發(fā)酵過程中不同理化因素對(duì)乳酸菌噬菌體的影響

于曉麗，趙莉，程溪，秦松躍，狄亞心，崔文，姜艷平，王麗，李一經(jīng)，唐麗杰，徐義剛，周晗，喬薪瑗

(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院動(dòng)物疾病防控技術(shù)與制劑創(chuàng)制實(shí)驗(yàn)室，哈爾濱150030）

0 引 言

乳酸菌作為益生菌，廣泛應(yīng)用于食品發(fā)酵及飼料加工業(yè)，在功能食品、醫(yī)療保健、微生態(tài)制劑等許多領(lǐng)域也具有較好的應(yīng)用前景[1-4]。乳酸菌具有提高機(jī)體免疫力、調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡[5]、促進(jìn)機(jī)體新陳代謝[6]等功能，對(duì)機(jī)體發(fā)揮著不容忽視的作用。乳酸菌定植腸道與自由基結(jié)合，可降低對(duì)機(jī)體的損害[7]，且菌體及其提取物均具有抗氧化作用[8]。乳酸菌長期用于食品發(fā)酵，已被證明不具有致病性，被公認(rèn)為安全級(jí)微生物[9]。但是乳桿菌在發(fā)酵過程中的不同階段均受到噬菌體污染的威脅，導(dǎo)致發(fā)酵周期延緩、產(chǎn)量下降甚至全部浪費(fèi)，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[10-11]。

在食品加工、化學(xué)制藥、飼料生產(chǎn)和生物技術(shù)等行業(yè)，噬菌體污染問題被廣泛報(bào)道[12]。減少或消除噬菌體污染，成為研究者非常關(guān)注的問題[13]。在發(fā)酵生產(chǎn)的不同階段若發(fā)生噬菌體侵染，會(huì)導(dǎo)致乳酸菌產(chǎn)酸量減少，發(fā)酵過程緩慢或產(chǎn)品產(chǎn)量、質(zhì)量下降等，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失[14]。Cox首次報(bào)道了噬菌體侵染發(fā)酵劑，在該領(lǐng)域取得顯著進(jìn)步，特別是在噬菌體遺傳學(xué)、生態(tài)學(xué)及抵抗外界環(huán)境因素方面[15]，隨后又有相關(guān)文獻(xiàn)[16]報(bào)道了干酪乳桿菌和副干酪乳桿菌的噬菌體導(dǎo)致乳品發(fā)酵失??；近來年，對(duì)噬菌體侵染酸奶和奶酪的報(bào)道[17-19]變得越發(fā)頻繁，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前，噬菌體污染仍然是影響發(fā)酵工業(yè)的一個(gè)難題。

本研究通過分析環(huán)境中不同理化因素對(duì)3株乳酸菌噬菌體的影響，為控制發(fā)酵生產(chǎn)中噬菌體污染、保護(hù)工業(yè)菌株、制定有效防控措施提供理論依據(jù)。通過對(duì)發(fā)酵介質(zhì)中理化因素對(duì)噬菌體及宿主菌的影響分析，為篩選抑制噬菌體活性且不影響發(fā)酵過程的有效措施奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株

干酪乳桿菌（L.casei ATCC 393）戊糖乳桿菌（L.pentosus KLDS 1.0413）短小乳桿菌（L.brevis ATCC 367），由本實(shí)驗(yàn)室保存。噬菌體Lc、Lpen和Lbre；均由本實(shí)驗(yàn)室保存。

1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備

垂直板電泳系統(tǒng)BIO-RADMV120型，Savant Instruments；低溫臺(tái)式高速離心機(jī)Z323，HERMAL公司；電熱恒溫培養(yǎng)箱DNP-9162型，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；電熱恒溫水槽DK-80型，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；凝膠成像儀UVR-800 Uitra-Uiolet Procducts Limted Cambhdge，UK吉爾森公司；微量電子天平BS201S型，北京賽多利斯公司；透射電子顯微鏡H-7650型，日本日立公司。

1.1.3 培養(yǎng)基配制

試驗(yàn)過程中使用的主要培養(yǎng)基見表1。

表1 主要培養(yǎng)基及其配方

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 發(fā)酵過程中p H對(duì)宿主菌和噬菌體的影響

取不同p H值（p H=2~11）的MRS培養(yǎng)液98 m L，分別接種L.casei ATCC 393、L.pentosus KLDS 1.0413和L.brevis ATCC 367菌液2 mL，37℃靜置培養(yǎng)18 h，測定OD600值。再將不同p H值（p H=2~14）的900μL MRS培養(yǎng)液中分別添加100μL噬菌體，混勻，32℃溫育30 min，以L.casei ATCC 393為指示菌，以MRS固體培養(yǎng)基做下層培養(yǎng)基，將原液10倍比稀釋后取100μL接種100μL指示菌，再將混合液接種4 mL MCM半固體培養(yǎng)基做上層培養(yǎng)基，制成雙層瓊脂平板，對(duì)形成的噬菌斑進(jìn)行計(jì)數(shù)，測定噬菌體的效價(jià)，計(jì)算噬菌體存活率。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.2.2 發(fā)酵過程中溫度對(duì)宿主菌和噬菌體的影響

為了減少發(fā)酵食品中乳酸菌菌種的使用、縮短發(fā)酵時(shí)間，對(duì)菌種最適生長溫度進(jìn)行測定，本試驗(yàn)選取發(fā)酵過程中常用溫度,取MRS培養(yǎng)液98 mL，分別接種L.casei ATCC 393、L.pentosus KLDS 1.0413和L.brevis ATCC 367菌液2 mL，將其置于32、37、45、56℃條件下進(jìn)行培養(yǎng)，每隔2 h測定其OD600值，繪制在不同溫度下的生長曲線。為了測定噬菌體的熱穩(wěn)定性，篩選出利于乳酸菌發(fā)酵但不利于噬菌體生長的溫度，參照Capra[20]等所描述的方法，用MRS培養(yǎng)宿主菌后，再分別感染3種噬菌體，噬菌體裂解宿主菌，收取裂解液，分別置于32、37、45、56℃和63℃溫度下作用，于2、5、10、15、30、45 min和60 min分別取樣，12 000×g離心4 min，取100μL上清進(jìn)行十倍比梯度稀釋，測定噬菌體效價(jià)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.2.3 發(fā)酵介質(zhì)中二價(jià)陽離子對(duì)宿主菌和噬菌體的影響

取MCM、MRS-Ca、MRS-Mg、MRS液體培養(yǎng)基98 mL，每一種培養(yǎng)液均分別接種L.casei ATCC 393、L.pentosus KLDS 1.0413和L.brevis ATCC 367菌液2 mL，置于37℃靜置培養(yǎng)18 h后測定其OD600值。參照Quiberoni等[21]所使用的方法，用MRS培養(yǎng)噬菌體，獲得噬菌體裂解液，采用雙層平板法制斑，其中上層分別為MCM、MRS-Ca、MRS-Mg、MRS半固體培養(yǎng)基，下層均為MRS固體培養(yǎng)基。32℃靜置培養(yǎng)，測定噬菌體的效價(jià)。

1.2.4 發(fā)酵介質(zhì)中NaCl對(duì)宿主菌和噬菌體的影響

在MRS培養(yǎng)基中添加質(zhì)量濃度1%、2%、3%、5%NaCl，取添加質(zhì)量濃度1%、2%、3%、5%NaCl的MRS培養(yǎng)液各98 mL，分別接種L.casei ATCC 393、L.pentosus KLDS 1.0413和L.brevis ATCC 367菌液2 mL，37℃靜置培養(yǎng)18 h，測定OD600值。參照Capra等[20]使用的方法，用MRS培養(yǎng)3種噬菌體,將終濃度為106PFU/m L噬菌體裂解液置于上述不同濃度NaCl發(fā)酵液中，32℃孵育4 h，測定噬菌體的效價(jià)。

1.2.5 發(fā)酵介質(zhì)中聚山梨醇酯類（T-20）對(duì)宿主菌和噬菌體的影響

取MRS培養(yǎng)基添加T-20，體積分?jǐn)?shù)分別為0.01%、1%、2%，將其平均分為兩組，取添加積分?jǐn)?shù)分別為0.01%、1%、2%T-20的MRS培養(yǎng)液各98 mL，分別接種L.casei ATCC 393、L.pentosus KLDS 1.0413和L.brevis ATCC 367菌液2 mL，第二組除接種等量菌液外，按最佳感染復(fù)數(shù)（motiplicity of infection MOI）接種對(duì)應(yīng)的噬菌體，32℃培養(yǎng)過夜，第一組分別測定菌液OD600值，第二組培養(yǎng)液經(jīng)12 000×g離心4 min，收集噬菌體裂解液，10倍比稀釋后制斑，測定此時(shí)噬菌體效價(jià)。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)酵過程中不同p H對(duì)宿主菌和噬菌體的影響結(jié)果

2.1.1 發(fā)酵過程中p H對(duì)宿主菌的影響結(jié)果

在p H=5~9范圍內(nèi)3株乳酸菌均可正常生長，具有較強(qiáng)的嗜酸性。當(dāng)p H=2或10時(shí)均不能生長，p H等于3時(shí)差異極顯著，pH等于4時(shí)差異顯著，均不能正常生長，p H等于9時(shí)差異不顯著乳酸菌可以正常生長，表明對(duì)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿較敏感。結(jié)果如圖1所示。

圖1 不同pH對(duì)宿主菌存活率的影響

2.1.2 發(fā)酵過程中p H對(duì)噬菌體的影響結(jié)果

在發(fā)酵介質(zhì)中，不同p H對(duì)Lc、Lpen及Lbre的影響結(jié)果如圖2所示。當(dāng)pH=2時(shí)，Lc完全滅活，Lpen效價(jià)下降1個(gè)數(shù)量級(jí)，Lbre效價(jià)下降4個(gè)數(shù)量級(jí)；當(dāng)p H=3~10時(shí)，3株噬菌體均表現(xiàn)出完全抗性；當(dāng)pH=11~14時(shí)，3株噬菌體效價(jià)均急劇下降，最終完全滅活。

圖2 不同pH對(duì)噬菌體效價(jià)的影響

2.2 發(fā)酵過程中溫度對(duì)宿主菌和噬菌體的影響結(jié)果

2.2.1 發(fā)酵過程中溫度對(duì)宿主菌的影響結(jié)果

3株乳酸菌L.casei ATCC 393、L.pentosus KLDS1 0413和L.brevi s ATCC 367分別于32、37、45℃和56℃進(jìn)行生長曲線的測定，當(dāng)溫度為32℃和37℃時(shí)，3株乳酸菌均正常生長，且37℃時(shí)生長狀態(tài)略好；當(dāng)溫度為45℃時(shí)，與37℃相比，差異極顯著，3株乳酸菌均生長緩慢，生長速度L.casei ATCC 393>L.pentosus KLDS1.0413>L.brevis ATCC 367；當(dāng)溫度為56℃時(shí)，與37℃相比，差異極顯著，3株乳酸菌均不能正常生長，結(jié)果如圖3~圖5所示。

圖3 溫度對(duì)L.casei ATCC 393的影響

圖4 溫度對(duì)L.pentosus KLDS1.0413的影響

圖5 溫度對(duì)L.brevi s ATCC 367的影響

2.2.2 發(fā)酵過程中溫度對(duì)噬菌體的影響結(jié)果

發(fā)酵介質(zhì)不同溫度對(duì)Lc的影響結(jié)果如圖6所示，37℃時(shí)表現(xiàn)出完全抗性；45℃處理5 min，15%噬菌體失活，處理30 min，60%噬菌體失活，處理60 min后，70%噬菌體失活；56℃處理5 min后，可使98%Lc滅活，處理10 min后幾乎全部滅活；63℃處理2 min即可完全滅活。

圖6 發(fā)酵介質(zhì)中溫度對(duì)噬菌體Lc的影響

發(fā)酵介質(zhì)不同溫度對(duì)Lpen的影響結(jié)果如圖7所示，當(dāng)溫度為32℃和37℃時(shí)，均表現(xiàn)出完全抗性；45℃時(shí)處理15~60 min，15%~20%噬菌體滅活；56℃作用處理45 min后，可使其全部滅活；63℃處理2 min即可完全滅活。

圖7 發(fā)酵介質(zhì)中溫度對(duì)噬菌體Lpen的影響

發(fā)酵介質(zhì)不同溫度對(duì)Lbre的影響結(jié)果如圖8所示，當(dāng)溫度為32℃時(shí)，表現(xiàn)出完全抗性；37℃處理2~10 min，可使其10%滅活；處理30~60 min，可使其30%滅活；45℃作用5~10 min，可使其30%滅活，作用60 min后，可使其70%滅活；在56℃及63℃溫度下分別處理5 min和2 min即可使噬菌體全部滅活。

圖8 發(fā)酵介質(zhì)中溫度對(duì)噬菌體Lbre的影響

2.3 發(fā)酵介質(zhì)中二價(jià)陽離子對(duì)宿主菌和噬菌體的影響結(jié)果

2.3.1 發(fā)酵介質(zhì)中二價(jià)陽離子對(duì)宿主菌的影響結(jié)果

發(fā)酵介質(zhì)中添加Ca2+和Mg2+對(duì)宿主菌的影響結(jié)果如圖9所示，L.casei ATCC 393、L.pentosus KLDS1.0413、L.brevis ATCC 367在MCM、MRS-Ca、MRS-Mg、MRS 4種培養(yǎng)基中的菌濃度均無明顯變化，差異不顯著，發(fā)酵液體介質(zhì)中添加鈣、鎂離子未影響宿主菌的正常生長。

圖9 鈣、鎂離子對(duì)宿主菌的影響

2.3.2 發(fā)酵介質(zhì)中二價(jià)陽離子對(duì)噬菌體的影響結(jié)果

發(fā)酵介質(zhì)中Ca2+和Mg2+對(duì)噬菌體的影響結(jié)果如圖10所示，上層為未添加Ca2+和Mg2+的MRS培養(yǎng)基時(shí)，噬菌體效價(jià)與MCM、MRS-Ca、MRS-M g 3組相比明顯降低。其中，未添加Ca2+和Mg2+使Lc效價(jià)下降2個(gè)數(shù)量級(jí)，Lpen和Lbre效價(jià)下降1個(gè)數(shù)量級(jí)；未添加Ca2+可使Lc效價(jià)下降1個(gè)數(shù)量級(jí)，Lpen效價(jià)略有降低，Lbre效價(jià)無明顯影響。

圖10 鈣、鎂離子對(duì)噬菌體的影響

2.4 發(fā)酵介質(zhì)中NaCl對(duì)噬菌體和宿主菌的影響結(jié)果

2.4.1 發(fā)酵介質(zhì)中NaCl對(duì)宿主菌的影響結(jié)果

在添加不同劑量NaCl的MRS培養(yǎng)基中，L.casei

ATCC393、L.pentosus KLDS 1.0413、L.brevis ATCC 367

均能正常生長，培養(yǎng)18 h后檢測OD600。結(jié)果如圖11所示，當(dāng)NaCl濃度為2%時(shí)，L.casei ATCC 393菌液OD600最大（9.8673）；當(dāng)NaCl濃度為1%時(shí)，L.pentosus KLDS 1.0413菌液OD600最大（9.5430）；當(dāng)NaCl濃度為2%時(shí)，L.brevis ATCC 367菌液OD600最大（6.2780），與MRS組相比差異不顯著,OD600數(shù)值均在乳酸桿菌正常生長的區(qū)間。

圖11 不同濃度NaCl對(duì)宿主菌的影響

2.4.2 發(fā)酵介質(zhì)中NaCl對(duì)噬菌體的影響結(jié)果

發(fā)酵液體介質(zhì)中不同濃度NaCl對(duì)Lc、Lpen及Lbre的影響結(jié)果如圖12所示。當(dāng)1%NaCl作用Lc時(shí)，Lc效價(jià)未發(fā)生改變；當(dāng)2%NaCl處理時(shí)，其效價(jià)下降1個(gè)數(shù)量級(jí)；當(dāng)3%、5%NaCl作用Lc時(shí)，其效價(jià)下降2個(gè)數(shù)量級(jí)。當(dāng)1%、2%NaCl作用Lpen時(shí)，其效價(jià)下降2~3個(gè)數(shù)量級(jí)；當(dāng)3%NaCl作用Lpen時(shí)，其效價(jià)下降4個(gè)數(shù)量級(jí)，當(dāng)5%NaCl處理時(shí)完全滅活。當(dāng)不同濃度NaCl作用Lbre時(shí)，其耐受性較強(qiáng)，當(dāng)NaCl濃度為3%和5%，效價(jià)下降一個(gè)數(shù)量級(jí)，但不能完全滅活。

圖12 不同濃度NaCl對(duì)噬菌體的影響

2.5 發(fā)酵介質(zhì)中T-20對(duì)噬菌體和宿主菌的影響結(jié)果

2.5.1 發(fā)酵介質(zhì)中T-20對(duì)宿主菌的影響結(jié)果

不同濃度T-20對(duì)宿主菌L.casei ATCC 393、L.pentosus KLDS 1.0413、L.brevis ATCC 367的作用結(jié)果如圖13所示。隨著T-20濃度的增加，3株乳酸菌的菌濃度均有降低（2%>1%>0.1%），當(dāng)T-20濃度為1%、2%時(shí)，菌濃度下降較明顯，但差異不顯著，可以保證發(fā)酵的正常進(jìn)行。

圖13 T-20對(duì)宿主菌的影響

2.5.2 發(fā)酵介質(zhì)中T-20對(duì)噬菌體的影響結(jié)果

不同濃度T-20對(duì)噬菌體的影響結(jié)果如圖14所示。0.1%、1%T-20可使Lc效價(jià)分別下降1個(gè)和2個(gè)數(shù)量級(jí)，2%T-20使Lc效價(jià)下降3個(gè)數(shù)量級(jí)；0.1%T-20處理Lpen時(shí)，其效價(jià)下降2個(gè)數(shù)量級(jí)，1%T-20處理時(shí)Lpen效價(jià)下降5個(gè)數(shù)量級(jí)，2%處理后可完全滅活；0.1%T-20處理Lbre時(shí)效價(jià)下降4個(gè)數(shù)量級(jí)，1%、2%T-20可使噬菌體Lbre完全滅活。

圖14 不同濃度T-20對(duì)噬菌體的影響

3 討 論

噬菌體污染的普遍存在常引起發(fā)酵失敗，并導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[22-23]。生產(chǎn)環(huán)境是影響發(fā)酵過程的重要因素之一，在發(fā)酵過程中，發(fā)酵液體的隨意排放、發(fā)酵乳廢棄以及洗罐后廢水的不當(dāng)處理等，會(huì)導(dǎo)致噬菌體污染發(fā)酵環(huán)境[24]。

噬菌體污染時(shí)，車間及廠區(qū)周圍環(huán)境會(huì)有大量噬菌體殘留，紫外消毒可有效控制發(fā)酵環(huán)境中的噬菌體污染。雖然紫外消毒覆蓋面積大，操作便捷，但由于穿透力弱，對(duì)隱蔽或遮擋的發(fā)酵生產(chǎn)設(shè)備，例如工廠管道、發(fā)酵罐和種子罐等不能消殺徹底。發(fā)酵生產(chǎn)中常用的新潔爾滅（0.05%）、甲醛（0.1%）和高錳酸鉀（KMnO4，0.05%）等生物滅活劑對(duì)噬菌體滅活效果非常顯著[25-26]。有研究報(bào)道，對(duì)乳桿菌噬菌體MLC-A最有效的乙醇濃度為75%[13]。

在發(fā)酵過程中，介質(zhì)中的相關(guān)因素對(duì)發(fā)酵過程具有重要的影響。在發(fā)酵生產(chǎn)中不同pH對(duì)噬菌體和宿主菌的影響不同，噬菌體對(duì)pH表現(xiàn)出高抗性，具有較強(qiáng)的耐酸、耐堿能力，但宿主菌耐酸不耐堿，并且噬菌體對(duì)p H的耐受范圍與宿主菌相比較寬。因此，在發(fā)酵過程中，采用改變p H無法有效抑制噬菌體生長。另外，多數(shù)噬菌體對(duì)熱處理較敏感，高溫處理可破壞衣殼蛋白、裂解噬菌體。本研究將噬菌體Lc、Lpen、Lbre在56℃條件下分別作用10、45、5 min均被滅活；而宿主菌L.casei ATCC 393、L.pentosus KLDS1.0413和L.brevis ATCC 367在32℃和37℃下正常生長。綜合發(fā)酵介質(zhì)中溫度對(duì)噬菌體與宿主菌的影響，在發(fā)酵生產(chǎn)中，可采取“先高后低”來設(shè)定溫度，發(fā)酵初期將介質(zhì)溫度升至56℃及以上維持一段時(shí)間，然后通過制冷裝置降至發(fā)酵菌株正常培養(yǎng)溫度，完成發(fā)酵過程。

噬菌體在侵染宿主菌過程中，吸附階段是首要過程。Sechaud等[27]指出Ca2+或M g2+不僅具有穩(wěn)定噬菌體DNA螺旋結(jié)構(gòu)、提高phage對(duì)宿主菌吸附率的作用，還可控制噬菌體DNA侵入宿主細(xì)胞。因此，二價(jià)陽離子Ca2+和Mg2+是噬菌體增殖必不可少的。本研究通過檢測添加Ca2+或Mg2+對(duì)發(fā)酵過程的影響，結(jié)果表明，宿主菌在添加和未添加Ca2+或Mg2+時(shí)均能正常生長，但Lc、Lpen、Lbre在未添加Ca2+或Mg2+時(shí)，其效價(jià)下降2~4個(gè)數(shù)量級(jí)，且形成的噬菌斑較小。有研究報(bào)道，當(dāng)噬菌體BYM、Ib3、YAB和MLC-A裂解菌體時(shí)，培養(yǎng)基中只有添加Ca2+和M g2+時(shí)，才能形成噬菌斑[28]。因此，在生產(chǎn)實(shí)踐中，可考慮在發(fā)酵介質(zhì)中添加絡(luò)合物（如檸檬酸鹽等）除去液體介質(zhì)中多余的二價(jià)陽離子，阻斷噬菌體對(duì)宿主菌的吸附，有效控制發(fā)酵過程中的噬菌體污染。

NaCl作為食品添加劑，不僅能改變發(fā)酵食品的口感質(zhì)地，還可抑制噬菌體污染且不影響發(fā)酵菌株正常生長。在本研究中，當(dāng)添加5%NaCl時(shí)發(fā)酵菌株濃度略有降低，但不影響發(fā)酵過程；當(dāng)3%、5%NaCl處理Lc時(shí)，效價(jià)下降2個(gè)數(shù)量級(jí)，有效抑制其活性；當(dāng)5%NaCl處理時(shí)，噬菌體Lpen完全滅活，Lbre無明顯抑制作用。因此，在食品發(fā)酵生產(chǎn)中，可利用噬菌體對(duì)Na-Cl敏感性的不同，添加適宜濃度的NaCl來抑制噬菌體活性。T-20是一類非離子表面活性劑，常用于發(fā)酵過程中，減少泡沫的產(chǎn)生，被公認(rèn)為安全、無毒、無刺激性的原料，每日允許攝入量為0~25 mg/kg（FAD/WHO，1985）。本研究選用不同濃度T-20對(duì)噬菌體及宿主菌共同作用，為了探究在合理濃度范圍內(nèi)添加T-20，是否可以控制發(fā)酵過程中噬菌體的污染，隨著T-20濃度的增加，3株乳酸菌濃度略有降低（0.1%<1%<2%），但可以確保發(fā)酵過程順利進(jìn)行；當(dāng)2%T-20作用Lc、Lpen、Lbre后，只有Lc效價(jià)下降3個(gè)數(shù)量級(jí)，而Lpen、Lbre均具有較強(qiáng)耐受性。因此，在生產(chǎn)實(shí)踐中，可利用噬菌體對(duì)T-20的敏感性抑制其活性。

本研究通過分析發(fā)酵介質(zhì)中不同理化因素對(duì)發(fā)酵過程的影響，為保護(hù)商業(yè)菌株、制定有效防控措施提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，同時(shí)為深入了解探究噬菌體與宿主菌間的相互作用奠定基礎(chǔ)。在生產(chǎn)實(shí)踐中不同消毒劑和消毒方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，在發(fā)酵生產(chǎn)過程中，可聯(lián)合應(yīng)用多種方法，有效控制噬菌體污染，節(jié)約生產(chǎn)成本，提高生產(chǎn)效率。