厚樸破壁飲片與傳統(tǒng)飲片對胃腸動力的藥理作用比較

姚亞峰

厚樸屬木蘭科植物(MagnoliaofficinalisRehd et Wils.)或為凹葉厚樸(MagnoliaofficinalisRehd et Wils.var.biloba Rehd et Wils)的根皮、干燥皮和枝皮。為芳香化濕類傳統(tǒng)中藥，臨床常用中藥材，具有下氣除滿和燥濕消痰之效[1]，多用于脘痞吐瀉、濕滯傷中、腹脹便秘、食積氣滯、脘腹脹滿疼痛、痰飲咳喘等癥，是消除脹滿之主藥。生厚樸味辛峻烈，刺激咽喉，故多以姜制后內(nèi)服，以消除咽喉刺激性和強化寬中和胃之效。厚樸主要成分是生物堿類、揮發(fā)油和木脂素類，《中華人民共和國藥典》(2015版)記載厚樸的主要成分是厚樸酚[2]。厚樸破壁飲片是指利用現(xiàn)代粉碎技術(shù)將中藥厚樸加工到D90300目)的分體，利用不同濃度的乙醇或水粘合成型，將原飲片的所有成分制成30～100目的顆粒狀飲片[3]。破壁飲片具有服用方便節(jié)省藥材的優(yōu)點。中藥破壁飲片研究中，破壁飲片是否補充傳統(tǒng)中藥飲片和兩者間的量效關(guān)系已成為研究熱點。本研究以厚樸破壁飲片為研究對象，探討其對胃腸動力的藥理作用，以期為厚樸破壁飲片應(yīng)用研究提供參考。

1 材料與儀器

1.1 動物昆明SPF級小鼠，18～22 g，雌雄各半。SD大鼠，體質(zhì)量190～210 g，雌雄皆可。所用小鼠、大鼠均由四川省中醫(yī)藥科學(xué)院實驗動物中心提供。

1.2 藥物及試劑厚樸飲片由北京本草方源藥業(yè)集團有限公司提供，經(jīng)襄城縣人民醫(yī)院中醫(yī)專家鑒定為厚樸的干燥根皮。厚樸破壁飲片由云南瑞藥金方現(xiàn)代中藥有限公司提供，經(jīng)中藥師鑒定為植物厚樸(MagnoliaofficinalisRehd et Wils)的含木脂素的木質(zhì)粉末。多潘立酮(國藥準字號：H20033864；規(guī)格：10 mg×30 s；江西捷眾制藥有限公司)；左旋精氨酸(成都德斯特生物，產(chǎn)品自編號：DJ0079;CAS登錄號：74-79-3；規(guī)格：200 mg/支)；西沙比利(準字號：H20020345；規(guī)格：5 mg/10 s；浙江京新藥業(yè)有限公司)；胃泌素、胃動素酶聯(lián)免疫試劑盒由武漢華美生物公司提供，NO試劑盒(南京建成生物工程研究所提供，批號：20120924)，所有操作均依據(jù)試劑盒說明完成。

1.3 儀器電子天平(萬分之一，Sartorius；德國賽多斯)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(RE52CS，上海亞榮生化儀器公司)；循環(huán)水式真空泵(SHZ-DIII，鞏義市予華儀器公司)；電熱恒溫水浴鍋(上海供銷公司提供)；調(diào)溫電熱套(型號：PTHW；鞏義市予華儀器公司提供)；數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱(型號：JZX-9070MBN；上海博訊實業(yè)醫(yī)療設(shè)備廠提供)；紅外測溫儀(型號：Raytek RayngerST20；美國雷泰公司)；酶標儀(型號：DNA Expert)由TECAN公司提供。

1.4 方法

1.4.1 厚樸飲片提取物制備應(yīng)用水煎回流法提取[4]，取150 g姜厚樸飲片粉碎，加入10倍蒸餾水浸泡30 min，煎煮30 min，煎煮2次且合并煎液，過濾，濃縮為1.5 g生藥/ml藥液備用。破壁厚樸飲片則用無菌蒸餾水制備為所需濃度的藥液，勻漿機攪拌為混懸液。

1.4.2 胃排空及小腸推進實驗健康昆明小鼠63只，依據(jù)體質(zhì)量，將其隨機分為空白對照組(A1組)、多潘立酮陽性組(13 mg/kg；B1組)、厚樸傳統(tǒng)飲片組(650 mg/kg；C1組)、厚樸破壁1倍組(650 mg/kg；D1組)、1/2倍組(325 mg/kg；E1組)、1/4倍組(162.5 mg/kg；F1組)、1/8倍(81.25 mg/kg；G1組)組，共7組，每組9只小鼠。空白對照組給予無菌蒸餾水，劑量：10 ml/kg，每天1次，連續(xù)7 d。最后一次給藥前禁食24 h，自由飲水，給藥后1 h灌胃0.5%酚紅溶液，20 min后頸椎脫臼法處死小鼠，腹部剖開后結(jié)扎胃幽門、賁門、回盲部，取小腸和胃，用濾紙試干胃，稱胃全重。沿胃大彎處剪開，洗凈胃內(nèi)物，取濾紙試干胃，稱胃凈重；計算小鼠胃殘留率；拉直小腸平鋪在白紙板上，測量其全長和酚紅移動前沿至幽門間長度，算出小腸推進率。胃排空率為胃全重減去未凈重后除以酚紅溶液注入量；小腸推進率為酚紅移動距離除以小腸全長[4]。

1.4.3 左旋精氨酸致大鼠胃動力障礙的影響實驗選56只SD大鼠，雌雄皆可，隨機分為8組，每組7只，分別為空白對照組(A2組)、西沙比利組(B2組)、厚樸傳統(tǒng)飲片組(C2組)、厚樸破壁1倍組(650 mg/kg；D2組)、1/2倍組(325 mg/kg；E2組)、1/4倍組(162.5 mg/kg；F2組)、1/8倍(81.25 mg/kg；G2組)，模型組(H組)共8組，每組7只SD大鼠?？瞻讓φ战M給予生理鹽水，腹腔注射1 ml，灌胃20 ml/(kg·d)；模型組腹腔注射左旋精氨酸，劑量：第1天5.2 mg/kg，第2～5天為2.6 g/kg，同時灌胃生理鹽水20 ml/(kg·d)。其余各組左旋精氨酸用量同模型組(應(yīng)用生理鹽水配置左旋精氨酸溶液，濃度為20%)，各組分別灌胃4 ml的厚樸藥物提取液10 g/(kg·d)。B組給予西沙比利懸混液20 ml/(kg·d)(生藥75 mg/ml)；第6天各組灌胃相應(yīng)藥物，并給水合氯醛(10%)3 ml/kg，取心尖血5 ml，以酶標儀發(fā)測定血清胃泌素GAS、胃動素MTL，硝酸還原酶法檢測血清NO。

1.4.4 觀察指標觀察各組小鼠胃殘留率及小腸推進率。

1.4.5 統(tǒng)計學(xué)方法所有數(shù)據(jù)均采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 21.0處理分析，計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示，行t檢驗；計數(shù)資料以%表示，行χ2檢驗。以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 厚樸破壁飲片和傳統(tǒng)飲片對小鼠胃腸動力的影響胃殘留率和腸推進率是評估胃腸動力的主要觀察指標，此研究通過對比厚樸破壁飲片與傳統(tǒng)飲片小鼠胃殘留率、腸推進率來評估厚樸破壁飲片對胃腸動力的影響。

2.1.1 厚樸破壁飲片與傳統(tǒng)飲片小鼠胃殘留率比較同空白對照A1組相比，除厚樸破壁飲片162.5 mg/kg組(F1組)和81.25 mg/kg(G1組)組，各給藥組小鼠的胃殘留率顯著下降，各組間比較差異均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；與多潘立酮陽性組(C1組)比較，厚樸傳統(tǒng)飲片(D1組)、厚樸破壁飲片325 mg/kg(E1組)、厚樸破壁飲片162.5 mg/kg(F1組)、81.25 mg/kg(G1組)的胃殘留率均高于多潘立酮陽性組，其中D1組、F1組和G1組均明顯高于多潘立酮陽性組，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。厚樸破壁飲片325 mg/kg(E1組)同多潘立酮陽性組比較則差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；而C1組、D1組、F1組及G1組間的比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見圖1。

圖1 各組小鼠胃殘留率

2.1.2 厚樸破壁飲片與傳統(tǒng)飲片對小鼠腸推進率的影響與空白對照組(A1組)相比，多潘立酮組(B1組)、厚樸傳統(tǒng)飲片650 mg/kg(C1組)、厚樸破壁1倍組(D1組)、厚樸破壁飲片325 mg/kg(E1組)和厚樸破壁飲片162.5 mg/kg(F1組)的小腸推進率均顯著提升，組間比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，但厚樸破壁飲片81.25 mg/kg(G1組)小鼠小腸推進率則無明顯改變，2組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與多潘立酮陽性組相比，厚樸傳統(tǒng)飲片和厚樸破壁飲片81.25 mg/kg組明顯低于多潘立酮陽性組，2組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，其余各組則高于多潘立酮陽性組，但組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見圖2。

圖2 各組小腸推進率

2.2 厚樸飲片對各組小鼠胃動力障礙的影響模型組空白對照組比較顯示各指標差異顯著(P<0.001)，提升模型成功。與模型組相比，B2組、C2組、D2組、E2組、G2組的胃動素MTL含量明顯上升，2組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；但各組與空白對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；這表明給藥后大鼠機體恢復(fù)胃動素含量，大鼠胃動力障礙緩解。胃泌素含量：同模型組相比，各給藥組血清胃泌素含量顯著上升(P<0.001)，但各給藥組間、給藥組與空白對照組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，給藥組大鼠恢復(fù)胃泌素含量，提升其胃動力障礙得到緩解。NO含量：同模型組相比，西沙比利組NO含量下降(P<0.05)，其余給藥組均無明顯差異(P>0.05)，但均呈下降趨勢。見表1。

表1 厚樸破壁飲片及傳統(tǒng)飲片對大鼠胃動力障礙的影響 (例，

3 討論

在胃排空及小腸推進實驗中，本研究結(jié)果顯示，厚樸傳統(tǒng)飲片(650 mg/kg)、厚樸破壁飲片325 mg/kg能促進胃排空，而厚樸破壁飲片650 mg/kg則減緩小鼠胃排空，厚樸破壁飲片影響小鼠胃排空構(gòu)不成劑量依賴變化，厚樸破壁1/2倍(325 mg/kg)劑量與傳統(tǒng)厚樸飲片650 mg/kg對小鼠胃排空作用相當，增加厚樸破壁飲片劑量后可能有反作用。厚樸破壁飲片與傳統(tǒng)飲片均可促進小腸蠕動，加快小腸推進作用，且隨厚樸破壁飲片劑量的增加其對小鼠小腸的推進作用也增強，在厚樸破壁飲片1/4倍量時刻達到厚樸傳統(tǒng)飲片650 mg/kg劑量的效果。

NO是胃腸道抑制遞質(zhì)，左旋精氨酸為NO合酶抑制劑，對中間神經(jīng)元NO合成具有抑制作用，大鼠注射左旋精氨酸可抑制NO合成，從而致其胃動力障礙。灌服厚樸傳統(tǒng)飲片和破壁飲片后可促進NO功能恢復(fù)，胃泌素和胃動素含量與模型組相比得到提升，恢復(fù)至正常水平，表明厚樸飲片和破壁飲片對大鼠胃動力障礙的緩解作用明顯，給藥1/4倍破壁飲片能夠達到與厚樸傳統(tǒng)飲片650 mg/kg用量的效果。

綜上所述，厚樸破壁飲片和厚樸傳統(tǒng)飲片能夠加速小鼠胃排空和加速小腸推進，能夠加速大鼠胃腸道動力障礙緩解和恢復(fù)，但在使用劑量上厚樸破壁飲片具有一定的優(yōu)勢。