枸杞子醋酸乙酯部位非生物堿類化學(xué)成分研究

孔江波，朱 瑩，張文靜，曹彥剛, 2，孫彥君, 2，李 孟, 2，馮衛(wèi)生, 2，陳 輝, 2*

枸杞子醋酸乙酯部位非生物堿類化學(xué)成分研究

孔江波1，朱 瑩1，張文靜1，曹彥剛1, 2，孫彥君1, 2，李 孟1, 2，馮衛(wèi)生1, 2，陳 輝1, 2*

1. 河南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，河南 鄭州 450046 2. 呼吸疾病中醫(yī)藥防治省部共建協(xié)同創(chuàng)新中心，河南 鄭州 450046

研究寧夏枸杞果實(shí)（枸杞子）的化學(xué)成分。運(yùn)用硅膠、ODS、Sephadex LH-20以及反相制備型HPLC等各種現(xiàn)代色譜分離技術(shù)進(jìn)行分離純化，根據(jù)化合物的光譜數(shù)據(jù)和理化性質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。從枸杞子95%乙醇提取物的醋酸乙酯部位中共分離得到23個(gè)化合物，分別鑒定為3--β--吡喃葡萄糖基-4-羥基咖啡酸甲酯（1）、linocinnamarin（2）、3--β--吡喃葡萄糖基-5-羥基桂皮酸甲酯（3）、4--β--吡喃葡萄糖基-5-甲氧基阿魏酸甲酯（4）、cassoside I（5）、nicphenside A（6）、3-(4--β--吡喃葡萄糖基苯基)丙酸甲酯（7）、苯乙基-β--葡萄糖苷（8）、棉花苷（9）、二氫阿魏酸甲酯（10）、7,8-二氫-(S)-7-甲氧基阿魏酸甲酯（11）、3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯（12）、1-(2-乙基苯基)乙烷-1,2-二醇（13）、1-(4-乙基苯基)乙烷-1,2-二醇（14）、黑麥草內(nèi)酯（15）、(3)-3-羥基-β-紫羅蘭酮（16）、芥子酸（17）、阿魏酸（18）、對(duì)羥基肉桂酸（19）、槲皮素（20）、丁香樹(shù)脂酚（21）、6-甲氧基-7-羥基香豆素（22）、鄰苯二甲酸丁二酯（23）?；衔?為新天然產(chǎn)物，化合物1～8、10、11、13～16均為首次從該屬植物中分離得到，化合物1～16為首次從該植物中分離得到。

枸杞子；3--β--吡喃葡萄糖基-4-羥基咖啡酸甲酯；linocinnamarin；黑麥草內(nèi)酯；(3)-3-羥基-β-紫羅蘭酮

枸杞屬L. 為茄科（Solanaceae）植物，全世界約有80種，主要分布在溫帶和亞熱帶地區(qū)；我國(guó)有7種3變種，主要分布于我國(guó)西北和華北地區(qū)[1]，其中寧夏枸杞L.、枸杞Mill.和黑果枸杞Mill.為我國(guó)3種常見(jiàn)的種[2]。本草記載及現(xiàn)代研究表明，寧夏枸杞和枸杞的果、葉、根均具有較高的藥用和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[3]?！吨袊?guó)藥典》2020年版收載了寧夏枸杞和枸杞的干燥根皮作為藥材地骨皮入藥[4]，具有涼血除蒸、清肺降火之功效；寧夏枸杞的干燥成熟果實(shí)為藥材枸杞子，其味甘、性平，歸肝、腎經(jīng)，有滋肝補(bǔ)腎、益精明目之功效[5]。本課題組曾對(duì)地骨皮進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究[6]，為進(jìn)一步促進(jìn)枸杞屬植物化學(xué)成分的研究進(jìn)展，完善其不同藥用部位的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，開(kāi)展了枸杞子的化學(xué)成分研究，共從其95%乙醇提取物的醋酸乙酯部位分離鑒定了23個(gè)化合物，均為非生物堿成分，包括2個(gè)黃酮類化合物（9、20）；14個(gè)苯丙素（1～8、10～12、17～19）；2個(gè)苯乙醇類（13、14）；2個(gè)單萜（15、16）；1個(gè)木脂素（21）；1個(gè)香豆素（22）和鄰苯二甲酸丁二酯（23）。其結(jié)構(gòu)分別鑒定為3--β--吡喃葡萄糖基-4-羥基咖啡酸甲酯（methyl-3--β--glucopyranosyl-4- hydroxy caffeic acid，1）、linocinnamarin（2）、3--β--吡喃葡萄糖基-5-羥基桂皮酸甲酯（3--β--glucopyranosyl-5-hydroxy cinnamate，3）、4--β--吡喃葡萄糖基-5-甲氧基阿魏酸甲酯（methyl-4--β--glucopyranosyl-5-methoxy ferulic acid，4）、cassoside I（5）、nicphenside A（6）、3-(4--β--吡喃葡萄糖基苯基)丙酸甲酯（methyl-3- (4--β--glucopyranosylphenyl)-propionate，7）、苯乙基-β--葡萄糖苷（phenethyl-β--glucopyranoside，8）、棉花苷（7--β--glucopyranose-quercetin glycoside，9）、二氫阿魏酸甲酯（dihydroferulic acid methyl ester，10）、7,8-二氫-()-7-甲氧基阿魏酸甲酯（methyl-7,8-dihydro-()-7-methoxy ferulate，11）、3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯[methyl-3-(4- hydroxyphenyl) propionate，12]、1-(2-乙基苯基)乙烷-1,2-二醇 [1-(2-ethylphenyl) ethane-1,2- ethanediol，13]、1-(4-乙基苯基)乙烷-1,2-二醇 [1-(4-ethylphenyl)-1,2-ethanediol，14]、黑麥草內(nèi)酯（loliolide，15）、(3)-3-羥基-β-紫羅蘭酮 [(3)-3-hydroxy-β-ionone，16]、芥子酸（sinapic acid，17）、阿魏酸（ferulic acid，18）、對(duì)羥基肉桂酸（-hydroxycinnamic acid，19）、槲皮素（quercetin，20）、丁香樹(shù)脂酚（syringaresinol，21）、6-甲氧基-7-羥基香豆素（6-methoxy-7-hydroxycoumarin，22）、鄰苯二甲酸丁二酯（dibutylphthalate，23）?；衔?為新天然產(chǎn)物，其1H-NMR、13C-NMR數(shù)據(jù)為首次報(bào)道；化合物1～8、10、11、13～16均為首次從該屬植物中分離得到，化合物1～16為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

Bruker AVANCE Ⅲ 500型核磁共振儀、Bruker maxis HD型飛行時(shí)間質(zhì)譜（德國(guó)Bruker公司）；Autopol IV全自動(dòng)旋光儀（美國(guó)魯?shù)婪蚬荆?；LC52型高壓制備液相色譜儀（賽譜銳思北京科技有限公司，SP-5030型半制備型高壓輸液泵，UV200型紫外檢測(cè)器，Easychrom型色譜工作站；色譜柱為YMC-Pack ODS-A（250 mm×20 mm，5 μm）。薄層色譜硅膠GF254、柱色譜硅膠（200～300目，青島海洋化工廠）；Sephadex LH-20（Pharmacia Biotech 公司）；RP-C18（40～60 μm，YMC）；大孔樹(shù)脂D101（西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司）；甲醇，色譜純（天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司）；其他試劑均為分析級(jí)。

枸杞子于2017年9月采自青海省格爾木市，經(jīng)河南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院陳隨清教授鑒定為茄科枸杞屬植物寧夏枸杞L.的干燥成熟果實(shí)。憑證樣品（20170906A）存放于河南中醫(yī)藥大學(xué)中藥化學(xué)研究室。

2 提取與分離

枸杞干燥果實(shí)50 kg，95%乙醇回流提取3次，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮，得浸膏32.58 kg。浸膏加水混懸，經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂D101柱色譜分離，依次用水、95%乙醇、丙酮進(jìn)行洗脫，得到水洗脫部位30 kg、95%乙醇洗脫部位1336 g、丙酮洗脫部位52.5 g。95%乙醇洗脫部位加水混懸，依次用醋酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收溶劑，得醋酸乙酯部位（183 g）、正丁醇部位（386 g）。醋酸乙酯部位經(jīng)硅膠柱色譜分離，依次用石油醚-醋酸乙酯（100∶0→0∶1）和醋酸乙酯-甲醇（30∶1→0∶1）梯度洗脫，并經(jīng)硅膠薄層檢識(shí)，合并相同流份得到13個(gè)流分（Fr. A～M）。Fr. B（8.47 g）反復(fù)經(jīng)硅膠柱色譜分離（石油醚-醋酸乙酯100∶0→5∶1）得化合物23（4.6 mg）。Fr. H（25.6 g）經(jīng)MCI柱色譜分離，依次用甲醇-水（0→100%）梯度洗脫，經(jīng)硅膠薄層譜檢識(shí)，合并相同流分，得到9個(gè)部分（Fr. H-1～H-9）。Fr. H-2經(jīng)ODS柱色譜分離依次用10%～100%甲醇溶液梯度洗脫，得到5個(gè)流分（Fr. H-2-1～H-2-5）。Fr. H-2-3經(jīng)制備型HPLC制備（20%乙腈）得化合物13（126 mg，R＝62 min）、14（33.8 mg，R＝65 min）、15（7.3 mg，R＝18 min）。Fr. H-5組分中的晶體使用甲醇反復(fù)洗滌得化合物22（66.3 mg）。Fr. H-5重結(jié)晶后剩余母液經(jīng)制備型HPLC制備（35%乙腈）得到化合物17（5.1 mg，R＝25 min）、18（20 mg，R＝26 min）和19（56.0 mg，R＝23 min）。Fr. H-6經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜分離得5個(gè)亞流分（Fr. H-6-1～H-6-5）。Fr. H-6-1經(jīng)制備型HPLC制備（35%甲醇）得到化合物16（7.2 mg，R＝28 min）。Fr. H-6-2 經(jīng)制備型HPLC制備（45%甲醇）得化合物10（13.2 mg，R＝18 min）、11（2.0 mg，R＝32 min）、12（4.9 mg，R＝39 min）。Fr. H-6-5經(jīng)制備型HPLC制備（35%甲醇）得到化合物20（6.5 mg，R＝66 min）。Fr. H-7經(jīng)硅膠柱色譜分離得到8個(gè)流分（Fr. H-7-1～H-7-8），F(xiàn)r. H-7-5經(jīng)制備型HPLC制備（40%甲醇）得到化合物21（3.4 mg，R＝24 min）。Fr. J（14.0 g）經(jīng)ODS柱色譜分離，依次用甲醇-水（10%→100%）梯度洗脫，得到5個(gè)流分（Fr. J-1～J-5）。Fr. J-3經(jīng)甲醇溶解后進(jìn)一步經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜分離得3個(gè)流分（Fr. J-3-1～J-3-3），F(xiàn)r. J-3-3經(jīng)制備型HPLC制備（35%甲醇）得到化合物1（311.7 mg，R＝32 min）、2（19.7 mg，R＝41 min）、3（4.4 mg，R＝30 min）。Fr. J-2經(jīng)制備型HPLC制備（30%甲醇）得到化合物6（72.6 mg，R＝41 min）、7（8.7 mg，R＝44 min）、8（12.9 mg，R＝53 min）。Fr. K（8.7 g）經(jīng)ODS柱色譜分離，依次用甲醇-水（10%→100%）梯度洗脫，得到5個(gè)流份（Fr. K-1～K-5）。Fr. K-3經(jīng)制備型HPLC制備（35%甲醇）得到化合物4（57.5 mg,R＝33 min）、5（13 mg，R＝40 min）、9（6.4 mg，R＝36 min）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末，ESI-MS/: 357 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.19 (1H, dd,= 8.4, 1.6 Hz, H-6), 6.88 (1H, d,= 8.4 Hz, H-5), 7.53 (1H, d,= 1.6 Hz, H-2), 7.61 (1H, d,= 16.0 Hz, H-7), 6.38 (1H, d,= 16.0 Hz, H-8), 3.77 (3H, s, 9-OCH3), 4.84 (1H, d,= 7.2 Hz, H-1′), 3.96 (1H, dd,= 12.0, 1.6 Hz, H-6′a), 3.73 (1H, dd,= 12.0, 6.0 Hz, H-6′b), 3.55～3.39 (4H, m, H-2′～5′)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 169.8 (C-9), 151.3 (C-4), 147.2 (C-3), 146.5 (C-7), 128.0 (C-1), 126.2 (C-6), 118.2 (C-5), 117.6 (C-2), 115.9 (C-8), 104.3 (C-1′), 78.6 (C-5′), 77.7 (C-3′), 75.0 (C-2′), 71.6 (C-4′), 62.6 (C-6′), 52.2 (9-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道中的linocaffein類似[7]，但在相同溶劑條件下兩者苯環(huán)上的碳?xì)浠瘜W(xué)位移值差別較大（ΔH0.15～0.43；ΔC1.6～4.6），推測(cè)是由于葡萄糖基連接位置不同的原因?qū)е?。進(jìn)一步結(jié)合化合物1的HMBC譜（圖1），H-6與C-2、C-4、C-7存在明顯相關(guān)遠(yuǎn)程信號(hào)，但與C-3沒(méi)有遠(yuǎn)程相關(guān)，而葡萄糖端基碳上的氫信號(hào)H-1′與C-3存在明顯遠(yuǎn)程相關(guān)，以上證實(shí)葡萄糖基是連接在苯環(huán)的3位碳上，鑒定其結(jié)構(gòu)為3--β--吡喃葡萄糖基- 4-羥基咖啡酸甲酯。通過(guò)Scifinder檢索，化合物1與文獻(xiàn)報(bào)道[8]的水解產(chǎn)物具有相同的結(jié)構(gòu)，而相關(guān)文獻(xiàn)未見(jiàn)波譜數(shù)據(jù)報(bào)道。鑒于此，確定化合物1為新天然產(chǎn)物。

圖1 化合物1的結(jié)構(gòu)和關(guān)鍵HMBC相關(guān)

化合物2：白色粉末，ESI-MS/: 341 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.67 (1H, d,= 16.0 Hz, H-7), 7.58 (2H, d,= 8.7 Hz, H-2, 6), 7.14 (2H, d,= 8.7 Hz, H-3, 5), 6.43(1H, d,= 16.0 Hz, H-8), 4.98 (1H, d,= 7.3 Hz, H-1′), 3.79 (3H, s, 9-OCH3), 3.92 (1H, dd,= 12.1, 2.0 Hz, H-6′a), 3.72 (1H, dd,= 12.1, 5.7 Hz, H-6′b), 3.50～3.41 (4H, m, H-2′～5′)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 169.4 (C-9), 160.9 (C-4), 145.8 (C-7), 130.8 (C-2, 6), 129.8 (C-1), 118.0 (C-3, 5), 116.7 (C-8), 101.8 (C-1′), 78.2 (C-5′), 77.9 (C-3′), 74.8 (C-2′), 71.3 (C-4′), 62.4 (C-6′), 52.1 (9-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[9]，故鑒定該化合物2為linocinnamarin。

化合物3：白色粉末，ESI-MS/: 379 [M＋Na]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.59 (1H, d,= 16.0 Hz, H-7), 6.38 (1H, d,= 16.0 Hz, H-8), 7.12 (1H, s, H-2), 7.06 (1H, d,= 8.3 Hz, H-4), 7.22 (1H, d,= 8.3 Hz, H-6), 4.86 (1H, d,= 7.0 Hz, H-1′), 3.92 (1H, d,= 12.0 Hz, H-6′a), 3.74 (H, dd,= 12.0, 5.2 Hz, H-6′b), 3.56～3.40 (4H, m, H-2′～5′), 3.79 (3H, s, 9-OCH3)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 169.5 (C-9), 149.1 (C-3), 148.9 (C-5), 146.3 (C-7), 131.2 (C-1), 122.2 (C-2), 118.2 (C-4), 117.1 (C-8), 116.1 (C-6), 103.7 (C-1′), 78.5 (C-5′), 77.7 (C-3′), 74.9 (C-2′), 71.4 (C-4′), 62.5 (C-6′), 52.2 (9-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[10]，故鑒定化合物3為3--β--吡喃葡萄糖基-5-羥基肉桂酸甲酯。

化合物4：白色粉末，ESI-MS/: 371 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.19 (2H, brs, H-5, 6), 7.28 (1H, s, H-2), 7.66 (1H, d,= 16.0 Hz, H-7), 6.47 (1H, d,= 16.0 Hz, H-8), 3.92 (3H, s, 3-OCH3), 3.79 (3H, s, 9-OCH3), 4.99 (1H, d,= 7.4 Hz, H-1′), 3.89 (1H, dd,= 12.0, 1.8 Hz, H-6′a), 3.79 (1H, dd,= 12.0, 5.2 H-6′b), 3.53～3.41 (4H, m, H-2′～5′)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 169.5 (C-9), 151.2 (C-3), 150.3 (C-4), 146.2 (C-7), 130.6 (C-1), 123.7 (C-6), 117.5 (C-5), 117.2 (C-8), 112.6 (C-2), 102.3 (C-1′), 78.4 (C-5′), 78.0 (C-3′), 75.0 (C-2′), 71.4 (C-4′), 62.2 (C-6′), 56.9 (3-OCH3), 52.2 (9-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[11]，故鑒定化合物4為4--β--吡喃葡萄糖基-5-甲氧基阿魏酸甲酯。

化合物5：白色粉末，ESI-MS/: 371 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.19 (1H, dd,= 8.4, 1.5 Hz, H-6), 7.15 (1H, d,= 8.4 Hz, H-5), 7.75 (1H, d,= 1.5 Hz, H-2), 6.92 (1H, d,= 12.9 Hz, H-7), 5.90 (1H, d,= 12.9 Hz, H-7), 3.89 (3H, s, 3-OCH3), 3.74 (3H, s, 9-OCH3), 4.98 (1H, d,= 7.4 Hz, H-1′), 3.91 (1H, overlapped, H-6′a), 3.71 (1H, dd,= 12.2, 5.4 Hz, H-6′b), 3.53～3.36 (4H, m, H-2′～5′)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 168.6 (C-9), 150.1 (C-3), 149.2 (C-4), 144.6 (C-7), 131.0 (C-1), 126.0 (C-6), 118.4 (C-8), 116.8 (C-5), 115.6 (C-2), 102.4 (C-1′), 78.4 (C-5′), 78.0 (C-3′), 75.0 (C-2′), 71.5 (C-4′), 62.6 (C-6′), 56.8 (3-OCH3), 52.0 (9-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[12]，故鑒定化合物5為cassoside I。

化合物6：淡黃色固體，ESI-MS/: 359 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.64 (1H, dd,= 8.2, 1.7 Hz, H-6), 7.11 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 6.73 (1H, d,= 1.7 Hz, H-2), 2.83 (2H, t,= 7.6 Hz, H-7), 2.60 (2H, t,= 7.6 Hz, H-8), 3.66 (3H, s, 9-OCH3), 4.72 (1H, d,= 7.3 Hz, H-1′), 3.91 (1H, dd,= 12.0, 1.5 Hz, H-6′a), 3.73 (1H, dd,= 12.0, 5.2 Hz, H-6′b), 3.51～3.41 (4H, m, H-2′～5′)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 175.3 (C-9), 148.5 (C-3), 145.4 (C-4), 137.9 (C-1), 120.8 (C-6), 119.3 (C-2), 117.2 (C-5), 104.8 (C-1′), 78.4 (C-5′), 77.8 (C-3′), 75.0 (C-2′), 71.4 (C-4′), 62.6 (C-6′), 52.2 (9-OCH3), 36.9 (C-8), 31.5 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[13]，故鑒定化合物6為 nicphenside A。

化合物7：白色無(wú)定形粉末，ESI-MS/: 343 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.15 (2H, d,= 8.6 Hz, H-2, 6), 7.03 (2H, d,= 8.6 Hz, H-3, 5), 2.88 (2H, t,= 7.6 Hz, H-7), 2.62 (2H, t,= 7.6 Hz, H-8), 3.65 (3H, s, 9-OCH3), 4.89 (1H, d,= 6.4 Hz, H-1′), 3.90 (1H, dd,= 12.0, 1.9 Hz, H-6′a), 3.71 (1H, dd,= 12.0, 5.3 Hz, H-6′b), 3.47～3.41 (4H, m, H-2′～5′)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 175.3 (C-9), 157.8 (C-4), 136.0 (C-1), 130.4 (C-2,6), 118.0 (C-3, 5), 102.6 (C-1′), 78.3 (C-5′), 78.1 (C-3′), 75.1 (C-2′), 71.5 (C-4′), 62.7 (C-6′), 52.5 (9-OCH3), 37.0 (C-8), 31.3 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[14]，故鑒定化合物7為3-(4--β--吡喃葡萄糖基苯基)丙酸甲酯。

化合物8：白色無(wú)定形粉末，ESI-MS/: 285 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.28 (4H, d,= 4.4 Hz, H-2, 3, 5, 6), 7.19 (1H, m, H-4), 4.11 (1H, m, H-7a), 3.78 (1H, m, H-7b), 2.96 (2H, td,= 7.8, 2.1 Hz, H-8), 4.32 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1′), 3.89 (1H, dd,= 12.4, 1.7 Hz, H-6′a), 3.68 (1H, dd,= 12.0, 5.2 Hz, H-6′b), 3.37～3.21 (4H, m, H-2′～5′)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 140.2 (C-1), 130.2 (C-3, 5), 129.5 (C-2, 6), 127.3 (C-4), 104.5 (C-1′), 78.2 (C-5′), 78.1 (C-3′), 75.2 (C-2′), 71.9 (C-8), 71.8 (C-4′), 62.9 (C-6′), 37.4 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[15]，故鑒定化合物8為苯乙基-β--葡萄糖苷。

化合物9：淡黃色粉末，ESI-MS/: 465 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.47 (1H, brs, H-6), 6.75 (1H, brs, H-8), 7.77 (1H, brs, H-2′′), 6.90 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5′′), 7.67 (1H, d,= 8.1 Hz, H-6′′), 5.07 (1H, d,= 6.4 Hz, H-1′), 3.96 (1H, d,= 12.0 Hz, H-6′a), 3.75 (1H, d,= 12.0, 5.5 Hz, H-6′b), 3.55～3.36 (4H, m, H-2′～5′)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 177.6 (C-4), 164.6 (C-7), 162.3 (C-5), 157.8 (C-9), 149.1 (C-2), 148.9 (C-4′′), 146.4 (C-3′′), 137.8 (C-3), 124.1 (C-1′′), 122.0 (C-6′′), 116.4 (C-5′′), 116.3 (C-2′′), 106.4 (C-10), 101.8 (C-1′), 100.3 (C-6), 95.7 (C-8), 78.5 (C-5′), 78.0 (C-3′), 74.9 (C-2′), 71.4 (C-4′), 62.6 (C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[16]，故鑒定化合物9為棉花苷。

化合物10：無(wú)色油狀物，ESI-MS/: 211 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.61 (1H, dd,= 8.0, 2.0 Hz, H-6), 6.68 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.76 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 2.81 (2H, t,= 7.6 Hz, H-7), 2.57 (2H, t,= 7.6 Hz, H-8), 3.81 (3H, s, 3-OCH3), 3.62 (3H, s, 9-OCH3)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 175.3 (C-9), 148.9 (C-3), 145.9 (C-4), 133.5 (C-1), 121.7 (C-6), 116.2 (C-5), 113.0 (C-2), 56.3 (3-OCH3), 52.0 (9-OCH3), 37.0 (C-8), 31.6 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[17]，故鑒定化合物10為二氫阿魏酸甲酯。

化合物11：無(wú)色油狀物，[α]25 D?34.6°（0.02，MeOH），ESI-MS/: 241 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.88 (1H, d,= 1.2 Hz, H-2), 6.76 (2H, brs, H-5, 6), 4.52 (1H, dd,= 9.1, 4.8 Hz, H-7), 2.76 (1H, dd,= 15.3, 9.1 Hz, H-8a), 2.57 (1H, dd,= 15.3, 4.8 Hz, H-8b), 3.85 (3H, s, 3-OCH3), 3.16 (3H, s, 7-OCH3), 3.64 (3H, s, 9-OCH3)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 173.2 (C-9), 149.2 (C-3), 147.6 (C-4), 133.1 (C-1), 120.7 (C-6), 116.1 (C-5), 110.9 (C-2), 81.3 (C-7), 56.7 (7-OCH3), 56.4 (3-OCH3), 52.1 (9-OCH3), 44.1 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[18]，故鑒定化合物11為7, 8-二氫-()-7-甲氧基阿魏酸甲酯。

化合物12：無(wú)色油狀物，ESI-MS/: 181 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.00 (1H, d,= 8.5 Hz, H-2, 6), 6.67 (1H, d,= 8.5 Hz, H-3, 5), 2.80 (2H, t,= 7.5 Hz, H-7), 2.56 (2H, t,= 7.5 Hz, H-8), 3.61 (3H, s, 9-OCH3)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 175.3 (C-9), 156.8 (C-4), 132.7 (C-1), 130.2 (C-2, 6), 116.2 (C-3, 5), 52.0 (9-OCH3), 37.1 (C-8), 31.2 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[19]，故鑒定化合物12為3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯。

化合物13：無(wú)色針晶（氯仿），ESI-MS/: 167 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 7.26 (1H, t,= 7.5 Hz, H-6), 7.18 (1H, overlapped, H-5), 7.15 (1H, overlapped, H-4), 7.15 (1H, overlapped, H-3), 4.78 (1H, dd,= 8.6, 2.9 Hz, H-7), 3.70 (1H, dd,= 11.6, 3.1 Hz, H-8a), 3.63 (1H, dd,= 11.6, 8.9 Hz, H-8b), 2.65 (2H, q,= 7.6 Hz, H-9), 1.25 (3H, t,= 7.6 Hz, H-10)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 144.3 (C-1), 140.4 (C-2), 128.3 (C-3), 127.2 (C-4), 125.5 (C-5), 123.3 (C-6), 74.7 (C-7), 67.9 (C-8), 28.7 (C-9), 15.4 (C-10)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[20]，故鑒定化合物13為1-(2-乙基苯基)乙烷-1,2-二醇。

化合物14：無(wú)色針晶（氯仿），ESI-MS/: 167 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 7.28 (1H, d,= 7.5 Hz, H-2, 6), 7.21 (1H, d,= 7.5 Hz, H-3, 5), 4.80 (1H, dd,= 8.1, 3.2 Hz, H-7), 3.74 (1H, dd,= 11.3, 3.1 Hz, H-8a), 3.67 (1H, dd,= 11.3, 3.1 Hz, H-8b), 2.66 (2H, q,= 7.6 Hz, H-9), 1.25 (3H, t,= 7.6 Hz, H-10)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 143.9 (C-4), 137.8 (C-1), 128.0 (C-3, 5), 126.2 (C-2, 6), 74.6 (C-7), 68.0 (C-8), 28.6 (C-9), 15.6 (C-10)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[21]，故鑒定化合物14為1-(4-乙基苯基)乙烷-1,2-二醇。

化合物15：無(wú)色塊狀晶體（甲醇），ESI-MS/: 197 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 5.77 (1H, s, H-7), 4.23 (1H, m, H-3), 2.44 (1H, dt,= 13.5, 2.5 Hz, H-4a), 2.01 (1H, dt,= 14.5, 2.5 Hz, H-2a), 1.78 (3H, s, H-11), 1.75 (1H, dd,= 13.5, 3.5 Hz, H-4b), 1.55 (1H, dd,= 14.5, 3.5 Hz, H-2b), 1.48 (3H, s, H-9), 1.29 (3H, s, H-10)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 185.7 (C-8), 174.4 (C-6), 113.3 (C-7), 89.0 (C-5), 67.2 (C-3), 48.0 (C-2), 46.4 (C-4), 37.2 (C-1), 31.0 (C-10), 27.4 (C-11), 27.0 (C-9)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[22]，故鑒定化合物15為黑麥草內(nèi)酯。

化合物16：無(wú)色油狀物，濃硫酸-茴香醛顯色為粉紅色。[α]25 D?25.3°（0.22，MeOH），ESI-MS/: 209 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 1.74 (1H, m, H-2a), 1.42 (1H, t,= 12.1 Hz, H-2b), 3.92 (1H, m, H-3), 2.38 (1H, m, H-4a), 2.06 (1H, m, H-4b), 7.31 (1H, d,= 16.4 Hz, H-7), 6.13 (1H, d,= 16.4 Hz, H-8), 2.29 (3H, s, H-10), 1.13 (3H, s, H-11), 1.10 (3H, s, H-12), 1.78 (3H, s, H-13)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 201.2 (C-9), 144.5 (C-7), 136.9 (C-6), 134.3 (C-8), 133.2 (C-5), 64.9 (C-3), 49.3 (C-2), 43.5 (C-4), 37.8 (C-1), 30.6 (C-11), 28.8 (C-12), 27.2 (C-10), 21.8 (C-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[23]，故鑒定化合物16為 (3)-3-羥基-β-紫羅蘭酮。

化合物17：白色無(wú)定形粉末，ESI-MS/: 225 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.89 (2H, s, H-2, 6), 7.58 (1H, d,= 15.9 Hz, H-7), 6.33 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8), 3.87 (6H, s, 3, 5-OCH3)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 171.1 (C-9), 149.6 (C-3, 5), 147.2 (C-7), 139.7 (C-4), 126.9 (C-1), 116.6 (C-8), 107.0 (C-2, 6), 57.0 (3, 5-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[24]，故鑒定化合物17為芥子酸。

化合物18：無(wú)色針晶（甲醇），ESI-MS/: 195 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.03 (1H, dd,= 8.2, 1.8 Hz, H-6), 6.79 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 7.15 (1H, d,= 1.8 Hz, H-2), 7.58 (1H, d,= 15.9 Hz, H-7), 6.29 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8), 3.87 (3H, s, 3-OCH3)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 170.9 (C-9), 150.5 (C-3), 149.3 (C-4), 146.9 (C-7), 127.8 (C-1), 124.0 (C-6), 116.4 (C-5), 115.9 (C-8), 111.7 (C-2), 56.4 (3-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[25]，故鑒定化合物18為阿魏酸。

化合物19：無(wú)色針晶（甲醇），ESI-MS/: 165 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 7.62 (1H, d,= 15.9 Hz, H-7), 6.29 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8), 7.45 (2H, d,= 8.4 Hz, H-2, 6), 6.82 (2H, d,= 8.4 Hz, H-3, 5)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 171.3 (C-9), 161.8 (C-4), 146.8 (C-7), 131.2 (C-2, 6), 127.3 (C-1), 116.9 (C-3, 5), 115.7 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[26]，故鑒定化合物19為對(duì)羥基肉桂酸。

化合物20：淡黃色粉末，ESI-MS/: 303 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, DMSO-6): 12.50 (1H, s, 5-OH), 10.83 (1H, s, 3-OH), 9.59 (1H, s, 7-OH), 9.32 (2H, s, 3′, 4′-OH), 7.68 (1H, d,= 2.1 Hz, H-2′), 7.54 (1H, d,= 8.5, 2.1 Hz, H-6′), 6.89 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5′), 6.42 (1H, d,= 1.9 Hz, H-8), 6.20 (1H, d,= 1.9 Hz, H-6)；13C-NMR (125 MHz, DMSO-6): 176.3 (C-4), 164.4 (C-7), 161.2 (C-5), 156.6 (C-9), 148.2 (C-2), 147.3 (C-4′), 145.5 (C-3′), 136.2 (C-3), 122.4 (C-1′), 120.4 (C-6′), 116.1 (C-5′), 115.5 (C-2′), 103.5 (C-10), 98.6 (C-6), 93.8 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[27]，故鑒定化合物20為槲皮素。

化合物21：無(wú)色油狀物，ESI-MS/: 419 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 3.07 (2H, s, H-1, 5), 4.71 (2H, d,= 3.5 Hz, H-4, 8), 4.26 (4H, m, H-3, 7), 3.88 (12H, s, 3′, 5′, 3′′, 5′′-OCH3), 6.56 (4H, s, H-2′, 6′, 2′′, 6′′), 5.47 (2H, s, -OH)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 147.2 (C-3′, 5′, 3′′, 5′′), 134.3 (C-4′, 4′′), 132.1 (C-1′, 1′′), 102.7 (C-2′, 6′, 2′′, 6′′), 86.1 (C-4, 8), 71.8 (C-3, 7), 56.4 (3′, 5′, 3′′, 5′′-OCH3), 54.4 (C-1, 5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[28]，故鑒定化合物21為丁香樹(shù)脂酚。

化合物22：無(wú)色針晶（甲醇），ESI-MS/: 193 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6.22 (1H, d,= 9.4 Hz, H-3), 7.87 (1H, d,= 9.4 Hz, H-4), 7.09 (1H, s, H-5), 6.75 (1H, s, H-8), 3.92 (3H, s, 6-OCH3)；13C-NMR (125 MHz, CD3OD): 164.3 (C-2), 153.0 (C-7), 151.5 (C-9), 147.2 (C-6), 146.3 (C-4), 112.7 (C-3), 112.7 (C-10), 110.0 (C-5), 104.1 (C-8), 57.0 (6-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[29]，故鑒定化合物22為6-甲氧基-7-羥基香豆素。

化合物23：無(wú)色油狀物，ESI-MS/: 279 [M＋H]+；1H-NMR (500 MHz, CDCl3): 7.69 (2H, m, H-3, 6), 7.50 (2H, m, H-4, 5), 4.28 (4H, t,= 6.7 Hz, H-2′, 2′′), 1.69 (4H, m, H-3′, 3′′), 1.42 (4H, m, H-4′, 4′′), 0.93 (6H, t,= 7.4 Hz, H-5′, 5′′)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 167.7 (C-1′, 1′′), 132.3 (C-1, 2), 130.9 (C-4, 5), 128.8 (C-3, 6), 65.5 (C-2′, 2′′), 30.5 (C-3′, 3′′), 19.1 (C-4′, 4′′), 13.7 (C-5′, 5′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[30]，故鑒定化合物23為鄰苯二甲酸二丁酯。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Non-alkaloid constituents from ethyl acetate extract of fruits of

KONG Jiang-bo1, ZHU Ying1, ZHANG Wen-jing1, CAO Yan-gang1, 2, SUN Yan-jun1, 2, LI Meng1, 2, FENG Wei-sheng1, 2, CHEN Hui1, 2

1. School of Pharmacy, Henan University of Chinese Medicine, Zhengzhou 450046, China 2. Co-construction Collaborative Innovation Center for Chinese Medicine and Respiratory Disease by Henan & Education Ministry of China, Zhengzhou 450046, China

To investigate the chemical constituents from the fruits of Gouqizi (L.).The compounds were isolated and purified by various column chromatographies, and their structures were identified by physiochemical properties and spectroscopic data.Twenty-three compounds were isolated from the ethyl acetate part of the 95% ethanol extract ofand their structures were identified as methyl-3--β--glucopyranosyl-4-hydroxy caffeic acid (1), linocinnamarin (2), 3--β--glucopyranosyl-5-hydroxy cinnamate (3), methyl-4--β--glucopyranosyl-5-methoxy ferulic acid (4), cassoside I (5), nicphenside A (6), methyl-3-(4--β--glucopyranosylphenyl) propionate (7), phenethyl-β--glucopyranoside (8), 7--β--glucopyranose-quercetin glycoside (9), dihydroferulic acid methyl ester (10), methyl-7,8-dihydro-()-7-methoxy ferulate (11), methyl-3-(4-hydroxyphenyl) propionate (12), 1-(2-ethylphenyl) ethane-1,2-ethanediol (13), 1-(4-ethylphenyl)-1,2-ethanediol (14), loliolide (15), (3)-3-hydroxy-β-ionone (16), sinapic acid (17), ferulic acid (18),-hydroxycinnamic acid (19), quercetin (20), syringaresinol (21), 6-methoxy-7-hydroxycoumarin (22), dibutylphthalate (23).Compound 1 is a new natural product, compounds 1—8, 10, 11, 13—16 are isolated from this genus for the first time, and compounds 1—16 are isolated from this plant for the first time.

fruits ofL.; methyl-3--β--glucopyranosyl-4-hydroxy caffeic acid; linocinnamarin; loliolide; (3)-3-hydroxy-β-ionone

R284.1

A

0253 - 2670(2021)07 - 1877 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.07.003

2020-08-23

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（21602047）；河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計(jì)劃項(xiàng)目（2017GGJS-081）；河南省重點(diǎn)研發(fā)與推廣專項(xiàng)（科技攻關(guān)）項(xiàng)目（202102310509）

孔江波，男，在讀碩士，研究方向?yàn)橹兴幓钚猿煞盅芯?。E-mail: 307457692@qq.com

陳 輝，男，博士，碩士生導(dǎo)師，教授，從事中藥活性成分研究。E-mail: chh701@163.com

[責(zé)任編輯 王文倩]