潘文武,舒 鳴,袁莉蕓
(1.湖南婁底市動物疫病預防控制中心,湖南婁底 417000;2.湖南懷化職業(yè)技術學院,湖南懷化 418000;3.湖北襄陽職業(yè)技術學院,湖北襄陽 441100)
我國于2020年7月1日起全面禁止在飼料中添加抗生素促生長劑后,養(yǎng)殖業(yè)尤其是家禽業(yè)面臨著疾病控制及生長性能低下的困擾,因此,關于開發(fā)或尋找可以替代抗生素的原料或添加劑產品以維持腸道和免疫功能相關研究倍受關注。有機酸及其鹽類通常被認為是無害的,大多數技術先進的國家已批準將其用作動物飼料添加劑,其中包括丁酸鈉在內的酸化劑鹽被認為可以降低腸道黏膜pH,從而共生生物生長創(chuàng)造一個酸性環(huán)境(賈鳳,2014)。此外,丁酸鈉可以抑制一些沙門氏菌的發(fā)育和增殖,同時在飼料中添加丁酸對增重、胴體性狀和腸絨毛大小均有顯著改善(周勤飛和王永才,2009)。Chamba等(2014)在肉雞中使用丁酸鈉,觀察其促進生長作用,結果發(fā)現,飼喂添加丁酸鈉日糧的仔豬血清中IgG濃度和空腸中總IgA濃度均顯著增加,其通過誘導宿主防御肽對免疫刺激作用也得到加強。Hassan等(2010)研究表明,微囊化型的有機酸比抗生素生長促進劑(恩拉霉素)更能提高肉雞的生長性能,因為微囊化丁酸鹽在消化時釋放緩慢,使部分丁酸鹽在腸道遠端游離,調節(jié)腸道黏膜,進而導致更好的生長性能,更低的菌落和糞便脫落率。迄今為止,關于丁酸鈉對肉雞體液和組織器官相對重量的研究數據有限,同時目前可以在飼料中添加抗菌肽,由于它具有天然抗菌、廣譜活性、作用速度快和細菌耐藥性較低的特點(潘行正等,2010),其作用機理和效果還有待驗證。因此,本研究旨在評估日糧添加不同水平丁酸鈉替代抗菌肽對肉雞生長性能、免疫反應及組織器官相對重量的影響。
1.1 試驗設計試驗將600只平均初始體重為(53.05±0.76)g的1日齡商品肉仔雞隨機分為4組,每組5個重復,每個重復30只。對照組飼喂基礎日糧,藥物組在基礎日糧中添加25 mg/kg抗菌肽,其他兩組分別在基礎日糧中添加5和10 mg/kg丁酸鈉。基礎日糧原料組成及營養(yǎng)成分見表1。
表1 基礎日糧原料組成及營養(yǎng)成分
1.2 數據記錄試驗期間每周統(tǒng)計1次各重復肉雞的飼料用量,分別在試驗第1、21和42天早上禁食4 h后按照重復對肉雞進行稱重,試驗結束后用記錄的數據計算平均日增重、平均日采食量和料重比。
1.3 樣品采集與分析抗體滴度水平歸因于動物的體液免疫反應。用血清學滴定法測定新城疫病毒和綿羊紅細胞抗原的體液免疫反應。分別在1和7 d對所有雛雞接種新城疫疫苗,同時每個重復隨機選擇4只雞通過雙邊翅膀注射5%綿羊紅細胞(SRBCs)抗原,之后參考King(1999)的方法測定抗體滴度。分別在試驗第21和42天每個重復隨機選擇3只雞進行屠宰,分離肝臟、腎臟、脾臟、胸腺和法氏囊并稱重,以其重量與活體雞重的比值表示相對重量。
1.4 數據分析使用SPSS軟件單因素方差分析模型對試驗數據進行統(tǒng)計分析,采用Turkey法進行多重比較,P<0.05表示差異顯著。
2.1 丁酸鈉對肉雞生長性能的影響由表2可知,對照組、藥物組與丁酸鈉組對21 d肉雞體重、1~21 d和1~42 d肉雞平均日增重、1~21 d料重比及各階段平均日采食量的影響均無顯著差異(P>0.05)。與對照組相比,0.5%丁酸鈉組42 d肉雞體重和22~42 d平均日增重分別顯著提高2.80%和4.07%(P<0.05)。但0.5%丁酸鈉組22~42 d和1~42 d料重比較對照組和藥物組分別顯著降低5.78%、6.86%和3.85%、5.06%(P<0.05)。
表2 丁酸鈉替代藥物對肉雞生長性能的影響
2.2 丁酸鈉對肉雞抗體滴度的影響由表3可知,日糧處理對21 d肉雞新城疫和綿羊紅細胞抗體滴度的影響無顯著差異(P>0.05),但0.5%和1.0%丁酸鈉組42 d肉雞新城疫和綿羊紅細胞抗體滴度顯著高于對照組和藥物組(P<0.05)。
表3 丁酸鈉替代藥物對肉雞抗體滴度的影響
2.3 丁酸鈉對肉雞組織器官相對重量的影響由表4可知,日糧處理對21 d肉雞肝臟、腎臟、脾臟及42 d肉雞肝臟、腎臟和法氏囊的相對重量無顯著影響(P>0.05)。0.5%和1%丁酸鈉組21 d肉雞法氏囊和胸腺相對重量及42 d肉雞脾臟和胸腺相對重量顯著高于對照組(P<0.05)。
表4 丁酸鈉替代藥物對肉雞組織器官相對重量的影響 %
生長性能數據顯示,與對照組相比,0.5%丁酸鈉組42 d肉雞體重和22~42 d平均日增重均顯著提高,同時該組22~42 d和1~42 d料重比較對照組和藥物組顯著降低,這與Chamba等(2014)的研究結果一致,作者推測生長性能的提高可能是因為丁酸鈉攝入后在腸道中創(chuàng)造了酸性環(huán)境,反過來使病原體負荷最小化。此外,日糧中添加丁酸鈉可以提高礦物質和蛋白質的腔內消化率,這可能也是導致日增重升高的原因(Zhang等,2011)。
細胞介導的免疫反應可能是由于延遲型超敏反應,其中綿羊紅細胞作為胸腺依賴的免疫原,用于評價雞的抗體反應。我們觀察到0.5%和1.0%丁酸鈉組42 d肉雞新城疫和綿羊紅細胞抗體滴度顯著高于對照組和藥物組,這表明丁酸鈉可能在抗原暴露后期調節(jié)B和T細胞的功能,并能調節(jié)宿主的免疫(Ahsan等,2016)。Park等(2015)指出,包括丁酸鹽在內的短鏈脂肪酸通常在腸道內合成,支持Th1和Th17效應細胞及IL-10調節(jié)性T細胞的調節(jié)和生長,這些細胞維持著免疫系統(tǒng)的框架。Zhou等(2014)報道,丁酸鹽對巨噬細胞的影響歸因于丁酸鹽抑制一氧化氮的產生,并減少細胞因子的表達,包括IL-6、IL-10、干擾素γ和IL-1β,這些細胞因子控制炎癥和維持免疫穩(wěn)態(tài)。與我們的發(fā)現類似,Eshak等(2016)報道了丁酸鹽處理的肉雞對新城疫的高抗體效價,因為丁酸調節(jié)腸道巨噬細胞的活動,巨噬細胞發(fā)揮腸道血腦屏障內T細胞和樹突狀細胞的功能,而后一種細胞在宿主免疫中也有作用。
在健康動物中,免疫器官重量的增加與機體免疫反應的改善有關。法氏囊、胸腺和脾臟是動物免疫系統(tǒng)的關鍵器官,本研究結果表明,0.5%和1%丁酸鈉組21 d肉雞法氏囊和胸腺相對重量及42 d肉雞脾臟和胸腺相對重量顯著高于對照組,這與Eshak等(2016)的結果一致,提示丁酸鹽對肉雞全身免疫系統(tǒng)也有一定的促進作用。
日糧添加丁酸鈉可以提高42 d肉雞新城疫和綿羊紅細胞抗體滴度,改善免疫器官相對重量,其中丁酸鈉添加水平為0.5%時可以顯著改善1~42 d肉雞的飼料效率。