DEK 在乳腺癌中的表達(dá)和臨床價(jià)值研究

白琳琳

乳腺癌是女性高發(fā)的三大惡性腫瘤之一,且發(fā)病率居于三者之首,該病的發(fā)生機(jī)制仍未探明,早期診斷、正確治療是改善其預(yù)后的關(guān)鍵,因而必須積極提升其診療水平,進(jìn)而改善患者預(yù)后。DEK 是惡性腫瘤的一種生物學(xué)標(biāo)志物,近年來(lái)臨床研究發(fā)現(xiàn),其與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切,但是尚未探明［1］。為此,本次研究選取2015 年1 月～2020 年1 月期間在本院行手術(shù)治療的60 例乳腺癌患者,對(duì)比分析了DEK 在乳腺癌中的表達(dá)情況和臨床價(jià)值,現(xiàn)總結(jié)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011 年1 月～2016 年1 月期間在本院行手術(shù)治療的60 例乳腺癌患者,術(shù)中進(jìn)行腫瘤和癌旁組織(正常組織)病理取樣,獲得60 份乳腺癌組織和60 份癌旁組織樣本作為研究樣本。60 例乳腺癌患者均為女性,年齡46～68 歲,平均年齡(57.12±11.02)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：病理組織學(xué)檢查確診為乳腺癌；臨床病理資料完整；隨訪治療完整；患者和家屬均自愿參與本次研究,并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：術(shù)中及術(shù)后45 d 內(nèi)未死亡者；術(shù)后失訪者；無(wú)法耐受手術(shù)治療者；組織樣本取樣不合格者等。本課題研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 患者乳腺癌組織和癌旁組織,采用免疫組織化學(xué)法對(duì)患者各組織樣本進(jìn)行免疫組化染色、鏡下觀察DEK 表達(dá)情況。同時(shí),采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)體系和實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time PCR)檢測(cè)乳腺癌組織和癌旁組織DEK信使核糖核酸(mRNA)表達(dá)水平。經(jīng)蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)乳腺癌組織和癌旁組織DEK 蛋白表達(dá)情況,經(jīng)Image J 軟件分析相對(duì)表達(dá)量。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 隨訪監(jiān)測(cè) 對(duì)60 例患者進(jìn)行隨訪,以死亡為隨訪終點(diǎn),觀察患者病情進(jìn)展和預(yù)后,統(tǒng)計(jì)患者術(shù)后2 年生存率和術(shù)后5 年生存率。

1.3.2 臨床資料分析 比較患者乳腺癌組織和癌旁組織DEK 蛋白表達(dá)情況、免疫組化結(jié)果、DEK mRNA表達(dá)水平。同時(shí),統(tǒng)計(jì)不同腫瘤大小、病理分級(jí)和預(yù)后患者的DEK 蛋白高表達(dá)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌組織與癌旁組織DEK 蛋白表達(dá)量比較 乳腺癌組織DEK 蛋白相對(duì)表達(dá)量為(4.92±1.02),高于癌旁組織的(1.56±0.58),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=22.181,P＜0.05)。

2.2 乳腺癌組織與癌旁組織免疫組化結(jié)果比較 乳腺癌組織DEK 蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為78.33%(48/60),腫瘤細(xì)胞胞漿位置高表達(dá),外觀棕黃；癌旁組織DEK 蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為8.33%(5/60),表達(dá)較弱或不表達(dá)。乳腺癌組織DEK 蛋白表達(dá)陽(yáng)性率高于癌旁組織,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=62.484,P＜0.05)。

2.3 乳腺癌組織與癌旁組織DEK mRNA 表達(dá)水平比較 乳腺癌組織DEK mRNA 平均表達(dá)量為(4.85±1.07)高于癌旁組織的(1.14±0.42),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=25.001,P＜0.05)。

2.4 不同腫瘤大小、病理分級(jí)患者DEK 蛋白高表達(dá)率比較 腫瘤大小T2、T3和T4患者DEK 蛋白高表達(dá)率均顯著高于T1患者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。腫瘤大小T2、T3和T4患者DEK 蛋白高表達(dá)率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。病理分級(jí)Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)患者DEK 蛋白高表達(dá)率均顯著高于Ⅰ級(jí)者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。病理分級(jí)Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)患者DEK 蛋白高表達(dá)率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

表1 不同腫瘤大小、病理分級(jí)患者DEK 蛋白高表達(dá)率比較(n,%)

2.5 不同預(yù)后患者DEK 蛋白表達(dá)率比較 60 例患者2 年生存率為70.00%(42/60),死亡患者乳腺癌組織DEK 蛋白高表達(dá)率為94.44%(17/18),顯著高于未死亡患者的71.43%(30/42),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.933,P＜0.05)。60 例患者5 年生存率為60.00%(36/60),死亡患者乳腺癌組織DEK 蛋白高表達(dá)率為95.83%(23/24),顯著高于未死亡患者的69.44%(25/36),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.267,P＜0.05)。

60 例患者隨訪5 年顯示,復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者共28 例,其乳腺癌組織DEK 蛋白高表達(dá)率為89.29%(25/28),顯著高于無(wú)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移患者的65.63%(21/32),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.673,P＜0.05)。

3 討論

隨著乳腺癌臨床研究的逐漸深入,部分生物標(biāo)志物在鑒別診斷乳腺癌、預(yù)測(cè)乳腺癌術(shù)后遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、預(yù)后生存情況中的臨床參考作用逐漸被發(fā)現(xiàn),其中DEK是較為典型的生物標(biāo)志物,其蛋白分子高表達(dá),與乳腺癌腫瘤大小、病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、生存情況等存在密切聯(lián)系,但是缺乏定量、定性分析數(shù)據(jù)支持,尚有待深入分析［2-4］。

乳腺癌患者DEK 蛋白表達(dá)情況相關(guān)研究顯示,免疫組化法檢測(cè)可見(jiàn)乳腺癌組織高表達(dá)情況,而正常的癌旁組織則表達(dá)較少,但是具體數(shù)值尚不明確［5,6］。本次研究中免疫組化結(jié)果顯示：乳腺癌組織DEK 蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為78.33%,癌旁組織DEK 蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為8.33%,進(jìn)一步總結(jié)可見(jiàn)乳腺癌患者存在腫瘤細(xì)胞胞漿位置高表達(dá),外觀棕黃,癌旁組織表達(dá)較弱或不表達(dá)。同時(shí),本次研究對(duì)DEK mRNA 和DEK 蛋白表達(dá)量的具體定量分析也證實(shí)了上述結(jié)論,乳腺癌組織DEK蛋白相對(duì)表達(dá)量為(4.92±1.02),顯著高于癌旁組織的(1.56±0.58),且乳腺癌組織DEK mRNA 平均表達(dá)量為(4.85±1.07)高于癌旁組織的(1.14±0.42),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),可知乳腺癌腫瘤組織存在DEK 蛋白高表達(dá)情況,與癌旁組織差異顯著,提示DEK 蛋白可作為鑒別診斷的參考指標(biāo)。同時(shí),有研究指出,不同腫瘤大小與病理分級(jí)的乳腺癌腫瘤組織,DEK 蛋白高表達(dá)率存在較大差異,但無(wú)明確結(jié)果［7］。本次研究發(fā)現(xiàn)腫瘤大小T2、T3和T4患者DEK 蛋白高表達(dá)率均顯著高于T1患者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。病理分級(jí)Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)患者DEK 蛋白高表達(dá)率均顯著高于Ⅰ級(jí)患者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示腫瘤大小T1和病理分級(jí)Ⅰ級(jí)患者DEK 蛋白表達(dá)率較低,腫瘤大小T2、T3和T4和病理分級(jí)Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)患者DEK 蛋白高表達(dá)率均較高,應(yīng)密切監(jiān)測(cè)其預(yù)后。此外,本次研究隨訪還發(fā)現(xiàn),DEK 蛋白高表達(dá)與患者的預(yù)后存在一定聯(lián)系,60 例患者2 年生存率為70.00%(42/60),死亡患者乳腺癌組織DEK 蛋白高表達(dá)率94.44%,顯著高于未死亡患者的71.43%,5 年生存率為60.00%(36/60),死亡患者乳腺癌組織DEK 蛋白高表達(dá)率為95.83%仍顯著高于未死亡患者的69.44%,且隨訪5 年顯示,復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者共28 例,其乳腺癌組織DEK 蛋白高表達(dá)率為89.29%顯著高于無(wú)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移患者的65.63%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示DEK 蛋白高表達(dá)者預(yù)后較差,術(shù)后復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)較高,生存時(shí)間較短,死亡率高,不良預(yù)后占比較高。

綜上所述,乳腺癌患者存在腫瘤組織DEK 蛋白高表達(dá)情況,而其表達(dá)水平與腫瘤大小、病理分級(jí)、預(yù)后情況存在一定聯(lián)系,DEK 基因具有潛在的鑒別、診斷與預(yù)后評(píng)估價(jià)值。