人乳頭狀瘤病毒DNA檢測(cè)聯(lián)合液基細(xì)胞學(xué)檢查意義在宮頸病變篩查中的意義

韋純麗

摘要：目的：研究分析高危型人乳頭瘤病毒檢測(cè)聯(lián)合液基細(xì)胞學(xué)檢查用于宮頸癌前病變篩查的臨床價(jià)值和意義。方法：選用的病例樣本為2020年1月～2020年12月時(shí)間段5209例在我院進(jìn)行宮頸癌前病變篩查的患者，全部患者均接受了高危型人乳頭瘤病毒DNA檢測(cè)聯(lián)合液基細(xì)胞學(xué)檢查，如果患者檢查結(jié)果符合異常指標(biāo)，則會(huì)進(jìn)行下一步的病理學(xué)宮頸活體組織檢查，本研究共分析了255例患者的病理學(xué)組織活檢結(jié)果。結(jié)果：TCT檢查結(jié)果與宮頸病變顯著相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=79.1，P<0.01）; HPV類型檢查結(jié)果與宮頸病變顯著相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=621.1，P<0.01）;高危型的HPV感染和TCT檢查結(jié)果密切相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=732.2，P<0.01）。結(jié)論：高危型人乳頭瘤病毒檢測(cè)聯(lián)合液基細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸癌前病變篩查中具有重要的臨床價(jià)值，可在臨床全面推廣該應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：宮頸癌前病變;高危型人乳頭瘤病毒檢測(cè);液基細(xì)胞學(xué);篩查

【中圖分類號(hào)】R246.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1673-9026（2021）03-047-02

宮頸癌是發(fā)生在全世界女性中第四大最常見的癌癥[1]。人類乳頭瘤病毒（Human Papilloma Virus，HPV）的感染是全世界最常見的性傳播疾病，多達(dá)5%的人類癌癥可歸因于其感染，高風(fēng)險(xiǎn)的HPV持續(xù)性感染已被公認(rèn)是導(dǎo)致宮頸癌的主要原因，HPV家族包括了170多種可感染分層上皮的病毒，13種hrHPV亞型中最常見的為HPV-16和18型[2]。傳統(tǒng)上，細(xì)胞學(xué)篩查是宮頸癌二級(jí)預(yù)防的方法，但現(xiàn)在越來(lái)越多的薈萃分析推薦將病毒學(xué)檢測(cè)用于對(duì)宮頸癌前病變及浸潤(rùn)性癌變的篩查。本研究重點(diǎn)探討分析hrHPV-DNA檢測(cè)聯(lián)合薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查（Thinprep liquid Cytologic Test，TCT）在宮頸病變篩查中的意義及應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究開展時(shí)間段為2020年1月1日～2020年12月31日，搜集的病例樣本為5209例于我院同時(shí)進(jìn)行宮頸癌前病變TCT和hrHPV-DNA篩查的患者，臨床表現(xiàn)為陰道分泌物增多、宮頸肥大或糜爛、異常陰道出血、月經(jīng)紊亂等，無(wú)子宮切除術(shù)及子宮椎體切除術(shù)病史、急性陰道炎癥病史，且未進(jìn)行任何宮頸癌治療。5209例患者年齡范圍為25～64歲，年齡均值為40.75±5.68歲。其中進(jìn)行病理活檢者255例。

1.2 方法

1.2.1 TCT檢查

患者排空膀胱，平躺于檢查臺(tái)。婦產(chǎn)科醫(yī)師戴上無(wú)菌手套后，先將病人外陰處用無(wú)菌棉簽清潔白帶等粘液后，再換宮頸刷插入病人宮頸內(nèi)約1厘米，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5圈以上后，把宮頸刷迅速放入細(xì)胞液中多次震蕩，使得細(xì)胞能被洗脫入細(xì)胞液中，最后送我院檢驗(yàn)科檢查。注意在檢查前48小時(shí)內(nèi)禁止性生活、禁止沖洗陰道或使用陰道栓劑，同時(shí)也禁止做陰道內(nèi)診。細(xì)胞學(xué)診斷采用國(guó)際癌癥協(xié)會(huì)推薦的TBS分級(jí)系統(tǒng)：無(wú)上皮或惡性病變（no epithelial or malignant lesion，NILM）、非典型鱗狀上皮細(xì)胞（atypical squamous cells，ACS）、低度鱗狀病變（low squamous intraepithelial lesion，LSIL）、高度鱗狀病變（high squamous intraepithelial lesion，HSIL）、鱗狀細(xì)胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）或腺癌（adenocarcinoma，AC）等。

1.2.2 hrHPV-DNA檢測(cè)

同樣的，將病人外陰處的粘液清理干凈后，換宮頸刷插入宮頸內(nèi)約1厘米處順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5次后，把宮頸刷在裝有細(xì)胞液的試管中停留10秒以上，獲得細(xì)胞后，利用人乳頭狀瘤病毒核酸檢測(cè)試劑盒，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)13種常見的hrHPV亞型。

1.2.3 宮頸病理組織活檢

利用陰道鏡輔助設(shè)備，給患者進(jìn)行消毒外陰、陰道、宮頸后，用專用的活檢鉗，根據(jù)病變部位（使用5%乙酸和碘溶液來(lái)確定轉(zhuǎn)化區(qū)）和要求，無(wú)菌條件下取幾小塊組織并放入10%福爾馬林溶液中固定，隨后送院外病理科做切片，染色，顯微鏡下觀察分析。依據(jù)病理學(xué)宮頸活體組織檢查，可將宮頸癌前病變劃分為CINⅠ（cervical intraepithelial neoplasia grade 1，宮頸上皮組織輕度非典型增生）、CINⅡ（cervical intraepithelial neoplasia grade 2，宮頸上皮組織中度非典型增生）、CINⅢ（cervical intraepithelial neoplasia grade 3，重度非典型增生、子宮原位癌）。本次研究中，當(dāng)TCT檢測(cè)結(jié)果為L(zhǎng)SIL及以上病變時(shí)，或者當(dāng)hrHPV-DNA檢測(cè)結(jié)果顯示為亞型16和（或）18時(shí)，都將進(jìn)行進(jìn)一步的組織病理學(xué)的活檢。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

使用SPSS 22.0分析本次數(shù)據(jù)，定性資料組間比較采用x2檢驗(yàn)，P <0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TCT與宮頸組織病理學(xué)檢查結(jié)果分析

本次選擇的篩查對(duì)象共有5209例，TCT檢查結(jié)果顯示為L(zhǎng)SIL及以上的有232例，其中被診斷為L(zhǎng)SIL有 204例（3.9%），HSIL有28例（0.5%）。對(duì)檢查結(jié)果為L(zhǎng)SIL及以上和HPV高危型（16或18亞型）的255名篩查對(duì)象進(jìn)行病理學(xué)活檢，把不同宮頸病變類型的組織病理學(xué)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=79.1，P<0.01），提示TCT檢查結(jié)果與宮頸病變顯著相關(guān)（表1）。

2.2 HPV類型與宮頸組織病理學(xué)檢查結(jié)果分析

在全部的5209例篩查對(duì)象標(biāo)本中，hrHPV-DNA檢測(cè)為陽(yáng)性的共有1227例，陽(yáng)性率為23.6%;其中亞型16的篩查對(duì)象244例（4.7%），亞型18的患者有11例（0.2%）。對(duì)255名篩查對(duì)象宮頸標(biāo)本進(jìn)行病理學(xué)活檢，把不同宮頸病變類型的組織病理學(xué)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（?x2=621.1，P<0.01），提示HPV類型檢查結(jié)果與宮頸病變顯著相關(guān)（表2）。

2.3 HPV類型與TCT檢查結(jié)果相關(guān)性分析

將HPV高危型和非高危型的TCT結(jié)果進(jìn)行比較，兩者差異（表3）有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=732.2，P<0.01），表明高危型的HPV感染和TCT檢查結(jié)果是密切相關(guān)的。

3 討論

宮頸癌是全世界婦女死亡的主要原因之一，發(fā)病率逐年升高且呈年輕化趨勢(shì)，與其進(jìn)程發(fā)展相關(guān)的主要危險(xiǎn)因素包括高危型人乳頭瘤病毒感染、年齡、吸煙、分娩、使用口服避孕藥和飲食等。在這些不同的危險(xiǎn)因素中，高危型HPV的持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生發(fā)展的主要驅(qū)動(dòng)因素。人乳頭瘤病毒HPV是一種嗜黏性或皮膚性、雙鏈非包膜病毒，屬性傳播病毒，超過(guò)80%的性活躍人群在其一生中都感染過(guò)該病毒。由HPV引起的感染通常是暫時(shí)性的和無(wú)癥狀的，并且可以在六個(gè)月至兩年內(nèi)被宿主的免疫系統(tǒng)清除。在HPV感染持續(xù)存在的情況下，它可能導(dǎo)致早期癌變，如果不能及早發(fā)現(xiàn)以進(jìn)行治療，可能會(huì)最終發(fā)展為癌癥。然而，值得注意的是，大多數(shù)HPV基因型并不是高度致癌的。事實(shí)上，目前有226種HPV基因型和新的HPV不斷被發(fā)現(xiàn)，這些HPV基因型按照國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)的致癌性分類，低風(fēng)險(xiǎn)型HPV有基因型6和11，其和致癌性無(wú)關(guān)聯(lián)，主要會(huì)導(dǎo)致肛門生殖器疣和口腔乳頭狀瘤;高風(fēng)險(xiǎn)型HPV類型有16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68等，HrHPVs的感染和癌癥的形成是相關(guān)的，可能會(huì)導(dǎo)致子宮頸癌、外陰癌。陰道癌、肛門癌、頭頸癌、口腔癌和喉癌等]。在宮頸癌前病變發(fā)展的早期階段，hrHPV相關(guān)的宮頸癌發(fā)生是無(wú)癥狀的，可以一直表現(xiàn)為hrHPV陰性[3]。具體來(lái)說(shuō)，hrHPV通過(guò)感染子宮頸上皮導(dǎo)致宿主基因組改變從而逐漸使宮頸上皮細(xì)胞發(fā)生了低度或高度的病變;一方面，hrHPV能沉默各種腫瘤抑制因子，另一方面激活各種致癌因子異常發(fā)揮作用，進(jìn)而引起基因組的不平衡和不穩(wěn)定性，推動(dòng)腫瘤的發(fā)展。但是宮頸癌發(fā)展的嚴(yán)重程度取決于HPV的特定亞型，其中16和18亞型是腫瘤轉(zhuǎn)化的主要推動(dòng)力。故本研究中重點(diǎn)選取hrHPV檢測(cè)結(jié)果為16和（或18）亞型陽(yáng)性的對(duì)象進(jìn)行病理學(xué)組織的活檢，雖然病理學(xué)檢查是對(duì)臨床腫瘤診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但要從腫瘤中直接獲得這種標(biāo)本而不中斷卻很難，并且不能反映治療后腫瘤的動(dòng)態(tài)變化[4]。所以，我們急需一種簡(jiǎn)便的其他輔助診斷方法。

本研究結(jié)果顯示，TCT檢查結(jié)果與宮頸病變顯著相關(guān)，高危型HPV檢查結(jié)果與宮頸病變也顯著相關(guān)，這些結(jié)果和其他人的研究結(jié)果也是一致的。我們嘗試分析TCT檢查結(jié)果和hrHPV檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性，本研究表明兩者檢查結(jié)果是密切相關(guān)的，TCT聯(lián)合hrHPV檢測(cè)對(duì)于宮頸癌前病變的輔助診斷是很有價(jià)值的，非常值得在臨床上大規(guī)模推廣此種方法[5-6]。這種聯(lián)合檢測(cè)可提高診斷的準(zhǔn)確度和靈敏度。值得一提的是，由于社會(huì)經(jīng)濟(jì)和社會(huì)文化的影響，即使宮頸癌篩查成本很低，也會(huì)出現(xiàn)很多女性不愿意主動(dòng)去醫(yī)院檢查此項(xiàng)目的現(xiàn)象，特別是在經(jīng)濟(jì)落后的農(nóng)村，嚴(yán)重阻礙宮頸癌前病變的及早發(fā)現(xiàn)，針對(duì)于此種現(xiàn)象，現(xiàn)已有HPV檢測(cè)的自我采樣方式來(lái)替代醫(yī)生的直接接觸取樣，這可以增加女性對(duì)宮頸癌篩查的參與度，此種方法已經(jīng)用于宮頸癌的國(guó)際篩查計(jì)劃[7-8]。更令人鼓舞的是，HPV疫苗已在我國(guó)上市，預(yù)防性HPV疫苗接種是減少和根除HPV相關(guān)疾病和宮頸癌的有效策略，這很有前景。預(yù)防宮頸癌是篩查的主要目標(biāo)。但是，即使注射了HPV疫苗，廣大女性也應(yīng)該做好按時(shí)篩查的工作。

參考文獻(xiàn)

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