• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    水分散-DNPH衍生-LC-MS/MS法同時測定電子煙液中8種羰基物

    2021-08-26 05:55:42潘立寧劉紹鋒李東亮樊美娟王曉瑜施豐成孫學輝劉瑞紅秦亞瓊
    煙草科技 2021年8期
    關鍵詞:二硝基苯丙烯醛羰基

    潘立寧,劉紹鋒*,李東亮,樊美娟,沈 怡,王曉瑜,施豐成,羅 誠*,孫學輝,劉瑞紅,秦亞瓊

    1.中國煙草總公司鄭州煙草研究院,鄭州高新技術產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)楓楊街2號 450001

    2.四川中煙工業(yè)有限責任公司技術中心 卷煙減害降焦四川省重點實驗室,成都市錦江區(qū)成龍大道一段56號610021

    近年來,隨著全球控煙力度不斷加大,一些發(fā)達國家傳統(tǒng)卷煙的銷量出現(xiàn)了一定的下降趨勢,而電子煙在全球銷量呈快速增長之勢[1-3]。作為電子煙的重要組成部分,電子煙液的質(zhì)量安全直接影響消費者的健康。低分子羰基物是一類對人體感覺系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)有強烈刺激作用的有害物質(zhì),特別是甲醛、乙醛、丙酮、丙烯醛、丙醛、巴豆醛、2-丁酮和丁醛8種低分子羰基物[4]。這8種羰基物均被列于Hoffmann名單中[5],甲醛、乙醛和巴豆醛分別被國際癌癥研究機構(gòu)(International Agency for Research on Cancer,IARC)列為1類、2B類、3類人類致癌物[6],丙烯醛被美國環(huán)境保護署(US Environmental Protection Agency,US EPA)列入“有害大氣污染物名單”[7]。為保障電子煙液的安全性,規(guī)范電子煙市場,部分國家和地區(qū)對電子煙液中的羰基物進行了規(guī)范或限量[8-9]。準確測定電子煙液中羰基物的質(zhì)量分數(shù)對于確定羰基物的形成機理和評價其對人體健康的影響具有重要意義。低分子量羰基物由于極性大、反應活性高、易揮發(fā)等特點,通常對其衍生化后再采用色譜或光譜技術進行檢測[10]。羰基物與DNPH的衍生應用廣泛[11-25],由于腙類化合物在高溫下會發(fā)生分解,液相色譜(LC)比氣相色譜(GC)更適合對羰基物的腙類產(chǎn)物進行測定[13],DNPH衍生-LC檢測法被一些國家的標準化機構(gòu)用作分析主流煙氣中羰基物的標準方法[14-15]。目前,電子煙氣溶膠中羰基物的研究較多,而電子煙液中羰基物分析方法的相關報道較少。Lim等[23]利用2,2,2-三氟乙基肼對羰基物進行衍生,采用頂空固相微萃取-GC-MS聯(lián)用法測定電子煙液中的甲醛、乙醛和丙烯醛;Varlet等[24]使用盛有DNPH的吸附管捕集電子煙液中的羰基物,經(jīng)乙腈洗脫后采用LC-UV/MS法進行測定。

    在本研究中,采用DNPH衍生化羰基物、采用LC-MS/MS法進行檢測,解決了在樣品前處理過程中因甘油和DNPH乙腈溶液不混溶導致的溶液分層問題以及腙類產(chǎn)物在酸性條件下的降解問題,旨在為電子煙液中多種羰基物的同時測定提供方法參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料、試劑和儀器

    收集市場上22種不同品牌、不同口味和不同煙堿量的電子煙液樣品。

    甲醛-2,4-二硝基苯腙(>97%)、乙醛-2,4-二硝基苯腙(>98%)、丙酮-2,4-二硝基苯腙(>98%)、丙烯醛-2,4-二硝基苯腙(>95%)、丙醛-2,4-二硝基苯腙(>97%)、巴豆醛-2,4-二硝基苯腙(>98%)、2-丁酮-2,4-二硝基苯腙(>98%)、丁醛-2,4-二硝基苯腙(>96%)(標準品,日本東京化成工業(yè)株式會社);甲醛-2,4-二硝基苯腙-d3、乙醛-2,4-二硝基苯腙-d(3標準品,>98%,上海安譜公司)。

    水(自制,符合GB/T 6682—2008規(guī)定的一級水,電阻率18.2 MΩ·cm);甲醇、乙腈(色譜純,美國Dikma公司);吡啶(色譜純)、2,4-二硝基苯肼(DNPH,>98%)(美國Sigma-Aldrich公司);高氯酸[70%(質(zhì)量分數(shù)),比利時Acros Organics公司]。

    1.2 方法

    1.2.1 標準工作溶液的配制

    采用乙腈配制8種羰基物-2,4-二硝基苯腙的混合標準儲備液,以及甲醛-2,4-二硝基苯腙-d3和乙醛-2,4-二硝基苯腙-d3的混合內(nèi)標儲備液,置于-20℃冰箱中保存。采用乙腈稀釋配制甲醛-2,4-二硝基苯腙-d3和乙醛-2,4-二硝基苯腙-d3的濃度均為20μg/mL的內(nèi)標工作液。采用乙腈逐級稀釋并加入內(nèi)標工作液配制系列標準工作溶液,系列標準工作溶液中各羰基物-2,4-二硝基苯腙的濃度分別為10、20、50、100、200、500、1 000 ng/mL,內(nèi)標濃度為200 ng/mL。

    1.2.2 樣品前處理和儀器條件

    稱取0.2 g電子煙液樣品于10 mL容量瓶中,依次加入1.2 mL去離子水、2 mL 1.2 mg/mL DNPH乙腈溶液以及80μL高氯酸水溶液,搖勻,室溫放置60 min進行衍生化反應。反應結(jié)束后加入200μL吡啶和100μL內(nèi)標工作溶液(甲醛-2,4-二硝基苯腙-d3和乙醛-2,4-二硝基苯腙-d3的混合溶液,濃度均為20μg/mL),并用乙腈定容至10 mL,搖勻。溶液過有機相濾膜,將濾液進行LC-MS/MS分析。分析條件:

    色譜柱:Acclaim?Explosive E2柱(3 mm×150 mm,3μm,120?);柱溫:30℃;進樣量:5μL;流動相A:水;流動相B:乙腈;洗脫方式:40%A+60%B等度洗脫;流速:0.4 mL/min;離子源:電噴霧電離源(ESI);掃描方式:負離子掃描;檢測方式:多反應監(jiān)測模式(MRM);電噴霧電壓:-4 200 V;離子源溫度:500℃;氣簾氣壓力:0.138 MPa;碰撞氣壓力:0.041 MPa;輔助氣1壓力:0.276 MPa;輔助氣2壓力:0.276 MPa;監(jiān)測離子對信息見表1。

    表1 各衍生物的內(nèi)標物、母離子、子離子、去簇電壓、碰撞能量及保留時間Tab.1 Internal standards,precursor ions,product ions,declustering potentials,collision energies and retention time of the derivatives

    2 結(jié)果與討論

    2.1 LC-MS/MS法與HPLC法比較

    文獻研究表明,電子煙液中低分子量羰基物質(zhì)量分數(shù)水平為μg/g級;為了改善口感,電子煙液中加入不同種類的香味成分,導致電子煙液基質(zhì)比較復雜,不同電子煙液樣品基質(zhì)差異較大[23-24]。選擇2個市售電子煙液樣品,按照1.2.2節(jié)的方法進行樣品前處理,然后分別采用LC-MS/MS法和LC法進行測定,LC條件參見文獻[7]。

    圖1為標準溶液和2個電子煙液樣品中8種羰基物-2,4-二硝基苯腙的LC-MS/MS提取離子色譜圖(圖1a)和LC譜圖(圖1b)。LC-MS/MS提取離子色譜圖顯示,樣品1中含有甲醛和乙醛,樣品2中含有甲醛、乙醛和2-丁酮。LC譜圖顯示,在樣品1中也檢測甲醛、乙醛,但因雜質(zhì)干擾,甲醛的色譜峰前沿處有凸起,難以準確定量,且丙烯醛及丙醛色譜峰中間存在很大的雜質(zhì)峰;樣品2中檢出甲醛和乙醛,但未檢出2-丁酮,且在巴豆醛出峰位置出現(xiàn)了很大的色譜峰,該峰經(jīng)LC-MS/MS法證實為雜質(zhì)峰而非巴豆醛,并將2-丁酮色譜峰掩蓋。由此可見,由于電子煙液基質(zhì)比較復雜,且不同電子煙液樣品基質(zhì)差異較大,采用LC法難以準確檢測樣品中的8種羰基物;LC-MS/MS法靈敏度高,且選擇性好,適于電子煙液中8種羰基物的測定。

    圖1 標準溶液和2個電子煙液樣品中8種羰基物-2,4-二硝基苯腙的LC-MS/MS提取離子色譜圖(a)和LC圖(b)Fig.1 Extracted ion chromatograms(a)and liquid chromatograms(b)for eight carbonyls in standard solution and two e-liquid samples

    2.2 DNPH溶液溶劑的優(yōu)化

    甲醇和乙腈為LC-MS/MS法的常用流動相,DNPH在甲醇和乙腈中的溶解性良好,因此分別采用甲醇和乙腈配制一定濃度的DNPH溶液,考察兩種溶劑產(chǎn)生的背景對檢測結(jié)果的影響。具體步驟:移取2 mL DNPH甲醇溶液(或DNPH乙腈溶液)和80μL高氯酸水溶液于10 mL容量瓶中,搖勻,室溫放置60 min進行衍生化反應。然后,加入200μL吡啶,采用甲醇(或乙腈)定容至10 mL,搖勻。將溶液過有機相濾膜,進行LC-MS/MS分析。分析條件同1.2.2節(jié)。

    3.2 主要臨床表現(xiàn) 鉤蟲性十二指腸炎綜合征是由鉤蟲寄生于小腸所引起的疾病,鉤蟲性十二指腸炎綜合征患者因感染鉤蟲的數(shù)量、時間及個人的身體狀況常呈現(xiàn)輕重不一的臨床表現(xiàn)。本征多先有胃納增加而體重減輕,上腹部不適,可有不同程度的隱痛,餐后腹脹。后期食欲不振,可有惡心、嘔吐、便秘或腹瀉,甚至黑便、柏油樣便、血便等消化道出血表現(xiàn)。貧血嚴重時胃酸分泌減低,可有異嗜癖、嗜酸性粒細胞增多癥,甚至發(fā)生嗜酸性膿腫導致腸梗阻表現(xiàn)。鉤蟲感染輕者可無癥狀,部分可有貧血、營養(yǎng)不良、胃腸功能失調(diào),重者可有發(fā)育障礙及心功能不全[7]。

    結(jié)果表明,采用甲醇配制DNPH溶液會造成很大背景(圖2a),DNPH甲醇溶液背景中存在6種羰基物的2,4-二硝基苯腙產(chǎn)物,這6種羰基物分別為甲醛、乙醛、丙酮、丙醛、2-丁酮、丁醛。其中,甲醛-2,4-二硝基苯腙的色譜峰很高,丙酮-2,4-二硝基苯腙和2-丁酮-2,4-二硝基苯腙的色譜峰較高,乙醛-2,4-二硝基苯腙、丙醛-2,4-二硝基苯腙和丁醛-2,4-二硝基苯腙的色譜峰相對較低,這些背景峰影響測定結(jié)果的準確性。使用購自不同公司的甲醇試劑配制DNPH溶液,結(jié)果無顯著性差異。低分子量羰基物可能由甲醇試劑引入,盡管實驗中所用為HPLC級試劑,但仍含有微量的羰基物,其與DNPH反應會帶來較高的背景值。在DNPH乙腈溶液背景中檢出了甲醛-2,4-二硝基苯腙和乙醛-2,4-二硝基苯腙。已知空氣中存在甲醛和乙醛,在背景中檢測出甲醛和乙醛是不可避免的。相對于DNPH甲醇溶液,DNPH乙腈溶液的本底小得多,因此選擇用乙腈配制DNPH溶液,同時所有結(jié)果均需要扣除溶劑背景。

    圖2 DNPH甲醇溶液(a)和DNPH乙腈溶液(b)背景中8種羰基物腙類產(chǎn)物的提取離子色譜圖Fig.2 Extracted ion chromatograms for eight carbonyls in treated DNPH/methanol solution(a)and DNPH/acetonitrile solution(b)

    2.3 分散劑用量的選擇

    電子煙液主要由丙二醇和甘油組成,其在不同電子煙液中的比例差異很大。甘油與乙腈不混溶,導致甘油質(zhì)量分數(shù)較高的電子煙液樣品與DNPH乙腈溶液混合時出現(xiàn)分層現(xiàn)象,影響測定結(jié)果。為了使反應體系均一化,在電子煙液樣品中引入一定量水進行分散后,再加入DNPH乙腈溶液。DNPH在乙腈中溶解度較大,在水中溶解度較小,當加入大量水后,DNPH會析出。因此,為了避免分層和DNPH析出,考察了水和DNPH乙腈溶液的加入量。

    采用同等質(zhì)量的甘油代替電子煙液樣品進行避免分層實驗:當水的加入量大于甘油質(zhì)量的6倍以上,無論加入多少DNPH乙腈溶液,反應體系均不會出現(xiàn)分層現(xiàn)象。避免DNPH析出實驗表明,保證DNPH不析出的允許加水量與DNPH濃度有關:當DNPH濃度為2 mg/mL時,若加水量不大于乙腈使用量,DNPH不會析出;當DNPH濃度減小,允許加水量將增加。根據(jù)以上分析,對于0.2 g電子煙液樣品,加入1.2 mL水(加入水的質(zhì)量為樣品質(zhì)量的6倍),再加入2 mL 1.2 mg/mL的DNPH乙腈溶液(加水量小于乙腈使用量)進行衍生化反應時,既不會出現(xiàn)分層現(xiàn)象,也不會析出DNPH。

    2.4 衍生過程參數(shù)優(yōu)化結(jié)果

    電子煙液中的羰基物能否與DNPH完全反應生成相應的腙類衍生物顯著影響結(jié)果的準確性。以分析物與內(nèi)標的面積比作為評價指標,分別研究確定DNPH濃度、高氯酸濃度和反應時間參數(shù)(圖3)。實驗所用的電子煙液樣品可檢出甲醛、乙醛、丙酮和丙醛,為了考察衍生過程參數(shù)對電子煙液中8種羰基物衍生化反應結(jié)果的影響,在該電子煙液樣品中加入一定量丙烯醛、巴豆醛、2-丁酮和丁醛。

    2.4.1 DNPH濃度

    腙類衍生物的生成量取決于DNPH與分析物的摩爾比[25],因此采用不同濃度的DNPH溶液處理電子煙液樣品。如圖3a所示,隨DNPH濃度增加,8種羰基物的2,4-二硝基苯腙衍生物先逐漸增加,然后保持不變。DNPH濃度由0.2 mg/mL增加至1.4 mg/mL,各腙類衍生物的響應依次增加至原來的2.45倍(甲醛-2,4-二硝基苯腙)、1.20倍(乙醛-2,4-二硝基苯腙)、3.82倍(丙酮-2,4-二硝基苯腙)、1.46倍(丙烯醛-2,4-二硝基苯腙)、1.54倍(丙醛-2,4-二硝基苯腙)、1.30倍(巴豆醛-2,4-二硝基苯腙)、2.26倍(2-丁酮-2,4-二硝基苯腙)和1.18倍(丁醛-2,4-二硝基苯腙)。當DNPH濃度為1.2 mg/mL時,8種羰基物的2,4-二硝基苯腙的響應最高;繼續(xù)增加DNPH濃度,響應不再增加。因此,選用DNPH濃度為1.2 mg/mL。

    圖3 衍生過程參數(shù)對測定結(jié)果的影響Fig.3 Effects of derivation parameters on determination results

    2.4.2 高氯酸濃度

    羰基物與DNPH發(fā)生反應,需要在酸性條件下進行,反應體系酸性強弱直接影響反應效率。因此,考察了不同濃度高氯酸水溶液對衍生化反應結(jié)果的影響(圖3b)。結(jié)果表明,當高氯酸濃度由1.4%增加至10.5%時,除丙烯醛外,其他7種羰基物的2,4-二硝基苯腙響應先逐漸增加,然后保持不變。當高氯酸濃度由1.4%增加至5.6%時,丙烯醛-2,4-二硝基苯腙響應逐漸增加;高氯酸濃度為5.6%~7.0%范圍內(nèi),丙烯醛-2,4-二硝基苯腙的響應保持不變;高氯酸濃度繼續(xù)增加,丙烯醛-2,4-二硝基苯腙響應下降。這主要是由于丙烯醛-2,4-二硝基苯腙在酸性較高條件下容易發(fā)生聚合反應[11-12]。當高氯酸濃度由1.4%增加至10.5%時,8種羰基物的2,4-二硝基苯腙的響應最大值與最小值的比例分別為甲醛-2,4-二硝基苯腙1.71、乙醛-2,4-二硝基苯腙1.49、丙酮-2,4-二硝基苯腙3.10、丙烯醛-2,4-二硝基苯腙7.05、丙醛-2,4-二硝基苯腙2.25、巴豆醛-2,4-二硝基苯腙21.67、2-丁酮-2,4-二硝基苯腙8.59和丁醛-2,4-二硝基苯腙2.16。由此可見,在羰基物與DNPH反應體系中,高氯酸濃度大小為非常重要的一個參數(shù),尤其對丙烯醛、巴豆醛和2-丁酮衍生化反應影響很大。當高氯酸濃度為7.0%時,8種羰基物的2,4-二硝基苯腙的響應均達到最大。因此,選擇高氯酸濃度為7.0%。

    2.4.3 反應時間

    反應時間是衍生過程的重要參數(shù),當電子煙液中的羰基物與DNPH反應一段時間后,加入一定量吡啶終止衍生反應,以評價反應時間對測定結(jié)果的影響。圖3c表明,當反應時間為30 min時,除甲醛外,其余7種羰基物與DNPH反應完全,繼續(xù)增加反應時間至100 min,該7種羰基物的腙類衍生物無明顯變化。甲醛與DNPH反應較慢,當反應時間為60 min時,甲醛-2,4-二硝基苯腙的響應達到最大。因此,選擇反應時間為60 min。

    2.5 加入吡啶的確定

    文獻研究表明,丙烯醛和巴豆醛的DNPH腙類衍生物在酸性條件下易發(fā)生聚合反應[11-12]。因此在電子煙液中的羰基物與DNPH反應完全后,加入一定量吡啶中和溶液中過量的酸。考察了吡啶對電子煙液中丙烯醛和巴豆醛測定結(jié)果的影響,對樣品溶液每小時取樣測定1次,持續(xù)測定10 h。結(jié)果顯示,加入適量吡啶后,丙烯醛和巴豆醛的相對標準偏差均小于6%;而不添加吡啶時,兩種分析物的響應逐漸降低,相對標準偏差均大于20%。

    2.6 方法表征

    分別對系列標準工作溶液進行LC-MS/MS分析,以羰基物腙類衍生物與內(nèi)標的峰面積比對相應羰基物的濃度進行線性回歸,得到各羰基物的標準工作曲線(表2)??芍?,標準曲線線性關系良好,相關系數(shù)均大于0.999。以3倍信噪比(S/N=3)計算檢測限(LOD),10倍信噪比(S/N=10)計算定量限(LOQ),8種羰基物的檢測限在5~28 ng/g之間,定量限在17~93 ng/g之間。

    表2 8種羰基物的線性方程、相關系數(shù)、檢測限和定量限Tab.2 Linear equations,correlation coefficients,LODs and LOQs of eight carbonyls

    在電子煙液樣品中分別加入低、中、高3個濃度水平進行加標回收率實驗。由表3可知,8種羰基物的平均加標回收率在92.5%~106.4%之間。對加標樣品進行5次日內(nèi)和日間平行測定,8種羰基物日內(nèi)和日間的相對標準偏差分別在3.2%~6.2%和4.1%~7.9%之間。

    表3 8種羰基物的回收率、日內(nèi)和日間精密度Tab.3 Recoveries,intra-and inter-day precisions of eight carbonyls

    2.7 實際樣品分析

    采用該方法測定了22種電子煙液樣品中8種羰基物的質(zhì)量分數(shù),如表4所示。結(jié)果發(fā)現(xiàn):①所測電子煙液樣品中均含有甲醛和乙醛,甲醛質(zhì)量分數(shù)在0.19~13.84μg/g之間,乙醛質(zhì)量分數(shù)在0.63~9.60μg/g之間。②有15種樣品中檢出丙酮,檢出率為68.2%,其中14種樣品中的質(zhì)量分數(shù)均小于1μg/g;僅1種樣品中質(zhì)量分數(shù)較高,為7.15μg/g。③丙烯醛、丙醛、巴豆醛、2-丁酮和丁醛的檢出率分別為31.8%、45.4%、9.1%、31.8%、13.6%,且這5種羰基物的質(zhì)量分數(shù)均小于1μg/g。

    表4 22種電子煙液樣品中8種羰基物的分析結(jié)果Tab.4 Analytical results of eight carbonyls in 22 e-liquid samples (μg·g-1)

    3 結(jié)論

    ①建立的水分散-DNPH衍生結(jié)合LC-MS/MS同時測定電子煙液中8種低分子量羰基物的方法,可有效消除基質(zhì)干擾,溶劑背景小,樣品溶液均一、穩(wěn)定;②該方法線性良好、靈敏度和精密度高、抗干擾能力強,前處理過程簡單、快速,適合大批量電子煙液樣品中8種羰基物的準確檢測。

    猜你喜歡
    二硝基苯丙烯醛羰基
    SiO2包覆羰基鐵粉及其涂層的耐腐蝕性能
    陶瓷學報(2021年5期)2021-11-22 06:35:34
    精制間二硝基苯中甲氧基化反應的優(yōu)化
    楊梅素-丙烯醛加合物抗氧化及捕獲丙烯醛活性
    食品科學(2020年23期)2020-12-31 01:31:34
    氣相色譜質(zhì)譜法測定地表水中二硝基苯
    分析儀器(2020年4期)2020-09-03 08:28:42
    在人類癌細胞中丙烯醛優(yōu)先損害核仁并引發(fā)核糖體應激和細胞凋亡
    DNPH衍生化采樣-溶劑解析-高效液相色譜法同時測定木制品中25種醛酮化合物
    丙烯醛的工業(yè)生產(chǎn)工藝及其下游產(chǎn)品的開發(fā)
    固相萃取-氣質(zhì)聯(lián)用法測定固體廢物浸出液中的二硝基苯
    甘油脫水合成丙烯醛ZSM-5催化劑的孔結(jié)構(gòu)和酸性調(diào)控
    1-叔丁基氧羰基-2'-氧-螺-[氮雜環(huán)丁烷-3,3'-二氫吲哚]的合成
    應用化工(2014年1期)2014-08-16 13:34:08
    天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 男人舔女人的私密视频| 在线看a的网站| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 高清在线视频一区二区三区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 啦啦啦在线免费观看视频4| 欧美精品高潮呻吟av久久| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲精品一二三| 各种免费的搞黄视频| 飞空精品影院首页| 欧美在线一区亚洲| 国产成人免费无遮挡视频| 一区福利在线观看| 亚洲av成人精品一二三区| 少妇人妻精品综合一区二区| 女性生殖器流出的白浆| 亚洲精品国产一区二区精华液| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产免费又黄又爽又色| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲,一卡二卡三卡| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 最近中文字幕2019免费版| 国产精品人妻久久久影院| 老司机在亚洲福利影院| 精品一区二区三卡| 一级,二级,三级黄色视频| 夫妻午夜视频| 亚洲欧洲日产国产| 久久精品久久久久久久性| 97在线人人人人妻| 久热这里只有精品99| 免费在线观看黄色视频的| 又黄又粗又硬又大视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产精品一区二区在线不卡| 国产成人a∨麻豆精品| 黄片小视频在线播放| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲精品国产av成人精品| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产 一区精品| 一级毛片我不卡| 秋霞伦理黄片| 操出白浆在线播放| 丝袜脚勾引网站| 成年人免费黄色播放视频| 丝袜在线中文字幕| 国产成人精品在线电影| 中国三级夫妇交换| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲精品乱久久久久久| 最近的中文字幕免费完整| 国产高清不卡午夜福利| 黄片无遮挡物在线观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 欧美精品亚洲一区二区| videosex国产| 青春草亚洲视频在线观看| av在线app专区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产精品久久久久成人av| 免费在线观看完整版高清| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 成年av动漫网址| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 啦啦啦啦在线视频资源| 久久精品久久久久久久性| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲熟女毛片儿| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 精品国产超薄肉色丝袜足j| 成年人午夜在线观看视频| av不卡在线播放| 9色porny在线观看| 中文字幕色久视频| 哪个播放器可以免费观看大片| 欧美xxⅹ黑人| 亚洲精品美女久久av网站| 日本91视频免费播放| 飞空精品影院首页| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产精品一区二区精品视频观看| 黄色视频在线播放观看不卡| 秋霞在线观看毛片| 婷婷色综合www| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产 一区精品| 一区二区三区精品91| 婷婷色麻豆天堂久久| 考比视频在线观看| 午夜免费观看性视频| 午夜免费观看性视频| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲精品在线美女| 97在线人人人人妻| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 熟妇人妻不卡中文字幕| videos熟女内射| 国产深夜福利视频在线观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产在线一区二区三区精| av视频免费观看在线观看| 亚洲,欧美精品.| 久热这里只有精品99| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 看十八女毛片水多多多| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 国产av码专区亚洲av| 丰满少妇做爰视频| 亚洲情色 制服丝袜| 日本vs欧美在线观看视频| 午夜老司机福利片| 观看av在线不卡| 国产精品一国产av| 欧美在线一区亚洲| 成年人免费黄色播放视频| 18禁国产床啪视频网站| 欧美老熟妇乱子伦牲交| h视频一区二区三区| 亚洲精品国产av成人精品| 亚洲熟女精品中文字幕| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲精品,欧美精品| 中文字幕制服av| 又大又黄又爽视频免费| avwww免费| 超碰成人久久| xxx大片免费视频| 精品酒店卫生间| 另类精品久久| 亚洲av成人精品一二三区| 国产精品成人在线| 精品酒店卫生间| 熟妇人妻不卡中文字幕| 一级毛片我不卡| 一区二区三区乱码不卡18| 久久国产亚洲av麻豆专区| 欧美日韩视频精品一区| 岛国毛片在线播放| 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 男人舔女人的私密视频| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 久久久久国产一级毛片高清牌| 中国三级夫妇交换| 亚洲精品视频女| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 久久久久久久久久久久大奶| 最近中文字幕2019免费版| 欧美精品一区二区大全| 日韩大码丰满熟妇| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 久久 成人 亚洲| 婷婷成人精品国产| 蜜桃在线观看..| 久久久国产精品麻豆| 国产精品偷伦视频观看了| 久久久久久久久免费视频了| 热re99久久精品国产66热6| 精品视频人人做人人爽| av网站免费在线观看视频| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 精品少妇内射三级| 亚洲av在线观看美女高潮| 青春草视频在线免费观看| 久久女婷五月综合色啪小说| 这个男人来自地球电影免费观看 | 国产日韩欧美亚洲二区| 国产一卡二卡三卡精品 | 亚洲av成人精品一二三区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产片特级美女逼逼视频| 国产又爽黄色视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 一区二区av电影网| 久久精品国产综合久久久| 午夜日韩欧美国产| 激情视频va一区二区三区| 亚洲精品国产区一区二| 日日啪夜夜爽| 男人舔女人的私密视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 制服人妻中文乱码| 午夜福利视频精品| 亚洲综合精品二区| 麻豆乱淫一区二区| 精品一区二区三卡| 黄片小视频在线播放| 国产探花极品一区二区| 九草在线视频观看| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产精品 国内视频| 最新的欧美精品一区二区| 只有这里有精品99| 看非洲黑人一级黄片| 一级片'在线观看视频| 男女高潮啪啪啪动态图| 99久久综合免费| 最近手机中文字幕大全| 丝袜喷水一区| 操出白浆在线播放| 99久久综合免费| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 日本wwww免费看| 日韩成人av中文字幕在线观看| 麻豆乱淫一区二区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲精品第二区| 国产一卡二卡三卡精品 | 精品久久蜜臀av无| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 免费少妇av软件| 女人久久www免费人成看片| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 色视频在线一区二区三区| 久久人人爽人人片av| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 满18在线观看网站| 国产成人啪精品午夜网站| 91老司机精品| 乱人伦中国视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| 大码成人一级视频| 亚洲一区中文字幕在线| 成年动漫av网址| 午夜日本视频在线| 黄片播放在线免费| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 高清欧美精品videossex| 亚洲欧美一区二区三区国产| videos熟女内射| 国产免费又黄又爽又色| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产一区二区三区综合在线观看| 午夜福利,免费看| 久久人妻熟女aⅴ| 国产 一区精品| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 最黄视频免费看| 日韩大码丰满熟妇| 日韩中文字幕视频在线看片| 校园人妻丝袜中文字幕| 午夜日韩欧美国产| 欧美日韩av久久| 如何舔出高潮| 亚洲第一av免费看| 国产色婷婷99| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产极品天堂在线| 十分钟在线观看高清视频www| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲色图综合在线观看| 午夜免费鲁丝| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 黄色视频在线播放观看不卡| 91精品国产国语对白视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲欧美激情在线| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲av电影在线进入| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲精品自拍成人| 欧美精品一区二区大全| 1024香蕉在线观看| 三上悠亚av全集在线观看| 久久人人爽人人片av| 日韩免费高清中文字幕av| 欧美精品av麻豆av| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 五月开心婷婷网| 欧美日韩亚洲高清精品| 不卡av一区二区三区| 国产精品女同一区二区软件| 在线观看三级黄色| 国产黄频视频在线观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 亚洲国产看品久久| 久久久久久人妻| 精品一区二区三卡| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 久久av网站| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产男女超爽视频在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 电影成人av| 成人黄色视频免费在线看| 精品久久久久久电影网| 亚洲国产精品一区三区| 国产免费视频播放在线视频| 国产精品熟女久久久久浪| 黄色 视频免费看| 国产精品国产av在线观看| 香蕉丝袜av| 美女扒开内裤让男人捅视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产欧美亚洲国产| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产男人的电影天堂91| 亚洲精品国产av蜜桃| 久久久久久久久久久免费av| av片东京热男人的天堂| 一区二区三区激情视频| 91精品三级在线观看| 99热国产这里只有精品6| 国产在视频线精品| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 成人毛片60女人毛片免费| 精品一区在线观看国产| 欧美日韩精品网址| 亚洲成人av在线免费| av网站在线播放免费| 国产亚洲av高清不卡| 在线天堂中文资源库| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产精品久久久人人做人人爽| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 国产熟女午夜一区二区三区| av天堂久久9| 18禁观看日本| 人成视频在线观看免费观看| 精品第一国产精品| 日韩电影二区| 香蕉国产在线看| 好男人视频免费观看在线| 日本91视频免费播放| 街头女战士在线观看网站| 美女福利国产在线| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 中文天堂在线官网| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 久久久久久久国产电影| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲成人一二三区av| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲国产欧美在线一区| 老汉色∧v一级毛片| 久久国产精品大桥未久av| 久久久国产一区二区| 亚洲三区欧美一区| 久久国产精品大桥未久av| 一区在线观看完整版| 国产成人a∨麻豆精品| 欧美在线黄色| 国产精品偷伦视频观看了| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产日韩欧美亚洲二区| 高清黄色对白视频在线免费看| 91精品国产国语对白视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产精品 国内视频| 日韩欧美精品免费久久| 久久久精品免费免费高清| bbb黄色大片| 男人爽女人下面视频在线观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 亚洲综合色网址| 中文字幕制服av| 久久人妻熟女aⅴ| 久久久久精品国产欧美久久久 | 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 国产精品一区二区精品视频观看| 日韩一区二区视频免费看| 国产极品天堂在线| 午夜免费鲁丝| 乱人伦中国视频| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 亚洲色图综合在线观看| tube8黄色片| 在线天堂最新版资源| 国产精品一国产av| 久久久久精品久久久久真实原创| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 国产又爽黄色视频| 波多野结衣av一区二区av| 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 少妇 在线观看| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产熟女午夜一区二区三区| 黄色怎么调成土黄色| 美女视频免费永久观看网站| 十八禁网站网址无遮挡| 久久久亚洲精品成人影院| 国产97色在线日韩免费| 中国国产av一级| 久久精品国产综合久久久| 另类精品久久| 一个人免费看片子| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 777久久人妻少妇嫩草av网站| 如何舔出高潮| 成年人免费黄色播放视频| 午夜福利在线免费观看网站| 电影成人av| 男人操女人黄网站| 色婷婷av一区二区三区视频| 久久久久精品国产欧美久久久 | 18禁动态无遮挡网站| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 一区二区日韩欧美中文字幕| 欧美亚洲日本最大视频资源| 99国产精品免费福利视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| av有码第一页| 大香蕉久久成人网| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 咕卡用的链子| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲成色77777| a级毛片在线看网站| 视频区图区小说| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲精品第二区| 精品国产一区二区三区四区第35| 精品免费久久久久久久清纯 | 啦啦啦在线免费观看视频4| 欧美成人午夜精品| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 日韩电影二区| 交换朋友夫妻互换小说| 午夜激情久久久久久久| a级毛片黄视频| 乱人伦中国视频| 免费高清在线观看日韩| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 久久久久久免费高清国产稀缺| 免费高清在线观看日韩| 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲,欧美精品.| 成年女人毛片免费观看观看9 | 国产成人免费无遮挡视频| 男女无遮挡免费网站观看| 美女主播在线视频| 一级a爱视频在线免费观看| 母亲3免费完整高清在线观看| 好男人视频免费观看在线| 两个人免费观看高清视频| 亚洲欧洲日产国产| 十八禁高潮呻吟视频| 精品国产一区二区久久| 国产亚洲av高清不卡| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产一卡二卡三卡精品 | 国产精品嫩草影院av在线观看| kizo精华| 久久久久国产一级毛片高清牌| 在线 av 中文字幕| 成年av动漫网址| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产日韩欧美视频二区| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 自线自在国产av| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 性色av一级| 超色免费av| 日韩 亚洲 欧美在线| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 久久99热这里只频精品6学生| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 曰老女人黄片| 看十八女毛片水多多多| 免费av中文字幕在线| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 色网站视频免费| 日本爱情动作片www.在线观看| 精品一区二区三卡| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 9热在线视频观看99| 亚洲成色77777| 亚洲av国产av综合av卡| 无限看片的www在线观看| 不卡视频在线观看欧美| 丰满迷人的少妇在线观看| 久久精品国产a三级三级三级| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 少妇人妻精品综合一区二区| 成人毛片60女人毛片免费| 天美传媒精品一区二区| 精品酒店卫生间| xxxhd国产人妻xxx| 久久久久精品人妻al黑| www.熟女人妻精品国产| a级片在线免费高清观看视频| 2018国产大陆天天弄谢| 国产野战对白在线观看| 国产黄色免费在线视频| 国产黄色视频一区二区在线观看| 成年美女黄网站色视频大全免费| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 天天添夜夜摸| 午夜日韩欧美国产| 久久精品人人爽人人爽视色| 午夜免费鲁丝| 久久女婷五月综合色啪小说| 亚洲 欧美一区二区三区| 熟女av电影| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 男女床上黄色一级片免费看| 久久久久精品久久久久真实原创| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲精品第二区| 深夜精品福利| 亚洲美女黄色视频免费看| 国产成人一区二区在线| 久久99一区二区三区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产在线视频一区二区| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲五月色婷婷综合| 天天影视国产精品| 日本av免费视频播放| 色播在线永久视频| 午夜福利乱码中文字幕| 99热国产这里只有精品6| 日本欧美国产在线视频| 国产伦理片在线播放av一区| 免费观看a级毛片全部| 无限看片的www在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲美女视频黄频| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产精品.久久久| 十八禁人妻一区二区| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 日韩伦理黄色片| 99久久99久久久精品蜜桃| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 18在线观看网站| 久久久久久久精品精品| tube8黄色片| 欧美精品一区二区大全| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 嫩草影视91久久| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 制服诱惑二区| 国产免费一区二区三区四区乱码| 一区福利在线观看| 视频在线观看一区二区三区| 美女福利国产在线| 日韩欧美一区视频在线观看| 日本av免费视频播放| 久久精品久久精品一区二区三区| 日韩视频在线欧美| h视频一区二区三区| 成人国产麻豆网| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产精品二区激情视频| 亚洲av男天堂| 日本欧美国产在线视频| a级片在线免费高清观看视频| 少妇人妻久久综合中文| 韩国高清视频一区二区三区| 国产免费现黄频在线看| 久久久国产一区二区| 天堂俺去俺来也www色官网| 色94色欧美一区二区| 色综合欧美亚洲国产小说| 免费看av在线观看网站| 久久人妻熟女aⅴ| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲精品第二区| 男女床上黄色一级片免费看| 成人手机av| 五月天丁香电影| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产97色在线日韩免费| 丰满饥渴人妻一区二区三| 性高湖久久久久久久久免费观看| 国产亚洲欧美精品永久| 国产精品嫩草影院av在线观看| 成人免费观看视频高清| av又黄又爽大尺度在线免费看| 久久人人爽人人片av| 大香蕉久久网| 少妇的丰满在线观看| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 久久天堂一区二区三区四区| 人人妻人人澡人人看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 尾随美女入室| 日本一区二区免费在线视频| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲男人天堂网一区| 久久这里只有精品19| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 一级黄片播放器| 人成视频在线观看免费观看| 国产99久久九九免费精品| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| av免费观看日本|