血清血小板反應(yīng)蛋白2在結(jié)直腸癌早期診斷中的應(yīng)用價值研究*

鄒瑟音，楊志勇，曹東林，徐金洪

1.廣東省第二人民醫(yī)院檢驗醫(yī)學(xué)部，廣東廣州 510000；2.廣東醫(yī)科大學(xué)，廣東東莞 523000

結(jié)腸直腸癌是全球診斷的第三大癌癥，也是癌癥相關(guān)致死的重要原因之一，在我國的發(fā)病率和致死率分別居第四位和第五位，且發(fā)病率出現(xiàn)逐年升高和年輕化的趨勢［1-2］。如果能被早期發(fā)現(xiàn)早期治療，很多患者是可以治愈的，遺憾的是大部分的患者直到晚期出現(xiàn)惡性增值、廣泛浸潤、淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移才能被準(zhǔn)確診斷，因此結(jié)直腸癌的早期診斷對提高患者的生存率和治愈率具有重要的價值。癌胚抗原（CEA）是消化道惡性腫瘤應(yīng)用較為廣泛的標(biāo)志物，無顯著臟器特異性，部分直腸惡性腫瘤患者未能被檢出，但某些非癌性因素如糖尿病、結(jié)腸炎、肝炎等因素也會導(dǎo)致CEA輕度升高，會存在一定的假陽性率，因此敏感度和特異度都遠(yuǎn)不能滿足臨床的需求。血小板反應(yīng)蛋白2（Thrombospondins，THBS-2）是一種具有多種生物學(xué)功能的糖蛋白，在腫瘤早期診斷及預(yù)后監(jiān)測中受到越來越多的關(guān)注［3-6］，本研究對健康對照組及結(jié)直腸癌患者進行血清THBS-2水平檢測，并與常用標(biāo)志物CEA進行對比分析，評價血清THBS-2檢測診斷結(jié)直腸惡性腫瘤的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對象

研究對象來源于2019年1月—2019年12月在廣東省第二人民醫(yī)院肛腸科就診及住院的患者。所有患者均行肛門指診及結(jié)直腸鏡檢查，發(fā)現(xiàn)異常者行組織病理學(xué)及影像學(xué)檢查，按照中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)分會《中國結(jié)直腸癌預(yù)防共識意見》［7］及《中國結(jié)直腸癌診療規(guī)范（2017版）》［8］制定診斷依據(jù)，共篩選出23例患者。另外以同一時間段的34例健康體檢人群作為對照組。

1.2 血清標(biāo)志物檢測

采集健康對照組及患者治療前的靜脈血3 ml，3 000 rpm離心5分鐘，2 h內(nèi)進行血清THBS-2和CEA檢測，其中THBS-2采用ELISA法檢測，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行操作，CEA采用羅氏E601電化學(xué)發(fā)光法進行檢測，正常參考范圍為0～6.5 ng/ml。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間比較采用t檢驗;通過ROC曲線來確定血清THBS-2檢測診斷結(jié)直腸癌的靈敏度和特異度，并通過計算約登指數(shù)（Youden index）來確定THBS-2的cutoff值；兩種檢驗方法的差別采用卡方檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 THBS-2檢測結(jié)果

正常對照組和患者組血清THBS-2檢測結(jié)果見圖1，健康對照組血清中THBS-2的平均水平為（37.66±12.91）ng/ml，結(jié)直腸癌患者組的平均水平為（6.59±18.58）ng/ml，（P＜0.001），說明與健康對照組相比，絕大多數(shù)的結(jié)直腸癌患者血清中的THBS-2水平明顯降低。血清THBS-2的ROC曲線如圖2所示，曲線下面積AUC為0.934，通過計算約登指數(shù)來確定鑒別正常與患者的最佳cutoff值為17.495 ng/ml，此時血清THBS-2水平診斷結(jié)直腸癌的靈敏度為87%，特異度為100%。

圖1 結(jié)腸癌患者和正常對照組血清THBS-2水平.

圖2 血清THBS-2的ROC曲線

2.2 CEA和THBS-2檢測結(jié)果比較

血清CEA和THBS-2檢測23例結(jié)直腸癌患者的結(jié)果比較如表1所示，血清THBS-2檢測出的陽性患者明顯高于血清CEA的檢測（P＜0.001），說明血清THBS-2水平檢測在早期結(jié)直腸癌患者的鑒別診斷上更優(yōu)于CEA。

表1 23例結(jié)直腸癌患者THBS-2檢測與CEA檢測結(jié)果比較

3 討論

THBS-2是血小板反應(yīng)蛋白家族的一員，因為在結(jié)構(gòu)上擁有4個蛋白結(jié)合區(qū)，如促血管生成、細(xì)胞轉(zhuǎn)移、增殖、促凋亡等，也有研究成果發(fā)現(xiàn)THBS2是一種惡性腫瘤相關(guān)血管生成和腫瘤侵襲性的負(fù)調(diào)節(jié)因子［9，10］，在各種腫瘤中的表達(dá)水平也不盡相同，如在宮頸癌、胃癌、卵巢癌等呈低水平表達(dá)，而在肝癌、胰腺導(dǎo)管癌、前列腺癌、口腔鱗癌等則呈高水平表達(dá)［11］，但不管是呈低水平表達(dá)還是高水平表達(dá)，都與對照組有顯著性差異，因而使THBS-2成為一個新的、在腫瘤早期診斷及預(yù)后監(jiān)測中非常具有應(yīng)用前景的標(biāo)志物。

在本研究中，結(jié)腸癌患者的血清THBS-2水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于健康對照組，具有統(tǒng)計學(xué)意義，說明該類患者與卵巢癌等腫瘤患者一樣血清中THBS-2呈低水平表達(dá)，而Wang等研究顯示與相鄰的正常組織相比，結(jié)直腸癌組織中THBS-2的表達(dá)水平明顯升高，并與腫瘤分級、晚期浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，而與患者預(yù)后呈負(fù)相關(guān)［6］。與Wang等的研究結(jié)果不太一致，其可能原因是檢測THBS-2水平的標(biāo)本類型不一樣，Wang等檢測的是腫瘤組織，而本研究檢測的是腫瘤患者的血清標(biāo)本，此外Wang等以腫瘤相鄰的正常組織作為對照，而本研究以健康人群作為對照，血清標(biāo)本比組織標(biāo)本更容易獲取，對患者的創(chuàng)傷性相對較小，也更易于進行批量標(biāo)本的獲取和檢測，因此血清標(biāo)本比組織標(biāo)本更具有臨床實用性。

Hsuan-Yu Peng等研究結(jié)果證明血清THBS-2是胰腺導(dǎo)管癌的獨立預(yù)測標(biāo)志物，可用于高度特異診斷胰腺導(dǎo)管癌，在鑒別患者組和高風(fēng)險對照組時，保證100%特異度的條件下，診斷靈敏度達(dá)仍達(dá)到55.9%［5］。本研究結(jié)果顯示血清THBS-2診斷結(jié)直腸癌的ROC曲線下面積為0.934，說明通過檢測血清中THBS-2的水平來鑒別診斷正常對照人群與結(jié)直腸癌患者的準(zhǔn)確性較高，在保證特異度為100%的情況下，靈敏度仍能高達(dá)87%，而臨床廣泛使用的CEA在同樣保證100%特異度的條件下，靈敏度不到50%，兩者相比，血清THBS-2檢測比CEA具有更明顯的優(yōu)勢。

本研究結(jié)果顯示血清THBS-2水平檢測對于結(jié)直腸癌的早期診斷具有非常重要的臨床應(yīng)用價值，若能建立實驗室正常參考范圍，并對結(jié)直腸癌診斷設(shè)立cutoff值，結(jié)合臨床癥狀，將有助于臨床對結(jié)直腸癌患者進行早期診斷及鑒別診斷。