糖尿病患者口服葉黃素安全性的研究

肖以欽 翁歡 沈旭中 陶銳 汪茜 葉紋 陸肇曾

(復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院眼科 上海 200040)

葉黃素是植物色素的主要成分，是胡蘿卜素的一種衍生物。存在于如玉米、蔬菜、水果、花卉等植物中。在中草藥、茶葉、雞蛋蛋黃、金槍魚中也含有豐富的葉黃素。葉黃素分子為高度不飽和結(jié)構(gòu)，相對分子質(zhì)量為568.88。分子式為 C40H56O2。在它的分子中含有多個共軛雙鍵，其生物作用具有消滅單線態(tài)氧的能力，可以與自由基基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)，進(jìn)一步形成無害的產(chǎn)物，或通過破壞自由基鏈的反應(yīng)，徹底將自由基清除。葉黃素本身對紫外線、光和熱都不穩(wěn)定，而當(dāng)葉黃素的游離羥基與脂肪酸酯化后可以形成葉黃素酯，可以大大提高穩(wěn)定性[1]，目前廣泛應(yīng)用于口服葉黃素制劑的生產(chǎn)。

葉黃素在年齡相關(guān)性黃斑病變(age-related macular degeneration，AMD)中的作用目前已得到認(rèn)可。在糖尿病患者中口服葉黃素是否能減輕或延緩糖尿病所致視網(wǎng)膜損傷目前尚無定論。在動物實驗中持續(xù)攝入葉黃素補充飲食，可防止局部氧化應(yīng)激對糖尿病視網(wǎng)膜產(chǎn)生神經(jīng)退行性影響[2]。

臨床上，在AMD患者中，每天服用葉黃素10 mg，未見其他不良反應(yīng)。而糖尿病患者因為疾病關(guān)系需使用較多藥物，口服10 mg葉黃素的吸收效果如何？是否會造成不良后果？目前尚無研究。本研究的目的是觀察糖尿病患者口服葉黃素后的濃度變化，以及是否存在不良反應(yīng)，為該藥物的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 資料 招募2017年10月～2019年2月沒有服用葉黃素和其他抗氧化劑治療，且年齡為50～80歲的確診2型糖尿病患者病例。本研究獲得本單位倫理委員會通過(倫理批件號2017臨審309號)，所有參加本研究的患者在檢查前都簽署了書面知情同意書。糖尿病視網(wǎng)膜病變診斷根據(jù)2014年《我國糖尿病視網(wǎng)膜病變臨床診療指南》進(jìn)行分級[3]。所有患者除外以下情況：①只有一側(cè)眼可視，且視力＜0.05，或雙眼矯正視力均＜0.05；②近2周內(nèi)曾使用過抗氧化劑類治療藥物；③存在屈光間質(zhì)混濁的疾病，如角膜混濁、白內(nèi)障、玻璃體混濁等情況者；④合并有青光眼、葡萄膜炎或其他眼底病并影響視力者；⑤合并有心、肝、腎、血液、免疫等重要臟器或系統(tǒng)的嚴(yán)重疾病者；⑥入選前3個月內(nèi)有手術(shù)史；⑦有各種腫瘤的患者；⑧有視神經(jīng)損害性疾病，如青光眼、缺血性視神經(jīng)病變等；⑨有精神疾患或酒精、藥物濫用史，或不能合作者；⑩使用免疫抑制的患者(如人類免疫缺陷病毒陽性患者)。

1.2 方法 研究對象通過入選/排除標(biāo)準(zhǔn)后，數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行分層隨機，分為對照組和用藥組。對照組給予賦形劑片 1粒/d 1次，用藥組給予葉黃素咀嚼片10 mg(1粒)/d 1次。隨訪時間節(jié)點為服藥后1個月、3個月、6個月。隨訪和基線分別詢問一般狀況和全身癥狀及體征，并檢測血葉黃素濃度和實驗室檢查，包括肝、腎功能，血糖及糖化血紅蛋白等。賦形劑和葉黃素咀嚼片均由浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠提供。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 本研究使用 SPSS13.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。先對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗，并進(jìn)行配對t檢驗。以P＜0.05 作為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 納入研究患者的基本情況 共入組隨訪糖尿病患者66例，按照隨機分層入組。其中對照組34例、用藥組32例，2組年齡、性別、糖尿病視網(wǎng)膜病變程度以及基線的視力和眼壓，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(表1)。

表1 納入研究患者的基本情況

2.2 用藥后葉黃素濃度變化 服用葉黃素前，對照組和用藥組血葉黃素濃度分別為(260.55±19.57)ng/mL和(288.27±24.05)ng/mL，口服葉黃素后血清中葉黃素濃度顯著升高并持續(xù)保持，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(表2)。

2.3 局部不良事件 本次試驗中尚無患者發(fā)生不良事件。

2.4 實驗室檢查變化 基線、服用葉黃素后1個月、3個月及6個月，谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、血尿素氮、肌酐及血糖等指標(biāo)在用藥組和對照組差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(表3)。

表2 葉黃素濃度 單位：ng/mL

表3 實驗室各項檢查的變化情況

3 討論

葉黃素是一種具有明顯抗氧化活性的天然色素，是黃斑色素的重要成分。不僅具有抗氧化的性能，還可以過濾藍(lán)光，減輕視網(wǎng)膜的氧化損害作用。葉黃素酯是葉黃素的游離羥基與脂肪酸酯化后形成的，其較葉黃素更穩(wěn)定。當(dāng)其進(jìn)入人體后，可以有效水解，并且釋放出游離的葉黃素，從而發(fā)揮葉黃素的功效。既往有研究[1]在用葉黃素預(yù)處理感光細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)可以減少氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡，并保護(hù)線粒體蛋白。可以防止細(xì)胞色素C從線粒體釋放，增強光感受器的分化，增加視蛋白的表達(dá)，促進(jìn)感光細(xì)胞外節(jié)的生長。Bone等[4]發(fā)現(xiàn)，正常飲食情況下，人體血液中葉黃素的濃度為0.08～0.35 mg/L。而在糖尿病視網(wǎng)膜病變患者中，葉黃素和玉米黃質(zhì)水平明顯低于正常人，尤其是在2型糖尿病患者中[5]。

本研究中糖尿病患者用藥組和對照組中血葉黃素含量在基線時差異無統(tǒng)計學(xué)意義。每天給予糖尿病患者口服葉黃素10 mg，1個月后用藥組的血葉黃素濃度顯著高于未服藥組。既往Kostic等[6]研究顯示，正常人口服單一葉黃素制劑16 h后血液中葉黃素濃度即達(dá)到最大值。當(dāng)每天服用10 mg葉黃素并且持續(xù)18 d后，血葉黃素含量會相應(yīng)持續(xù)增加。既往的研究發(fā)現(xiàn)，葉黃素在視網(wǎng)膜的密度和血液中的含量高低是一致的。提高血液中葉黃素的含量可以增加其在視網(wǎng)膜中的含量，因此，我們的研究可以提示視網(wǎng)膜內(nèi)葉黃素含量增加。

那么口服葉黃素會不會引起不良反應(yīng)呢？患者的安全，也是我們研究者需要考慮的。目前，關(guān)于葉黃素安全性評價的研究，主要都是一些動物實驗。實驗對象有小鼠[7]，也有獼猴[8]，實驗的結(jié)果都提示葉黃素是安全的，并無明顯的毒副作用。然而，在人體試驗中,每天攝入同屬于類胡蘿卜素的β2胡蘿卜素,可能會增加吸煙者和石棉工人的肺癌及胃癌發(fā)病率[9]。但也有研究[10]顯示，當(dāng)葉黃素的使用劑量至1.5 g/d仍未見副作用。提取自萬壽菊的游離葉黃素在2004年被世界衛(wèi)生組織批準(zhǔn)作為食品添加劑，隨后這一成分陸續(xù)出現(xiàn)在嬰幼兒的配方奶粉中，也說明了葉黃素是安全、無毒的。

本研究選取的葉黃素片，葉黃素含量為10 mg，提取自萬壽菊的游離葉黃素作為原料；同時未使用膠囊包被，賦形成分中不含糖，這也為藥物在糖尿病患者中的運用提供了可能。我們的試驗結(jié)果表明，口服葉黃素后血清中葉黃素濃度顯著升高并持續(xù)保持，試驗前后糖尿病患者血糖未見波動，均未見不良反應(yīng)，各項實驗室指標(biāo)也均未見異常。說明葉黃素口服吸收較好，且對糖尿病患者無不良影響。在6個月隨訪期末，我們也看到了口服葉黃素對糖尿病患者視網(wǎng)膜的改善表現(xiàn)，在后續(xù)文章中會進(jìn)一步闡述這些結(jié)果。本研究為葉黃素類在糖尿病患者的應(yīng)用提供了依據(jù)。

志謝：感謝復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院內(nèi)分泌團(tuán)隊對項目的支持。

利益說明：研究者與廠家無經(jīng)濟聯(lián)系。