貝那普利和氨氯地平對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠促胰液素、生長(zhǎng)抑素表達(dá)的影響*

金 華，劉志軍，顏春魯，劉峰林，陳 麗，張秋菊，徐厚謙，胡繼宏，竇榮海，溫鑫洋

（1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，蘭州730000；2.甘肅省中醫(yī)方藥挖掘與創(chuàng)新轉(zhuǎn)化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，蘭州730000）

高血壓病不是單一疾病，而是一組臨床綜合征，也可以認(rèn)為它是一個(gè)由多種疾病組合的共同體，一個(gè)引起心腦血管疾病的癥候群。近年來(lái)，胃腸激素與血壓調(diào)控的關(guān)系受到人們關(guān)注［1，2］，而且在臨床上日益顯示出其重要性。遺傳與環(huán)境因素是否通過(guò)胃腸激素途徑影響血壓，即胃腸激素變化是否為高血壓病的發(fā)病機(jī)制，亦或胃腸激素變化是高血壓病引起的病理生理變化、是高血壓病發(fā)生靶器官損害前的一個(gè)重要的中間環(huán)節(jié)尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠（spontaneously hypertensive rats，SHR）促胰液素（secretin，PZ）、生長(zhǎng)抑素（somatostatin，SS）表達(dá)的研究，為闡明高血壓病的發(fā)病機(jī)制提供資料。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

14周齡雄性 SHR 45只，SPF級(jí)，體重（350±20）g；同源雄性 WKY（Wistar Kyoto，WKY）大鼠 15只，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)：SCXK（京）2012-0001。飼養(yǎng)于甘肅中醫(yī)藥大學(xué)SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，溫度（22±2）℃，相對(duì)濕度（55±5）%，人工光照明暗各12 h。

1.2 實(shí)驗(yàn)分組及干預(yù)

45只SHR大鼠常規(guī)飼養(yǎng)7日后，隨機(jī)分為3組（n＝15）：自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）組、貝那普利組（benazepril）、氨氯地平組（amlodipine）；以 WKY大鼠作為正常對(duì)照組（WKY組）（n＝15），共4組。以蒸餾水為溶劑，配制貝那普利和氨氯地平混懸液，貝那普利組灌服貝那普利 0.90 mg·kg-1·d-1；氨氯地平組灌服氨氯地平 0.45 mg·kg-1·d-1。SHR組及 WKY組每日灌服等體積蒸餾水。共干預(yù)8周。

1.3 藥物、試劑和儀器

鹽酸貝那普利（洛汀新，10 mg，北京諾華制藥有限公司，批號(hào)：X1936），苯磺酸氨氯地平（絡(luò)活喜，5 mg，輝瑞制藥有限公司，批號(hào)：1205120）。促胰液素（PZ）／（secretin）一抗，批號(hào)為 GR 80805-1；生長(zhǎng)抑素（SS）一抗，批號(hào)為 GR 80805-1；山羊抗兔（goat antirabbit）IgG（H+L），批號(hào)為 ab6702，上述均購(gòu)自 Abcam公司。免疫組化染色試劑盒購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司。RNA提取試劑盒（Qiagene公司，批號(hào)74104），反轉(zhuǎn)錄試劑盒和熒光染料（Roche公司）、PCR引物（金唯智生物科技有限公司設(shè)計(jì)合成）。全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀（Bio-Rad公司，型號(hào) i-Mark）、熒光 PCR儀（Bio-Rad公司，型號(hào) CFX96）、凝膠掃描成像系統(tǒng)（Bio-Rad公司）、電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司，型號(hào)FA2004N）、醫(yī)用低速離心機(jī)（金壇市恒豐儀器廠，型號(hào)LX-820）等。

1.4 免疫組化法測(cè)定十二指腸PZ、胃竇SS的表達(dá)

取部分十二指腸（幽門(mén)下1.5 cm處）、胃竇部組織，作適當(dāng)修整后放入4%多聚甲醛中固定。（1）石蠟切片：40℃過(guò)夜，60℃烤片 1 h。（2）常規(guī)脫蠟至水。（3）抗原修復(fù)：枸櫞酸緩沖液（pH 6.0）恒溫水浴至95℃～98℃，放入玻片，維持60 min；室溫放置自然冷卻，PBS沖洗5min×3次。（4）滴加內(nèi)源性過(guò)氧化物酶封閉液，避光室溫孵育10min；PBS沖洗5min×3次。（5）封閉：滴加正常山羊血清，37℃孵育15 min，甩干不洗。（6）滴加稀釋抗5-HT抗體，然后4℃過(guò)夜。用PBS替代一抗作為陰性對(duì)照，約12～16 h；次日取出，室溫放置 10 min，PBS洗 5 min×3次。（7）滴加二抗工作液，37℃孵育30 min；PBS洗5 min×3次。（8）滴加HRP標(biāo)記的鏈霉親和素，37℃孵育15min；PBS洗 5 min×3次。（9）DAB顯色：DAB溶液按試劑說(shuō)明書(shū)配制，鏡下觀察，至目的組織出現(xiàn)陽(yáng)性顆粒而周圍組織無(wú)非特異顯色時(shí)，蒸餾水終止反應(yīng)。（10）蘇木素復(fù)染細(xì)胞核1～2min，1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒，鏡下控制，自來(lái)水返藍(lán)10 min；脫水、透明、封片。

1.5 RT-PCR法測(cè)定十二指腸PZ、胃竇 SSmRNA表達(dá)

（1）總RNA提?。喝?0mg組織提取總 RNA，液氮速凍后碾磨組織，加入600μl RLT裂解液裂解組織，將所得溶液于離心機(jī)4℃、12 000 r／min離心3 min。加入70%乙醇600μl后，立即轉(zhuǎn)移700μl溶液（包括沉淀）至柱子上，4℃、12 000 r／min離心 15 s，完全濾過(guò)溶液；分別加入700μl Buffer RW1、500μl Buffer RPE，按上述條件離心，棄濾液；加入500μl Buffer RPE，4℃、12 000 r／min離心 2min，棄濾液。將柱子移至新的2 ml試管中，4℃、12 000 r／min離心1 min，干燥濾膜，將柱子移入的新的1.5 ml試管中加入 30～50μl無(wú)酶水，4℃、12 000 r／min離心1min得到RNA。同時(shí)取2μl RNA樣品，稀釋50倍后測(cè)定樣品在 260 nm和 280 nm處的吸收值，OD260／280在1.8～2.0之間視為提取的總RNA質(zhì)量純度較好。（2）逆轉(zhuǎn)錄獲得第一鏈cDNA：使用羅氏反轉(zhuǎn)錄試劑盒（No 0489686-6001），嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)反轉(zhuǎn)錄總mRNA，合成第一鏈cDNA文庫(kù)，反應(yīng)產(chǎn)物在-20℃冰箱中保存?zhèn)溆?。反?yīng)條件：25℃、10 min，55℃、30 min，85℃、5 min，4℃保存。引物設(shè)計(jì)與合成：β-actin：F：AGGGAAATCGTGCGTGAC， R： CGCTCATTGCCGATAGTG； PZ：F： AGCCGCTTGCAGGACAGT， R：CCACGCTGTTCTCTGGAATATTT； SS： F： CCCCAGACTCCGTCAGTTTC， R： GTGGGCTCAGACAGCAGTTC。（3）cDNA的 PCR擴(kuò)增：使用 Fast-Start Universal SYBR Green MASTER（ROX），實(shí)驗(yàn)步驟參照其說(shuō)明書(shū)，反應(yīng)體系總體積50μl，反應(yīng)條件：95℃、5 min；95℃、10 s；55℃、20 s；75℃、30 s。使用PCR儀自帶軟件算出CT值，并用2-△△CT法做相對(duì)定量分析。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

計(jì)量資料采用均數(shù) ±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。組間比較采用方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 促胰液素（PZ）在十二指腸組織中的表達(dá)

免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示，PZ在各組大鼠的十二指腸均有表達(dá)。與WKY組比較，SHR組PZ的表達(dá)水平明顯升高（P＜0.05）；與SHR組比較，貝那普利組和氨氯地平組 PZ的表達(dá)水平明顯降低（P＜0.05）；與貝那普利組比較，氨氯地平組PZ的表達(dá)水平明顯降低（P＜0.05）。鏡下觀察顯示，PZ在黏膜下腺體上皮內(nèi)分泌細(xì)胞的胞漿中表達(dá)較明顯，由S細(xì)胞分泌，WKY組PZ在胞漿中表達(dá)較弱，SHR組PZ在胞漿中表達(dá)增強(qiáng)，貝那普利組和氨氯地平組PZ在胞漿中表達(dá)減弱（表1，圖1，圖1見(jiàn)彩圖頁(yè)Ⅰ）。

Tab.1 The comparison of PZaverage gray value in duodenum between groups（）

Tab.1 The comparison of PZaverage gray value in duodenum between groups（）

WKY：Wistar-Kyoto；SHR：Spontaneously hypertensive rats；PZ：Secretin*P＜0.05 vs WKY group；＃P＜0.05 vs SHR group；▲P＜0.05 vs Benazepril group

Group n Gray value WKY group 9 89.59±5.30 SHR group 9 124.51±1.18*Benazepril group 8 117.60±1.84＃Amlodipine group 8 102.63±5.14?！?/p>

2.2 生長(zhǎng)抑素（SS）在胃竇組織中的表達(dá)

免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示，SS在各組大鼠的胃竇中均有表達(dá)。與WKY組比較，SHR組SS的表達(dá)水平明顯升高（P＜0.05）；與SHR組比較，貝那普利組和氨氯地平組SS的表達(dá)水平明顯降低（P＜0.05）；與氨氯地平組比較，貝那普利組SS的表達(dá)水平明顯降低（P＜0.05）。鏡下觀察顯示，SS由粘膜下腺體上皮內(nèi)分泌細(xì)胞（D細(xì)胞）分泌，在D細(xì)胞胞漿內(nèi)散在分布；與SHR組比較，貝那普利組和氨氯地平組SS陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)減少。（表2，圖2，圖2見(jiàn)彩圖頁(yè)Ⅰ）。

Tab.2 The comparison of SSaverage gray value in gastric antrum between groups（）

Tab.2 The comparison of SSaverage gray value in gastric antrum between groups（）

SS：Somatostatin*P＜0.05 vs WKY group；＃P＜0.05 vs SHR group；▲P＜0.05 vs Benazepril group

Group n Gray value WKY group 9 78.41±4.16 SHR group 9 91.44±2.08*Benazepril group 8 82.65±2.99＃Amlodipine group 8 86.03±3.38?！?/p>

2.3 促胰液素（PZ）mRNA在十二指腸組織中的表達(dá)

各組大鼠十二指腸組織PZmRNA表達(dá)分析，與WKY組比較，SHR組PZmRNA在十二指腸的表達(dá)明顯升高（P＜0.05）；與SHR組比較，貝那普利組和氨氯地平組PZmRNA在十二指腸中的表達(dá)降低（P＜0.05）；與貝那普利組比較，氨氯地平組 PZmRNA在十二指腸中的表達(dá)降低（P＜0.05，表3）。

Tab.3 The expression of PZmRNA in duodenum（）

Tab.3 The expression of PZmRNA in duodenum（）

PZ：Secretin*P＜0.05 vs WKY group；＃P＜0.05 vs SHR group；▲P＜0.05 vs Benazepril group

Group n 2-△△Ct WKY group 9 0.10±0.03 SHR group 9 1.00±0.07*Benazepril group 8 0.55±0.14＃Amlodipine group 8 0.35±0.13＃▲

2.4 生長(zhǎng)抑素（SS）mRNA在胃竇組織中的表達(dá)

各組大鼠胃竇組織中SSmRNA表達(dá)分析，與WKY組比較，SHR組SSmRNA在胃竇中的表達(dá)明顯升高（P＜0.05）；與SHR組比較，貝那普利組和氨氯地平組 SS mRNA在胃竇中的表達(dá)降低（P＜0.05）；與貝那普利組比較，氨氯地平組SSmRNA在胃竇中的表達(dá)降低（P＜0.05，表 4）。

Tab.4 The expression of SSmRNA in gastric antrum（）

Tab.4 The expression of SSmRNA in gastric antrum（）

SS：Somatostatin*P＜0.05 vs WKY group；＃P＜0.05 vs SHR group；▲P＜0.05 vs Benazepril group

Group n 2-△△Ct WKY group 9 0.56±0.13 SHR group 9 1.00±0.31*Benazepril group 8 0.74±0.40＃Amlodipine group 8 0.09±0.02?！?/p>

在高血壓病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，盡管遺傳因素很重要，在很大程度上也與不健康的生活方式相關(guān)。僅關(guān)注高血壓，忽視導(dǎo)致高血壓病的諸多代謝性危險(xiǎn)因素，也難以在高血壓病的病因?qū)W研究和臨床診療方面取得突破，而不健康的生活方式或代謝性危險(xiǎn)因素均與胃腸道關(guān)系密切。最新研究資料顯示，由血液攜帶的胃腸激素是胃腸道向腦內(nèi)傳遞的重要化學(xué)信號(hào)，這些信號(hào)物質(zhì)可以通過(guò)腦干的最后區(qū)（area postrema，AP）直接入腦［3］，打破了傳統(tǒng)的“血腦屏障”概念。胃腸激素可能通過(guò)信號(hào)傳導(dǎo)至下丘腦弓狀核，進(jìn)而參與食物攝取和能量消耗的調(diào)節(jié)［4，5］。下丘腦是壓力反射的重要整合中樞，其下行纖維投射到延髓頭端腹外側(cè)區(qū)和脊髓中間外側(cè)

3 討論

柱，影響交感傳出神經(jīng)活動(dòng)，從而調(diào)節(jié)壓力反射功能［6］。研究認(rèn)為［7］，某些感受器受到刺激后將激活迷走傳入神經(jīng)，信號(hào)通過(guò)腦干的孤束核最終傳至下丘腦。而部分胃腸激素通過(guò)上述信號(hào)傳導(dǎo)通路將信號(hào)傳至下丘腦［8］，這可能與機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，GAS、CCK和 SS均為應(yīng)激敏感激素［9］，而促胰液素可能也是一種應(yīng)激激素［10］。

促胰液素是一種腦腸肽，在外周是由位于十二指腸和空腸上段粘膜中的S細(xì)胞分泌，由27個(gè)氨基酸殘基組成的具有螺旋結(jié)構(gòu)的堿性多肽，具有調(diào)節(jié)胰腺外分泌、抑制胃酸分泌和胃運(yùn)動(dòng)等多種生理功能。胃竇、胃泌酸粘膜層和下丘腦也存在能分泌促胰液素的細(xì)胞，并發(fā)現(xiàn)促胰液素廣泛分布于大腦皮質(zhì)和神經(jīng)核團(tuán)，參與胃腸運(yùn)動(dòng)、語(yǔ)言表達(dá)和行為控制等多種功能調(diào)節(jié)［11-13］。Welch MG［13］等發(fā)現(xiàn)促胰液素及其受體廣泛分布于大腦皮質(zhì)和各種神經(jīng)核團(tuán)，參與中樞中各種神經(jīng)元活動(dòng)的調(diào)節(jié)，因而認(rèn)為中樞的促胰液素充當(dāng)了神經(jīng)調(diào)質(zhì)的作用。研究顯示［14，15］，促胰液素還可以調(diào)節(jié)下丘腦、垂體和腎臟的滲透壓。胃腸道功能紊亂必然引起胃腸激素的調(diào)節(jié)異常，這與腦腸軸功能受阻密切相關(guān)。作為一種腦腸肽，促胰液素及其受體廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和胃腸道中，具有極其復(fù)雜的病理生理功能和作用途徑，而在高血壓病的發(fā)生中，促胰液素可能參與了其各個(gè)病理生理環(huán)節(jié)。本實(shí)驗(yàn)選取自發(fā)性高血壓大鼠十二指腸促胰液素的表達(dá)作為切入點(diǎn)，探索高血壓病與胃腸激素的關(guān)系，進(jìn)一步通過(guò)免疫組化及RT-PCR對(duì)各組大鼠促胰液素蛋白與mRNA的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示，SHR組十二指腸促胰液素mRNA表達(dá)水平較WKY組明顯增高。給予貝那普利和氨氯地平干預(yù)8周后，SHR組十二指腸促胰液素mRNA的表達(dá)水平明顯降低，而氨氯地平組降低更明顯。這一結(jié)果提示，貝那普利和氨氯地平均能使自發(fā)性高血壓大鼠十二指腸促胰液素mRNA的表達(dá)水平降低。從免疫組化角度看，貝那普利和氨氯地平均能抑制S細(xì)胞的分泌功能，使黏膜下腺體上皮內(nèi)分泌細(xì)胞胞漿中促胰液素表達(dá)減弱，進(jìn)而降低十二指腸組織促胰液素的表達(dá)。由此推測(cè)，貝那普利和氨氯地平的降壓作用很有可能是通過(guò)調(diào)節(jié)胃腸激素——促胰液素mRNA的表達(dá)，最終降低血壓。

生長(zhǎng)抑素（SS）是一種由14肽組成的環(huán)狀腦腸肽，廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周組織中。研究證明［16］，SS具有調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)和多種激素的雙重作用。黃衛(wèi)［17］等證實(shí)，SS存在于下丘腦視前區(qū)第三腦室腹側(cè)壁上。Liddle［18］研究發(fā)現(xiàn)，SS除參與認(rèn)知、痛覺(jué)、行為、胃腸運(yùn)動(dòng)等外，還參與血壓的調(diào)節(jié)。本實(shí)驗(yàn)采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)各組大鼠生長(zhǎng)抑素mRNA的表達(dá)，結(jié)果顯示，SHR組胃竇生長(zhǎng)抑素mRNA表達(dá)水平較WKY組明顯增高；灌服貝那普利或氨氯地平干預(yù)8周后，SHR組胃竇生長(zhǎng)抑素mRNA表達(dá)明顯降低，而氨氯地平組降低更明顯。這一結(jié)果提示，貝那普利和氨氯地平均能使自發(fā)性高血壓大鼠胃竇生長(zhǎng)抑素mRNA的表達(dá)降低。從免疫組化角度看，SS由粘膜下腺體上皮內(nèi)分泌細(xì)胞（D細(xì)胞）分泌，在D細(xì)胞胞漿內(nèi)散在分布；貝那普利組和氨氯地平組SS陽(yáng)性的細(xì)胞數(shù)較SHR組減少。由此推測(cè)，貝那普利和氨氯地平的降壓作用很有可能是通過(guò)調(diào)節(jié)生長(zhǎng)抑素mRNA的表達(dá)，最終降低血壓。本次實(shí)驗(yàn)中氨氯地平組胃竇生長(zhǎng)抑素的表達(dá)明顯低于模型組，這一結(jié)果尚需深入研究。

高血壓病的發(fā)病機(jī)制很復(fù)雜。有研究認(rèn)為，腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS）是高血壓病體液調(diào)節(jié)機(jī)制中的重要組成部分，RAS的成員ACE基因多態(tài)性與高血壓病關(guān)系密切［19］。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)促胰液素和生長(zhǎng)抑素這兩項(xiàng)指標(biāo)研究，初步揭示高血壓病與胃腸激素具有相關(guān)性，尚不能完全解釋胃腸激素變化是否為高血壓病發(fā)病機(jī)制亦或是高血壓病引起的病理生理變化，尚需逐步深入探討胃腸激素通過(guò)哪種方式和（或）環(huán)節(jié)（一定是血液?jiǎn)幔浚﹨⑴c或影響高血壓病的發(fā)病或靶器官損傷，包括RAS的變化是否與胃腸激素的釋放有關(guān)，從而為闡明高血壓病的發(fā)病機(jī)制增添新的內(nèi)容。

［1］ 金 華，金 釗，張蕾蕾.基于胃腸激素觀點(diǎn)的高血壓發(fā)病機(jī)制思考［J］.醫(yī)學(xué)與哲學(xué)，2011，32（12）：33-34.

［2］ 祝之明，熊詩(shī)強(qiáng).胃腸道——代謝性高血壓發(fā)病的始動(dòng)器官？見(jiàn)：胡大一，馬長(zhǎng)生.心臟病學(xué)實(shí)踐2015［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2015：93-98.

［3］ Wang J，Zhou L，Tian R.Role of the area postrema of medulla oblongata in the regulation of canine interdigestive migratingmotor complex［J］.Chin Med J，2002，115（3）：384-388.

［4］ Simpson KA，Martin NM，Bloom SR.Hypothalamic regulation of food intake and clinical therapeutic applications［J］.Arq Bras EndocrinolMetabol，2009，53（2）：120-128.

［5］ Sainsbury A，Zhang L.Role of the arcuate nucleus of the hypothalamus in regulation of body weight during energy deficit［J］.Mol Cell Endocrinol，2010，316（2）：109-119.

［6］ 黨 娜，潘燕霞.中樞氧化應(yīng)激抑制高血壓大鼠壓力感受性反射功能［J］.中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志，2012，28（5）：445-448.

［7］ SchwartzMW，Woods SC，Porte D Jr，etal.Centralnervous system control of food intake［J］.Nature，2000，404（6778）：661-671.

［8］ Jobst EE，Enriori PJ，Cowley MA.The electrophysiology of feeding circuits［J］.Trends Endocrinol Metab，2004，15（10）：488-499.

［9］ Jonsson BH，Uvnas-Moberg K，Theorell T，et al.Gastrin，cholecystokinin，and somatostatin in a laboratory experiment of patients with functional dyspepsia［J］.Psychosom Med，1998，60（3）：331-337.

［10］Oektedalen O，Opstad PK，Schaffalitzky de Muckadell OB.Secretin—a new stress hormone［J］？Regul Pept，1982，4（4）：213-219.

［11］CheyWY，Chang TM.Secretin，100 years later［J］.JGastroenterol，2003，38（11）：1025-1035.

［12］ Chey WY，Chang CH，Pan HJ，et al.Evidence on the presence of secretin cells in the gastric antraland oxynticmucosa［J］.Regul Pept，2003，111（1-3）：183-190.

［13］Welch MG，Keune JD，Welch Horan TB，et al.Secretin：hypothalamic distribution and hypothesized neuroregulatory role in autism［J］.Cell Mol Neurobiol，2004，24（2）：219-241.

［14］Chu JY，Chung SC，Lam AK，et al.Phenotypes developed in secretin receptor-nullmice indicated a role for secretin in regulating renalwater reabsorption［J］.Mol Cell Biol，2007，27（7）：2499-2511.

［15］ Chu JY，Lee LT，Lai CH，et al.Secretin as a neurohypophysial factor regulating body water homeostasis［J］.Proc Natl Acad SciUSA，2009，106（37）：15961-15966.

［16］ Sandkuhler J，Helmachen CO.Spinal somatostatin superfusion in vivo affects activity of catnociceptive dorsal horn neurons：comparison with spinal morphine［J］.Neuroscience，1990，34：565.

［17］黃 衛(wèi)，李海標(biāo)，盧光啟.生長(zhǎng)抑素在大鼠腦室管膜中定位分布的免疫組織化學(xué)和原位雜交的研究［J］.解剖學(xué)報(bào)，1996，27（4）：383-385.

［18］Liddle RA.Cholecystokinin：its role in health and disease［J］.Curr Opin Endocrinol Diabetes obes 2003，10（1）：50-54.

［19］李鵬飛，張 偉，馬 暢，等.自發(fā)性高血壓大鼠心臟中 ACE，AT1R，ACE2和 MasR表達(dá)變化的研究［J］.中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志，2011，27（2）：153-154.