基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對(duì)生姜藥用活性成分的發(fā)現(xiàn)和作用機(jī)制分析

★ 雷丹 洪滔 伍慶華 羅小泉,4 陳來(lái),4 劉志勇,4（.江西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技中心 南昌 0004；.江西中醫(yī)藥大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院 南昌 0004；.江西中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院 南昌 0004；4.江西省中藥藥理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 南昌 0004）

生姜（Zingiberofficinale Roscoe）屬于姜科多年生草本植物姜的新鮮根狀莖部分，是人們喜歡用的調(diào)味品或菜肴，具有溫中止嘔、溫肺止咳、發(fā)散風(fēng)寒等功效［1］，現(xiàn)在被列為藥食兩用的中藥材?；瘜W(xué)成分分析顯示生姜中有多達(dá)100余種化學(xué)成分，分屬揮發(fā)油、姜辣素、二苯基庚烷三大類(lèi)［2］。國(guó)內(nèi)外研究表明，生姜的主要藥理作用有止吐、抗腫瘤、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、抗炎等［3-5］。近年來(lái)，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析技術(shù)的出現(xiàn)，應(yīng)用文本挖掘等方法建立生物信息關(guān)系網(wǎng)絡(luò)，解析網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)并進(jìn)行中藥作用的多靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，為新藥研發(fā)提供新思路［6-9］。在綜合中藥系統(tǒng)藥理學(xué)解析平臺(tái)（TCMSP）和batman數(shù)據(jù)庫(kù)的基礎(chǔ)上，應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的分析技術(shù)對(duì)生姜的主要功能物質(zhì)進(jìn)行細(xì)分，并結(jié)合功能成分分析作用靶點(diǎn)、有關(guān)生物信號(hào)路徑和疾病信息，研究了生姜的主要活性成分的功能及其發(fā)揮藥理作用的機(jī)制，為生姜的深入開(kāi)發(fā)和多層次應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。

1 資料獲得與方法

1.1 數(shù)據(jù)庫(kù)與處理軟件［10-16］數(shù)據(jù)庫(kù)（中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析與TCMSP）（https://tcmspw.com/tcmsp.php）；BATMAN-TCM線(xiàn)上解析數(shù)據(jù)庫(kù)（http://bionet.ncpsb.org/batman-tcm/）；UniProt蛋白質(zhì)通用數(shù)據(jù)庫(kù)（http：// www.uniprot. org/uploadlists/）；CTD數(shù) 據(jù)庫(kù)（http://ctdbase.org/）；蛋白質(zhì)互作平臺(tái)STRING V 10.5（https：//string-db.org/）；生物學(xué)信息注釋數(shù) 據(jù) 庫(kù)DAVID V 6.8（https：//david.ncifcrf.gov/）；cytoscape 3.7.2作圖軟件。

1.2 主要活性成分的收集和靶點(diǎn)獲取本研究通 過(guò) 檢 索TCMSP（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，中藥系統(tǒng)藥理數(shù)據(jù)庫(kù)和分析平臺(tái)）相關(guān)信息，對(duì)獲得的生姜所有活性成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行了篩分選擇，其中篩分條件為：經(jīng)口服藥的生物利用度（oral bioavailability，OB）≥30 %、藥物相似的類(lèi)藥性（drug-likeness，DL）≥0.18［10］；其中OB一般認(rèn)為是評(píng)價(jià)藥物是否發(fā)揮藥效的一個(gè)參考指標(biāo)［17］，DL代表發(fā)現(xiàn)成分與已知西藥的相似度，對(duì)確定中藥成分是否在機(jī)體產(chǎn)生作用具有重要參考意義［18］。采用 TCMSP 靶點(diǎn)預(yù)測(cè)模型對(duì)相關(guān)活性功能成分作用靶點(diǎn)加以預(yù)測(cè),通過(guò)UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)獲取有關(guān)作用點(diǎn)的DNA片段（基因）名稱(chēng)。利用相關(guān)軟件建立生姜“活性功能成分-作用點(diǎn)”的關(guān)系圖，用互聯(lián)的拓?fù)鋵W(xué)技術(shù)分析關(guān)系圖，并探討其主要功能活性物質(zhì)成分與作用點(diǎn)之間的關(guān)聯(lián)。

1.3 作用靶點(diǎn)-相關(guān)疾病網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建將生姜主要功能物質(zhì)作用點(diǎn)的關(guān)聯(lián)基因?qū)氲紺TD數(shù)據(jù)線(xiàn)上解析平臺(tái)（tp：//ctdbase.org/）數(shù)據(jù)庫(kù)，得到與作用點(diǎn)有關(guān)的疾病信息，解析生姜在疾病治療中的作用，同時(shí)結(jié)合已發(fā)表的文獻(xiàn)研究生姜治療的主要疾病，選擇分析軟件Cytoscape 3.7.2（該軟件具有網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵傩裕┸浖⑸饔命c(diǎn)-疾病信息的關(guān)聯(lián)。在該關(guān)系結(jié)構(gòu)中，代表靶作用的蛋白以節(jié)點(diǎn)表示，代表作用點(diǎn)的相互作用則以“邊”來(lái)表示。采用網(wǎng)絡(luò)分析功能，分析網(wǎng)絡(luò)的拓?fù)鋵傩?，?jì)算其“介數(shù)中心性（Betweennesscentrali-ty）”和“節(jié)點(diǎn)度值分布（Node de-greedistribution）” 參數(shù)［19-20］（節(jié)點(diǎn)度值反映了一個(gè)靶作用蛋白與其他靶作用蛋白的連接的多少，而介數(shù)則是經(jīng)過(guò)這一靶蛋白的路徑占最短路徑總數(shù)的比，度值和介數(shù)是量化指標(biāo)，用以評(píng)價(jià)一個(gè)靶蛋白（節(jié)點(diǎn)）在網(wǎng)絡(luò)中的重要性，具有高的度值和介數(shù)值節(jié)點(diǎn)可以成為后續(xù)新藥的發(fā)現(xiàn)和靶點(diǎn)預(yù)測(cè)提供線(xiàn)索），故此最后利用該屬性分析來(lái)尋找生姜發(fā)揮藥效作用的主要功能成分。

1.4 相關(guān)靶蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)的建構(gòu)為研究生姜主要活性功能成分有關(guān)靶作用蛋白之間的聯(lián)系，在STRING平臺(tái)上建立其相互作用靶蛋白之間的PPI網(wǎng)絡(luò)。在運(yùn)行前需要進(jìn)行有關(guān)設(shè)置，首先需要將物種設(shè)為人類(lèi)（Homo sapiens），其次要將最低相互作用閥值設(shè)為中等置信度（Medium confidence），一般為0.4，其余參數(shù)的設(shè)置保持默認(rèn)就可以了，然后通過(guò)軟件對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)鋵傩赃M(jìn)行研究，繼而篩選并討論P(yáng)PI網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵靶作用蛋白。

1.5 生物過(guò)程和通路分析基于上述結(jié)果，通過(guò)生物學(xué)信息注釋數(shù)據(jù)庫(kù)DAVID 6.8，篩選出最多富集的生物學(xué)注釋。對(duì)生姜主要活性功能成分的靶基因采用KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行路徑和基因本體GO的相關(guān)生物過(guò)程富集，以分析生姜主要活性功能成分作用點(diǎn)的主要代謝路徑及GO生物過(guò)程（結(jié)果中如P＜0.05則判為具有關(guān)聯(lián)性）。

2 結(jié)果

2.1 生姜化學(xué)成分篩選通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)篩選潛在的活性化合物，共獲得生姜的化學(xué)成分共265個(gè)，對(duì)其在體內(nèi)的吸收、分布、代謝、排泄（ADME）過(guò)程中的性質(zhì)進(jìn)行評(píng)價(jià)，最終以O(shè)B≥30%和DL≥0.18作為化合物篩分選擇的條件，結(jié)合CNKI文獻(xiàn)報(bào)道，共獲得10個(gè)活性功能成分，如豆甾醇、β-谷甾醇、6-姜酚、6-姜烯酚等。把靶點(diǎn)名稱(chēng)輸入U(xiǎn)niProt數(shù)據(jù)庫(kù)，獲得其相應(yīng)人源靶點(diǎn)的基因名稱(chēng)。其中二氫辣椒堿（Dihydrocapsaicin）、8-姜酚（8-gingerol）未在TCMSP平臺(tái)上查到相關(guān)作用靶點(diǎn)信息，因此共獲得生姜的主要活性功能成分8個(gè)，如表1所示。

表1 生姜主要活性成分基本信息

2.2 “活性功能成分-作用靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖分析將篩分出的8個(gè)活性功能成分和其相互作用的靶點(diǎn)通過(guò)軟件構(gòu)建成網(wǎng)絡(luò)圖，如圖1所示。圖1包含82個(gè)節(jié)點(diǎn)（8個(gè)活性功能成分和74個(gè)相關(guān)作用靶點(diǎn)）和119條線(xiàn)，功能活性成分以圓圖標(biāo)表示，相關(guān)作用靶點(diǎn)以三角形表示，活性功能成分與相關(guān)靶點(diǎn)之間的關(guān)系則以線(xiàn)條來(lái)表示。目前普遍認(rèn)為度值和節(jié)點(diǎn)與活性功能成分的重要性呈正相關(guān)性的關(guān)系，值越大，相應(yīng)的節(jié)點(diǎn)在活性成分靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖中越重要［21］。圖1中，MOL000358（β-谷甾醇）的度值為38，表明這個(gè)活性功能成分的靶點(diǎn)共有38個(gè)，最大。MOL000449（豆甾醇）度值為31，MOL002467（6-姜酚）的度值為26，靶點(diǎn)較多的成分提示其在生姜的藥理作用中就可能起到關(guān)鍵作用。生姜在越來(lái)越多的研究中顯示具有抗炎、抗腫瘤等廣泛生理活性［22-23］；β-谷甾醇、豆甾醇對(duì)人肝癌細(xì)胞活性具有明顯的增殖抑制作用生姜揮發(fā)油研究進(jìn)展，6-姜酚對(duì)人乳腺癌細(xì)胞遷移有明顯的抑制作用；生姜主要活性成分中MOL001771（B-谷甾醇）的度值為2，最低，可見(jiàn)，不同活性功能成分的作用靶點(diǎn)數(shù)量是不一樣，作用靶點(diǎn)的差異體現(xiàn)了其發(fā)揮藥理作用的強(qiáng)度不一樣。相關(guān)靶點(diǎn)ADRA1B、SCN5A、ADRB2、CHRM1的度值均為4，說(shuō)明這些可能是生姜發(fā)揮整體藥效的關(guān)鍵靶點(diǎn)，作用靶點(diǎn)與多個(gè)有效成分具有相互作用關(guān)系，表明生姜發(fā)揮其藥理作用是多靶點(diǎn)協(xié)同作用的結(jié)果。

圖1 活性成分-靶點(diǎn)圖

2.3 “成份靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)圖分析通過(guò)CTD在線(xiàn)分析平臺(tái)分析成份與靶點(diǎn)有關(guān)的疾病， ACHE、BCL2L1、GBRA2、GBRA3、GBRA5、LACTBL1暫 時(shí)沒(méi)有找到相關(guān)的疾病信息，刪除這部分作用點(diǎn)，共獲得65個(gè)與疾病相關(guān)的點(diǎn)。通過(guò)軟件構(gòu)建“成份作用靶點(diǎn) - 疾病”網(wǎng)絡(luò)圖，包含65個(gè)靶作用點(diǎn)和34種相關(guān)疾病，共99個(gè)節(jié)點(diǎn)和2 271條線(xiàn)。圖中“V”代表相關(guān)疾病，相關(guān)靶點(diǎn)以方形圖代表， “線(xiàn)”代表活性功能成分與疾病靶點(diǎn)的關(guān)系，如圖2所示。34種有關(guān)疾病包括腫瘤、心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、免疫系統(tǒng)疾病等?！俺煞葑饔冒悬c(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)圖中度值較大的疾病包括腫瘤、心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、血管疾病等，表明生姜的主要活性成分可能有利于治療腫瘤、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管疾病等都有作用。其度值較大的靶作用點(diǎn)有PTGS2等，與其相關(guān)的疾病分別有41、40、40、39個(gè)，表明這些靶作用點(diǎn)在生姜治療的疾病中可以發(fā)揮比較大的作用，也體現(xiàn)了生姜治療疾病的多成分、多靶點(diǎn)的協(xié)同作用的特性。

圖2 靶點(diǎn)-疾病圖

2.4 靶作用蛋白PPI網(wǎng)絡(luò)分析生姜靶蛋白PPI聯(lián)系圖顯示有63個(gè)交匯節(jié)點(diǎn)（6個(gè)靶蛋白未參與蛋白的相互作用分析）、反應(yīng)作用連線(xiàn)300條。經(jīng)計(jì)算，PPI 聯(lián)系圖中度值平均為10.526，介數(shù)平均為0.025。進(jìn)一步把度值、介數(shù)都排序在前1/3的作用蛋白（排名前19的作用蛋白）建立交集，區(qū)分出度值高、介數(shù)大的作用蛋白共有9個(gè)，提示這些作用靶蛋白是生姜發(fā)揮治療作用的PPI關(guān)系網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵靶作用點(diǎn)，在該關(guān)系圖中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。關(guān)鍵作用點(diǎn)及拓?fù)鋮?shù)見(jiàn)表2。

表2 生姜靶蛋白PPI關(guān)系圖中的關(guān)鍵作用點(diǎn)及其拓?fù)鋮?shù)

2.5 代謝通路 KEGG分析生姜主要功能功能成分中67個(gè)作用基因中有59個(gè)富集在KEGG代謝通路中，牽涉74條KEGG代謝通路，其中P≤0.05 的信號(hào)通路有65條，將相關(guān)性排序前十的生物功能如表3所示?；驍?shù)目較多的主要代謝通路有：癌癥信號(hào)通路、尿液配體-受體相互作用、乙型肝炎、Ca2+信號(hào)通路、癌中的蛋白聚糖代謝、3K-Akt信號(hào)通路、酒精性脂肪肝?。∟AFLD）、MP信號(hào)通路、視光、直腸癌、嗎啡成癮、可卡因成癮、甲狀腺激素信號(hào)通路、心肌細(xì)胞中的神經(jīng)信號(hào)、PK信號(hào)通路，另有P＞0.05的茶堿和其他因子調(diào)節(jié)的鈣重吸收、ll樣受體信號(hào)通路、子宮癌、卵母細(xì)胞跨內(nèi)皮遷移、D樣受體信號(hào)通路、Tural殺傷細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性、花生四烯酸代謝等信號(hào)通路,但這些通路在其他文獻(xiàn)中報(bào)道也與生姜治療疾病的過(guò)程有關(guān)。由此可見(jiàn)，生姜具有通過(guò)調(diào)節(jié)多條代謝通路的能力進(jìn)而發(fā)揮治療疾病的作用。

表3 生姜主要活性功能成分代謝通路與相關(guān)靶基因

2.6 GO生物過(guò)程分析將上述得到的74個(gè)靶點(diǎn)輸入到DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)中，通過(guò)生物學(xué)功能富集以分析其生物學(xué)過(guò)程。共得到212條生物過(guò)程，其中有顯著差異的生物過(guò)程共有159條，將排序前十的相關(guān)性生物功能列入表4所示。GO分析生姜相關(guān)靶點(diǎn)的生物學(xué)功能分布發(fā)現(xiàn)，主要影響的生物過(guò)程有與藥物反應(yīng)、AC激活腎上腺素能受體信號(hào)通路、神經(jīng)元凋亡過(guò)程的正調(diào)控、與雌二醇反應(yīng)、突觸傳遞（膽堿能）、平滑肌收縮的正調(diào)控、AC抑制G蛋白偶聯(lián)乙酰膽堿受體信號(hào)通路、磷脂酶C激活G蛋白偶聯(lián)的乙酰膽堿受體信號(hào)通路、與脂多糖反應(yīng)、磷脂酶C激活G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路等。

表4 生姜主要活性成分GO生物過(guò)程與靶基因

3 討論

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)能在一定程度上反映生物大分子與化學(xué)成分之間的相互作用,通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法篩選出中藥更有效的活性成分,能夠?yàn)楦嗅槍?duì)性的中藥研究提供基礎(chǔ)［25］。生姜是一種姜科藥食兩用的中藥,具有具有解表散寒、溫中止嘔、化痰止咳等功效,臨床常用于治療治風(fēng)濕痛、腰腿痛，胃、十二指腸潰瘍，瘧疾，急性細(xì)菌性痢疾，急性睪丸炎等，還具有止吐、抗腫瘤、抗氧、抗菌、抗過(guò)敏、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的作用［1］。為進(jìn)一步闡述中藥生姜的藥理作用及其作用機(jī)制,借助TCSMP分析平臺(tái),以ADME的參數(shù)OB、DL為閾值,篩選出生姜中具有較好OB、DL的優(yōu)效化合物,并構(gòu)建了化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò),探索生姜的優(yōu)效化合物與靶點(diǎn)之間的關(guān)系,并對(duì)靶點(diǎn)進(jìn)行了基因水平的功能注釋。為生姜的優(yōu)效化合物所對(duì)應(yīng)的多靶點(diǎn)、多途徑的藥理作用機(jī)制提供了研究基礎(chǔ)。

生姜的成分復(fù)雜,通過(guò)篩選得出的分子靶標(biāo)可能是生姜發(fā)揮藥理機(jī)制的關(guān)鍵物質(zhì)基礎(chǔ)。研究證實(shí)，生姜的主要活性成分6-姜酚和6-姜烯酚可以通過(guò)不同的機(jī)制觸發(fā)胃癌腫瘤細(xì)胞的凋亡［26］。β-谷甾醇（beta-sitosterol）是植物甾醇類(lèi)成分之一，存在于某些植物藥中，具有降血脂、抗癌、抗炎癥等作用，目前β-谷甾醇已應(yīng)用到醫(yī)藥行業(yè)中［27］。且β-谷甾醇、豆甾醇（Stigmasterol）還被研究表明具有抑制人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的抗腫瘤作用［28］。姜酮（zingerone）是生姜及其制品中清除自由基的一種有效成分［29］。10-姜酚（10-gingerol）能劑量依賴(lài)性的抑制肝癌HepG2細(xì)胞的增殖，抑制Src及其下游的STAT3的激活［30］。說(shuō)明生姜的優(yōu)效成分篩選方法的可行性，且生姜可通過(guò)這些優(yōu)效成分從而治療如癌癥、炎癥、心血管等疾病及發(fā)揮抗氧化作用。

化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)中的靶點(diǎn)共有65個(gè)與疾病有關(guān),進(jìn)一步將生姜的靶點(diǎn)進(jìn)行PPI分析得到9個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn),包括TP53、CASP3、JUN、MMP9、RELA、PPARG、HSP90AA1、ACHE、MAOA等。提示生姜可能通過(guò)優(yōu)效化合物與篩選出的關(guān)鍵靶點(diǎn)相互作用從而對(duì)疾病起到治療作用。TP53，也稱(chēng)p53，通過(guò)調(diào)節(jié)凋亡、細(xì)胞生長(zhǎng)，影響腫瘤血管的生成等過(guò)程發(fā)揮抗癌的作用，并在基因組穩(wěn)定性中起作用［31］。CASP3（Caspase 3）是一種蛋白質(zhì)編碼基因，CASP3被發(fā)現(xiàn)對(duì)于正常的大腦發(fā)育是必需的，并且在細(xì)胞凋亡中也起著典型的作用，它負(fù)責(zé)染色質(zhì)的濃縮和DNA片段化［32］。JUN是一種蛋白質(zhì)編碼基因，相關(guān)疾病有百日咳和肉瘤，途徑包括ATM途徑以及理化特性與毒性相關(guān)途徑，其編碼的蛋白c-jun，水平的周期性變化在腺上皮細(xì)胞的增殖和凋亡中具有重要意義［33］。MMP9（Matrix Metallopeptidase 9）為MMP家 族的一員，MMP家族是一類(lèi)金屬蛋白酶是鈣依賴(lài)性鋅含內(nèi)肽酶，其在正常的生理過(guò)程中參與細(xì)胞外基質(zhì)的分解，例如胚胎發(fā)育、繁殖、血管生成、骨骼發(fā)育、傷口愈合、細(xì)胞遷移、學(xué)習(xí)和記憶、以及病理過(guò)程如關(guān)節(jié)炎、腦出血和轉(zhuǎn)移［34-35］。RELA，也稱(chēng)為p65，是一種與REL相關(guān)的蛋白，參與NF-κB異二聚體的形成，核易位和激活，已經(jīng)研究證明RELA可調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，并且RELA的活化與多種類(lèi)型的癌癥正相關(guān)［36］。PPARG（Peroxisome proliferator-activated receptor gamma）是一種蛋白質(zhì)編碼基因，與其相關(guān)的疾病包括脂肪營(yíng)養(yǎng)不良、家族性疾病、頸動(dòng)脈內(nèi)膜—中層厚度。HSP90AA1（Heat Shock Protein 90 Alpha Family Class A Member 1）基因在大多數(shù)腫瘤中沒(méi)有改變,目前發(fā)現(xiàn)膀胱癌的改變次數(shù)最多,其次是胰腺癌,在許多腫瘤中，HSP90AA1基因是純合缺失的，這表明這些腫瘤可能具有降低的惡性程度［37-38］。ACHE（Acetylcholinesterase），也稱(chēng)酰水解酶，是體內(nèi)的主要膽堿酯酶。它是一種酶的是催化的擊穿乙酰膽堿和其他一些的膽堿該函數(shù)酯作為神經(jīng)遞質(zhì)，主要存在于神經(jīng)肌肉接頭和膽堿能型化學(xué)突觸中，其活性可終止突觸傳遞，是神經(jīng)毒劑和殺蟲(chóng)劑等有機(jī)磷化合物抑制的主要靶點(diǎn)。MAO-A是正常大腦功能的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。它可通過(guò)氧化脫氨作用降解胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)，例如多巴胺，去甲腎上腺素和5-羥色胺，能夠以應(yīng)對(duì)諸如缺血和炎癥等應(yīng)激反應(yīng)［39］。說(shuō)明生姜可能是調(diào)控這些核心基因或者網(wǎng)絡(luò)中的其他基因從而調(diào)控如癌癥、炎癥、心血管疾病、行為和神經(jīng)疾病等。

GO與KEGG分析提示生姜的生物功能主要富集在藥物反應(yīng)、AC激活腎上腺素能受體信號(hào)通路、神經(jīng)元凋亡過(guò)程的正調(diào)控、與雌二醇反應(yīng)、突觸傳遞（膽堿能）、平滑肌收縮的正調(diào)控的過(guò)程。通路主要富集于癌癥信號(hào)通路、尿液配體-受體相互作用、乙型肝炎、Ca2+信號(hào)通路、癌中的蛋白聚糖代謝、3K-Akt信號(hào)通路、酒精性脂肪肝病（NAFLD）、PK信號(hào)通路等相關(guān)通路。其中，癌癥信號(hào)通路不僅在KEGG為顯著性較高的通路，p53和RELA、HSP90AA1等癌癥相關(guān)蛋白在PPI網(wǎng)絡(luò)中也處于中心地位，且PPI網(wǎng)絡(luò)中中心靶點(diǎn)CASP3和MMP9是細(xì)胞凋亡和遷移通路的主要蛋白，說(shuō)明生姜可能是通過(guò)調(diào)控這些靶點(diǎn)，從而促腫瘤細(xì)胞凋亡或抑制腫瘤細(xì)胞的遷移等，而起到抗腫瘤的作用。

4 結(jié)論

本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的技術(shù)與方法，描繪了生姜多種功能成分-多作用靶點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系，再次印證了中藥起效是通過(guò)“多成分、多靶點(diǎn)”作用的特點(diǎn)。同時(shí)這個(gè)方法可以繼續(xù)用于虛擬篩選生姜有效物質(zhì)并發(fā)現(xiàn)其作用靶點(diǎn)，進(jìn)一步闡明生姜活性功能成分、作用靶點(diǎn)、影響通路之間相互作用關(guān)系，對(duì)于發(fā)現(xiàn)生姜及其活性功能成分可以通過(guò)多個(gè)作用靶點(diǎn)、多條代謝通路發(fā)揮藥理藥效作用，為進(jìn)一步研究生姜藥理藥效機(jī)制提供理論依據(jù)。但我們這次的研究也有不足之處，目前工作僅是基于數(shù)據(jù)庫(kù)的分析，通過(guò)數(shù)據(jù)搜集獲取的資料對(duì)藥物的功效進(jìn)行預(yù)測(cè)，后續(xù)要更深入了解生姜的藥效物質(zhì)還需要設(shè)計(jì)一些試驗(yàn)加以驗(yàn)證；此次分析的方法,也只是通過(guò)OB和DL的篩分為條件,與生姜的實(shí)際吸收情況有一定的差距,也存在著一定的限制，因?yàn)樗幬锏奈绽貌粌H僅局限于口服，而且口服生物利用度低的成分也需要重視起來(lái)，恰恰是這些成分可能存在更廣泛的治療作用，但本研究為生姜藥用價(jià)值的進(jìn)一步合理開(kāi)發(fā)提供了一個(gè)思路。