刺參“參優(yōu)1 號”苗種在不同pH 條件下的代謝特征和適應性研究*

榮小軍 李 彬 廖梅杰① 王印庚 王治平王錦錦 于永翔 張 正 范瑞用

(1. 農業(yè)農村部海洋漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展重點實驗室 中國水產科學研究院黃海水產研究所 青島 266071；2. 青島海洋科學與技術試點國家實驗室海洋漁業(yè)科學與食物產出過程功能實驗室 青島 266071；3. 青島瑞滋集團有限公司 青島 266408)

刺參(Apostichopus j aponicus)自然分布于太平洋西部的中國、俄羅斯、韓國與日本沿海(廖玉麟, 1997)。20 世紀80 年代，刺參人工育苗技術突破后，刺參養(yǎng)殖業(yè)迅猛發(fā)展，目前已成為引領我國第五次海水養(yǎng)殖浪潮的主要品種。然而，近年來隨著產業(yè)規(guī)模的急劇擴大，養(yǎng)殖過程中出現的種質退化、疾病頻發(fā)、產品質量安全等問題日益突出，對刺參養(yǎng)殖的可持續(xù)發(fā)展構成巨大威脅(王印庚等, 2014)。刺參良種選育和規(guī)?；茝V是解決上述問題的重要手段之一。中國水產科學研究院黃海水產研究所采用群體選育方法，以抗病力和生長速度為選育目標，經過累代選育，培育出生長速度快、抗病力強、成活率高的刺參“參優(yōu)1 號”新品種(GS-01-016-2017)，為刺參養(yǎng)殖種質提升提供了種質基礎。然而，生物的性狀表現是環(huán)境和基因共同作用的結果，我國海參養(yǎng)殖區(qū)域跨度大、養(yǎng)殖模式多樣、水域環(huán)境復雜，要充分發(fā)揮良種的種質潛力，需要對其生態(tài)適應性進行科學評價，相應結果也將有助于良種最適養(yǎng)殖區(qū)和養(yǎng)殖模式的確定，進而為獲得最佳的良種增產貢獻率提供科學指導。

pH 是水體環(huán)境的關鍵指標，研究表明，pH 的升高或降低會對魚、蝦、貝、參等水生動物的存活、生長和免疫酶活性產生直接影響(王雙耀等, 2013; 王蕓等, 2013; 文春根等, 2009; 韓莎等, 2018a)。在池塘養(yǎng)殖過程中，因天氣、浮游藻類繁殖、池底大型藻類生長、底質老化、人工投餌或微生態(tài)制劑使用等因素的影響，養(yǎng)殖水體的pH 值常會發(fā)生波動或劇烈變化，監(jiān)測結果表明，池塘養(yǎng)殖水體的pH 值在4.0～10.0 范圍內大幅度波動(韓莎等, 2018b)。近年來，在外海海域，受海洋酸化、赤潮、綠潮等影響，外海的pH 值也會發(fā)生大幅波動。隨著刺參養(yǎng)殖產業(yè)的發(fā)展，尤其是“東參西養(yǎng)”和“北參南養(yǎng)”模式的快速發(fā)展，刺參養(yǎng)殖區(qū)從最初的自然分布區(qū)逐步拓展到黃河三角洲地區(qū)和閩浙沿海，刺參的養(yǎng)殖模式涉及外海底播增殖、灘涂的圍堰養(yǎng)殖、池塘養(yǎng)殖以及陸基的工廠化養(yǎng)殖等多種模式，養(yǎng)殖用水的pH 受相應因素的影響波動較大，pH 值變化會對良種的生理、生長及優(yōu)良性狀的表現產生影響。本研究測定了不同pH 條件下刺參“參優(yōu)1 號”的生長、存活、呼吸代謝以及非特異性免疫酶活性變化，旨在探明“參優(yōu)1 號”對pH 的適應性，分析不同pH 條件下“參優(yōu)1 號”苗種的生長、呼吸代謝和免疫等特征變化，進而確定其最適pH 條件及其耐受機制，為該良種的推廣提供理論依據和參考。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

本實驗所用刺參苗種為2019 年中國水產科學研究院黃海水產研究所在青島瑞滋集團有限公司培育的“參優(yōu)1 號”苗種，平均規(guī)格為(5.00±0.75) g/頭。選取活力良好的個體，在水槽中暫養(yǎng)7 d 后進行實驗。

1.2 實驗方法

根據刺參對pH 的耐受特點和各養(yǎng)殖模式下海水的pH 變化范圍，本研究設8 個pH 梯度：6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5 和10.0。實驗所用海水以砂濾潔凈海水為基礎，利用NaOH 或HCl 調節(jié)至相應pH，采用pH 測定儀測定相應pH，配制好的海水分別儲備在單獨的1 m3的聚丙烯水槽中。各pH 實驗組所用養(yǎng)殖水槽為塑料水槽，水槽容積為30 L。以自然海水pH 值為基礎，按照每天降低或升高0.5 個pH對實驗用海水進行酸堿度的梯度降低或升高。每個pH 實驗設置4 個平行，每個平行放置30 頭刺參，其中3 個平行用于測定相應實驗條件下苗種的生長和存活，另外1 個平行用于呼吸代謝和酶活性測定樣品的獲取。實驗期間的養(yǎng)殖管理：每天投喂配合飼料1 次，按照刺參體重的2%投喂，每天定時吸底、清污并補充相同pH 的儲存海水，換水量為50%。實驗期間，每天觀察并記錄各實驗組刺參的攝食、運動狀況，及時挑出化皮死亡個體并繪制存活率曲線。根據實驗前后刺參存活的個體數和平均體重計算各組存活率(Survival rate, SR)和特定生長率(Specific growth rate, SGR)，設置相同的實驗條件，在第7 天測定各組刺參的呼吸代謝，在0、10、20 和30 d 自各實驗組中隨機抽取刺參苗種，測定其非特異性免疫酶活性。

1.2.1 不同pH 條件下刺參“參優(yōu)1 號”苗種的特定生長率和存活率 實驗開始時，測定并計算苗種的初始平均體重。實驗過程中，每天觀察并記錄苗種的存活數量，繪制存活率曲線圖。實驗結束時，測定并計算終末平均體重，采用以下公式計算苗種的存活率和特定生長率：

存活率(SR)=Nt/N0×100%

特定生長率(SGR)=(lnWt-lnW0)×100/t

式中，N0和Nt分別為刺參初始苗種數量和終末存活苗種數量，W0和Wt分別為刺參苗種的初始平均體重和苗種的終末平均體重(g)，t 為養(yǎng)殖天數。

1.2.2 不同pH 條件下刺參“參優(yōu)1 號”苗種的呼吸代謝 各組到達設定的pH 條件的第7 天測定各實驗組刺參的呼吸代謝，實驗在2 L 呼吸瓶中進行，每個測試瓶中加入相應pH 的海水和刺參，每個pH 梯度設3 個平行組，每組10 頭刺參，同時設置3 個不添加刺參苗種的呼吸瓶作為空白對照組。所有呼吸瓶放入同一個溫度為16℃的水槽中以保持相同的溫度環(huán)境條件(章龍珍等, 2009)。每個呼吸瓶放入刺參苗種并加滿相應pH 的儲存海水后，立即用橡皮塞封口，封口4 h 后用虹吸法收集各呼吸瓶中的水樣，用碘量法(GB17378.4-2007)和次溴酸鈉氧化法(GB17378.4-2007)測定各樣品中的溶解氧(DO)和氨氮(NH3-N)濃度，根據如下公式計算相應pH 條件下刺參的耗氧率(RO)和排氨率(RN)，并進一步測算其氧氮比(O/N)。

耗氧率(RO)=[(O0-Ot)V]/(W×t)

排氨率(RN)=[(Nt-N0)V]/(W×t)

氧氮比(O/N)=(RO/16)/(RN/14)

式中，Ot和O0為實驗結束時實驗組和對照組水體的溶解氧濃度(mg/L)，Nt和N0分別為實驗結束時實驗組和對照組水體的氨氮濃度(mg/L)，t 為實驗周期(h)；W 為參與測試的刺參苗種的體重(g)，V 為實驗的水體體積(L)。

1.2.3 不同pH 條件下刺參“參優(yōu)1 號”苗種的非特異性免疫酶活性變化 本研究實驗周期為30 d，分別在0 d、10 d、20 d、30 d 自各pH 組中隨機抽取3 頭刺參苗種，解剖吸取體腔液，4℃條件下，3000 g離心10 min，吸取上清液，進行酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性測定，酶指標測定選用南京建成生物公司的試劑盒。

1.3 數據處理

利用Graphpad Prism 8.0 軟件進行圖表繪制，用SPSS 18.0 軟件進行單因素方差分析(One-way ANOVA)，多重分析采用Turkey 檢驗，按照P＜0.05 對不同pH組相應測定指標的差異進行顯著性檢測。

2 結果與分析

2.1 pH 對刺參“參優(yōu)1 號”苗種存活的影響

實驗期間，不同pH 條件下刺參“參優(yōu)1 號”苗種的存活率統(tǒng)計結果見圖1。由圖1 可以看出，pH值對苗種存活影響很大，在pH 6.5～9.5 條件下，苗種30 d 存活率均為100%，且苗種攝食、運動正常，附著力較強，而pH 10.0 實驗組，苗種活力下降，附著力降低，逐漸沉到水槽底部，攝食減少，部分個體出現化皮和死亡現象，到第4 天苗種全部死亡，死亡率達100%。

2.2 pH 對刺參“參優(yōu)1 號”苗種生長的影響

由于pH 10.0 條件下測試苗種全部死亡，無法計算實驗周期內苗種的SGR，對pH 6.5～9.5 各實驗組苗種的SGR 計算結果見圖2。由圖2 可以看出，在pH 6.5～9.5 之間，苗種的SGR 隨pH 升高呈先升高后降低的趨勢。在pH 6.5～7.0 之間，苗種的SGR 為負值；在pH 7.5～8.5 之間，SGR 為正值，在pH 9.0～9.5范圍內SGR 降為負值。在pH 6.5～ 8.0 之間，苗種的SGR 顯著升高(P＜0.05)，在pH 8.0～9.5 之間，SGR 逐漸降低。其中，在pH 8.0 實驗組SGR 最高，最高值為0.541%/d。

圖1 不同pH 條件對刺參“參優(yōu)1 號”苗種的存活影響Fig.1 Effect of pH on survival rate of sea cucumber “Shenyou No.1”

圖2 不同pH 條件下刺參“參優(yōu)1 號”苗種的特定生長率Fig.2 Specific growth rate of sea cucumber“Shenyou No.1”under different pH

依據所測得的不同pH 條件下的苗種的SGR 數據并通過excel 數據趨勢，推導不同pH 條件下生長率曲線公式，在pH 6.5～9.5 范圍內，pH 和苗種SGR 的關系可以用以下公式表示：SGR=-0.6298p2+10.132p-40.195 (R2=0.9892)。據公式推算出刺參“參優(yōu)1 號”在pH 條件為8.04 時，將獲得最大的SGR。

2.3 pH 對刺參“參優(yōu)1 號”苗種呼吸代謝的影響

不同pH 條件下刺參“參優(yōu)1 號”苗種的RO的測定結果見圖3。由圖3 可知，在pH 6.5～9.5 范圍內，隨pH 的升高RO呈“V”型變化趨勢，在pH 6.5～8.0范圍內，隨著pH 的上升RO逐漸降低，并在pH 8.0時達最低[19.07 μg/(g·h)]；在pH 8.0～9.5 范圍內，隨pH 的升高RO逐漸升高。RO在pH 6.5 和pH 9.5 組間無顯著差異(P＞0.05)，均處于較高水平。

圖3 不同pH 條件下刺參“參優(yōu)1 號”苗種的耗氧率Fig.3 Oxygen consumption rate of sea cucumber“Shenyou No.1” under different pH

不同pH 條件下刺參“參優(yōu)1 號”苗種的RN的測定結果見圖4。從圖4 可知，不同pH 條件下苗種RO變化趨勢相似，在pH 6.5～9.5 范圍內隨著pH 升高，實驗苗種的RN呈“V”型變化趨勢，并在pH 8.0 時實驗組達到最低谷，最低值為1.34 μg/(g·h)；并且苗種RN在pH 7.5 和pH 8.5 之間以及pH 6.5 和pH 9.5 組間無顯著差異(P＞0.05)。

圖4 不同pH 條件下刺參“參優(yōu)1 號”苗種的排氨率Fig.4 Ammonia excretion rate of sea cucumber“Shenyou No.1” under different pH

根據RN和RO計算不同pH 條件下刺參苗種的O/N 結果見表1。從表1 可以看出，不同的pH 組O/N的值均在11 左右，在pH 8.0 組苗種的O/N 比最高，為12.40±1.17，但不同pH 條件下各實驗組苗種的O/N無顯著差異(P＞0.05)。

2.4 pH 對刺參“參優(yōu)1 號”苗種非特異性免疫酶活力的影響

由于在pH 10.0 組實驗過程中測試用苗種全部死亡，未對該實驗組進行體腔液獲取和酶指標的測定。本研究對pH 6.5～9.5 條件下苗種的非特異性免疫酶活性(包括ACP、AKP、LZM 和SOD)的測定結果見圖5～圖8。

表1 pH 對刺參“參優(yōu)1 號”O(jiān)/N 的影響Tab.1 Effect of pH on O/N of sea cucumber “Shenyou No.1”

對各實驗組ACP 酶活力的測定結果見圖5，pH為8.0 的實驗組，在實驗周期內的各時間點刺參“參優(yōu)1 號”苗種的ACP 活性無顯著變化(P＞0.05)，其余實驗組ACP 活性隨養(yǎng)殖時間的延長呈波動起伏趨勢。對比相同時間節(jié)點不同pH 條件實驗組的酶活力結果可以看出，隨著pH 的升高ACP 活性呈“V”型波動趨勢，且在pH 8.0 時達到最低值。

圖5 pH 對刺參“參優(yōu)1 號”體腔液ACP 活性的影響Fig.5 Effect of pH on ACP activity of coelomic fluid in sea cucumber “Shenyou No.1”

對各實驗組苗種AKP 酶活力的測定結果見圖6，在pH 6.5～9.5 范圍內，AKP 的活性受pH 影響變化顯著，在pH 6.5～8.0 范圍內，AKP 的活性隨pH 升高而逐漸降低，并在pH 為8.0 時達到最低值，且pH 8.0實驗組不同時間點刺參“參優(yōu)1 號”苗種的AKP 活力沒有顯著變化(P＞0.05)；在pH 8.0～9.5 范圍內，AKP的活性隨pH 升高而逐漸升高。

不同pH 對刺參“參優(yōu)1 號”體腔液中LZM 活性的影響見圖7。從圖7 可以看出，在pH 6.5～8.0 范圍內，LZM 的活性隨pH 升高而逐漸降低，并在pH為8.0 時達到最低值，且pH 8.0 實驗組不同時間點刺參“參優(yōu)1 號”苗種的LZM 活力沒有顯著變化(P＞0.05)，pH 8.0～9.5 范圍內，LZM 的活性隨pH 升高而逐漸升高；除pH 8.0 組外，其他實驗組LZM 的活性隨時間均呈先升高再降低的趨勢，并在第10 天到達到峰值。

圖6 pH 對刺參“參優(yōu)1 號”體腔液AKP 活性的影響Fig.6 Effect of pH on AKP activity of coelomic fluid in sea cucumber “Shenyou No.1”

圖7 pH 對刺參“參優(yōu)1 號”體腔液LZM 活性的影響Fig.7 Effect of pH on LZM activity of coelomic fluid in sea cucumber “Shenyou No.1”

圖8 pH 對刺參“參優(yōu)1 號”體腔液SOD 活性的影響Fig.8 Effect of pH on SOD activity of coelomic fluid in sea cucumber “Shenyou No.1”

不同pH 對刺參“參優(yōu)1 號”體腔液中SOD 活性的影響見圖8。從圖8 可以看出，在pH 6.5～9.5 范圍內，0 d 和10 d 時SOD 活性隨pH 的升高呈“V” 型變化趨勢，最低值在pH 8.0；20 d 和30 d 時pH 的變化對SOD 的活性影響相對較?。籶H 8.0 實驗組在實驗周期內的不同時間點，刺參“參優(yōu)1 號”苗種的SOD 活力變化不顯著(P＞0.05)；此外，各實驗組SOD活性均在0 d 時最高，在第10 天時活性呈降低趨勢，在20 d 和30 d 時活性較低。

3 討論

3.1 刺參“參優(yōu)1 號”苗種在不同pH 條件下的適應性

水體pH 值是水產養(yǎng)殖過程中的一個重要的環(huán)境因子，pH 的高低直接影響水生動物的生長及生理代謝(曹善茂等, 2015; Hu et al, 2015)。刺參在pH 不適時會出現棘刺收縮、身體卷曲、糞便變細變短、池底的殘餌量增加等現象。在刺參養(yǎng)殖過程中，水體中的pH 會因養(yǎng)殖管理、酸雨和水體污染等因素的影響而產生波動，而且不同池塘pH 也存在差異，對水產新品種而言，選育目標性狀決定了其在養(yǎng)殖業(yè)中的應用潛力，而新品種生態(tài)適應性則決定了其推廣范圍和區(qū)域。刺參“參優(yōu)1 號”是以抗燦爛弧菌(Vibrio splendidus)能力和生長速度為選育目標培育出的刺參新品種，為獲得最大的良種貢獻率，需要對該品種的酸堿度適應范圍進行評估，以期根據不同區(qū)域養(yǎng)殖水域pH 范圍進行合理推廣，從而發(fā)揮良種的最大貢獻率。

水產動物對pH 的適應范圍存在物種的差異。相關研究表明，黃顙魚(Pseudobagrus f uvlidraco)在pH 7.0～8.0 范圍內生長較好(崔平等, 2018)，縊蟶(Sinonovacula constricta)在pH 7.5～9.5 可正常存活(葉博等, 2019)，中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)在幼蟹時期適宜的pH 范圍為8.0～9.0 (劉金生等, 2016)。在本研究中，pH 10.0 實驗組第4 天苗種全部死亡，是由于水體堿性過高，刺參出現急性中毒現象；在pH 7.5～8.5之間苗種呈正生長，超出或低于此范圍，苗種呈現負增長。研究表明，pH 值過高或過低導致海洋生物生長發(fā)育緩慢，是因為酸堿度的變化導致生物體內滲透壓發(fā)生改變，為了維持體內的酸堿平衡，必然會轉移部分用于其他生理過程的能量進行反饋補償性代謝，從而影響了生物其他的正常生理活動，導致生長發(fā)育變慢(湛垚垚等, 2013)。劉洋等(2020)研究發(fā)現，海灣扇貝(Argopecten irradia)幼蟲在pH 低于7.6 的條件下出現生長停滯現象。Asha 等(2005)研究發(fā)現，尖塔海參(Holothuria sp inifera)幼蟲的最適生存pH 為7.8，在pH 達到9.0 的時候實驗個體已全部死亡。本研究緩慢調節(jié)pH 后30 d 的養(yǎng)殖實驗結果表明，刺參“參優(yōu)1 號”的存活pH 為6.5～9.5，最適生長pH 為7.5～8.5。韓莎等(2018b)研究表明，青島國家海洋科研中心選育的刺參苗種適宜生長的pH 范圍為7.6～8.8，與本研究結果相近。Luo 等(2019)調研了大連刺參養(yǎng)殖池塘的pH 年變化范圍為7.86～8.38，表明該地酸堿度符合“參優(yōu)1 號”苗種的pH 適應性，有利于良種優(yōu)勢性狀的發(fā)揮。

3.2 刺參“參優(yōu)1 號”在不同pH 條件下的呼吸代謝特征

pH 波動會對水生生物產生一定的刺激，從而導致呼吸代謝變化(Stumpp et al, 2011、2012)。曹善茂等(2015)研究表明，中華原鉤蝦(Eogammarus sinensis)在最適pH 范圍內的RO和RN均處在較高水平，Savant等(1995)的研究也呈現相同的趨勢。而朱愛意等(2007)研究顯示，褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)在最適pH范圍內的RO和RN相對較低，在pH 不適時RO和RN會提高。本研究結果顯示，pH 8.0 實驗組刺參的RO和RN最低，pH 偏移會使RO和RN上升，是由于在適宜的pH 下，機體的基礎代謝較低，耗能較少；在pH脅迫下，機體需要消耗更多的能量去維持體內的內環(huán)境平衡，此趨勢與章龍珍等(2009)對長鰭籃子魚(Siganus canaliculatus)幼魚的研究結果類似。

氧氮比(O/N)是反映生物對環(huán)境適應情況和營養(yǎng)物質供能情況的指標(Ikeda, 1974)，不同的生物之間O/N 受pH 影響的變化趨勢存在差異。O/N 表示生物體內蛋白質、脂肪和碳水化合物分解代謝之間的關系(曹善茂等, 2015)。Mayzalld(1976)提出，O/N 約為7時，生物體能量完全由蛋白質氧化提供；Ikeda (1974)認為，O/N 約為24 時，生物體所需能量由蛋白質和脂肪氧化提供；如果主要由脂肪或碳水化合物提供，O/N 將變?yōu)闊o窮大(Conover et al, 1968)。相關研究表明，中華小長臂蝦(Palaemonetes sinensis)在pH 4.0～9.0之間O/N 呈波動趨勢，pH 的升高會使長肋日月貝(Amusium pleuronectes)的O/N 升高，在pH 7.7 和pH 8.7的水體中文蛤(Meretrix meretrix)O/N 顯著高于pH 6.7和pH 9.7(姜宏波等, 2017; 嚴俊賢等, 2018; 楊杰青等, 2016)。本研究表明，pH 的變化對刺參O/N 無顯著影響，說明pH 的變化不會改變刺參代謝底物，與上述研究結果不同的原因可能由于物種差異所致。

3.3 刺參“參優(yōu)1 號”苗種在不同pH 條件下的免疫酶活性特征

水體中pH 過高或者過低會影響刺參體腔液的酸堿度，直接影響其各種生理過程。另外，pH 變化還會導致有益微生物的大量死亡，病原菌及有害生物的大量繁殖打破了水體中的生態(tài)平衡，進而間接影響到刺參機體的代謝和免疫過程。研究表明，pH 脅迫會影響水產動物免疫酶的活性(魏煒等, 2001; 王維娜等,2002)，因此，可以通過檢測刺參體內主要免疫酶的活性來反映對pH 的適應情況。ACP 和AKP 是動物體內參與免疫防御等活動的2 種重要的水解酶, 是溶酶體酶的重要標志酶(文春根等, 2009)。超氧化物歧化酶(SOD)是生物體內重要的抗應激酶，它可以將機體內過多的O2-催化生成H2O2和O2，從而起到保護機體的作用(Sui et al, 2016)。本研究結果表明，pH 變化顯著影響了刺參“參優(yōu)1 號”的ACP、AKP、LZM和SOD 活性。從相同pH 條件下30 d 實驗期內酶指標的測定結果可以看出，LZM 活性在第10 天最高，SOD 活性在第0 天最高，而后開始降低，ACP 和AKP則隨時間延長呈波動變化，表明刺參體腔細胞在應對pH 變化過程中，不同酶指標的變化響應時間存在差異性。Gullian 等(2017)研究發(fā)現，墨西哥海參體內的SOD 在pH 7.7 的時候活性較高。Zhao 等(2010)通過添加酵母多糖進行pH 脅迫(pH 為5.5 和10.0) 24 h 后，使LSZ 和ACP 活性升高，但其僅代表24 h 的數據，并未驗證該pH 條件下海參能否長期存活。趙先銀等(2011)研究發(fā)現，對蝦的多種酶活性對不同pH 條件的響應時間也存在差異。從不同的pH 組之間酶指標的測定結果可以看出，4 種免疫酶的活性均在最適生長的pH 8.0 實驗組最低，隨著pH 的偏移，4 種免疫酶活性均出現升高趨勢，變化趨勢與付監(jiān)貴等(2016)對日本沼蝦(Macrobrachium n ipponense)的研究結果類似；樊甄姣等(2006)對櫛孔扇貝(Chlamys farreri)的研究也發(fā)現，在pH 7.0～9.0 之間，實驗組呈現出隨pH偏移，各種酶活性升高的現象；文春根等(2009)研究發(fā)現，無齒蚌(Anodonta woodiana)體內的多種免疫酶活性隨pH 的改變而出現波動變化，可能是為避免環(huán)境對機體的損傷而發(fā)生的免疫調節(jié)反應，也可能是由“毒物興奮效應”所導致(Calabrese et al, 2005)。

綜上所述，在刺參“參優(yōu)1 號”苗種養(yǎng)殖生產過程中應保持水體pH 在7.5～8.5 范圍內，苗種生長速度較快，pH 過高或過低均會引起刺參的應激反應，表現為生長下降和存活率降低等現象，生理指標表現為RO和RN升高以及免疫酶活性發(fā)生變化。因此，在良種推廣過程中，應根據相應海域或養(yǎng)殖模式下的pH 周年變化范圍，選擇適宜的推廣區(qū)域并控制養(yǎng)殖管理工藝，避免暴雨、水體污染等自然或人為因素造成pH 大幅波動，保障良種在適宜的環(huán)境條件下生長，以獲得最佳的良種貢獻率。