ω-3多不飽和脂肪酸與卵母細(xì)胞質(zhì)量相關(guān)性研究進(jìn)展

郭子瑜，錢云

(南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心，南京 210011)

隨著人類輔助生殖技術(shù)的不斷發(fā)展，與卵母細(xì)胞質(zhì)量相關(guān)因素的研究越來越受到關(guān)注。雖然體外培養(yǎng)條件可能對(duì)早期胚胎的發(fā)育潛能具有一定影響，但卵母細(xì)胞質(zhì)量是決定卵母細(xì)胞能否發(fā)育至囊胚的關(guān)鍵因素[1]。作為卵母細(xì)胞直接和必要的微環(huán)境，卵泡液通過各種代謝產(chǎn)物的累積為卵母細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子，促進(jìn)其生長發(fā)育[2]，因此卵泡液的組分變化對(duì)卵母細(xì)胞質(zhì)量至關(guān)重要。在卵泡液的脂質(zhì)組成成分中，飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸被認(rèn)為是一次性能源，而多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids，PUFAs)則具有持續(xù)而廣泛的作用[3]。PUFAs主要包括ω-3PUFAs和ω-6PUFAs，其中ω-6PUFAs與女性生殖系統(tǒng)疾病關(guān)系的研究已較為成熟，而ω-3PUFAs與女性生殖領(lǐng)域關(guān)系的研究相對(duì)較少。ω-3PUFAs在促進(jìn)人體健康、降低疾病風(fēng)險(xiǎn)方面均具有重要作用，如改善乳腺癌[4]、心腦血管疾病[5]及糖尿病[6]的發(fā)生發(fā)展等。近年來，ω-3PUFAs在女性生殖系統(tǒng)疾病中的研究也逐漸深入。ω-3PUFAs廣泛存在于卵泡液及卵母細(xì)胞中，是卵泡形成過程中細(xì)胞增殖所必需的能量儲(chǔ)備分子，可調(diào)節(jié)卵泡的生長及成熟，ω-3PUFAs組成、濃度和相對(duì)豐度的改變與卵母細(xì)胞質(zhì)量密切相關(guān)，影響女性生育能力[7-8]。但目前關(guān)于ω-3PUFAs改善卵母細(xì)胞質(zhì)量的研究結(jié)果并不一致，還需要進(jìn)一步深入研究加以驗(yàn)證?，F(xiàn)就ω-3PUFAs與卵母細(xì)胞質(zhì)量相關(guān)性的研究進(jìn)展予以綜述。

1 ω-3PUFAs概述

ω-3PUFAs是維持人體正常生長發(fā)育所必需的脂肪酸，主要通過飲食或營養(yǎng)補(bǔ)充獲得。ω-3PUFAs主要包括α-亞麻酸(α-linolenic acid，ALA)、二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid，EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid，DHA)。ALA廣泛存在于植物油、海洋藻類和天然草本植物中，如亞麻籽、核桃和大豆油；EPA和DHA主要存在于魚油中，如鮭魚、沙丁魚和鯡魚油。ALA是合成一系列長鏈ω-3PUFAs的前體，在肝臟中通過去飽和以及延長反應(yīng)轉(zhuǎn)化為EPA和DHA；日常飲食中富含的亞油酸可與ALA競(jìng)爭性抑制合成長鏈ω-3PUFAs的關(guān)鍵酶Δ6-脂肪酸去飽和酶，因此，在人體中只有約8%的ALA轉(zhuǎn)化為EPA，不足4%的ALA轉(zhuǎn)化為DHA[9]。

ω-3PUFAs以乙酯、三酰甘油和磷脂為主要存在形式，因此其生物利用度也不同。與乙酯形式的ω-3PUFAs相比，三酰甘油形式的ω-3PUFAs具有更好的生物利用度，而磷脂形式ω-3PUFAs的生物利用度目前尚不明確[10]。研究發(fā)現(xiàn)，納米乳液系統(tǒng)可提高長鏈ω-3PUFAs的生物利用度，但目前納米乳液的制備和加工方法均可能影響ω-3PUFAs的氧化穩(wěn)定性[11]，因此改良ω-3PUFAs納米乳液可能是未來ω-3PUFAs相關(guān)制劑的研究方向。

2 ω-3PUFAs對(duì)卵母細(xì)胞的影響及相關(guān)機(jī)制

2.1ω-3PUFAs調(diào)節(jié)卵母細(xì)胞質(zhì)量相關(guān)脂質(zhì)代謝 脂質(zhì)代謝是卵母細(xì)胞成熟過程中的重要能量來源，卵母細(xì)胞及其周圍卵丘顆粒細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)代謝與卵母細(xì)胞質(zhì)量及胚胎發(fā)育密切相關(guān)。在卵泡微環(huán)境中，影響卵母細(xì)胞質(zhì)量的相關(guān)脂質(zhì)代謝主要包括類固醇激素的生成和脂質(zhì)含量的改變。卵巢類固醇激素的生成可調(diào)節(jié)卵泡發(fā)育、卵母細(xì)胞的減數(shù)分裂成熟以及胚胎質(zhì)量。研究表明，體液循環(huán)中的ω-3PUFAs可通過調(diào)節(jié)類固醇激素代謝過程中的關(guān)鍵酶影響卵母細(xì)胞、胚胎和胎兒的發(fā)育[12]。Wang等[13]給成年大鼠膳食中添加DHA補(bǔ)充劑，48 h后(血漿DHA半衰期約為1.63 d)，與基礎(chǔ)飲食組大鼠相比，DHA飲食組大鼠血清三酰甘油水平降低；進(jìn)一步通過非靶向代謝組學(xué)分析大鼠血清樣本發(fā)現(xiàn)，DHA的代謝效應(yīng)與花生四烯酸、類固醇激素和多胺代謝相關(guān)，推測(cè)DHA通過自身代謝及協(xié)同其他脂類物質(zhì)調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝而發(fā)揮一系列有益作用。此外，在雌兔胚胎著床前(人工授精5～7 d)和著床后(人工授精7～14 d)補(bǔ)充DHA和EPA，可提高血漿孕酮水平，有利于增加胚胎植入后的存活率并促進(jìn)胎盤形成[14]。哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞中的脂質(zhì)水平反映了脂肪酸β-氧化的程度，脂質(zhì)水平過高可導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、氧化應(yīng)激和DNA損傷等，從而降低卵母細(xì)胞質(zhì)量[15]。在豬卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)基中添加低水平DHA培養(yǎng)44 h后發(fā)現(xiàn)，卵母細(xì)胞及第7天囊胚中的脂質(zhì)水平顯著降低，而卵裂率和囊胚細(xì)胞數(shù)目顯著增加，表明補(bǔ)充DHA可能通過降低卵母細(xì)胞及胚胎中的脂毒性，促進(jìn)豬卵母細(xì)胞成熟并提高其發(fā)育潛能[16]。然而，Oseikria等[17]指出，高濃度DHA可導(dǎo)致顆粒細(xì)胞中脂質(zhì)和類固醇激素代謝紊亂，從而降低卵母細(xì)胞的質(zhì)量。Nikoloff等[18]研究發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基中添加高水平EPA后，卵母細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)水平降低且脂質(zhì)滴形態(tài)改變，同時(shí)卵母細(xì)胞成熟率降低，但抗氧化劑可改善這一結(jié)局，雖然EPA可在一定程度上降低卵母細(xì)胞內(nèi)的脂毒性，但卵丘卵母細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激水平仍較高，減弱了其對(duì)卵母細(xì)胞的有利影響，甚至最終表現(xiàn)出一定的損害作用。由此認(rèn)為，低劑量的ω-3PUFAs可通過調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝提高卵母細(xì)胞質(zhì)量、促進(jìn)胚胎發(fā)育，同時(shí)對(duì)妊娠結(jié)局產(chǎn)生有益影響，但ω-3PUFAs濃度過高則可能會(huì)對(duì)卵母細(xì)胞產(chǎn)生不利影響。

目前關(guān)于ω-3PUFAs作為卵母細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)劑的研究相對(duì)較少，且研究結(jié)論尚未統(tǒng)一，未來仍需更多設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定不同類型、不同濃度的ω-3PUFAs對(duì)卵丘卵母細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)水平及脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)水平的影響，并評(píng)估其對(duì)卵母細(xì)胞成熟及胚胎發(fā)育的作用。

2.2ω-3PUFAs影響卵母細(xì)胞內(nèi)前列腺素(prostaglandin，PG)的生成 ω-3PUFAs不僅是體內(nèi)各種生理過程的重要能源，還是PG合成的直接前體。PG是由細(xì)胞膜磷脂、磷脂酰乙醇胺以及磷脂酰肌醇釋放的PUFAs通過磷脂酶A2作用生物合成的一種脂類激素，參與調(diào)節(jié)卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體的擴(kuò)展以及卵母細(xì)胞的成熟，是哺乳動(dòng)物排卵的中樞調(diào)節(jié)因子。PG主要包括5種類型，即PGE2、PGD2、PGF2α、PGI2和血栓素，其中PGI2、PGE2及PGF2α的生成與女性生育能力的關(guān)系研究較為廣泛。

ω-3PUFAs衍生的PGI2通過激活過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferator activated receptor，PPAR)參與胚胎的發(fā)育和著床[19]；PGE2則通過結(jié)合卵丘顆粒細(xì)胞上的G蛋白偶聯(lián)受體介導(dǎo)自分泌或旁分泌調(diào)節(jié)途徑，誘導(dǎo)促排卵相關(guān)基因表達(dá)并提高卵母細(xì)胞內(nèi)環(huán)腺苷酸水平，在卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟、卵丘顆粒細(xì)胞擴(kuò)展以及卵泡破裂等排卵級(jí)聯(lián)過程中起重要作用[20]。研究表明，在體外培養(yǎng)液中添加ALA可增加卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合物中PGE2合成并提高環(huán)腺苷酸水平，促進(jìn)卵母細(xì)胞核成熟，而添加PG環(huán)加氧酶2抑制劑NS-398則可顯著降低卵母細(xì)胞成熟率[21]。PGF2α是重要的外周循環(huán)炎癥標(biāo)志物，通過干擾發(fā)情周期、分娩過程和胚胎存活而影響生殖結(jié)局。有研究報(bào)道，高水平ω-3PUFAs的攝入與PGF2α水平呈負(fù)相關(guān)，因此ω-3PUFAs可能發(fā)揮抗炎作用[22]。此外，ω-3PUFAs還可通過影響PG合成過程中的關(guān)鍵酶，間接影響PG的表達(dá)。環(huán)加氧酶2是體內(nèi)合成PG過程中的限速酶，ω-3PUFAs可通過調(diào)節(jié)卵母細(xì)胞中環(huán)加氧酶2的活性和相關(guān)基因的表達(dá)，減少其下游2系列PG(如PGF2α)生成，促進(jìn)炎癥生物效價(jià)低的3系列PG產(chǎn)生，最終降低卵母細(xì)胞內(nèi)的炎癥反應(yīng)[23]。另有研究表明，EPA和DHA能夠產(chǎn)生具有抗炎作用的保護(hù)蛋白和具有抑炎作用的溶解素，以抑制炎癥反應(yīng)，成人每天攝入EPA與DHA的總量>2 g可能起到抗炎作用[24]，但目前關(guān)于ω-3PUFAs相關(guān)制劑的劑量學(xué)研究仍處于起步階段。綜上，ω-3PUFAs可通過直接或間接調(diào)節(jié)不同亞型PG的生成，增加促排卵相關(guān)基因的表達(dá)，減輕炎癥反應(yīng)，對(duì)卵母細(xì)胞成熟及發(fā)育潛能產(chǎn)生積極影響。

2.3ω-3PUFAs改變卵母細(xì)胞膜的組成和功能 ω-3PUFAs是哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜磷脂雙層結(jié)構(gòu)的重要組成部分，不僅可為膜蛋白(如受體、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、通道蛋白及黏附蛋白)提供最佳的支架，還可作為許多信號(hào)通路中各種親脂性配體的前體[25]。ω-3PUFAs的含量和類型不僅影響卵巢類固醇激素的合成，還可影響卵母細(xì)胞成熟、子宮功能及妊娠結(jié)局。有研究指出，飲食中ω-3PUFAs含量及類型的變化可導(dǎo)致卵母細(xì)胞膜中ω-3PUFAs含量及類型的相應(yīng)改變[26]，影響卵母細(xì)胞膜流動(dòng)性、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)和氧化損傷的易感性[7]，最終影響生殖結(jié)局。

在輔助生殖過程中，低溫冷凍保存技術(shù)廣泛應(yīng)用于卵母細(xì)胞和胚胎的保存，伴隨該技術(shù)產(chǎn)生的不良后果主要包括低溫?fù)p傷和低溫保護(hù)劑的毒性作用。目前的實(shí)驗(yàn)方法仍無法規(guī)避這些問題，未來需要開發(fā)新的策略來提高低溫保存的效果。在低溫冷凍等應(yīng)激狀態(tài)下，卵母細(xì)胞膜的組成及完整性是保護(hù)其發(fā)育能力不受損害的基礎(chǔ)。研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充ω-3PUFAs可增加血漿和卵丘顆粒細(xì)胞中長鏈ω-3PUFAs含量，維持低溫處理后卵母細(xì)胞膜的完整性，提高基礎(chǔ)卵泡數(shù)和優(yōu)質(zhì)卵母細(xì)胞數(shù)，改善低溫冷凍后的卵母細(xì)胞質(zhì)量[27]。在Δ6-脂肪酸去飽和酶缺陷小鼠模型中，自幼鼠培養(yǎng)開始，持續(xù)補(bǔ)充花生四烯酸和DHA至成年，可重塑PUFAs缺乏小鼠的卵巢和睪丸膜脂質(zhì)體，促進(jìn)卵巢周期中的正常縫隙連接網(wǎng)絡(luò)重組和支持細(xì)胞-血-睪丸屏障的重建，表明花生四烯酸和DHA是女性卵巢及男性睪丸膜磷脂體和鞘磷脂體中的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)[28]。此外，Moallem等[29]研究顯示，卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合物可選擇性地?cái)z取不同類型的ω-3PUFAs，與短鏈ω-3PUFAs(如ALA)相比，長鏈ω-3PUFAs(如EPA和DHA)更易進(jìn)入卵母細(xì)胞。卵母細(xì)胞的這種選擇性功能表明卵母細(xì)胞膜對(duì)脂肪酸組成變化高度敏感，可能導(dǎo)致與功能特性相關(guān)的膜流動(dòng)性變化，說明卵母細(xì)胞膜上可能存在某些影響卵母細(xì)胞成熟及發(fā)育的保護(hù)性分子機(jī)制，但目前具體機(jī)制仍不明確，還有待進(jìn)一步研究。

2.4ω-3PUFAs調(diào)節(jié)卵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平 在卵母細(xì)胞內(nèi)，線粒體參與調(diào)節(jié)ATP生成、鈣穩(wěn)態(tài)、氧化應(yīng)激水平、細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及細(xì)胞凋亡。卵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平的調(diào)節(jié)對(duì)卵母細(xì)胞核成熟至關(guān)重要，氧化應(yīng)激的產(chǎn)生與抗氧化能力的不平衡可能導(dǎo)致DNA損傷和細(xì)胞凋亡。Marei等[30]在牛卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)基中添加低濃度ALA，結(jié)果顯示，在不影響卵母細(xì)胞內(nèi)線粒體分布和含量的情況下，ALA可通過降低氧化應(yīng)激水平促進(jìn)細(xì)胞核成熟，最終提高卵母細(xì)胞成熟率。另有研究表明，在牛卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體體外成熟培養(yǎng)基中添加高水平非脂化脂肪酸(棕櫚酸、硬脂酸和油酸)后，卵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平升高、囊胚率降低以及囊胚細(xì)胞凋亡標(biāo)志物表達(dá)增加，即發(fā)生卵母細(xì)胞發(fā)育潛能損害；而聯(lián)合添加生理濃度的ALA后，卵丘顆粒細(xì)胞中線粒體膜電位在一定程度上恢復(fù)正常，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平降低，有助于減少卵丘顆粒細(xì)胞凋亡且部分恢復(fù)卵丘顆粒細(xì)胞擴(kuò)展能力，最終改善卵母細(xì)胞在脂毒性條件下的發(fā)育能力[31]。然而，Wakefield等[32]給予小鼠補(bǔ)充相對(duì)高水平的ω-3PUFAs，結(jié)果顯示，高水平ω-3PUFAs飲食組小鼠卵母細(xì)胞內(nèi)的線粒體分布和鈣水平發(fā)生改變，氧化應(yīng)激水平升高，導(dǎo)致卵母細(xì)胞受精后的囊胚率降低，胚胎畸形率顯著升高。

目前關(guān)于ω-3PUFAs影響卵母細(xì)胞內(nèi)線粒體功能及氧化應(yīng)激水平的研究結(jié)果不一致，主要原因可能為實(shí)驗(yàn)中補(bǔ)充的ω-3PUFAs水平不一。適宜劑量的ω-3PUFAs可能有利于降低卵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平，改善卵母細(xì)胞質(zhì)量，而過量ω-3PUFAs則可能損害卵母細(xì)胞的成熟及發(fā)育潛能。ω-3PUFAs補(bǔ)充劑量與卵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平的關(guān)系仍需更多研究證實(shí)，ω-3PUFAs對(duì)卵母細(xì)胞質(zhì)量及女性生育能力改善均具有重要意義。

2.5ω-3PUFAs激活卵母細(xì)胞促分裂原活化的蛋白激酶(mitogen activated protein kinase，MAPK)信號(hào)通路 MAPK信號(hào)通路是一種高度保守的、重要的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的多種生理功能。MAPK通路激活在卵母細(xì)胞減數(shù)分裂恢復(fù)、卵丘顆粒細(xì)胞擴(kuò)展以及排卵事件中均具有重要作用。MAPK可調(diào)控卵母細(xì)胞減數(shù)分裂過程中紡錘體的組裝、維持染色體的正常排列，并參與維持減數(shù)分裂中期阻滯等微管動(dòng)力學(xué)的調(diào)節(jié)[33]。MAPK通路激活可導(dǎo)致其他蛋白激酶通路激活，并通過調(diào)節(jié)卵丘顆粒細(xì)胞與卵母細(xì)胞間縫隙連接的通透性影響減數(shù)分裂，抑制物質(zhì)的運(yùn)輸，同時(shí)通過調(diào)節(jié)相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄活性影響甾體激素的產(chǎn)生、卵丘顆粒細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的合成以及各種成熟調(diào)節(jié)分子的活性[34]。研究顯示，DHA通過結(jié)合卵母細(xì)胞表面非脂化脂肪酸受體4激活MAPK相關(guān)信號(hào)通路，提高牛卵母細(xì)胞成熟率及受精后的囊胚率，而對(duì)卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合物中的脂質(zhì)水平及脂質(zhì)代謝相關(guān)的基因表達(dá)無顯著影響[26]。Marei等[21]研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充ALA可增加卵丘顆粒細(xì)胞中的環(huán)腺苷酸水平，引起卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合物中MAPK1和MAPK3磷酸化，提高卵母細(xì)胞核成熟率并改善早期胚胎發(fā)育。Lee等[35]研究顯示，ALA可通過激活MAPK信號(hào)通路促進(jìn)卵母細(xì)胞核成熟、增加谷胱甘肽含量、促進(jìn)卵母細(xì)胞胞質(zhì)成熟。上述研究均證實(shí)，ω-3PUFAs可通過激活MAPK信號(hào)通路促進(jìn)卵母細(xì)胞成熟及胚胎發(fā)育。

2.6ω-3PUFAs激活卵母細(xì)胞PPAR PPAR是一類多域蛋白質(zhì)，屬于核受體超家族。PPAR作為重要的細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子，可調(diào)節(jié)一系列參與糖、脂代謝及炎癥反應(yīng)控制的相關(guān)基因的表達(dá)。PPAR主要包括3種亞型，即PPARα、PPARβ/δ和PPARγ。PPAR廣泛表達(dá)于生殖系統(tǒng)各類器官中，包括下丘腦、垂體、卵巢、子宮和睪丸[36]。PPAR可與天然配體長鏈脂肪酸結(jié)合并實(shí)現(xiàn)活化，其中ω-3PUFAs因具有更高的親和力，在微摩爾濃度下即可激活PPAR[37]。ω-3PUFAs可結(jié)合并誘導(dǎo)PPAR的構(gòu)象變化，觸發(fā)包括脂肪酸β-氧化及生成等多種代謝過程中特定基因的表達(dá)和轉(zhuǎn)錄，有助于維持卵母細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)代謝的穩(wěn)態(tài)[38]。Idrees等[39]研究表明，PPARδ的激活可顯著降低卵母細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量和氧化應(yīng)激水平，維持脂肪酸分解與β-氧化過程的平衡，從而改善卵母細(xì)胞質(zhì)量、胚胎發(fā)育及胚胎著床能力。此外，ω-3PUFAs激活PPAR可促進(jìn)核因子κB的失活、增加抗氧化酶(如過氧化氫酶、超氧化物歧化酶或血紅素加氧酶-1)的表達(dá)、降低活性氧類水平，從而抑制炎癥反應(yīng)，有利于卵母細(xì)胞成熟和胚胎發(fā)育[40]。另有研究顯示，PPARα缺失對(duì)小鼠生育能力無顯著影響，PPARβ/δ敲除小鼠在妊娠早期即出現(xiàn)胎盤畸形、胚胎死亡，而PPARγ可通過調(diào)節(jié)卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟相關(guān)基因(如一氧化氮合酶)的表達(dá)促進(jìn)卵母細(xì)胞成熟[41]。在豬胎盤早期形成過程中，PPARβ/δ和PPARγ的激活刺激滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖，有助于胚胎著床及胎盤形成[42]。因此，ω-3PUFAs激活PPAR有利于卵母細(xì)胞成熟，改善早期胚胎發(fā)育，對(duì)胚胎植入及胎盤形成具有重要意義。

3 ω-3PUFAs在卵泡液中的作用

正常的母體代謝健康狀態(tài)對(duì)于保障成功的排卵、受孕和胚胎發(fā)育至關(guān)重要。Matorras等[43]首次研究人卵母細(xì)胞中脂肪酸的組成，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飽和脂肪酸是受精失敗卵母細(xì)胞中的最主要成分(79.22%)，其中硬脂酸(38.65%)和棕櫚酸(32.66%)最為豐富，單不飽和脂肪酸(14.27%)中油酸含量最高(9.77%)，PUFAs則只占總脂肪酸的6.50%，ω-6PUFAs∶ω-3PUFAs=7.73，EPA∶DHA≈5。但由于存在倫理等問題，臨床研究中直接獲取卵母細(xì)胞進(jìn)行成分測(cè)定并不可行，而在輔助生殖技術(shù)開展過程中，卵泡液的獲取十分簡易；同時(shí)，母體血清代謝物的變化常反映在卵泡液中[44]，影響卵泡健康、卵母細(xì)胞成熟以及隨后的胚胎發(fā)育，因此卵泡液的組分分析是最常用的評(píng)估卵母細(xì)胞質(zhì)量的生物學(xué)指標(biāo)。O′Gorman等[45]用氣相色譜-質(zhì)譜法分析體外受精患者卵泡液中PUFAs的含量發(fā)現(xiàn)，正常受精后卵裂組患者卵泡液中ALA和DHA水平均顯著高于未卵裂組患者，表明ω-3PUFAs可能是預(yù)測(cè)卵母細(xì)胞發(fā)育能力的潛在非侵入性標(biāo)志物，有助于體外受精過程中卵母細(xì)胞的選擇。一項(xiàng)前瞻性隊(duì)列研究顯示，卵泡液與血清中的PUFAs濃度呈正相關(guān)，卵泡液中較高水平的油酸和EPA可提高卵母細(xì)胞發(fā)育能力，并可在一定程度上逆轉(zhuǎn)飽和脂肪酸對(duì)卵母細(xì)胞質(zhì)量的不利影響，改善輔助生殖結(jié)局[46]。但是，Ruiz-Sanz等[8]研究發(fā)現(xiàn)，卵泡液中的脂肪酸譜隨著卵泡的生長發(fā)育而變化，ω-3PUFAs水平(特別是DHA水平)與女性年齡呈正相關(guān)，與獲卵數(shù)、受精率及優(yōu)質(zhì)胚胎率均呈負(fù)相關(guān)。以上研究結(jié)果的差異可能與研究人群納入標(biāo)準(zhǔn)、樣本量及檢測(cè)方法不同有關(guān)，未來仍需更多的研究證實(shí)ω-3PUFAs在卵泡液中的作用。總之，卵泡液中ω-3PUFAs水平有望成為預(yù)測(cè)卵母細(xì)胞質(zhì)量的非侵入性手段，并可能為臨床改善卵母細(xì)胞質(zhì)量的相關(guān)干預(yù)措施提供指導(dǎo)。

4 小 結(jié)

不同濃度、物種及亞型的ω-3PUFAs對(duì)女性生殖的影響存在差異。代謝組學(xué)是一門新興的尋找與疾病相關(guān)的生物標(biāo)志物的研究方法，其因具有客觀、準(zhǔn)確及測(cè)量相對(duì)簡單等優(yōu)點(diǎn)而成為目前研究的熱點(diǎn)。因此，臨床上可以考慮使用代謝組學(xué)方法，在血清及不同人群卵母細(xì)胞發(fā)育的不同階段測(cè)定ω-3PUFAs水平及亞型分布的差異，探索其是否可以成為預(yù)測(cè)卵母細(xì)胞質(zhì)量的生物標(biāo)志物。同時(shí)，臨床ω-3PUFAs營養(yǎng)/藥物制劑干預(yù)對(duì)改善女性生殖健康的必要性以及ω-3PUFAs制劑中適宜的ALA、DHA和EPA含量及比例等問題也亟待解決。未來仍需更多的體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)一步證實(shí)ω-3PUFAs對(duì)卵母細(xì)胞成熟及發(fā)育潛能的影響及作用機(jī)制，以改善卵泡微環(huán)境并提高卵母細(xì)胞質(zhì)量，最終改善女性生育能力。