GLP-1對STZ誘導(dǎo)AD模型的保護(hù)作用及對Aβ的影響研究

吳珊珊 魏亞芬 李晶鑫 盧沖 劉麗 肖淑媛

[摘要]目的 探討胰高血糖素樣多肽-1（Glucagon like polypeptide-1，GLP-1）對鏈脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）誘導(dǎo)阿爾茨海默病（Alzheimers disease，AD）模型的保護(hù)作用及對β淀粉樣蛋白（amyloid-beta，Aβ）的影響研究。方法擇取由哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬一院提供的24只健康大鼠，將其分為3組（每組8只），即空白對照組、STZ組和GLP-1組。對比各組定位航行實(shí)驗(yàn)中，大鼠在各時(shí)期的逃避潛伏期；以及在空間探索實(shí)驗(yàn)中，在原平臺(tái)象限游泳時(shí)間和總時(shí)間比值及術(shù)后各個(gè)時(shí)期Aβ水平的變化。結(jié)果 空白對照組與GLP-1組的逃避潛伏期顯著低于STZ組（P<0.05）；STZ組在原平臺(tái)象限游泳時(shí)間與總時(shí)間的比值顯著小于空白對照組和GLP-1組的Aβ水平（P<0.05）；空白對照組與GLP-1組顯著低于STZ組（P<0.05）。結(jié)論 在STZ誘導(dǎo)AD模型中GLP-1的效果顯著，可以進(jìn)行進(jìn)一步研究與探討。

[關(guān)鍵詞]胰高血糖素樣多肽-1；阿爾茨海默病影響；β淀粉樣蛋白

[中圖分類號(hào)]R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

阿爾茨海默?。ˋlzheimers disease，AD）是一種發(fā)病不顯著且發(fā)病較慢并伴隨持續(xù)性進(jìn)行的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，在臨床上以進(jìn)行性記憶力下降和認(rèn)知能力減退為主要表現(xiàn)[1]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，AD患者腦內(nèi)會(huì)出現(xiàn)多種生理學(xué)、生物化學(xué)及組織學(xué)方面的異常變化，主要表現(xiàn)為大腦皮層及海馬出現(xiàn)聚集形成的老年斑[2]。

本文旨在探究（Glucagon-likepeptide-1，GLP-1）對（Streptozotocin，STZ）誘導(dǎo)AD模型的保護(hù)以及對Aβ有何種影響，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選自由哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬一院提供的24只健康大鼠，雄性，體質(zhì)量范圍在（255.10±35.11）g。將其隨機(jī)分為3組（每組各8只），即空白對照組、STZ組和GLP-1組。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①由實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供；②健康、無殘疾。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：對藥物過敏。

1.2 方法

采取禁食但不禁水，時(shí)間為12 h，再進(jìn)行腹腔麻醉，采用3 mL/kg的10%水合氯醛進(jìn)行麻醉，并將其固定在立體定位儀上，側(cè)腦室注射?？瞻讓φ战M中給予10 μL的生理鹽水。STZ組則注射5 mg/kg的STZ 10μL。GLP-1組則注射STZ 10μL，并于1 h后再注射GLP-1 50 μL。

本實(shí)驗(yàn)先采用STZ誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦損傷，再予以治療（使用GLP-1）。術(shù)后3周進(jìn)行Morris水迷宮（MWM）測試，觀察試驗(yàn)鼠的行為學(xué)變化。在術(shù)后的7 d、14 d、21 d對大鼠進(jìn)行取血，并使用ELISA試劑盒（上海晶抗生物工程有限公司）檢測Aβ水平，步驟需嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）定位航行實(shí)驗(yàn)：將大鼠放入池水中并記錄其到水下平臺(tái)的時(shí)間，在超過1 min時(shí)，引導(dǎo)到達(dá)平臺(tái)并保持10 s。訓(xùn)練時(shí)間為5 d，4次/d；（2）空間探索實(shí)驗(yàn)：于第六天，拆除平臺(tái)，池邊放入大鼠，開始1 min的探查訓(xùn)練。記錄其每次找到平臺(tái)的時(shí)間及到原平臺(tái)區(qū)域次數(shù)，并記錄到達(dá)象限所用的時(shí)間。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 在各時(shí)期的逃避潛伏期

在各個(gè)時(shí)期，空白對照組與GLP-1組的逃避潛伏期顯著低于STZ組（P<0.05），詳見表1。

2.2 在原平臺(tái)象限游泳時(shí)間與總時(shí)間比值

空白對照組與GLP-1組在原平臺(tái)象限游泳時(shí)間與總時(shí)間比值顯著大于STZ組（P<0.05），詳見表2。

2.3 各組術(shù)后不同時(shí)期Aβ水平變化對比

空白對照組與GLP-1組顯著低于STZ組7 d、14 d、21 d Aβ水平（P<0.05），詳見表3。

3 討論

AD是老年人群體中常見的疾病之一，AD患者的認(rèn)知和記憶功能會(huì)隨著時(shí)間逐漸減弱，特征表現(xiàn)為細(xì)胞外老年斑內(nèi)Aβ的沉積及細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)纖維纏結(jié)出現(xiàn)。經(jīng)過科學(xué)家的不斷研究發(fā)現(xiàn)，GLP-1可實(shí)現(xiàn)對神經(jīng)元的保護(hù)作用。通過此次實(shí)驗(yàn)表明：注射STZ的大鼠逃避潛伏期顯著更高（P<0.05）；在原平臺(tái)象限游泳時(shí)間與總時(shí)間比值上空白對照組與GLP-1組顯著大于STZ組的比值（P<0.05），各組術(shù)后不同時(shí)期Aβ水平變化對比空白對照組和GLP-1組顯著低于STZ組7 d、14 d、21 d Aβ水平（P<0.05）。以上結(jié)果可說明：對于STZ所誘導(dǎo)的癡呆大鼠的神經(jīng)損傷方面，GLP-1可以對學(xué)習(xí)和記憶功能方面起到一定的保護(hù)作用。但是，注射了GLP-1的實(shí)驗(yàn)鼠在實(shí)驗(yàn)中仍未達(dá)到注射了生理鹽水的標(biāo)準(zhǔn)，雖然GLP-1對STZ所誘導(dǎo)的癡呆大鼠起到了積極作用，但仍未完全達(dá)到正常水平。另外，GLP-1可降低AD大鼠Aβ水平，有效防止老年斑的形成。

綜上所述，GLP-1對STZ所誘導(dǎo)的癡呆大鼠對行為學(xué)方面起到積極的影響作用，且可有效降低Aβ水平，能起到顯著的保護(hù)作用。

參考文獻(xiàn)

[1] 武雪玲，李筱筱，賈世亮，等.非瑟酮對Aβ_（42）誘導(dǎo)AD癡呆模型大鼠的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2016，28（12）：2011-2016+2005.

[2] 高穎.GLP-1對STZ誘導(dǎo)AD模型保護(hù)作用[D].山西醫(yī)科大學(xué)，2009.