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    叉頭框轉(zhuǎn)錄因子M1和增殖細胞核抗原在食管癌組織中的表達及與放化療預(yù)后相關(guān)性分析

    2021-09-22 01:31:30馬顯平張海斌
    陜西醫(yī)學雜志 2021年9期
    關(guān)鍵詞:放化療食管癌食管

    馬顯平,張海斌

    (1.陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院腫瘤放療科,陜西 咸陽 712000;2.銅川市人民醫(yī)院普外胸外科,陜西 銅川 727000)

    食管癌是我國常見惡性腫瘤,長期占惡性腫瘤死亡的前5位[1-2]。隨著醫(yī)學技術(shù)的發(fā)展,出現(xiàn)了一些新的治療方法及新的治療藥物,但是食管癌患者5年生存率一直維持在20%左右[3]。放化療為中晚期食管癌的主要治療方法,但是除了治療過程中的不良反應(yīng)外,腫瘤局部未控率和復(fù)發(fā)率也一直比較高。因此,尋找影響食管癌病情與預(yù)后的分子標志物并對其機制進行深入研究,對于改善患者預(yù)后具有重要作用[4-5]。現(xiàn)代研究表明食管癌的發(fā)生是環(huán)境因素與宿主因素相互作用的結(jié)果,也是多階段、多基因變化的過程。叉頭框轉(zhuǎn)錄因子M1(Forkhead box protein M1,F(xiàn)OXM1)可通過與下游基因的啟動子結(jié)合,從而調(diào)控下游基因轉(zhuǎn)錄,參與機體DNA損傷修復(fù)、細胞周期調(diào)控、染色質(zhì)組裝等多個過程[6-7]。增殖細胞原核抗(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)是反映細胞增殖的主要生物指標之一,其表達水平與細胞增殖和轉(zhuǎn)移水平密切相關(guān)[8-10]。本研究探討FOXM1和PCNA在食管癌組織中的表達與放化療預(yù)后的相關(guān)性,希望為明確食管癌的發(fā)生機制與改善放化療預(yù)后提供參考。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取2017年6月至2020年6月于本院行同期放化療的86例食管癌患者作為研究對象。其中,男性46例,女性40例;平均年齡(59.38±9.47)歲;平均病灶最大直徑(5.28±0.28)cm;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移32例;組織學高分化28例,低分化22例,中分化36例;臨床分期Ⅱ期42例,Ⅲ期28例,Ⅳ期16例。病例納入標準:所有患者均行病理檢查確診為食管鱗狀細胞癌,具有完整的病灶組織標本與癌旁組織本標(與癌灶距離≥5 cm);年齡18~80歲;未合并其他惡性腫瘤;臨床分期Ⅱ期及以上。排除標準:懷孕或母乳喂養(yǎng)期間婦女;對本研究放化療藥物過敏者;合并嚴重內(nèi)科疾病者?;颊吆炇鹆酥橥鈺?。本院倫理委員會批準了本研究。

    1.2 FOXM1和PCNA表達檢測 取所有患者癌組織標本與癌旁組織標本,即刻置于液氮中-80 ℃保存。制成原位雜交標本,暴露特異性片段,0.1% Tritoon-100和0.1 mol/L PBS溶液孵育30 min,然后室溫固定10 min。每張切片加入20 μl雜交液(FOXM1、PCNA雜交液),42 ℃雜交過夜。使用DAB進行顯色,蘇木素復(fù)染細胞核,顯微鏡下觀察。經(jīng)Image Pro Plus 6.0軟件分析,計數(shù)各視野總細胞數(shù)和陽性細胞數(shù),計算標本的FOXM1和PCNA陽性標記指數(shù)。

    1.3 放化療方法 所有患者都采用相同的放化療方案。放療方案:使用瓦里安直線加速器,采用三維適形放療技術(shù)。計劃靶區(qū)給予劑量2 Gy/次,5次/周,共5周。完成后縮靶至計劃腫瘤靶區(qū),推量至60 Gy?;煼桨福悍暖煹?天為順鉑60 mg/m2,第1~4天為氟尿嘧啶500 mg/m2,4周后重復(fù)該化療方案。

    1.4 調(diào)查資料 調(diào)查所有患者的病理資料,包括性別、年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學分化、病灶最大直徑、臨床分期。同時隨訪到2020年12月1日,調(diào)查患者的生存與死亡情況。

    1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 23.00統(tǒng)計學軟件進行分析,計量資料用均數(shù)±標準差表示,行t檢驗或方差分析,相關(guān)性分析采用Pearson法,影響因素分析采用Logistic回歸模型,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié) 果

    2.1 食管癌組織與癌旁組織FOXM1和PCNA表達水平比較 見表1(圖1)。食管癌組織FOXM1和PCNA表達水平高于癌旁組織(均P<0.05)。

    表1 食管癌組織與癌旁組織FOXM1和PCNA表達水平比較

    A:癌組織FOXM1;B:癌旁組織FOXM1;C:癌組織PCNA;D:癌旁組織PCNA

    2.2 不同臨床病理特征食管癌患者FOXM1和PCNA表達水平比較 見表2。在食管癌患者中,不同組織學分化、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病灶直徑患者的FOXM1和PCNA表達水平對比差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)。

    表2 不同臨床病理特征食管癌患者FOXM1和PCNA表達水平比較

    2.3 食管癌患者放化療預(yù)后與FOXM1和PCNA表達水平相關(guān)性分析 所有患者經(jīng)過放化療療治后,隨訪到2020年12月1日,86例患者死亡21例,病死率為24.4%。Pearson分析顯示,食管癌患者放化療預(yù)后與FOXM1和PCNA表達水平具有相關(guān)性(r=0.542、0.443,均P<0.05)。

    2.4 食管癌患者放化療預(yù)后影響因素分析 見表3。Logistic回歸模型顯示,F(xiàn)OXM1和PCNA表達水平均為影響食管癌患者放化療預(yù)后的重要因素(均P<0.05)。

    表3 食管癌患者放化療預(yù)后影響因素分析

    3 討 論

    我國是食管癌高發(fā)區(qū),主要集中在太行山區(qū),呈同心圓向外分布。該病的病因包括食物霉菌污染、微量營養(yǎng)素缺乏、遺傳因素等,但具體的發(fā)病機制還不明確。為探討FOXM1和PCNA在食管癌組織中的表達及與放化療預(yù)后的相關(guān)性,本研究選取86例食管癌患者展開研究。目前食管癌主要的治療手段為手術(shù)切除治療、化療、放療等,但是預(yù)后依然比較差[11-13]。隨著腫瘤分子生物學研究的不斷深入,積極進行分子靶點分析已成為食管癌的研究熱點。

    本研究顯示,食管癌組織FOXM1和PCNA表達水平都高于癌旁組織;不同組織學分化、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病灶直徑食管癌患者的FOXM1和PCNA表達水平對比差異都有統(tǒng)計學意義。從機制上分析,F(xiàn)OXM1是FOX 轉(zhuǎn)錄因子家族成員之一,可參與調(diào)節(jié)細胞凋亡、代謝、增殖與分化,在惡性腫瘤細胞中呈現(xiàn)高表達。FOXM1能夠促進血管生成,為腫瘤的增殖提供大量養(yǎng)分,從而促進腫瘤轉(zhuǎn)移[14]。李佩琴等[15]發(fā)現(xiàn),F(xiàn)OXM1在食管鱗癌中存在異常表達,經(jīng)研究證實FOXM1與食管鱗癌細胞分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及預(yù)后有很大聯(lián)系,能為食管鱗癌的診治提供依據(jù),與本研究結(jié)果基本一致。PCNA是一種相對分子量為3.6×104的酸性核蛋白,存在于細胞核內(nèi)不同部位,其合成與表達與細胞增殖狀態(tài)密切相關(guān)。PCNA也是細胞核內(nèi)合成DNA所必需的一種核蛋白,是反映細胞增殖的主要生物指標之一,可參與調(diào)節(jié)DNA復(fù)制?,F(xiàn)代研究[16-17]顯示,PCNA在多種惡性腫瘤呈現(xiàn)高表達,可通過對多種基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控實現(xiàn)G2/M和G1/S轉(zhuǎn)換,推動有絲分裂的進行,可通過調(diào)節(jié)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響腫瘤細胞的遷移。

    食管鱗癌主要從基底細胞過度增生、不典型增生進而發(fā)展為原位癌,進一步發(fā)展為浸潤型食管鱗狀細胞癌[18]。食管癌患者行根治性同期放化療后容易出現(xiàn)各種不良反應(yīng),且沒有從根本上提高患者的預(yù)后生存率。本研究中,所有患者經(jīng)過放化療治療后,隨訪到2020年12月1日,86例患者中死亡21例,病死率為24.4%;Pearson分析顯示,食管癌患者放化療預(yù)后與FOXM1、PCNA表達水平具有相關(guān)性;Logistic回歸模型顯示,F(xiàn)OXM1、PCNA表達水平都為影響食管癌患者放化療預(yù)后的重要因素。從機制上分析,F(xiàn)OXM1可通過轉(zhuǎn)錄激活多種信號通路,作用于食管上皮的相關(guān)基因,引起食管上皮細胞癌變[19];PCNA可在食管上皮癌變不同階段中起重要作用,其高表達可視為惡性腫瘤的危險預(yù)后因素[20]。

    綜上所述,F(xiàn)OXM1和PCNA在食管癌組織中呈現(xiàn)高表達,與患者的病理特征存在相關(guān)性,也是影響患者放化療預(yù)后的重要影響因素。然而,本研究沒有進行1年或者多年生存率分析,且納入患者數(shù)量比較少,將在后續(xù)研究中加以完善。

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