新型冠狀病毒樣本核酸檢測及核酸提取方法效果研究

顧佳

摘要：目的：探討分析在進(jìn)行新型冠狀病毒肺炎患者的診斷時，選擇不同取樣部位對核酸檢測結(jié)果產(chǎn)生的影響。方法：將2020年11月至2021年9月間錄入的30名確診為新型冠狀病毒肺炎的患者作為研究對象，由醫(yī)療實(shí)驗人員對所有患者進(jìn)行診斷，采用鼻咽拭子、痰液、血液、糞便、肛門拭子的病毒核酸進(jìn)行 熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行檢測。確認(rèn)不同檢測部位陽性率。結(jié)果：在本次研究結(jié)果中發(fā)現(xiàn)鼻咽拭子的診斷陽性率為13（43.33%），痰液標(biāo)本診斷準(zhǔn)確率為23（76.67%），血液標(biāo)本診斷準(zhǔn)確率為1（3.33%），糞便陽性率為6（20.00%），肛門拭子的診斷陽性率為2（6.67%）。診斷率最高的為痰液標(biāo)本。結(jié)論：在對新型冠狀病毒肺炎患者進(jìn)行臨床診斷時，實(shí)驗人員所選擇的取樣部位會對最終的檢驗結(jié)果產(chǎn)生直接影響，故而在臨床上建議采用痰液標(biāo)本進(jìn)行檢測能夠獲得最高的診斷準(zhǔn)確率，而對于疑似病例的患者可以采用多種診斷方式連用的形式，提高患者的診斷準(zhǔn)確度。

關(guān)鍵詞：新型冠狀病毒肺炎;取樣部位;診斷分析;臨床研究

新型冠狀肺炎病毒，在近年來我國范圍內(nèi)呈現(xiàn)快速傳播的趨勢，雖然在我國臨床工作者不斷的努力下[1]，這一疾病已經(jīng)得到了有效的管理。新型冠狀病毒肺炎的診斷依舊是現(xiàn)代相關(guān)工作人員重視的一項內(nèi)容，這種肺炎在臨床上主要通過呼吸道飛沫傳播和接觸傳播，而隱性感染者也可能成為感染源，由于人類對于新型冠狀病毒肺炎缺乏免疫力，則普通人在日常生活中容易受到這種病毒的感染，尤其是老年人以及身體抵抗力較差的患者，更加容易出現(xiàn)這種疾病。目前新型冠狀病毒肺炎以及發(fā)展為重大公共衛(wèi)生突發(fā)事件，需要一種快速且有效的手段對其進(jìn)行評估。實(shí)時熒光定量聚合酶電反應(yīng)是一種利用熒光信號實(shí)時對每個循環(huán)的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行診斷的方式[2]。這種診斷方式靈敏度較高，并且具有教堂的特異性，在臨床應(yīng)用過程中易于普及，成為了目前臨床上對新型冠狀肺炎病毒進(jìn)行診斷的一種首選方式，而樣本的選擇是對患者病情進(jìn)行診斷的關(guān)鍵[3]。本次實(shí)驗將2020年11月至2021年9月間錄入的30名確診為新型冠狀病毒肺炎的患者作為研究對象，探討分析在進(jìn)行新型冠狀病毒肺炎患者的診斷時，選擇不同取樣部位對核酸檢測結(jié)果產(chǎn)生的影響，現(xiàn)報道如下。

1一般資料與方法

1.1一般資料

將2020年11月至2021年9月間錄入的30名確診為新型冠狀病毒肺炎的患者作為研究對象，由醫(yī)療實(shí)驗人員對所有患者進(jìn)行診斷，采用鼻咽拭子、痰液、血液、糞便、肛門拭子的病毒核酸進(jìn)行 熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行檢測。其中男性患者共有16例，女性患者共有14例，年齡介于55-78歲之間，平均年齡（64.2±4.8）歲。

①符合新型冠狀病毒肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn);②意識清楚，未昏迷者;⑤神經(jīng)功能缺損無繼續(xù)進(jìn)展;③患者知情同意;④本次實(shí)驗統(tǒng)計計劃已經(jīng)上交倫理委員會，批準(zhǔn)后得以實(shí)施。

排除標(biāo)準(zhǔn)

①昏迷;②有嚴(yán)重的心、肝、腎合并癥或嚴(yán)重感染;③發(fā)病前有影響功能恢復(fù)的神經(jīng)或肌肉骨骼疾病;④不伴運(yùn)動功能障礙者;⑤不愿簽署知情同意書。

本次實(shí)驗患者的個體狀況良好，可進(jìn)行后續(xù)對比（P>0.05）。

1.2方法

本次研究中所有患者在入院時患者的鼻咽拭子核酸檢測結(jié)果均為陽性，所有患者有醫(yī)務(wù)人員對其個體狀況進(jìn)行診斷，確認(rèn)患者的臨床診斷準(zhǔn)確度，并按要求對患者不同部位進(jìn)行相應(yīng)的診斷，分別采集患者的鼻咽拭子、痰液、血液、糞便、肛門拭子。在獲得患者的實(shí)驗樣本后，由醫(yī)務(wù)人員對患者進(jìn)行常規(guī)的核酸提取操作，并按要求進(jìn)行臨床診斷。

1.3 評價標(biāo)準(zhǔn)

按照核酸檢測結(jié)果陽性評估方式，對患者的陽性率進(jìn)行評估，分析不同診斷方式的陽性率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件選擇spss 21.00 for windows，確認(rèn)兩組患者T、X2檢驗值，判斷檢驗值與P值之間的關(guān)聯(lián)性，借此對本次研究結(jié)果中指標(biāo)進(jìn)行評估，確認(rèn)兩組是否存在統(tǒng)計學(xué)差異。

2結(jié)果

在本次研究結(jié)果中發(fā)現(xiàn)鼻咽拭子的診斷陽性率為13（43.33%），痰液標(biāo)本診斷準(zhǔn)確率為23（76.67%），血液標(biāo)本診斷準(zhǔn)確率為1（3.33%），糞便陽性率為6（20.00%），肛門拭子的診斷陽性率為2（6.67%）。診斷率最高的為痰液標(biāo)本。

3討論

新冠肺炎的全程為新型冠狀病毒肺炎，是在近兩年中出現(xiàn)的一種病毒，最早是在湖北武漢發(fā)現(xiàn)的病例，該病具有很強(qiáng)的傳播性，且致死率極高，由于傳播速度非?？焖俣艿絿液蜕鐣膹V泛關(guān)注[4]。目前我國乃至全球的確診例數(shù)和死亡例數(shù)都非常高，且還在持續(xù)增長中。在感染以后，患者主要以發(fā)熱、喉嚨不適、無力為主要癥狀，另外也可能出現(xiàn)流鼻涕、鼻塞、腹痛、肌肉酸痛等癥狀，如果未及時采取措施治療，病毒入侵身體會逐漸導(dǎo)致凝血功能障礙和多器官衰竭[5]。新型冠狀病毒在全國出現(xiàn)了明顯的擴(kuò)散，而相關(guān)工作人員在進(jìn)行患者的接治時，一方面需要為發(fā)熱患者進(jìn)行有效的醫(yī)療，另一方面還要注意發(fā)熱患者是否出現(xiàn)了新冠疫情感染的情況，所以在開展患者的護(hù)理時，需要盡可能選擇合理且有效的門診護(hù)理管理工作，通過這種方式能夠有助于保障普通患者與新型冠狀病毒感染患者的安全性，避免出現(xiàn)交叉感染和疫情蔓延的情況。另外，上述中提到該病的傳染性極強(qiáng)，且目前還沒有特效藥能夠治療，加上對該病缺乏正確的認(rèn)識，并未通過措施來進(jìn)行預(yù)防，所以一旦患者確診或者疑似新冠，就應(yīng)該立刻進(jìn)行隔離，防止出現(xiàn)交叉感染，但由于大部分患者對新冠的了解不足，隔離的時候患者的心態(tài)或者情緒可能會受到影響，所以隔離期間有必要采取相關(guān)護(hù)理干預(yù)，讓感染率降到最低[6]。目前我國在進(jìn)行新型冠狀病毒檢測時，主要采用實(shí)時熒光RT-PCR的方式進(jìn)行檢測，這種檢測方式不僅操作簡單，并且對于醫(yī)務(wù)人員的整體要求較低，通過進(jìn)行核酸檢測的方式來確認(rèn)患者是否存在新型冠狀病毒感染的狀況。

病毒核酸檢測陽性是新型冠狀病毒的病原學(xué)診斷依據(jù)，目前臨床上在對患者的病情進(jìn)行診斷時，主要采用上呼吸道鼻咽拭子作為核酸檢測樣本，而其他生物樣本在臨床上的診斷準(zhǔn)確度較少。而在本次研究結(jié)果中顯示不同樣本，對于檢測工作產(chǎn)生的準(zhǔn)確度也有所不同，在鼻咽拭子的診斷陽性結(jié)果中，陽性率大約為43%左右，同時痰液樣本的診斷準(zhǔn)確率可以達(dá)到76.67%，故而在對患者進(jìn)行病情診斷時，建議采用痰液樣本的形式對其進(jìn)行診斷，能夠有助于保障患者的診斷準(zhǔn)確度。而采用其他診斷方式進(jìn)行診斷，診斷，準(zhǔn)確率均不超過50%，尤其是血液標(biāo)本診斷率僅為3.33%。在研究結(jié)果中，痰液樣本診斷陽性率最高的原因可能是由于新型冠狀病毒經(jīng)呼吸道分泌物進(jìn)入消化道所導(dǎo)致的，但也并不排除消化道粘膜屏障損傷，可能會導(dǎo)致患者陽性率增加的情況。在患者假陰性出院以及出院后患者的復(fù)陽性風(fēng)險較高，故而醫(yī)務(wù)人員在對患者的病情進(jìn)行判斷時，可根據(jù)患者的臨床癥狀作出相應(yīng)的診斷方式選擇必要時可以采用咽拭子檢測聯(lián)合痰液檢測的方式對患者進(jìn)行判斷，能夠有助于改善患者的病情。了解患者的具體情況，包含過往病史、最近接觸的人、去過的地方、目前的臨床癥狀，并讓患者走專用通道到達(dá)醫(yī)院，并且時刻佩戴口罩，在進(jìn)行護(hù)理前后，需要對手部進(jìn)行消毒并將手套放至專用垃圾桶中處理，檢查儀器也需要定期消毒，檢查病房時應(yīng)控制時間，盡可能將接觸患者的時間縮短。

綜上所述，在對新型冠狀病毒肺炎患者進(jìn)行臨床診斷時，醫(yī)務(wù)人員所選擇的取樣部位會對最終的檢驗結(jié)果產(chǎn)生直接影響，故而在臨床上建議采用痰液標(biāo)本進(jìn)行檢測能夠獲得最高的診斷準(zhǔn)確率，而對于疑似病例的患者可以采用多種診斷方式連用的形式，提高患者的診斷準(zhǔn)確度。

參考文獻(xiàn)

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