D-二聚體檢測(cè)方法及臨床應(yīng)用進(jìn)展

曾革寬

（融安縣中醫(yī)醫(yī)院，廣西 柳州，545400）

D 一二聚體是來源于纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白凝塊，主要是對(duì)纖維蛋白溶解功能反映指標(biāo)。目前機(jī)體D-二聚體水平升高原因較多，包括血液高凝狀態(tài)、靜脈血栓形成、彌漫性血管內(nèi)凝血及肺栓塞等。因此，開展D-二聚體檢測(cè)對(duì)某些疾病預(yù)測(cè)具有較高參考價(jià)值。近些年來隨著臨床對(duì)D-二聚體相關(guān)研究開展增多，對(duì)其研究不斷深入，其臨床應(yīng)用價(jià)值有了更多研究進(jìn)展，如國內(nèi)外多項(xiàng)研究顯示，D-二聚體檢測(cè)可有效預(yù)測(cè)腫瘤疾病及評(píng)估預(yù)后等作用等[1]。同時(shí)，臨床開展D-二聚體檢測(cè)優(yōu)點(diǎn)為安全無創(chuàng)，且費(fèi)用低廉、檢測(cè)方便快捷，上述均是D-二聚體檢測(cè)廣泛開展提供有利條件，患者對(duì)上述檢測(cè)更易接受[2]。本文就D-二聚體檢測(cè)方法及臨床應(yīng)用情況如下分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1.D-二聚體概述

1.1 D-二聚體檢測(cè)原理依據(jù)D-二聚體測(cè)定過程中，主要涵蓋以下兩個(gè)部分：D-二聚體片段必須被單克隆抗體捕獲，并固定在微孔板、膜結(jié)構(gòu)較大結(jié)構(gòu)上，與乳膠珠、紅細(xì)胞連接。檢測(cè)單克隆抗體捕獲D-二聚體后，需要被定量檢測(cè)出現(xiàn)[6]。因此，D-二聚體分子必須具有兩個(gè)不同表位，通過此類測(cè)定法檢測(cè)，基于凝集測(cè)定中，相同單克隆抗體作為捕獲抗體又做為檢測(cè)抗體[7]。

1.2 D-二聚體檢測(cè)D-二聚體作為可溶的纖維蛋白降解產(chǎn)物，產(chǎn)生過程中涉及到凝血酶、活化因子XIII、纖溶酶三種酶的作用。目前對(duì)D-二聚體檢測(cè)方法較多，不同檢測(cè)方法所應(yīng)用試劑及檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)不一致，據(jù)報(bào)道約有20 種不同單克隆抗體并涉及30 種不同測(cè)定方法應(yīng)用于D-二聚體的測(cè)定[8]。常見包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫熒光試驗(yàn)、全血凝集試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)及免疫比濁法，不同檢測(cè)方式應(yīng)用下各有優(yōu)缺點(diǎn)，所適應(yīng)檢測(cè)方向不同。全血凝集試驗(yàn)使用與D-二聚體和紅細(xì)胞膜抗原結(jié)合位點(diǎn)的雙特異性抗體，當(dāng)D-二聚體水平升高則發(fā)生紅細(xì)胞凝集。全血凝集試驗(yàn)為一項(xiàng)定性試驗(yàn)，可迅速確定結(jié)果。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫熒光試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)及免疫比濁法作為定量試驗(yàn)可檢測(cè)及D-二聚體水平。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)方法的原理相同，但酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)操作費(fèi)時(shí)、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，而酶聯(lián)免疫熒光試驗(yàn)在保證傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法的高敏感性、特異性前提下，極大縮短檢測(cè)時(shí)間，對(duì)單個(gè)樣本進(jìn)行檢測(cè)[9]。乳膠凝集試驗(yàn)依賴于包被于乳膠顆粒的單克隆抗體，對(duì)乳膠凝集稀釋度判斷和計(jì)算樣本中的D-二聚體含量，被認(rèn)為為一種半定量檢測(cè)方法。乳膠增強(qiáng)免疫透射比濁法應(yīng)用邁瑞EXC810 自動(dòng)凝血分析儀，儀器性能良好、檢測(cè)準(zhǔn)確、精密度高、參加室間質(zhì)控取得優(yōu)秀成績(jī)。為D-二聚體檢測(cè)提供質(zhì)量保證。免疫比濁法基于乳膠凝集法基礎(chǔ)上利用自動(dòng)凝血分析儀檢測(cè)透射光強(qiáng)度變化計(jì)算樣本D-二聚體含量，免疫比濁法靈敏度、精密度更高，避免人工加樣的偶然誤差，被廣泛應(yīng)用于臨床。

2.D-二聚體的臨床應(yīng)用

2.1 產(chǎn)科疾病診斷妊娠期女性血液呈現(xiàn)高凝狀態(tài)，纖溶活性上升維持纖溶、凝血?jiǎng)討B(tài)平衡。因此，相比較非妊娠期女性，妊娠期女性D-二聚體水平明顯偏高。研究指出[10]，妊娠女性D-二聚體水平與孕周呈現(xiàn)正相關(guān)，當(dāng)孕周時(shí)間越長(zhǎng)則D-二聚體水平越高。研究指出[11]，D-二聚體水平與妊娠期糖尿病產(chǎn)生關(guān)系緊密，交聯(lián)纖維蛋白特異性產(chǎn)物水平與血管損傷呈現(xiàn)正相關(guān)，血管損傷越嚴(yán)重則特異性產(chǎn)物水平越高，會(huì)增加合并癥發(fā)生可能性。孕婦合并妊娠期糖尿病合并癥會(huì)導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)纖溶、凝血水平變化，妊娠期糖尿病患者C 反應(yīng)蛋白、白介素以及腫瘤壞死因子隨血糖水平升高增加，改變血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)，增加血管通透性，增加胰島素抵抗反應(yīng)。同時(shí)，妊娠期D-二聚體水平與高血壓病情況呈現(xiàn)正相關(guān)。

2.2 血栓性疾病D-二聚體被廣泛用于血栓性疾病預(yù)測(cè)及療效評(píng)估中有重要臨床意義。對(duì)肺栓塞疾病檢測(cè)中，D-二聚體具有重要臨床意義，對(duì)肺栓塞敏感性偏高，同時(shí)可有效進(jìn)行陰性預(yù)測(cè)，因此臨床中將D-二聚體作為一項(xiàng)重要指標(biāo)，被廣泛用于肺栓塞初篩中[13]。但臨床實(shí)際應(yīng)用過程中，需避免將D-二聚體作為疾病篩查唯一診斷標(biāo)準(zhǔn)，要想提高疾病診斷結(jié)果，仍需與其他診斷結(jié)果聯(lián)合應(yīng)用，如臨床表現(xiàn)、體征、影像學(xué)檢查等。多數(shù)手術(shù)患者在圍手術(shù)期，尤其為術(shù)后極易產(chǎn)生深靜脈血栓、肺栓塞等嚴(yán)重并發(fā)癥，影響手術(shù)效果及預(yù)后同時(shí)，甚至?xí)?duì)患者生命安全構(gòu)成較大威脅。因此，需重視對(duì)圍手術(shù)期患者開展D-二聚體檢測(cè)工作，以便及時(shí)預(yù)測(cè)血栓類型的并發(fā)癥，做好相應(yīng)預(yù)防及其治療工作。

2.3 心腦血管疾病D-二聚體在多數(shù)疾病中呈現(xiàn)升高，包括心房顫動(dòng)、腦梗死及急性動(dòng)脈夾層等。心房顫動(dòng)患者血漿D-二聚體水平會(huì)高于非心房顫動(dòng)患者，經(jīng)臨床抗凝治療及成功負(fù)律后，患者D-二聚體水平呈現(xiàn)下降。對(duì)心房顫動(dòng)患者D-二聚體水平更高患者會(huì)增加腦卒中風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生率，但部分研究表明[12]，與其他生物標(biāo)志物相比較，如肌鈣蛋白、N 端腦鈉肽前體及生長(zhǎng)分化因子15 相比較，D-二聚體水平并不會(huì)增加心房顫動(dòng)患者腦卒中風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)模型的預(yù)測(cè)值。因此，D-二聚體水平對(duì)預(yù)測(cè)心房顫動(dòng)患者腦卒中發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)價(jià)值有限。同時(shí)，因D-二聚體地特異性影響下，僅依靠D-二聚體水平診斷急性腦梗死時(shí)，會(huì)增加假陽性發(fā)生率，為此臨床診斷急性腦梗死時(shí)，仍需進(jìn)一步論證D-二聚體應(yīng)用價(jià)值?？焖僭\斷急性主動(dòng)脈夾層可有效降低患者死亡率。研究指出[13]，對(duì)1557 例低風(fēng)險(xiǎn)急性主動(dòng)脈夾層4 項(xiàng)研究數(shù)據(jù)分析中，當(dāng)D-二聚體＜500ug/L 靈敏度為98%，陰性預(yù)測(cè)值為95%，可有效排除低風(fēng)險(xiǎn)患者急性主動(dòng)脈夾層診斷。對(duì)非低風(fēng)險(xiǎn)患者僅依據(jù)D-二聚體水平難以對(duì)急性主動(dòng)脈夾層排除?？梢姡R床對(duì)急性主動(dòng)脈夾層診斷中D-二聚體應(yīng)用作用受限。

2.4 惡性腫瘤靜脈血栓栓塞癥作為惡性腫瘤患者發(fā)病及死亡主要原因之一，癌細(xì)胞經(jīng)過直接和間接機(jī)制對(duì)人體微環(huán)境產(chǎn)生促血栓形成作用，臨床則表現(xiàn)為血栓形成。研究提出[14]，D-二聚體與高敏C 反應(yīng)蛋白等生物標(biāo)志物可有效確定惡性腫瘤相關(guān)血栓形成的最佳抗凝治療持續(xù)時(shí)間，在預(yù)測(cè)及治療方案制定中發(fā)揮著重要作用。研究指出[15]，D-二聚體水平納入惡性腫瘤患者評(píng)分系統(tǒng)中可改善惡性腫瘤患者靜脈血栓栓塞風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)，同樣為預(yù)測(cè)最強(qiáng)因子之一。但目前對(duì)上述風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型確定高危腫瘤患者初次預(yù)防血栓形成獲益情況，仍需臨床大量前瞻性管理研究及回顧性研究進(jìn)一步確定。

3.小結(jié)

D-二聚體作為凝血及纖溶酶原標(biāo)志，可有效且快速評(píng)估血栓活性，對(duì)臨床診斷靜脈血栓性疾病具有重要臨床意義，減少影像學(xué)檢查在多數(shù)疑似靜脈血栓性疾病或肺栓塞患者應(yīng)用，為臨床制定更好抗凝治療方案提供檢驗(yàn)依據(jù)。同時(shí)，D-二聚體在急性主動(dòng)脈夾層及腦血管疾病中同樣發(fā)揮著一定價(jià)值。惡性腫瘤及妊娠疾病中應(yīng)用價(jià)值逐漸凸顯，但患者因個(gè)性差異性，往往對(duì)D-二聚體水平影響仍需進(jìn)一步深入探討及分析，及時(shí)排除對(duì)臨床疾病診斷假陽性干擾。D-二聚體與其他標(biāo)志物聯(lián)合診斷下，有助于對(duì)某些疾病病情及治療效果精準(zhǔn)評(píng)價(jià)，當(dāng)臨床仍需大量大樣本回顧性研究及相關(guān)前瞻性研究證實(shí)。