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    三葉青嫩枝單芽扦插繁殖技術(shù)

    2021-07-09 06:07:24謝志亮王盼曾光輝康華靖
    浙江農(nóng)業(yè)科學(xué) 2021年7期
    關(guān)鍵詞:嫩枝草炭插條

    謝志亮,王盼,曾光輝,康華靖,3*

    (1.溫州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,浙江 溫州 325006;2.磐安縣中藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展促進中心,浙江 金華 322300;3.溫州市農(nóng)林漁生態(tài)系統(tǒng)增匯減排重點實驗室,浙江 溫州 325006)

    三葉青又名三葉崖爬藤、蛇附子、石抱子、石猴子、石老鼠、金線吊葫蘆,為葡萄科崖爬藤屬多年生蔓生藤本植物,主要分布于浙江、江西、福建、湖南、湖北、廣東、廣西等10多個省區(qū),是我國特有的名貴珍稀藥用植物[1]。三葉青以塊根或全草入藥,具有抗病毒、抗炎、鎮(zhèn)痛與解熱、保肝等作用,且毒副作用小,是西藥無法代替的“植物抗生素”[2]。臨床上主要用于治療病毒性腦膜炎、乙型腦炎、病毒性肺炎、黃疸性肝炎等,特別是塊根對小兒高燒有特效[3],是抗腫瘤常用藥物,對肺癌[4-5]、肝癌[6]、胃癌[7]、腸癌[8]、宮頸癌[9]等癌細胞具有抑制增殖和促進凋亡的作用。

    三葉青生長于郁閉度較高、腐殖質(zhì)含量高、濕度大、排水透氣的山坡灌叢、山谷、溪邊林下巖石縫中[2],以北緯27.3°以北的武夷山及福建、浙江、江西靠近武夷山的部分山區(qū)的三葉青最為正宗,而以浙江產(chǎn)三葉青為上品[10]。因其對光照、溫度、濕度等生長環(huán)境的要求嚴苛,自然條件下生長速度緩慢,產(chǎn)量極低。加之三葉青抗腫瘤作用等藥理實驗的證實,其藥效被過分的宣傳夸大,近年來人為無節(jié)制的采挖,野生三葉青已經(jīng)處于瀕臨滅絕狀態(tài)[3]。2012年三葉青被浙江省政府列入浙江省重點保護野生植物名錄,野生三葉青的采集利用受《浙江省野生植物保護辦法》(浙政令[2010]277號)制約。因此,開展三葉青野生資源人工栽培種關(guān)鍵技術(shù)研究,對珍稀三葉青資源保護和保障人民身體健康有重要意義。由于三葉青人工栽培的研究起步較晚,目前扦插繁殖雖已有報道[11-13],但使用的插條主要是2~3 a生插條,插條用量大,所需時間較長,難以滿足規(guī)?;耘嗟男枨?。本研究采用多因素多水平的正交試驗,以生根率、平均生根數(shù)、平均最大根長、萌芽率、新梢長、根鮮重和干重為扦插生根質(zhì)量的指標,探索三葉青單芽扦插繁殖的最佳組合方法,為三葉青野生資源保護及其產(chǎn)業(yè)化栽培提供育苗技術(shù)支持。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    供試三葉青為野生小葉三葉青,2016年11月采挖自溫州永嘉山區(qū),盆栽于溫州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院智能溫室大棚內(nèi)。

    1.2 方法

    采用L16(45)正交設(shè)計研究不同基質(zhì)、激素種類及濃度組合、激素處理時間等對三葉青帶葉單芽扦插成活與生長的影響。于2017年6月4日剪取三葉青當年生幼嫩枝條(春梢),剪成帶葉單芽插條,插條下端長4~5 cm,上端離芽約2 cm,扦插深度為芽剛好露出基質(zhì)為宜。每處理15條插條,重復(fù)3次。扦插后及時噴霧30 min,后期根據(jù)氣候及土壤干濕情況等進行噴霧。1個月后即7月4日調(diào)查生根率、萌芽率、新梢長。隨機選取9株,調(diào)查其1級根數(shù)量、最大根長,并洗凈根系吸干水分,用電子分析天平稱量根鮮重,80 ℃烘干12 h后再稱量根干重。驗證試驗于7月15日開始,按照上述方法進行,處理時間同樣為1個月。

    1~4水平:基質(zhì)(A)分別為草炭、1/2珍珠巖+1/2草炭、1/2珍珠巖+1/2蛭石和1/3珍珠巖+1/3草炭+1/3蛭石;時間(B)分別為5、15、30和60 s;NAA(C)分別為0、50、100和150 mg·L-1;IBA(D)分別為0、50、100和150 mg·L-1;IAA(E)分別為0、50、100和150 mg·L-1。

    1.3 統(tǒng)計與分析

    利用SPSS 19.0對數(shù)據(jù)進行整理、統(tǒng)計與分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 對生根率、根數(shù)和根長的影響

    插條扦插10 d左右即從剪口、節(jié)上、節(jié)間開始發(fā)根。從表1看出,除處理1外,其余15個處理的生根率均為100%,各處理間整體上無顯著差異。

    表1 各處理組合對生根及植株萌芽生長的影響

    不同處理間插條的平均生根數(shù)差異較大(7.2~33.7根)。比較極值可知,影響插條根數(shù)量的主次因子為B>A>C>D>E。分析K值(各水平下指標的數(shù)值之和)可知,各因素分別以A4、B2、C3、D4、E3為最優(yōu)水平,即平均生根數(shù)量的最佳組合為A4B2C3D4E3。從最大根長來看,插條的平均最大根長在9.5~17.8 cm。比較極值可知,影響最大根長的主次因子為A>C>D>B>E。分析K值可知,因素分別以A4、B2、C2、D2、E3為最優(yōu)水平,即最大根長的最佳組合為A4B2C2D2E3。

    2.2 對萌芽率和新梢長的影響

    萌芽率除處理9~12較低外(以處理9最低,為6.7%),其余12個處理的萌芽率均達100%(表1)。極值分析表明,對三葉青萌芽率影響最大的為因素A(基質(zhì)),而因素B、C、D和E影響無差異。比較K值可知,各因素分別以A1、A2、A4、B3、C2、D1、E3為最優(yōu)水平,即A1(A2、A4)B3C2D1E3為誘導(dǎo)腋芽萌發(fā)的最佳組合。新梢平均長度與萌芽率相似,以9~12處理的新梢長度最短(小于3 cm)。而其余12個處理的新梢長度均在11 cm以上,最長達到14.1 cm。極值分析表明,影響新梢長度的主次因子為A>E>B>D>C。比較K值可知,各因素分別以A4、B4、C3、C4、D1、E2為最優(yōu)水平,即新梢長度的最佳組合為A4B4C3(C4)D1E2。

    2.3 對平均根鮮重和干重的影響

    表1顯示,平均單株根鮮重以處理1(0.17 g)最小、處理15最大(0.45 g)。極值分析表明,影響平均根鮮重的主次因子為A>C>B>E>D。比較K值,各因素分別以A4、B2、C2、D4、E1、E2為最優(yōu)水平,即平均根鮮重的最佳組合為A4B2C2D4E1(E2)。平均單株根干重與平均根鮮重相似,以處理1最小,為0.023 g;最大為處理15,為0.041 g。極值分析表明,影響平均單株根干重的主次因子為A>C>E>D>B。比較K值,各因素分別以A3、B2、C2、D4、E2為最優(yōu)水平,即平均根干重的最佳組合為A3B2C2D4E2。

    2.4 驗證試驗

    影響三葉青嫩枝單芽帶葉插條生根數(shù)、生根長度、根鮮重、根干重、萌芽率和新梢長度的因素主要為基質(zhì),而影響生根數(shù)量的因素主要為處理時間。綜合分析后認為A4B2C2D4E3較為適宜三葉青嫩枝單芽帶葉扦插,即基質(zhì)為1/3珍珠巖+1/3草炭+1/3蛭石,用NAA 50 mg·L-1+IBA 150 mg·L-1+IAA 100 mg·L-1浸蘸15 s。驗證試驗結(jié)果表明,三葉青生根率和萌芽率均達到100%,其中平均根數(shù)28.5條,最大根長16.4 cm,平均梢長16.2 cm,平均根鮮重0.36 g,平均根干重0.034 g。

    3 討論

    三葉青資源稀缺而需求量大,藥材市場上供不應(yīng)求,偽混品眾多,嚴重影響臨床療效。吉慶勇等[14]的研究結(jié)果顯示,對于三葉青最主要的活性成分黃酮,人工種植植株和野生植株沒有顯著的差異,這表明人工種植的三葉青能夠代替野生三葉青滿足市場的藥用需求。因此,三葉青人工種植取代野生資源的依賴勢在必行,探討三葉青種苗高效無性扦插繁殖技術(shù)對野生三葉青種質(zhì)資源保護和三葉青的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展具有重要意義。

    研究認為,插穗生長年限是影響三葉青枝條扦插繁殖的重要因素[11]。周小卿等[10]認為,半木質(zhì)化的三葉青枝條含營養(yǎng)物質(zhì)多且整條枝都具有運輸水分的功能,在能保證足夠濕度的情況下,插穗留的葉片多,光合作用強,合成有機物多,從而促進長根。胡春梅等[15]對三葉青不同插穗類型對生根質(zhì)量指數(shù)影響的研究也表明,半木質(zhì)化帶2片葉的效果最好,半木質(zhì)化帶1片葉的效果次之,嫩枝帶2片葉的效果居第三,嫩枝帶1片葉的效果最差。然而,袁蓮蓮等[12]則認為三葉青扦插繁殖以當年生嫩枝為佳。本試驗用嫩枝單芽的扦插試驗結(jié)果也表明,生根率為100%,萌發(fā)率整體也較高,根和新梢生長良好。另外,通過觀察,本試驗中扦插后10 d開始生根,時間遠遠短于同類相關(guān)研究[15]。由此可見,嫩枝單芽扦插不僅能節(jié)約用枝,還能快速大量繁育幼苗。

    本試驗的扦插基質(zhì)種類對插條平均生根數(shù)、平均生根長度、平均根鮮重、平均根干重、平均萌芽率和新梢平均長度均有顯著影響。已有相關(guān)研究表明,新鮮黃泥基質(zhì)對三葉青扦插效果最好,其生根數(shù)量最多,生根率最高,生根長度最長[11,15]。分析認為,這是由于新鮮黃泥質(zhì)地疏松,具有較好的吸水保水性能,清潔干凈、污染少,含有胡敏酸為微酸性土壤,能促進植株發(fā)新根[16]。本試驗的結(jié)果也表明透氣有保水的基質(zhì)配方——1/3珍珠巖+1/3草炭+1/3蛭石的扦插基質(zhì)效果最佳。

    植物生長調(diào)節(jié)劑種類、濃度及浸泡時間對三葉青根的生長發(fā)育均有顯著影響。胡春梅等[15]研究認為,IBA對生根率、平均根數(shù)、平均根長、生根質(zhì)量等各項指標都表現(xiàn)最好,NAA的效果次之,究其原因,生長素類的NAA和IBA含有硫脲基團,能使細胞壁松馳,促進合成蛋白質(zhì)等物質(zhì),能促進植物根細胞的生長。華金渭等[13]研究也表明,用6-BA和IAA的混合液能促進三葉青1 a生枝插條的生根。本試驗結(jié)果表明,NAA對三葉青扦插生根的平均根數(shù)、最大根長及根的干鮮重影響較大。從植物生長調(diào)節(jié)劑不同濃度處理對三葉青生根情況的影響效果來看,植物生長調(diào)節(jié)劑處理的濃度為100 mg·L-1時,三葉青扦插繁殖生根效果最好,生根率最高,平均根數(shù)最多,平均根長最長。玉屏等[17]研究表明,激素濃度為1 000 mg·L-1時,扦插于黃壤、黑壤中效果均較好。同樣,吉慶勇等[11]認為,用2~3 a生的老枝在1 000 mg·L-1IBA中浸漬10 s后扦插于黃土中生根效果最佳。本文NAA處理最佳濃度為50 mg·L-1。這與上述研究差異較大,濃度相差較大的原因有可能與選擇的枝條年齡有關(guān)。

    4 小結(jié)

    采用正交試驗設(shè)計,研究基質(zhì)、外源激素種類與濃度組合及浸蘸時間對當年生帶葉單芽嫩枝(春梢)扦插成活的影響表明,扦插基質(zhì)類型是影響單芽插條萌芽率、新梢長度、最大根長、根鮮重和根干重的主要因素,而影響嫩枝帶葉單芽插條生根數(shù)量的主要因素是激素處理時間。綜合試驗結(jié)果認為,當年生帶葉單芽嫩枝插條用NAA 50 mg·L-1+IBA 150 mg·L-1+IAA 100 mg·L-1浸蘸15 s后,扦插于1/3珍珠巖+1/3草炭+1/3蛭石的基質(zhì)上效果最佳。驗證試驗也表明,上述組合處理1個月后的生根率和萌芽率均達100%,平均最大根長16.4 cm,平均每株生根28.5條,根鮮重0.36 g,根干重0.034 g,新梢長度16.2 cm,部分插條葉腋處有2個新梢萌發(fā)。

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