黃果梨種苗高效嫁接繁育技術(shù)研究

魏海斌，劉小利*，顧文毅，祁銀燕，史文君

(1.青海大學(xué)農(nóng)林科學(xué)院，青海 西寧 810016； 2.青海高原林木遺傳育種實(shí)驗(yàn)室，青海 西寧 810016)

黃果梨為白梨(PyrusbretschneideriRehd)系統(tǒng)的地方梨品種[1]，主產(chǎn)于青海省黃南藏族自治州同仁縣隆務(wù)河流域。因其果味濃郁純正、皮薄松軟、色澤金黃、酸甜適度、營養(yǎng)豐富等特點(diǎn)，倍受群眾喜愛。近年，隨著農(nóng)村產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整，地產(chǎn)特色林果業(yè)有了長足發(fā)展，黃果梨種植面積得到進(jìn)一步擴(kuò)大，其優(yōu)質(zhì)種苗供給的重要性愈顯突出。規(guī)范的種苗繁育技術(shù)可以有效提高種苗的質(zhì)量和成活率，進(jìn)而達(dá)到降低生產(chǎn)成本、提高經(jīng)濟(jì)效益的目的[2]。嫁接繁育技術(shù)是在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用的一種無性繁殖技術(shù)[3],該方法不僅能保持接穗品種的優(yōu)良性狀，而且可以利用砧木的有利特性，增強(qiáng)品種的抗寒性、抗旱性、抗病蟲害等能力[4]，是果樹種苗生產(chǎn)上常用的繁殖手段以及保持品種特性的重要途徑[5]。嫁接繁殖中嫁接體的愈合過程是一個(gè)復(fù)雜的動(dòng)態(tài)變化過程，其實(shí)質(zhì)是砧穗愈傷組織的產(chǎn)生、對(duì)接、愈合、維管束鞘的形成與分化，砧、穗結(jié)合成一體的整體過程[6]。嫁接成活的關(guān)鍵，不僅受砧木和接穗的親和力、生活力等內(nèi)在因素的影響外，還受溫度、濕度、光照、水分等外在因素的影響[7]。但在內(nèi)因和外因一致的前提下，不同的嫁接方法、嫁接時(shí)期及砧木處理方式對(duì)嫁接成活及后期生長的影響更大[8-10]。本試驗(yàn)通過開展黃果梨種苗嫁接繁育技術(shù)中適宜嫁接方法、嫁接時(shí)期、砧木處理方式等關(guān)鍵技術(shù)研究，進(jìn)一步完善其種苗嫁接繁育技術(shù)方案，為快速高效繁育黃果梨優(yōu)質(zhì)種苗提供科學(xué)依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地設(shè)在青海省黃南藏族自治州同仁縣保安鎮(zhèn)東干木村格拉灘黃果梨種植基地。試驗(yàn)地海拔2 300 m，屬大陸性高原半干旱氣候，年均氣溫5.6 ℃；年均降雨量401.4 mm，年均蒸發(fā)量1 397.3 mm；年均無霜期134 d。試驗(yàn)地土壤pH 8.49，有機(jī)質(zhì)、堿解氮、速效磷缺乏，速效鉀中等，田間管理中等。

1.2 試驗(yàn)材料

嫁接砧木采用一年生杜梨苗,嫁接品種為地方梨品種黃果梨。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法

1.3.1 不同嫁接方法試驗(yàn) 試驗(yàn)以一年生杜梨為砧木，于4月初定植，翌年3月中旬開展枝接和芽接單因素隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)。其中枝接采用劈接方式,芽接采用帶木質(zhì)芽接，接后在接芽上方1 cm處剪砧。兩種嫁接方式的嫁接部位均為地上10 cm處。每個(gè)處理30株，重復(fù)3次。

秋季停止生長后，調(diào)查各處理嫁接成活率和當(dāng)年新梢生長量。同時(shí)，在嫁接過程中，統(tǒng)計(jì)兩個(gè)處理嫁接千株苗的穗條使用量、嫁接用工量、砧木可嫁接率、單株生產(chǎn)成本等。

1.3.2 不同時(shí)期帶木質(zhì)芽接試驗(yàn) 試驗(yàn)以一年生杜梨為砧木，于4月初定植，分別于當(dāng)年7月下旬和翌年3月下旬開展春秋兩季帶木質(zhì)芽接的單因素隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)。7月下旬芽接接穗采用黃果梨當(dāng)年生半木質(zhì)化枝條，翌年3月芽接接穗采用一年生黃果梨木質(zhì)化枝條。嫁接部位均為地上10 cm處。每個(gè)處理30株，重復(fù)3次。秋季停止生長后，調(diào)查各處理嫁接成活率和新梢生長量。

1.3.3 芽接不同包裹方式及剪砧時(shí)期處理組合試驗(yàn) 試驗(yàn)以一年生杜梨為砧木，于4月初定植，當(dāng)年7月下旬進(jìn)行帶木質(zhì)芽接試驗(yàn)。選用黃果梨當(dāng)年生半木質(zhì)化枝條為接穗，隨采隨用。采用3因素多水平隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)，其中A因素為不同芽接時(shí)期，設(shè)5個(gè)水平，分別為A1(7月23日)、A2(8月2日)、A3(8月12日)、A4(8月22日)、A5(9月2日)；B因素為芽接后接芽不同包裹方式，設(shè)2個(gè)水平，B1為嫁接后接芽外露，B2為嫁接后接芽被嫁接膜包裹，不外露；C因素為嫁接后砧木處理方式，設(shè)3個(gè)水平，C1為嫁接后立即在接芽上部1 cm處剪砧，C2為嫁接后10 d在接芽上部1 cm處剪砧，C3為嫁接后當(dāng)年不剪砧。每處理組合30株，重復(fù)3次。嫁接后20 d開始調(diào)查接芽萌發(fā)率，每10 d調(diào)查1次，直至秋季停止，統(tǒng)計(jì)各處理當(dāng)年萌發(fā)率及生長量。翌年春季萌動(dòng)后，調(diào)查翌年接芽萌發(fā)率，并于秋季停止生長后調(diào)查生長量。

1.4 測定指標(biāo)

新稍長度用鋼卷尺測量，為嫁接口至新稍頂端的長度。新稍粗度用游標(biāo)卡尺測定，為接芽發(fā)出新稍基部距嫁接口1 cm處的粗度。

嫁接成活率=(成活株數(shù)÷嫁接總株數(shù))×100%

砧木可嫁接率=(實(shí)際可嫁接的砧木數(shù)量÷用于嫁接的砧木總株數(shù))×100%

當(dāng)年萌發(fā)率=(嫁接后當(dāng)年接芽萌發(fā)的株數(shù)÷嫁接總株數(shù))×100%

翌年萌發(fā)率=(嫁接后第二年接芽萌發(fā)的株數(shù)÷嫁接總株數(shù))×100%

1.5 試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用DPS17.10軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同嫁接方式對(duì)嫁接成活率、生長量及生產(chǎn)成本的影響

不同嫁接方式對(duì)嫁接成活率和新稍生長量的影響如表1所示。由表可知，兩種嫁接方式相比，帶木質(zhì)芽接的嫁接成活率比劈接高16.67%，但劈接的新稍高生長量和粗生長量卻比帶木質(zhì)芽接分別高19.61 cm和0.23 cm。兩種嫁接方式的嫁接成活率、新稍高生長量和粗生長量間無顯著差異。

表1 不同嫁接方式間嫁接成活率及新稍生長量的差異性比較Tab.1 Comparison of grafting survival rate and growth difference of new shoots among different grafting methods

表2為不同嫁接方式對(duì)生產(chǎn)成本的影響。由表可知，兩種嫁接方式相比，嫁接千株種苗所需種條用量不同，劈接平均嫁接千株種苗種條用量比帶木質(zhì)芽接多129.66條，且存在顯著差異；兩種嫁接方式的用工量，劈接每嫁接千株種苗比帶木質(zhì)芽接多用人工2.34個(gè)工，兩者并存在顯著差異；從可嫁接率上看，帶木質(zhì)芽接較劈接高22.33%，兩者存在極顯著差異；從一年生嫁接苗單株生產(chǎn)成本看，劈接較帶木質(zhì)芽接單株成本高0.75元，并存在顯著差異。由此可見帶木質(zhì)芽接表現(xiàn)出嫁接成本低，該嫁接方法更為經(jīng)濟(jì)、高效。

表2 不同嫁接方式生產(chǎn)成本比較Tab.2 Comparison of production cost of different grafting methods

2.2 春秋兩季帶木質(zhì)芽接對(duì)嫁接成活率和生長量的影響

表3為春秋兩季帶木質(zhì)芽接對(duì)嫁接成活率和生長量的影響。由表可知，春秋兩季帶木質(zhì)芽接，其嫁接成活率相近，均為90%以上，但秋季帶木質(zhì)芽接新稍高生長量和粗生長量比春季帶木質(zhì)芽接分別高36.37 cm和0.36 cm。春秋兩季嫁接成活率間無顯著差異，但秋季帶木質(zhì)芽接的高生長量和粗生長量顯著高于春季帶木質(zhì)芽接處理。

表3 春秋兩季帶木質(zhì)芽接成活率和生長量的差異比較Tab.3 Comparison of survival rate and growth of budding with wood in spring and autumn

2.3 不同處理組合對(duì)萌發(fā)率、生長量的影響

2.3.1 不同處理組合對(duì)接芽萌發(fā)率的影響 圖1為不同處理組合對(duì)接芽當(dāng)年萌發(fā)率的影響。由圖可以看出，在7月23日至9月2日時(shí)間段內(nèi)，嫁接時(shí)間越早，接芽萌發(fā)的越快，可在最短的時(shí)間內(nèi)達(dá)到較高萌發(fā)率。其中7月23日嫁接，接芽萌發(fā)最快，嫁接20 d后的萌發(fā)率可達(dá)63.33%(A1B1C2處理)。在9月以后嫁接，除A5B1C1處理當(dāng)年接芽萌發(fā)率為20%外，其他處理接芽當(dāng)年基本不萌發(fā)。這可能與早期嫁接，氣溫高，早晚溫差小，利于嫁接口愈合有關(guān)。

從接芽不同的處理方式上看，總體上露芽處理組合(含B1的處理組合)較包芽處理組合(含B2的處理組合)接芽萌發(fā)早，當(dāng)年萌發(fā)率高，最高可達(dá)93.33%(A2B1C2)。而包芽的處理組合當(dāng)年萌發(fā)率相對(duì)較低，最高為86.67%(A3B2C2)。

從嫁接后砧木不同處理方式上看，嫁接后適時(shí)剪除接口上方的砧木，利于接芽早期萌發(fā)，砧木當(dāng)年不處理，接芽當(dāng)年不萌發(fā)。這可能與砧木處理越晚，砧木本身消耗部分養(yǎng)分和水分，使得養(yǎng)分和水分不能集中供給接芽所致。在嫁接后10 d剪砧，前20 d接芽萌發(fā)率雖不及嫁接后立即剪砧的處理，但在中后期接芽萌發(fā)率卻普遍較高，這可能與嫁接后短期內(nèi)保留砧木，砧木上的葉片在消耗養(yǎng)分和水分的同時(shí)，也在制造有機(jī)物質(zhì)回流樹體內(nèi)儲(chǔ)藏，更利于接口愈合和后期接芽萌發(fā)、生長對(duì)養(yǎng)分的需求有關(guān)。

各處理隨著嫁接后時(shí)間的推移，接芽萌發(fā)率逐漸提高，并嫁接后40 d基本達(dá)到最佳萌發(fā)率。比較所有處理組合可以看出，不論嫁接早晚，凡是包芽不剪砧的處理組合，接芽當(dāng)年不萌發(fā)，當(dāng)年萌發(fā)率為0。而以7月中下旬至8月中旬進(jìn)行嫁接，采用露芽方式，并在嫁接后10 d剪除接口上方的砧木，接芽當(dāng)年萌發(fā)率最高，均可達(dá)到80%以上。

圖1 不同處理組合的接芽當(dāng)年萌發(fā)率Fig.1 Germination rate of grafted buds in different treatment combinations

2.3.2 不同處理組合對(duì)新梢當(dāng)年生長量的影響 圖2、
圖3為不同處理組合對(duì)新梢當(dāng)年生長量的影響。由圖可以看出，不論嫁接早晚，凡是包含不剪砧的處理組合，接芽當(dāng)年不萌發(fā)，新梢無生長量。同樣的處理組合隨嫁接時(shí)間的推后，接芽萌發(fā)的新梢當(dāng)年生長量逐漸減小。嫁接時(shí)間越早，接芽萌發(fā)新梢當(dāng)年生長量越大；嫁接時(shí)間越晚，接芽萌發(fā)新梢生長量越小或甚至不萌發(fā)。試驗(yàn)以7月中下旬至8月上旬嫁接的處理組合，當(dāng)年新梢高生長量基本均大于10 cm，最高的當(dāng)年新梢高生長量可達(dá)16.07 cm(A2B1C2)；9月初嫁接的處理組合(A5B1C1)當(dāng)年高和粗生長量最小，僅為0.97 cm和0.11 cm。在7月中下旬至8月上旬，嫁接后10 d剪砧處理組合接芽萌發(fā)新梢生長量大于嫁接后立即剪砧的處理組合；而隨著嫁接時(shí)間的推后，嫁接后立即剪砧的處理組合接芽萌發(fā)新梢生長量大于接后10 d剪砧的處理組合。這可能與隨著嫁接試驗(yàn)的推后，氣溫越低，芽體萌發(fā)時(shí)間越長，加之砧木消耗樹體本身部分養(yǎng)分和水分，導(dǎo)致芽體萌發(fā)晚，后期生長時(shí)間不足有關(guān)。

圖2 不同處理組合新稍當(dāng)年高生長量Fig.2 High growth of new shoots in different treatment combinations

圖3 不同處理組合新稍當(dāng)年粗生長量Fig.3 Crude growth of new shoots in different treatment combinations

2.3.3 不同處理組合對(duì)翌年接芽萌發(fā)率的影響 圖4為不同處理組合對(duì)當(dāng)年和翌年萌發(fā)率的影響。從圖可以看出，同樣的處理組合隨著嫁接時(shí)間的推遲，翌年接芽萌發(fā)率逐漸降低，9月初嫁接的部分處理組合翌年萌發(fā)率為0(A5B2C2)。說明過晚嫁接，由于氣溫逐漸降低，晝夜溫差大，不利于嫁接口愈合和萌發(fā)新稍的木質(zhì)化形成，致使嫁接口愈合程度低或萌發(fā)新稍木質(zhì)化程度低而導(dǎo)致越冬后嫁接體死亡，造成翌年萌發(fā)率降低。適時(shí)早接，氣溫高，晝夜溫差小，利于嫁接口愈合和新稍木質(zhì)化，可使接芽或新稍安全越冬，保證翌年正常萌發(fā)。

所有組合中均以嫁接后當(dāng)年不剪砧的處理翌年接芽萌發(fā)率較高，表現(xiàn)為7月中下旬至8月中旬間嫁接，越冬保存率均達(dá)80%以上，最高可達(dá)96.67%(A1B1C3、)，甚至9月初嫁接，翌年接芽萌發(fā)率仍能達(dá)到60%以上(A5B2C3、A5B1C3)。其次為嫁接10 d后剪砧的處理組合，而嫁接后立即剪砧的處理組合翌年接芽萌發(fā)率相比較低。

圖4 不同處理組合當(dāng)年和翌年萌發(fā)率比較Fig.4 Comparison of germination rate of different treatment combinations in the same year and the next year

綜合比較當(dāng)年接芽萌發(fā)率和翌年接芽萌發(fā)率可以看出，嫁接后當(dāng)年不剪砧的所有10個(gè)處理組合，雖當(dāng)年接芽萌發(fā)率為0，但翌年接芽萌發(fā)率卻均達(dá)到60%以上；而嫁接后立即剪砧和10 d后剪砧的處理組合，均表現(xiàn)為翌年接芽萌發(fā)率低于當(dāng)年萌發(fā)率。說明接芽當(dāng)年萌發(fā)率高的，翌年接芽萌發(fā)率不一定高，而接芽當(dāng)年不萌發(fā)的，不一定翌年接芽萌發(fā)率低。翌年接芽萌發(fā)率的高低取決于接口愈合程度和萌發(fā)新稍木質(zhì)化程度。秋季氣溫逐漸降低，此時(shí)采取剪砧等促進(jìn)接芽萌發(fā)的措施，雖能提高當(dāng)年萌發(fā)率，但由于新稍生長期短，木質(zhì)化程度低，容易導(dǎo)致不能安全越冬。相反，嫁接后不剪砧，砧木生長的同時(shí)，給接芽提供接芽充足養(yǎng)分促進(jìn)接口愈合，利于芽體安全越冬，從而保證翌年較高的萌發(fā)率。

2.3.4 不同處理組合對(duì)翌年苗木生長的影響 圖5、
圖6為各處理對(duì)翌年新梢生長量的影響，從圖可以看出，只要嫁接成活并安全越冬后，各處理翌年新稍均能正常生長，且生長量相當(dāng)。其中在各個(gè)時(shí)間段嫁接，均以嫁接后不剪砧的處理，其翌年萌發(fā)后新稍生長量較大，新稍平均長度均達(dá)到80 cm以上，粗度達(dá)到0.8 cm以上，且苗木生長通直，規(guī)格好。這可能與嫁接后不剪砧，砧木上的葉片制造的營養(yǎng)可使嫁接口完全愈合并在入冬前儲(chǔ)藏充足的養(yǎng)分，翌年春季萌動(dòng)后養(yǎng)分充足，生長動(dòng)力大有關(guān)。

圖5 各處理翌年新稍高生長量Fig.5 High growth of new shoots of different treatments in the next year

圖6 各處理翌年新稍粗生長量Fig.6 Crude growth of new shoots of different treatments in the next year

2.3.5 試驗(yàn)各因素多重比較結(jié)果 表4為各因素多重比較結(jié)果，從表可以看出，對(duì)接芽當(dāng)年萌發(fā)率而言，試驗(yàn)各單因素A、B、C及A×B、A×C、B×C、A×B×C互作P<0.01，均存在極顯著差異。對(duì)新稍當(dāng)年生長量而言， A、C因素對(duì)新稍當(dāng)年高生長的影響存在極顯著差異，單因素B間無顯著差異，A×C和A×B×C互作對(duì)新稍當(dāng)年高生長的影響存在極顯著差異。A、C因素及A×B、A×C、B×C、A×B×C互作對(duì)新稍當(dāng)年粗生長的影響存在極顯著差異。對(duì)接芽翌年萌發(fā)率而言， A、B、C各單因素及A×C、B×C 互作P<0.01，均存在極顯著差異，而A×B、A×B×C互作無顯著差異。對(duì)接芽翌年生長量而言，試驗(yàn)各單因素A、C及A×C、B×C、A×B×C互作P<0.01，均存在極顯著差異，而單因素B間無顯著差異，A×B互作P<0.05，存在顯著差異。

表4 各因素對(duì)生長狀況影響的多重比較Tab.4 Multiple comparison of the effects of various factors on growth

3 討論與結(jié)論

本研究結(jié)果表明，黃果梨種苗嫁接繁殖過程中，采用帶木質(zhì)芽接，嫁接成活率比劈接高16.67%，而劈接的新稍高生長量和粗生長量比帶木質(zhì)芽接分別高19.61 cm和0.23 cm。這可能是帶木質(zhì)芽接相比劈接在砧穗間更能形成緊密平滑的結(jié)合面是使其嫁接成活率高的主要原因，而劈接相比帶木質(zhì)芽接其嫁接體能提供生長更多養(yǎng)分是使其新稍生長量較高的主要原因。邱俊儒等[11]、諸玲等[12]、曹建華等[13]、糜林等[14]的研究也表明砧穗間結(jié)合緊密度是影響嫁接成活的關(guān)鍵因素之一，嫁接體的營養(yǎng)水平是嫁接成活和前期生長的重要營養(yǎng)來源。劈接與帶木質(zhì)芽接在嫁接成活率和新稍生長量無顯著差異，而帶木質(zhì)芽接由于對(duì)砧木粗度的要求較低，操作技術(shù)難度低，節(jié)省嫁接材料，使其可嫁接率更高，生產(chǎn)成本更低，表現(xiàn)為生產(chǎn)效率高，更符合生產(chǎn)需求。

春秋兩季帶木質(zhì)芽接，其嫁接成活率間無顯著差異，但秋季帶木質(zhì)芽接的高生長量和粗生長量顯著高于春季帶木質(zhì)芽接。說明秋季帶木質(zhì)芽接，由于接后砧木暫時(shí)不剪除，砧木的葉片產(chǎn)生的營養(yǎng)物質(zhì)回流促進(jìn)接口更好愈合并儲(chǔ)存足夠的養(yǎng)分供翌年接芽萌發(fā)、生長；而春季進(jìn)行芽接，接后隨即剪除砧木，此時(shí)接芽萌發(fā)與新稍前期生長所需養(yǎng)分均依靠剩余砧木提供，因此造成生長動(dòng)力不足，故生長量相對(duì)較小。這與何長敏等[15]提出的在諸多影響嫁接成活和生長的外在因素中，營養(yǎng)物質(zhì)是愈傷組織形成和嫁接成活、生長的基礎(chǔ)相一致。

秋季帶木質(zhì)芽接嫁接成活率和苗木生長量雖均符合生產(chǎn)需求，但秋季嫁接時(shí)期、接芽包裹方式、剪砧時(shí)期的不同，均會(huì)影響嫁接成活率、新稍生長量及翌年萌發(fā)和生長情況。研究表明：在只考慮秋季嫁接時(shí)期單個(gè)因素前提下，秋季帶木質(zhì)芽接，嫁接時(shí)間越早，接芽萌發(fā)的越快，嫁接成活率越高，新梢生長量越大；嫁接時(shí)間越晚，接芽萌發(fā)的越慢，嫁接成活率越低，新梢生長量越小。這符合張斌[16]提出的溫度對(duì)愈傷組織形成的快慢和嫁接成活有很大關(guān)系的理論。這是由于秋季較早嫁接，氣溫相對(duì)較高，形成層活動(dòng)強(qiáng)度較大,細(xì)胞分裂較快，嫁接易成活；秋季較晚嫁接，氣溫日漸降低，嫁接后接穗和砧木的形成層活動(dòng)較弱,形成層細(xì)胞分裂緩慢，造成嫁接成活率低。張艾榮[17]對(duì)不同嫁接時(shí)期對(duì)黃連木成活率的影響研究也的得到了同樣的研究結(jié)果。在只考慮接芽包裹方式單個(gè)因素前提下，帶木質(zhì)芽接時(shí)露芽處理比包芽處理接芽萌發(fā)早，當(dāng)年萌發(fā)率高。這可能與包芽在一定程度上給接芽萌發(fā)造成一定阻力，不利于接芽無阻力的順利萌發(fā)所致。在只考慮剪砧時(shí)期單個(gè)因素前提下，嫁接后適時(shí)剪除接口上方的砧木，利于接芽早期萌發(fā)。在嫁接后10 d剪砧或翌年春季萌動(dòng)前剪砧，接芽萌發(fā)率高，新稍生長量大。這可能與嫁接后保留砧木，砧木上的葉片在消耗養(yǎng)分和水分的同時(shí)，也在制造有機(jī)物質(zhì)回流樹體內(nèi)儲(chǔ)藏，更利于接口愈合和后期接芽萌發(fā)、生長對(duì)養(yǎng)分的需求有關(guān)。

綜上可知，在青海高原地區(qū)，以秋季7月中下旬至8月中旬間，采用露芽帶木質(zhì)芽接方式，且嫁接后不剪砧，待翌年萌動(dòng)前在接芽上方1 cm處剪砧的方法，嫁接成活率和可嫁接率高，新稍生長量大，苗木生產(chǎn)成本低，表現(xiàn)為更加經(jīng)濟(jì)高效。