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      用艾灸療法調控TGF-β/Smad信號傳導通路在逆轉慢性萎縮性胃炎癌前病變中的效果

      2021-09-13 04:57:46金,龔
      當代醫(yī)藥論叢 2021年17期
      關鍵詞:經(jīng)穴灌胃萎縮性

      蔡 金,龔 安

      (1.貴州中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院兒科,貴州 貴陽 550002;2.江西中醫(yī)藥大學岐黃國醫(yī)書院,江西 南昌 330025)

      有研究指出,胃癌的發(fā)生與TGF-β/Smad信號傳導通路異常存在一定的關聯(lián)。TGF-β/Smad信號傳導通路具有抑制腫瘤細胞增殖、生長的作用。此信號傳導通路中任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常均可造成信號轉導紊亂,從而促進腫瘤的發(fā)生與發(fā)展[1]。本文主要是研究應用艾灸療法調控TGF-β/Smad信號傳導通路在逆轉慢性萎縮性胃炎癌前病變方面的效果。

      1 資料與方法

      1.1 試驗動物

      選擇純系合格Wistar大鼠120只,雄性,SPF級,6周齡。采用架式籠養(yǎng),每籠5只。飼養(yǎng)溫度為(24±2)℃,濕度為(55±5%),每12 h進行1次亮暗循環(huán)。讓大鼠自由取食標準飼料和自來水,檢疫3周后進行分組試驗。

      1.2 分組及處理

      將120只Wistar大鼠隨機分為正常組、模型組、艾灸胃經(jīng)穴組、對照點組、艾灸胃經(jīng)穴+LY2109761組和對照點+LY2109761組,每組20只大鼠。對各組大鼠進行相應的處理,具體的處理方法如下:1)正常組大鼠:標準飼養(yǎng),不進行造模。定時對其進行捆綁,40 min/次,1次/d,持續(xù)進行4周。2)模型組大鼠:標準飼養(yǎng),進行慢性萎縮性胃炎癌前病變造模。定時對其進行捆綁,40 min/次,1次/d,持續(xù)進行4周。3)艾灸胃經(jīng)穴組大鼠:標準飼養(yǎng),進行慢性萎縮性胃炎癌前病變造模。艾灸其胃經(jīng)穴,40 min/次,1次/d,持續(xù)進行4周。4)艾灸胃經(jīng)穴+LY2109761組大鼠:標準飼養(yǎng),進行慢性萎縮性胃炎癌前病變造模。為其腹腔注射適量的LY2109761,艾灸其胃經(jīng)穴,40 min/次,1次/d,持續(xù)進行4周。5)對照點組大鼠:標準飼養(yǎng),進行慢性萎縮性胃炎癌前病變造模。艾灸其對照點,40 min/次,1次/d,持續(xù)進行4周。6)對照點+LY2109761組大鼠:標準飼養(yǎng),進行慢性萎縮性胃炎癌前病變造模。為其腹腔注射適量的LY2109761,艾灸其對照點,40 min/次,1次/d,持續(xù)進行4周。

      1.3 造模方法

      參照嚴茂祥[2]的方法進行慢性萎縮性胃炎癌前病變造模,具體方法如下:讓大鼠飲用N-甲基-N-硝基-N-亞硝基胍溶液,使用水楊酸、酒精對其進行灌胃。定時使用夾子對其進行夾尾,采用饑飽失常法對其進行處理,為期20周。將N-甲基-N-硝基-N-亞硝基胍加入到等離子水中配備成濃度為1 g/L的儲存液,在4℃下避光儲存。用時將其配制成170 μg/mL的飲用液,并置于表面涂黑色油漆的飲水瓶中,讓大鼠自然飲用(每日更換1次)。使用10 mL/kg濃度為2%的水楊酸鈉溶液對大鼠進行灌胃,每日1次(進行灌胃前后禁食禁水1 h)。使用10 mL/kg濃度為30%的酒精溶液對大鼠進行灌胃,隔日1次(進行灌胃前后禁食禁水1 h)。每日對大鼠進行1次夾尾,使其保持激怒、爭斗狀態(tài)(持續(xù)1 h)。采用饑飽失常法對其進行處理,即足量喂食2 d后停食1 d,循環(huán)實施。進行模型檢測的方法是:從造模第1周開始,每隔1周斷頭處死1只大鼠,取其胃組織行常規(guī)病理檢查。觀察造模情況,觀察內容主要包括有無胃黏膜萎縮、腸化生和異型增生及上述情況出現(xiàn)的時間和程度等。

      1.4 干預方法

      選穴方法是:選取大鼠的中脘穴、足三里穴作為治療穴位,對照點為中脘穴、足三里穴外側1 cm。穴位的定位參照《實驗針灸學》[3]。取穴方法是:將大鼠左右腓骨小頭前下方和劍突下方兩側的體毛除去,確定穴位后用苦味酸做標記。取胃組織的方法是:讓大鼠禁食1 d后,為其腹腔注射0.3 mL濃度為3%的戊巴比妥。距幽門1.0 cm剖胃取材,沿矢狀線做縱行切開后,用10%的多聚甲醛液進行組織固定、標號,然后進行相關指標的檢測。

      1.5 觀察指標

      分別對比正常組大鼠、模型組大鼠、艾灸胃經(jīng)穴組大鼠、對照點組大鼠、艾灸胃經(jīng)穴+LY2109761組大鼠、對照點+LY2109761組大鼠胃黏膜中表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)、轉 化 生 長 因 子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、Smad3、P53、B淋巴細胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、核仁組成區(qū)相關蛋白(nucl-eolar organizer region associated protein,Ag-NOR)和增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的水平。

      1.6 統(tǒng)計學處理

      對本研究中的數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進行處理,計量資料采用t檢驗,計數(shù)資料采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

      2 結果

      2.1 六組大鼠胃黏膜組織EGF、TGF-β、Smad3水平的對比

      與正常組大鼠相比,模型組大鼠胃黏膜組織EGF、TGF-β的水平均較高,其胃黏膜組織Smad3的水平均較低,P<0.05。與模型組大鼠、艾灸胃經(jīng)穴組大鼠、對照點組大鼠、對照點+LY2109761組大鼠相比,艾灸胃經(jīng)穴+LY2109761組大鼠胃黏膜組織EGF、TGF-β的水平均較低,其胃黏膜組織Smad3的水平較高,P<0.05。詳見表1。

      表1 六組大鼠胃黏膜組織EGF、TGF-β、Smad3水平的對比(±s)

      表1 六組大鼠胃黏膜組織EGF、TGF-β、Smad3水平的對比(±s)

      組別 EGF(ng/L) TGF-β(ng/L)Smad3(pg/mL)正常組(n=20) 2256.87±16.59 91.23±5.21 15.51±3.64模型組(n=20) 2811.52±18.01 140.51±7.30 9.23±2.05艾灸胃經(jīng)穴組(n=20)2667.24±17.55 133.27±8.51 11.86±1.98對照點組(n=20) 2703.51±17.93 127.55±5.81 10.57±1.63艾灸胃經(jīng)穴+LY2109761組(n=20)2304.26±16.78 105.62±5.62 14.41±3.20對照點+LY2109761組(n=20) 2597.51±17.22 128.91±6.05 11.36±1.75

      2.2 六組大鼠胃黏膜細胞P53、Bcl-2、Ag-NORs、PCNA水平的對比

      與正常組大鼠相比,模型組大鼠胃黏膜細胞P53、Bcl-2、Ag-NORs、PCNA的水平均較高,P<0.05。與模型組大鼠、艾灸胃經(jīng)穴組大鼠、對照點組大鼠、對照點+LY2109761組大鼠相比,艾灸胃經(jīng)穴+LY2109761組大鼠胃黏膜細胞P53、Bcl-2、Ag-NORs、PCNA的水平均較低,P<0.05。詳見表2。

      表2 六組大鼠胃黏膜細胞P53、Bcl-2、Ag-NORs、PCNA水平的對比(ng/L,±s)

      表2 六組大鼠胃黏膜細胞P53、Bcl-2、Ag-NORs、PCNA水平的對比(ng/L,±s)

      組別 P53 Bcl-2 Ag-NORs PCNA正常組(n=20) 38.59±3.15 23.01±3.26 77.25±3.41 1.65±0.45模型組(n=20) 56.07±1.26 39.57±1.55 115.02±5.79 3.04±0.91艾灸胃經(jīng)穴組(n=20) 52.31±1.51 32.43±1.50 110.32±5.40 2.61±0.77對照點組(n=20) 50.20±1.40 36.15±1.42 105.45±5.17 2.83±0.84艾灸胃經(jīng)穴+LY2109761組(n=20) 37.66±3.02 25.04±3.08 80.16±3.65 1.80±0.50對照點+LY2109761組(n=20) 48.25±1.33 30.98±1.77 97.25±4.02 2.95±0.88

      3 討論

      慢性萎縮性胃炎是臨床上常見的一種慢性胃炎。此病具有病程長、易反復發(fā)作、遷延難愈等特點。有研究指出,慢性萎縮性胃炎轉變成胃癌與胃黏膜細胞信號傳導紊亂造成相關基因表達失衡,進而引發(fā)胃黏膜細胞異常增殖有關。近年來,慢性萎縮性胃炎的發(fā)病率呈逐漸升高的趨勢。但對于此病,臨床上仍缺乏特效治療方案[4]。中醫(yī)認為,慢性萎縮性胃炎屬于“胃脘痛”、“胃痞”等范疇,其病機為本虛標實,其中脾胃氣虛為虛,氣滯血瘀為實,部分患者存在虛實夾雜的情況,對其進行治療的難度較大[5]。有研究指出,艾灸足陽明經(jīng)穴對胃黏膜損傷性疾病具有一定的預防作用。本研究的結果顯示,與模型組大鼠、艾灸胃經(jīng)穴組大鼠、對照點組大鼠、對照點+LY2109761組大鼠相比,艾灸胃經(jīng)穴+LY2109761組大鼠胃黏膜組織EGF、TGF-β的水平、胃黏膜細胞P53、Bcl-2、Ag-NORs、PCNA的水平均較低,其胃黏膜組織Smad3的水平較高,P<0.05。這表明,艾灸對慢性萎縮性胃炎癌前病變具有逆轉作用。有研究指出,進行艾灸可對機體造成一定的刺激,進而可促進內源性保護物質的產生。另外,艾灸胃經(jīng)穴可有效改善慢性萎縮性胃炎癌前病變大鼠胃黏膜細胞中增殖相關細胞因子的表達,同時增強其胃黏膜的預保護能力,防止其病情向胃癌發(fā)展。

      綜上所述,應用艾灸療法調控干預TGF-β/Smad信號傳導通路,可抑制胃癌的發(fā)生與發(fā)展。

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