兩種前處理方法檢測白酒中甲醛含量的比較

黃靜 章發(fā)盛

(湘西食品藥品檢驗所，湖南 吉首 416000)

近年來，白酒行業(yè)甲醛問題受到輿論關(guān)注?，F(xiàn)行有效的《發(fā)酵酒及其配制酒》GB2758-2012，只規(guī)定了發(fā)酵酒(啤酒)中甲醛的限量(≤2mg·L-1)[1]，目前并沒有關(guān)于白酒中甲醛限量的強制性標準，也沒有檢測白酒中甲醛含量的國家食品安全標準。本次試驗參照《發(fā)酵酒及其配制酒衛(wèi)生標準的分析方法》GB/T 5009.49-2008[2]，采用蒸餾法和直接法對白酒進行前處理后,加入2mL乙酰丙酮溶液顯色反應(yīng)，搖勻后在沸水浴中加熱10min，再取出冷卻于415nm測定吸光度。根據(jù)標準曲線計算試樣中甲醛含量，從方法學比較測定結(jié)果,為檢測白酒中甲醛含量提供科學合理的方法。

1 檢測方法

1.1 原理

甲醛在過量乙酸銨的存在下，與乙酰丙酮和氨離子生成黃色的2,6-二甲基-3,5-二乙?；?1,4-二氫吡啶化合物，在波長415nm處有最大吸收，在一定濃度范圍內(nèi)，其吸光度與甲醛含量成正比，與標準系列比較定量[3]。

1.2 儀器和試劑

紫外可見分光光度計(日本島津公司)，水蒸氣蒸餾裝置，移液管，比色管，容量瓶，國家標準物質(zhì)甲醛標準溶液100mg·L-1(北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司)，乙酰丙酮，乙酸銨，冰乙酸，磷酸。

1.3 測定方法

參照GB/T 5009.49-2008標準。

1.3.1 蒸餾法

移取25mL白酒倒入500mL蒸餾瓶中，加入20mL 200g·L-1磷酸溶液于蒸餾瓶，接水蒸氣蒸餾裝置蒸餾，收集餾出液于100mL容量瓶冷卻后加水稀釋至刻度。吸取5mL餾出液于25mL比色管中，加入蒸餾水到10mL刻度后，再加入2mL乙酰丙酮溶液，搖勻后在沸水浴中加熱10min，取出冷卻后于415nm測定吸光度；甲醛含量公式：

(1)

式中，X為白酒中甲醛的含量，mg·L-1；c為根據(jù)標準曲線得到的甲醛質(zhì)量，ug；c0為試劑空白溶液得到的甲醛質(zhì)量，ug；V100為餾出液定容體積，mL；V25為移取白酒體積，mL；V5為吸取白酒體積，mL。

1.3.2 直接法

移取1mL白酒于25mL比色管中，加入蒸餾水到10mL刻度后，再加入2mL乙酰丙酮溶液，搖勻后在沸水浴中加熱10min，取出冷卻后于415nm測定吸光度；甲醛含量公式：

(2)

式中，X為白酒中甲醛的含量，mg·L-1；c為根據(jù)標準曲線得到的甲醛質(zhì)量，ug；c0為試劑空白溶液得到的甲醛質(zhì)量，ug；V1為吸取白酒體積，mL。

2 方法驗證

2.1 標曲線性關(guān)系考察

精密吸取0.00mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、8.00mL、10.00mL 1.0ug·mL-1標準工作液于25mL比色管中，加水至10mL刻度后，再加入2mL乙酰丙酮溶液，搖勻后在沸水浴中加熱10min，取出冷卻后于415nm測定吸光度，繪制標準曲線，從標準曲線上查出試樣的含量[3]。工作曲線：

y=91.97016x+0.37343

線性相關(guān)系數(shù)R2=0.99628。

表1 甲醛溶液標準系列吸光度

2.2 精密度試驗

A法：從1份100mL容量瓶的白酒餾出液中，分別吸取6份5mL餾出液于25mL比色管中；B法：吸取1份1mL白酒樣品于25mL比色管中。兩種方法都加水至10mL刻度，再加入2mL乙酰丙酮溶液，搖勻后在沸水浴中加熱10min，取出冷卻后于415nm測定吸光度,試驗結(jié)果見表2。

表2 精密度試驗結(jié)果

A法白酒樣品中甲醛含量均值為2.71mg·L-1,RSD為1.57%；B法白酒樣品中甲醛含量均值為4.49mg·L-1,RSD為0.52%，表明儀器的精密度較好，B法優(yōu)于A法。

2.3 重復性試驗

A法：分別吸取6份25mL白酒于蒸餾瓶中蒸餾，從6批次餾出液中，分別吸取5mL餾出液于25mL比色管中；B法：吸取6份1mL白酒樣品于25mL比色管中。兩種方法都加水至10mL刻度，再加入2mL乙酰丙酮溶液，搖勻后在沸水浴中加熱10min，取出冷卻后于415nm測定吸光度,試驗結(jié)果及數(shù)據(jù)分析見表3。

表3 重現(xiàn)性試驗結(jié)果

A法6份白酒中甲醛含量均值為2.87mg·L-1,RSD為6.01%；B法白酒樣品中甲醛含量均值為4.58mg·L-1,RSD為3.18%，表明方法的重復性良好，B法優(yōu)于A法。

2.4 穩(wěn)定性試驗

A法：從1份100mL容量瓶的餾出液中，分別吸取6份5mL餾出液于25mL比色管中；B法：吸取1份1mL白酒樣品于25mL比色管中。兩種方法都加水至10mL刻度，再加入2mL乙酰丙酮溶液，搖勻后在沸水浴中加熱10min，分別于溶液制備后0h、1h、2h、3h于415nm測定吸光度,試樣放置不同時間后，檢測濃度值見表4。

表4 穩(wěn)定性試驗結(jié)果

結(jié)果表明，試液加入乙酰丙酮顯色反應(yīng)，沸水浴10min后冷卻，A法和B法都要盡快進行比色，否則時間過長，檢測結(jié)果偏高。

2.5 加標回收率試驗

A法：在25mL白酒中加入100ug·mL-1甲醛標準溶液0.8mL，即80ug，相當于1.25mL白酒樣品加入4ug甲醛。B法：在1mL白酒中加入1ug·mL-1標準使用液2mL，相當于1mL白酒樣品加入2ug甲醛。

A法白酒樣品中甲醛回收率為63.30%；B法白酒樣品中甲醛回收率為95.70%，表明A法準確度較差，B法的準確度好。

2.6 檢出限與試劑空白值

在最佳試驗條件下，測定A法和B法各6份空白樣品溶液，以連續(xù)測定空白溶液響應(yīng)值的3倍標準偏差(3sb)所對應(yīng)的濃度作為檢出限。相對標準偏差sb，標準曲線斜率b。

(3)

方法檢出限：

(4)

表5 加標回收試驗結(jié)果

表6 空白樣品試驗結(jié)果

A法6份餾出液中試劑空白甲醛含量平均值為0.34mg·L-1,檢出限為1.31×10-5ug；B法試劑空白中甲醛含量平均值為0.14mg·L-1,表明B法優(yōu)于A法。

2.7 樣品測定

對市場上隨機采購的3種品牌白酒進行測定，結(jié)果見表7。

表7 3個品牌白酒中甲醛含量的測定結(jié)果

3 討論與分析

2種處理方法比較，從加標回收率、精密度、重復性方面，A蒸餾法，蒸餾過程，甲醛損耗比較大，檢測結(jié)果偏低；B直接法，操作簡便，耗時短，檢測結(jié)果更加準確可靠。從穩(wěn)定性來看，試樣加入乙酰丙酮沸水浴顯色反應(yīng)10min，冷卻后應(yīng)該1h內(nèi)進行測定，長時間放置試樣，導致檢驗結(jié)果不斷增高。試驗中發(fā)現(xiàn)，一瓶白酒開瓶后，第2天繼續(xù)吸樣檢驗，結(jié)果會降低，說明開瓶后白酒中甲醛不穩(wěn)定，開瓶后應(yīng)該在1d內(nèi)完成檢驗。

4 結(jié)論

比較2種前處理方法，B直接法優(yōu)于A蒸餾法，操作簡便，耗時短，檢測結(jié)果準確可靠。