人妻夜夜爽99麻豆av| 五月天丁香电影| 男女免费视频国产| 99久国产av精品国产电影| 99视频精品全部免费 在线| videossex国产| 色网站视频免费| 一区二区三区乱码不卡18| 99视频精品全部免费 在线| 大片免费播放器 马上看| 免费av不卡在线播放| 午夜91福利影院| 熟女电影av网| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 能在线免费看毛片的网站| 久久国产精品大桥未久av | 色94色欧美一区二区| 六月丁香七月| 国产男女超爽视频在线观看| 91久久精品国产一区二区成人| 九草在线视频观看| 中文字幕av电影在线播放| 久久久久国产网址| 高清不卡的av网站| 少妇高潮的动态图| 热re99久久国产66热| h日本视频在线播放| 亚洲国产最新在线播放| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 免费观看的影片在线观看| 免费观看在线日韩| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 亚洲av综合色区一区| 久久久午夜欧美精品| 一级黄片播放器| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 婷婷色av中文字幕| 五月伊人婷婷丁香| 欧美成人午夜免费资源| 视频区图区小说| 老熟女久久久| 国产成人91sexporn| 丝袜喷水一区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 日韩欧美一区视频在线观看 | 成人午夜精彩视频在线观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 丝袜在线中文字幕| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲伊人久久精品综合| 久久久国产欧美日韩av| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 一级二级三级毛片免费看| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久国产亚洲av麻豆专区| 人妻一区二区av| 国精品久久久久久国模美| 成人亚洲欧美一区二区av| 99久久精品国产国产毛片| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲精品第二区| 午夜av观看不卡| 久久人人爽人人片av| 日本午夜av视频| 十八禁高潮呻吟视频 | 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲内射少妇av| 在线观看免费视频网站a站| 久久久精品94久久精品| 在线播放无遮挡| 亚洲,一卡二卡三卡| 国产男女超爽视频在线观看| 日本欧美国产在线视频| 日韩av不卡免费在线播放| 免费看日本二区| 人人妻人人澡人人看| 国产在线一区二区三区精| 丰满人妻一区二区三区视频av| 日韩视频在线欧美| 亚洲精品国产色婷婷电影| 高清视频免费观看一区二区| 久久97久久精品| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲四区av| 成人毛片a级毛片在线播放| 99热这里只有是精品在线观看| 国产一区二区在线观看日韩| 久久精品国产a三级三级三级| 女人精品久久久久毛片| 久久婷婷青草| 9色porny在线观看| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 成人毛片a级毛片在线播放| 国产成人免费无遮挡视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 在现免费观看毛片| 只有这里有精品99| 亚洲不卡免费看| 在线观看三级黄色| 蜜桃在线观看..| 黄色毛片三级朝国网站 | 天堂8中文在线网| 久久女婷五月综合色啪小说| 男人爽女人下面视频在线观看| 一区二区三区精品91| 中文字幕免费在线视频6| 十分钟在线观看高清视频www | 精品人妻偷拍中文字幕| 熟女人妻精品中文字幕| 日本色播在线视频| 老女人水多毛片|