如何進(jìn)行新冠病毒核酸檢測(cè)

王立瑞

新冠肺炎具有極強(qiáng)的流行性和傳染性，可通過呼吸途徑傳播。及時(shí)發(fā)現(xiàn)和隔離治療新冠肺炎患者，是防止疫情大面積擴(kuò)散的重要方式。目前，最適合大范圍篩查的檢測(cè)方法就是新冠病毒核酸檢測(cè)，通過檢測(cè)病毒的核酸，及時(shí)發(fā)現(xiàn)陽性患者與無癥狀感染者，盡早隔離治療與觀察，避免疫情擴(kuò)散。那么新冠病毒核酸檢測(cè)的流程是什么？檢測(cè)時(shí)需要注意哪些問題？都是核酸檢測(cè)人員需要掌握和了解的內(nèi)容。

一、新冠病毒核酸檢測(cè)是什么意思

核酸檢測(cè)主要是對(duì)病毒的核酸進(jìn)行檢測(cè)的方法，通過在受檢者糞便、血液、呼吸道標(biāo)本中查找是否存在外來入侵病毒的核酸，進(jìn)而確定是否感染了新冠病毒。如果核酸檢測(cè)顯示陽性，則說明受檢者體內(nèi)存在病毒。新冠病毒感染人體后，可在呼吸道系統(tǒng)進(jìn)行繁殖。因此通過檢查鼻咽拭子或痰液標(biāo)本的病毒核酸，就能夠判斷人體是否感染新冠病毒。目前，核酸檢測(cè)陽性也是新冠病毒感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。在大范圍檢測(cè)中，新冠病毒核酸檢測(cè)主要采集咽拭子標(biāo)本，受檢者將嘴巴張開，醫(yī)生用一根長棉簽拭子，擦拭受檢者咽隱窩、扁桃體附近的分泌物，然后在試管中妥善保存，統(tǒng)一送到核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒核酸檢測(cè)。檢測(cè)中采取特定的檢測(cè)技術(shù)和反應(yīng)方法，根據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)如果結(jié)果顯示為陽性，則說明受檢者體內(nèi)已經(jīng)感染了新冠病毒。

二、新冠病毒核酸檢測(cè)的流程是怎樣的

新冠病毒核酸檢測(cè)的流程主要是，呼吸道標(biāo)本采集→樣本運(yùn)送→樣本接受→樣本滅活（56℃，30min）→核酸提取→核算擴(kuò)增→結(jié)果判讀→報(bào)告。在新冠病毒核酸檢測(cè)中，首先是采集樣本，醫(yī)護(hù)人員用棉拭子在咽喉處擦拭，采集到的混合人體細(xì)胞、病毒、細(xì)菌的分泌物樣本。在病毒采樣管中保存，通過專用樣本運(yùn)送桶、特制密封樣本轉(zhuǎn)運(yùn)箱冷藏保存，送到實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。對(duì)外包裝逐層噴灑酒精消毒，然后拆開樣本包裝，并對(duì)樣本做好編號(hào)標(biāo)記。樣本先滅活后進(jìn)行病毒核酸提取，首先處理樣本，加入相應(yīng)的試劑，采用專用設(shè)備和方法提取病毒核酸。核酸提取后采用實(shí)時(shí)熒光PCR儀進(jìn)行核酸擴(kuò)增。PCR技術(shù)，也就是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)或稱為體外DNA擴(kuò)增技術(shù)，進(jìn)行擴(kuò)增和檢測(cè)。將病毒核酸加入到配制好的PCR體系中，放入熒光定量PCR檢測(cè)儀器，設(shè)定程序后，儀器會(huì)自動(dòng)運(yùn)行，對(duì)病毒基因進(jìn)行擴(kuò)增。在經(jīng)過一段時(shí)間的反應(yīng)之后，得出熒光信號(hào)，進(jìn)而獲得樣本檢驗(yàn)結(jié)果。在實(shí)驗(yàn)室檢查完成后，還要對(duì)各種廢物進(jìn)行無害處理。

三、核酸檢測(cè)時(shí)需要注意哪些問題

首先是檢測(cè)前的樣品采集、保存與運(yùn)輸：采樣人員按個(gè)人三級(jí)防護(hù)穿戴好防護(hù)裝備，采樣時(shí)先核對(duì)被采樣人的信息，包括姓名、性別、編號(hào)及身份證號(hào)碼等信息，采樣部位必須準(zhǔn)確，采樣操作必須規(guī)范，樣品保存和運(yùn)輸必須符合規(guī)范要求。實(shí)驗(yàn)室樣品的接收：接收樣品時(shí)先逐一核對(duì)樣品與登記表信息，登記編號(hào)與樣品管編號(hào)是否一致，被采樣人員信息登記必須完整，否則拒收樣品，登記信息與樣品管不一致時(shí)返回重新采樣，打開轉(zhuǎn)運(yùn)箱必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，并做好必要的消毒處理。樣品檢測(cè)：檢測(cè)前必須先56℃30min滅活，核酸提取必須按試劑說明書進(jìn)行，操作時(shí)必須認(rèn)真仔細(xì)，防止加樣順序錯(cuò)誤，加樣量與提取程序必須與說明書一致，提取后的廢棄物必須按規(guī)范處理，否則容易造成實(shí)驗(yàn)室的污染。核酸擴(kuò)增：擴(kuò)增試劑與提取液加入必須精準(zhǔn)，擴(kuò)增程序設(shè)置嚴(yán)格按擴(kuò)增試劑說明書進(jìn)行，并按上級(jí)要求做好質(zhì)量控制。核酸檢測(cè)人員按規(guī)范做好個(gè)人防護(hù)，整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作必須滿足生物安全要求，廢充物處理符合規(guī)范，防止實(shí)驗(yàn)室內(nèi)職業(yè)暴露和廢棄物處理不當(dāng)造成的環(huán)境污染和新冠肺炎疫情擴(kuò)散。

四、新冠病毒核酸檢測(cè)如何保障結(jié)果準(zhǔn)確可靠

在新冠病毒核酸檢測(cè)中，如果受到一定因素的影響，可能會(huì)發(fā)生假陽性或假陰性的情況。例如，受檢者本身并未感染新冠病毒，但檢測(cè)結(jié)果顯示為陽性。這可能是由于實(shí)驗(yàn)室核酸污染、標(biāo)本間交叉污染等因素引起的。對(duì)此，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控工作嚴(yán)格落實(shí)，以減少假陽性的發(fā)生。假陰性的情況往往更為常見，指的是受檢者在流行病學(xué)、肺部影像學(xué)、臨床癥狀上都符合新冠肺炎標(biāo)準(zhǔn)，但是病毒核酸檢測(cè)結(jié)果卻為陰性。這是由于，病毒剛剛?cè)肭秩梭w，病毒量尚未達(dá)到可以檢出的水平。對(duì)于不同程度癥狀、不同潛伏期的情況，在人體不同位置病毒載量也有所不同。如果采樣部位、采樣時(shí)機(jī)不準(zhǔn)確，就可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果陰性。檢測(cè)使用的試劑、設(shè)備等都有檢測(cè)下限。如果病毒量無法達(dá)到檢測(cè)下限，那么就會(huì)無法檢出，導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理不到位、人員檢測(cè)能力差、設(shè)備性能不足等，也會(huì)發(fā)生假陰性。所以，需要對(duì)這些情況加以注意，以提高檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。

結(jié)論：新冠病毒核酸檢測(cè)是大范圍初步篩查新冠肺炎患者的重要途徑。在核酸檢測(cè)當(dāng)中，必須確保嚴(yán)格的操作和規(guī)范的流程，受檢者也要做好配合。將各種影響因素消除，以提高檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。